壳寡糖诱导和白粉菌侵染的辣椒叶片防御酶系活性研究
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白粉菌侵染过程中不同抗性辣椒品种叶片3种酶活性变化王萱;王立浩;石延霞;毛胜利;李宝聚;张宝玺【期刊名称】《中国蔬菜》【年(卷),期】2009(000)022【摘要】以辣椒4个不同抗性品种为材料,研究成株期感染白粉菌后,叶片组织内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性变化.结果表明,4个材料接种白粉病病原菌后3种酶活性均有所提高.受白粉菌侵染后,抗病品种的PAL和β-1,3-葡聚糖酶活性明显高于感病品种.几丁质酶的活性变化与辣椒对白粉病的抗性无关.【总页数】5页(P53-57)【作者】王萱;王立浩;石延霞;毛胜利;李宝聚;张宝玺【作者单位】中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;天津市农业高新技术示范园区管理中心,天津300384;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081【正文语种】中文【中图分类】S642.2【相关文献】1.辣椒不同砧木嫁接组合的疫病抗性评价及叶片防御酶活性的变化分析 [J], 邹春蕾;刘长远;王丽萍;王辉;辛彬;孙宝山;吴振红2.不同抗性小麦品种受叶锈菌侵染前后防卫酶活性变化研究 [J], 白春微;蒋选利;李琼朴3.苜蓿假盘菌侵染过程中不同抗性苜蓿品种叶片几种酶活性变化 [J], 肖爱萍;张学乐;王蓟花;史娟4.不同抗性小麦品种受白粉菌侵染前后PPO、POD活性变化 [J], 王宏梅;蒋选利;白春微;左希;丁海霞5.辣椒不同砧木嫁接组合的疫病抗性评价及叶片防御酶活性的变化分析 [J],因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
壳寡糖的制备及其抑菌性能的研究
尹爱国;李火娣
【期刊名称】《甘肃科学学报》
【年(卷),期】2013(25)2
【摘要】通过酶解法降解壳聚糖,配制成不同质量分数的壳寡糖缓冲溶液,探究其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等的生长抑制影响.结果表明:壳寡糖的抑菌作用随其质量分数的增加而增大,其抑菌性能在较低质量分数时与其呈线性关系,到2.0%与2.5%的质量分数后基本持平,吸光度一直保持在一个较低的范围内稳定增长.壳寡糖质量分数和菌种对吸光度影响差异显著,二者没有交互作用.
【总页数】3页(P40-42)
【作者】尹爱国;李火娣
【作者单位】广东石油化工学院,广东茂名 525000;广东石油化工学院,广东茂名525000
【正文语种】中文
【中图分类】TS202
【相关文献】
1.壳寡糖的制备及其抑菌性能研究 [J], 严钦;沈月新;王慥
2.壳寡糖抑菌性能的研究 [J], 赵倩;谢全喜;徐海燕;谷巍;曹斌;郑军红
3.纳米银/植物源复合抗菌剂的制备及其抑菌性能的研究 [J], 甘智豪;林家洪;韦次宁;刘永龙;杨平;黄小茉
4.PDA@Ag纳米复合材料的制备及抑菌性能研究 [J], 解修超;兰阿峰;刘二奴;郭少
波;邓百万
5.PDA@Ag纳米复合材料的制备及抑菌性能研究 [J], 解修超;兰阿峰;刘二奴;郭少波;邓百万
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壳寡糖抑菌及抗氧化性的研究臧珉;陈斌【摘要】本文通过经典的Fenton反应方法建立体系研究壳寡糖清除羟基自由基能力,邻苯三酚在碱性条件下发生自氧化反应体系研究壳寡糖清除超氧阴离子的能力,以及总抗氧化能力测定.同时以棉花枯萎病菌及烟草赤星病菌为受试菌种,采用生长速率法研究壳寡糖对植物病原真菌的抑制作用.壳寡糖对羟基自由基清除率IC50 3.78mg/mL,超氧阴离子清除率IC50 3.3 mg/mL,5g/L壳寡糖对棉花枯萎菌、烟草赤星菌菌丝生长的抑制率达20%和14%.研究结果表明壳寡糖具有较强抗氧化能力,并且有一定抑菌作用的生物活性寡糖,有很广阔的应用前景.【期刊名称】《中国野生植物资源》【年(卷),期】2016(035)006【总页数】5页(P27-30,38)【关键词】壳寡糖;羟自由基清除率;超氧阴离子清除率;总抗氧化能力;抑菌【作者】臧珉;陈斌【作者单位】南京锐博科技股份有限公司,江苏南京210006;菲尼克斯生物化学(苏州)有限公司,江苏苏州215200【正文语种】中文【中图分类】Q946壳聚糖为甲壳质脱乙酰化处理后的产物,是天然糖中唯一大量存在的碱性氨基多糖。
由于壳聚糖同时具有游离的氨基和羟基,故具有特殊的生理活性,无毒、可生物降解、生物相容性好[1]。
然而,由于壳聚糖是高分子化合物,分子量通常在几十万至上百万,且分子结构紧密,因而不能溶于水等一些普通溶剂,难以被吸收利用,限制了壳聚糖的应用。
壳寡糖是壳聚糖降解以后的聚合度为2~10的以β-1,4-糖苷键连接的碱性寡糖,壳寡糖分子上的游离氨基(—NH2)在酸性条件下可以质子化而带正电形成阳离子聚合物[2]。
其水溶性好,很容易被吸收利用,且生物活性比壳聚糖更强。
在人体肠道内活化增殖双歧杆菌, 抑制大肠杆菌的生长,在微酸环境中具有较强的抗菌作用和显著的保湿吸湿能力;活化植物细胞,促进植物快速生长[3-4]。
壳寡糖对清除超氧阴子有一定效果,超氧自由基(即超氧阴离子自由基, O2-·) 是一种外层轨道含有未配对电子的特殊状态分子的活性氧。
“寡糖.吗啉胍”防治辣椒病毒病田间药效试验作者:刘晓帆亓晓光郭小珍等来源:《农业开发与装备》 2013年第2期刘晓帆,亓晓光,郭小珍,马盼盼(濮阳市农业科学研究院,河南濮阳 457000)摘要:“寡糖.吗啉胍”综合利用了植物矿质元素的抗性诱导和矿质营养的双重作用,将抗性诱导剂和矿质元素进行组配研制出的预防和控制作物病毒病的新型多功能肥料。
曾获得河南省科学技术进步奖,有病为药,无病为肥。
经田间药效试验表明,“寡糖.吗啉胍”对辣椒安全,预防和控制辣椒病毒病效果为82.1%~83.6%,最佳使用浓度为600~1200倍液,施用间隔期7~10d。
关键词:“寡糖.吗啉胍”;辣椒病毒病;药效试验1 材料和方法试验地设在濮阳市的菜篮子种植区王助乡,地势平坦,两合土质,辣椒重茬地,辣椒病毒病常年混合发生,均匀且严重。
供试辣椒品种濮椒1号,密度5万棵/hm2,宽窄行种植,小区4行区,行距0.6m,株距0.4m,行长10m,小区面积30m2。
试验设” “寡糖.吗啉胍”600倍液、900倍液、1200倍液、1500倍液,“寡糖.吗啉胍”900倍液灌根,对照药剂50%多菌灵(市售品)600倍液灌根,清水对照等7个处理。
小区随机排列,3次重复。
辣椒病毒病初发期开始第一次用药,叶面喷雾量450kg/hm2,灌根250ml/棵,间隔7d第二次用药,分别在第一次用药前、第一次用药后7d、第二次用药后7d,调查各小区中间两行的发病情况及药害发生情况。
病情分级标准为:0级,无萎垂症状,正常株;1级,初发病株,可恢复性萎垂的最高叶位在总叶数的1/4以下;3级,可恢复性萎垂最高叶位在总叶数的1/4~1/2之间;5级,可恢复性萎垂最高叶位在总叶数的1/2以上;7级,全株死亡。
2 结果与分析试验结果见附表” “寡糖.吗啉胍”600倍液、900倍液、1200倍液、1500倍液喷雾处理,第一次喷施后防效分别为81.2%、82.7%、81.5%、66.7%,第二次喷施后防效分别为82.1%、83.6%、83.4%、64.6%,两次喷施后“寡糖.吗啉胍”600倍液、900倍液、1200倍液防效之间均无显著差异,但均显著优于1500倍液防效。
辣椒白粉病生防菌株Bs2的筛选鉴定及田间防效研究孙睿揆;王志远;飞兴文;吴毅歆;吴兴兴;毛自朝;何月秋【摘要】从40份农田土壤中分离筛选出了69株芽孢杆菌对Fusarium oxysporum、Botrytis cinerea、Colletotrichum gloeosporioides、Cylindrocarpon具有拮抗作用,其中Bs2菌株发酵液稀释50倍(5.6×107cfu/mL)后处理,连续用3次后的第7天,对辣椒白粉病的防治效果达到60.77%,略低于化学农药粉锈灵(0.8g/L)的防治效果.通过形态特征观察,生理生化试验及16S rDNA序列分析,Bs2与菌株Bacillus pumilus SBT2-9的相同,其16S rDNA序列同源性高达99.41%,被鉴定为短小芽孢杆菌.%69 strains antagonistic against Fusarium oxysporum, Botrytis cinerea, Colletotrichum gloeosporioides, Cylindrocarpon, were screened from the 40 field soil samples. A strain Bs2 with 50-fold dilution(5.6 x lO'cfu/mL) of the fermentation broth gave good control efficacy of 60.77 % against hot pepper powdery mildew in the field test after 3 sprays, which was lower than that of fungicide triadimefon ( 0.8 g/L). Bs2 was identified as Bacillus pumilus on the basis of its morphological, physiological and biochemical characters as well as its sequence analysis of 16S rDNA with 99.41 % similarity to B. Pumilus SBT2-9.【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2011(024)003【总页数】5页(P974-978)【关键词】辣椒白粉病;拮抗细菌;鉴定;短小芽孢杆菌;生物防治【作者】孙睿揆;王志远;飞兴文;吴毅歆;吴兴兴;毛自朝;何月秋【作者单位】云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南昆明,650201;云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南昆明,650201;云南省玉溪市农科院,云南玉溪,653100;云南农业大学农学与生物技术学院,云南昆明,650201;云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南昆明,650201;云南农业大学农学与生物技术学院,云南昆明,650201;云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南昆明,650201;云南农业大学农学与生物技术学院,云南昆明,650201【正文语种】中文【中图分类】S641.3云南省是全国辣椒主要种植地区之一,每年种植面积47 000 hm2,产值近10亿元,已成为部分地区重要经济支柱。
文章编号:1674 − 7054(2022)05 − 0509 − 05链霉菌和壳寡糖对辣椒幼苗生长发育的影响朱 清1,范鹤龄1,孙雪冰1,王 位1,黄小龙2,李长江1,张荣萍1(1. 海南大学 热带作物学院,海口 570228; 2. 海南大学 生命科学与药学院,海口 570228)摘 要: 为了探究链霉菌30702和壳寡糖对辣椒种子萌发和幼苗生长的影响,采用浸种方法和穴盘育苗法,研究了链霉菌(3个浓度水平)、壳寡糖(2个浓度水平)对辣椒出苗质量及幼苗形态和生理的影响。
结果表明,采用链霉菌和壳寡糖浸种后,辣椒的出苗率、株高、茎粗、根长、叶面积、壮苗指数、总干质量、可溶性糖、可溶性蛋白等含量显著提高,萎蔫指数显著降低,影响程度随链霉菌使用浓度的增加而增大,且链霉菌的作用大于壳寡糖;链霉菌1.2×107 cfu·mL −1和壳寡糖100 g·L −1的复合处理的生长发育最佳,萎蔫指数最低,且此复合处理在主成分分析中的综合得分最高;交互作用分析结果表明,除总干质量和壮苗指数外,链霉菌和壳寡糖均有显著的交互作用。
综合结果表明,链霉菌30702对辣椒的种子萌发有促进作用,有利于辣椒幼苗的生长,链霉菌与壳寡糖之间有交互效应。
关键词: 辣椒;壳寡糖;链霉菌30702;出苗率;生长发育中图分类号: R 915;S 641.3 文献标志码: A引用格式: 朱清,范鹤龄,孙雪冰,等. 链霉菌和壳寡糖对辣椒幼苗生长发育的影响[J]. 热带生物学报,2022,13(5):509−513. DOI :10.15886/ki.rdswxb.2022.05.012辣椒(Capsicum annuum L.)原产于中南美洲热带雨林地区的墨西哥、秘鲁等地,是茄科辣椒属一年或多年生草本植物,辣椒亦称番椒、茄椒或海椒。
培育辣椒壮苗是实现辣椒优质高产高效栽培的前提条件,直接关系到菜农的经济收入,对辣椒种植具有重要意义[1]。
温室辣椒白粉病的药剂防治研究蒋启东;王冬【摘要】进行了几种新药剂防治辣椒白粉病的效果试验.试验结果表明,参试药剂对辣椒白粉病都有一定防治效果,其中以15%粉锈宁(三唑酮)1 000倍液+77%可杀得(氢氧化铜)1 200倍液防治效果最好,40%福星(氟硅唑)6 000倍液次之,50%翠贝(醚菌酯)3 000倍液对辣椒产生病害.建议在发病初期用15%粉锈宁1 000倍液+77%可杀得1 200倍液进行喷雾防治,用药2~3次,间隔7-10 d;病情发生较重时可选40%福星6 000倍液与15%粉锈宁1 000倍液+77%可杀得1 200倍交替施用.【期刊名称】《长江蔬菜》【年(卷),期】2011(000)002【总页数】3页(P69-71)【关键词】辣椒;白粉病;药剂防治【作者】蒋启东;王冬【作者单位】辽宁省风沙地改良利用研究所,辽宁阜新,123000;辽宁省风沙地改良利用研究所,辽宁阜新,123000【正文语种】中文辣椒(Capsieum annuumL.)是一种重要的蔬菜,在我国栽培面积约130万hm2[1]。
辣椒白粉病是一种由内丝白粉菌引起的为害辣椒茎叶的真菌病害[2],发生严重时可造成叶片大量脱落。
该病自1971年在美国出现后[3],20世纪80年代末还只是零星发生[4],90年代初为害逐渐严重,目前该病在所有辣椒种植区都有发生[4]。
随着温室辣椒的连年种植,该病随时发生,逐年加重,较难防治[5]。
目前关于辣椒白粉病防治的研究较少,张裘[6]报道石硫合剂对辣椒白粉病的防治效果达到96%,但经过多年使用,辣椒已对其产生抗性。
代明春等[7]报道的叶斑净和薛春胜[8]报道的甲基托布津防治效果不太理想,易造成农药残留。
因此,笔者对几种新药剂防治温室辣椒白粉病的效果进行了试验,以期筛选出效果较好的药剂,并为辣椒白粉病的防治措施提供理论参考。
1.1 试验材料试验药剂:50%翠贝(醚菌酯水分散粒剂,法国巴斯夫股份有限公司生产);15%粉锈宁(三唑酮可润性粉剂,江苏江阴市精细化工二厂生产);40%福星(氟硅唑乳油,美国杜邦公司生产);20%金力士(丙环唑乳油,新加坡利农私人有限公司生产);77%可杀得(氢氯化铜可湿性粉剂,美国固信公司生产)。
壳寡糖诱导烟草抗病毒研究的开题报告摘要:壳寡糖(chitosan oligosaccharide,COS)是一种从壳聚糖(chitosan)水解而得的低分子寡糖,具有广谱的生物活性和多种生物学功能。
本研究旨在探究 C0S 对烟草株抗病毒的作用机制。
通过选择一种具有病毒易感性的烟草株,研究不同浓度C0S 处理对烟草抗病毒的影响。
同时,采用 qRT-PCR 技术检测 C0S 处理后相关基因的表达情况,并运用荧光显微镜观察细胞的荧光强度和细胞结构变化。
本研究将为 C0S 的应用提供新思路,拓展其在植物病害防治中的应用。
引言:壳寡糖是壳聚糖水解而得的低分子寡糖,除了具有壳聚糖的生物活性和多种生物学功能外,还具有更广谱的能力,例如抗氧化、抗炎、增强免疫力和促进植物生长等作用。
近年来,壳寡糖的抗病毒作用备受关注。
已有研究表明,壳寡糖可以激活植物抗病毒系统中的基因表达,并通过增强植物自身免疫能力降低植物的病毒感染率。
根据已有研究,本研究将探究 COS 对烟草株(Nicotiana tabacum)抗病毒的作用机制,并为 COS 的应用提供新思路,拓展其在植物病害防治中的应用。
材料与方法:1.材料:烟草株种子、DAS-ELISA 试剂盒、壳寡糖(COS)、RNA提取试剂盒、逆转录(RT)试剂盒、SYBR Green qPCR Kit;2.方法:1)烟草株的育种:选取一种具有病毒易感性的烟草株(如YC8 ),进行育种准备。
2)烟草株的培养与处理:通过水培等方式将烟草幼苗转移到含不同浓度 COS 的培养基中进行处理,观察 COS 处理对烟草株生长和抗病毒能力的影响。
3)DAS-ELISA:采用 DAS-ELISA 技术对 COS 处理后的烟草株进行病毒检测,比较 COS 处理前后病毒感染率的变化。
4)qRT-PCR:选取与植物抗病毒机制相关的基因,如 PR1、PR2、PR5 等,进行 qRT-PCR 扩增,检测 COS 处理对基因表达的影响情况。
壳寡糖可以诱导辣抵椒抗白粉病
白粉病是辣椒的一种长发疾病,比较难防治,这主要是由病菌为害特点所决定的。
目前,防治辣椒白粉病主要以化学药剂防治为主。
利用植物诱导抗病性是国际上新近兴起的重要研究领域,被认为是植物保护的新途径和新技术。
壳寡糖作为一种绿色天然可食用的新型生物农药,可以诱导辣椒对白粉病产生抗性。
壳寡糖是通过激活辣椒抗病性来抑制病情发展的,并非直接抑制病原物,其机制与杀菌剂等毒性化合物不同。
以壳寡糖为诱导剂研究其诱导辣椒抗白粉病性的效果结果显示,25~125 μg·mL-1壳寡糖对辣椒白粉病均有明显的防病效果,其中以50 μg·mL-1处理后1 d接种产生的诱导抗病性最显著,防病效果达80%以上。
白粉病菌对不同抗性辣椒品种防御酶活性的影响及其互作超微结构分析莫熙礼;蒋选利;武华文;江厚成【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2016(0)6【摘要】为了探索白粉病菌对不同抗性辣椒品种防御酶活性的影响及其互作机制,采用酶标仪法测定病原菌对辣椒叶片防御酶活性的影响;用扫描电子显微镜和荧光显微镜对辣椒-白粉病菌互作过程进行超微结构观察。
试验表明:接种白粉病菌后,抗性材料(花溪辣椒)的POD、PPO活性表现为峰值出现最早,感病材料(西安8819和遵义辣椒)表现为活性变化幅度大、峰值出现较晚;抗病材料和感病材料的PAL酶活性都在处理3 d到达峰值,抗病材料活性变化幅度大于感病材料;花溪辣椒(抗病)和遵义辣椒(感病)的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶迅速上升,而西安8819(感病)的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性上升速度较慢。
接种白粉病菌后12 h,分生孢子萌发产生芽管和附着胞,24 h 形成菌丝,菌丝周边的蜡质组织开始被溶解,120 h菌丝从叶表面气孔伸出,形成为分生孢子梗,未见有从气孔侵入的迹象。
从而可以得出结论:接种白粉病菌后,辣椒叶片防御酶活性均有不同程度的提高,不同辣椒品种的防御酶活性变化不同。
【总页数】4页(P229-232)【作者】莫熙礼;蒋选利;武华文;江厚成【作者单位】黔西南民族职业技术学院,贵州兴义562400;贵州大学农学院,贵阳花溪550025;黔西南民族职业技术学院,贵州兴义562400;黔西南民族职业技术学院,贵州兴义562400【正文语种】中文【中图分类】S436.418.1+9【相关文献】1.不同抗性油菜品种接种黑胫病菌防御酶活性变化研究2.腐烂病菌对不同抗性荷花品种防御酶活性的影响3.不同抗性猕猴桃材料接种溃疡病菌后防御酶活性变化研究4.白粉病菌侵染对美洲南瓜不同抗性品种PAL基因表达量的影响5.辣椒品种对疫病的抗性研究(Ⅰ) 不同互作中的水解酶活性及其与抗性的关系因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
翟新羽,黄太萍,冯国荣,等.壳寡糖抑制辣椒疫霉的生长发育和侵染[J].江苏农业科学,2023,51(15):106-111.doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2023.15.016壳寡糖抑制辣椒疫霉的生长发育和侵染翟新羽,黄太萍,冯国荣,陈 意,刘 洋,靳晶豪,陈孝仁(扬州大学植物保护学院,江苏扬州225009) 摘要:色菌界的疫霉菌所引发的作物疫病是农业生产上的毁灭性病害,严重威胁粮食安全和农业可持续发展。
为探明壳寡糖是否可用于作物疫病的绿色防控,分析壳寡糖对辣椒疫霉的抑菌活性及作用机制。
在壳寡糖终浓度为0、10、30、50、100、300、500mg/L的PDA平板上接种辣椒疫霉、恶疫霉、瓜类疫霉、寄生疫霉和荔枝霜疫霉,测定菌丝生长情况;在壳寡糖终浓度为0、10、30、50、100mg/L的10%V8培养液中培养辣椒疫霉菌丝,观察菌丝形态变化;添加0、10、30、50、100mg/L壳寡糖,观察对辣椒疫霉游动孢子囊的产生,以及游动孢子释放、游动和萌发的影响;对本氏烟喷施浓度为0、10、30、50、100、1000mg/L的壳寡糖后接种辣椒疫霉,观察病害发生情况。
结果表明,壳寡糖能直接抑制辣椒疫霉和其他4种卵菌(恶疫霉、瓜类疫霉、寄生疫霉和荔枝霜疫霉)的菌丝生长,但抑菌效果在种间存在差异,当浓度为100mg/L时对辣椒疫霉的生长抑制率达到了52.50%。
自50mg/L浓度起,壳寡糖对辣椒疫霉的菌丝形态,游动孢子囊形成,以及游动孢子的释放、游动和萌发均有强烈的抑制作用,当浓度升高时抑制效果更加显著。
经1000mg/L壳寡糖喷施处理过的本氏烟叶片上产生的病斑面积明显小于对照叶片,显示壳寡糖可以保护本氏烟免遭辣椒疫霉的侵染。
本研究综合表明,壳寡糖可抑制辣椒疫霉的营养生长、生长发育和侵染致病,具有防控作物疫病的生防潜力。
关键词:壳寡糖;辣椒疫霉;卵菌;本氏烟;生物防治;绿色防控 中图分类号:S436.418.1+9 文献标志码:A 文章编号:1002-S432.11302(2023)13-0106-06收稿日期:2022-10-31基金项目:国家自然科学基金(编号:32272477、32102154、31871907);江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(20)3125];广东省植物保护新技术重点实验室开放基金(编号:植重2021-04);江苏省大学生创新创业训练计划(编号:202211117153Y);扬州大学优秀青年骨干教师培养对象项目;扬州大学高端人才支持计划(拔尖人才成长计划)。
疫病病菌侵染后辣椒幼苗体内保护酶活性的变化毛爱军;王永健;冯兰香;许勇;耿三省;曹婉红【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2003(018)002【摘要】疫霉菌侵染后辣椒幼苗叶片和根茎组织中PPO、POD和PAL活性发生变化.试验表明:除感病品种根茎部固有的POD活性较高以外,抗(耐)病辣椒品种幼苗叶片的PPO、POD和PAL及根茎部PPO和PAL活性高于感病品种.疫霉菌侵染后,仅根茎部PPO活性略有下降,各辣椒品种幼苗叶片和根茎组织PPO、POD和PAL均在接种后一度显著高于对照.抗(耐)病辣椒品种幼苗根茎部PAL活性接种4 d升幅大且早,抗(耐)病品种体内固有的PPO、POD和PAL活性高,在辣椒抗疫霉菌反应中起了重要作用.【总页数】4页(P66-69)【作者】毛爱军;王永健;冯兰香;许勇;耿三省;曹婉红【作者单位】北京蔬菜研究中心,北京,100089;北京蔬菜研究中心,北京,100089;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;北京蔬菜研究中心,北京,100089;北京蔬菜研究中心,北京,100089;北京蔬菜研究中心,北京,100089【正文语种】中文【中图分类】S601【相关文献】1.枯萎病菌侵染后棉苗体内谷胱甘肽含量的变化及其与抗病性的关系 [J], 宋凤鸣;葛秀春;郑重2.枯萎病菌侵染后棉苗体内超氧物歧化酶和过氧化氢酶活性的变化及与抗病性的关系 [J], 宋凤鸣3.涝渍胁迫下生姜幼苗生长及体内保护酶活性变化 [J], 陈娟;梁明霞;潘开文4.云杉落针病病菌侵染后雪岭云杉叶片内保护酶活性的变化 [J], 妥桂香5.枯萎病菌侵染后棉苗体内多酚氧化酶活性的变化(简报) [J], 宋凤鸣;郑重;葛秀春因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
核盘菌通过类似整联蛋白(SSITL)抑制寄主的抗病反应目 录摘 要 (I)ABSTRACT (IV)缩略词表 (VIII)1. 前言综述 (1)1.1 核盘菌的危害及其防治 (1)1.1.1 核盘菌的危害及其生物学特性 (1)1.1.2 作物菌核病的防治研究 (1)1.2 植物病原菌与寄主植物的互作 (5)1.2.1 植物天然的的物理及生理生化防卫屏障 (5)1.2.2 植物的先天免疫系统 (6)1.2.3 植物的后天免疫系统 (10)1.2.4 植物的非寄主抗性 (13)1.2.5 不同类型植物病原菌的侵染策略以及互作方式 (14)1.2.6 核盘菌的侵染策略 (16)1.3基因功能研究的策略 (19)1.3.1丝状真菌的遗传转化的研究进展 (19)1.3.2基因的超标达、敲除和沉默 (20)1.3.3 蛋白质的定位 (24)1.4 Integrin以及Integrin–like基因的研究进展 (26)1.4.1 整联蛋白的结构 (27)1.4.2 整联蛋白的信号传导 (29)1.4.3整联蛋白在微生物中的生物学功能 (30)1.5 本项研究的目的和意义 (32)2. 材料与方法 (33)2.1 菌株及植物材料 (33)2.2 基因的生物信息学分析 (33)2.3 核酸的实验操作 (34)2.3.1 DNA的提取 (34)2.3.2 质粒的提取 (34)2.3.3 总RNA的提取 (35)2.3.4 RT和Real–Time PCR (35)2.3.5 Northern blot (36)2.4 蛋白质的实验操作 (37)2.4.1 SSITL的原核表达 (37)2.4.2 抗体血清的制备、效价(ELISA)以及特异性(Western blot)的检测 (37)2.4.3 SSITL的免疫胶体金亚细胞定位 (39)2.4.4 核盘菌侵染洋葱表皮过程中SSITL的免疫荧光定位 (40)2.5 相关载体的构建 (40)2.6 ATMT介导的真菌和植物转化 (41)2.7 生物学特性的实验研究 (43)2.7.1 生长速度、致病力、菌丝顶端分支以及菌落形态的观察 (43)华中农业大学2012届博士研究生学位论文2.7.2 菌核的培养、大小及重量的测定和菌核萌发的研究 (43)2.7.3 核盘菌产草酸能力的测定 (44)2.7.4 核盘菌侵染拟南芥叶片过程的观察 (45)2.8 SSITL与植物诱导抗性的关系 (45)2.8.1 核盘菌侵染拟南芥过程中SSITL基因的表达情况 (45)2.8.2 核盘菌侵侵染拟南芥过程中拟南芥局部抗性的动态变化 (45)2.8.3 核盘菌侵侵染拟南芥过程中拟南芥系统抗性的动态变化 (46)2.8.4 SSITL在植物中表达对植物的抗病性的影响 (46)3. 结果与分析 (47)3.1 SSITL的生物信息学分析 (47)3.1.1 SSITL的序列分析 (47)3.1.2 SSITL蛋白的同源比对分析及高级结构预测 (49)3.2 SSITL对核盘菌生物学特性的影响 (53)3.2.1 SSITL基因在核盘菌不同生长时期的表达 (53)3.2.2 SSITL基因沉默对核盘菌生物学特性的影响 (53)3.3 SSITL抗体的制备以及免疫胶体金亚细胞定位 (61)3.3.1 SSITL的原核诱导表达 (61)3.3.2 抗血清效价以及特异性测定 (63)3.3.3 SSITL蛋白的亚细胞定位 (63)3.4 SSITL基因在核盘菌与植物互作过程中的作用 (67)3.4.1 核盘菌侵染拟南芥时,SSITL基因的表达情况 (67)3.4.2 核盘菌SSITL对拟南芥局部防卫反应的影响 (68)3.4.3 核盘菌SSITL对拟南芥系统防卫反应的影响 (70)3.4.4 SSITL在寄主植物中瞬时表达对植物抗病性的影响 (74)3.4.5 SSITL在寄主植物中组成型表达对植物抗病性的影响 (79)3.4.6 SSITL的表达对烟草的影响 (81)4. 讨论 (83)4.1 SSITL基因生物学功能的深入探讨 (83)4.1.1 SSITL基因的序列分析 (83)4.1.2 SSITL基因的功能分析 (85)4.2 SSITL参与抑制植物诱导抗性 (87)4.2.1 SSITL基因在核盘菌侵染过程中被诱导表达 (88)4.2.2 SSITL参与抑制植物的局部抗性 (88)4.2.3 SSITL参与抑制植物的系统抗性 (89)4.2.4 SSITL基因在植物中表达后,植物的抗性受到抑制 (90)4.3 研究SSITL的互作蛋白以及作用机理 (90)4.4 结论与展望 (92)5. 参考文献 (94)附录: (116)博士期间发表的论文 (121)致 谢 (122)核盘菌通过类似整联蛋白(SSITL)抑制寄主的抗病反应摘 要核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)属于子囊菌门,是一种世界性分布的典型的死体营养型病原真菌。
壳寡糖衍生物对烟草花叶病的田间防效试验赵龙杰;王莹;徐翠莲;王彩霞【摘要】测定了壳寡糖、宁南霉素、水杨醛壳寡糖希夫碱、5-溴水杨醛壳寡糖希夫碱、水杨醛壳寡糖希夫碱膦酸酯、5-溴水杨醛壳寡糖希夫碱膦酸酯对烟草花叶病的抑制效果,结果表明:这些药剂对烟草花叶病毒( TMV)均具有一定的诱导抗病效应,其中以5-溴壳寡糖希夫碱膦酸酯药剂的防治效果较好。
%The author tested the inhibitions of Chitosan oligosaccharide , Ningnan mycin, Salicylaldehyde chitosan oligosaccha-ride Schiff base , 5-Bromosalicylaldehyde chitosan oligosaccharide Schiff base , Salicylaldehyde chitosan oligosaccharide Schiff base phosphonate , 5-Bromosalicylaldehyde chitosan oligosaccharide Schiff base phosphonate to tobacco mosaic virus ( TMV) disease in field.The results indicated that all these drugs had certain effects of inducing resistance to TMV .Of all, 5-Bromosalicylaldehyde chitosan oligosaccharide Schiff base phosphonate had the best control effect against this disease .【期刊名称】《江西农业学报》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】4页(P68-71)【关键词】壳寡糖希夫碱;壳寡糖膦酸酯;烟草花叶病;防效【作者】赵龙杰;王莹;徐翠莲;王彩霞【作者单位】河南农业大学理学院,河南郑州 450002;河南农业大学理学院,河南郑州 450002;河南农业大学烟草学院,河南郑州 450002;河南农业大学烟草学院,河南郑州 450002【正文语种】中文【中图分类】S435.7烟草花叶病是烟草生产上的重要病害之一,在我国各种植烟区普遍发生[1-5]。
生防菌 BS04防治辣椒疫病机制李建文;高易宏;吴辉;江翱;孙文秀【摘要】从生防菌的根际定殖、防效和诱导防御酶活性3个方面探讨了生防菌BS04防治辣椒疫病的机制。
结果表明,生防菌 BS04能够在辣椒根际定殖,且定殖密度比较稳定,稳定维持在105 CFU/ g 以上;盆栽试验测定防治效果表明,生防菌 BS04的培养液对辣椒幼苗期疫病有较明显的防治效果,防效达85.81%;防御酶活性测定结果显示,接种辣椒疫霉菌后,辣椒叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)的活性均显著提高并出现峰值,但生防菌 BS04培养液和辣椒疫霉菌共同处理后,各种防御酶的活性有所降低,并表现出相对平缓的状态。
【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2015(000)010【总页数】3页(P151-153)【关键词】生防菌;辣椒疫病;防病机制;生物防治;防御酶【作者】李建文;高易宏;吴辉;江翱;孙文秀【作者单位】长江大学生命科学学院,湖北荆州434025;长江大学生命科学学院,湖北荆州 434025;长江大学生命科学学院,湖北荆州 434025;长江大学生命科学学院,湖北荆州 434025;长江大学生命科学学院,湖北荆州 434025【正文语种】中文【中图分类】S436.418.1+9辣椒疫病由辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)引起,是辣椒生长过程中发生比较严重的土传病害[1-3]。
多年来,国内外学者使用化学药剂[4]、选育抗病品种[5]、生物防治[6]等措施不断加强对辣椒疫病的防治。
但由于辣椒疫霉菌变异能力强,致病力分化明显,容易产生抗药性,采用化学药剂和选育抗病品种防治辣椒疫病存在极大的弊端。
利用有益微生物防治辣椒疫病成为首选的有效措施,越来越多的生防菌也受到了人们的关注。
目前,已从土壤及植物等不同来源分离筛选到若干株对辣椒疫霉菌具有拮抗作用的生防菌[7-14],但对其防病机制的研究还不够深入。
第一作者简介:肖仲久(1980Ο),男,湖南武冈市人,在读博士,讲师,现主要从事植物免疫学研究工作。
E Οmail :xzj198099@163.com 。
通讯作者:蒋选利(1960Ο),男,博士,教授,博士生导师,现主要从事植物免疫学研究工作。
E Οmail :253946966@ 。
基金项目:贵州省科学技术基金资助项目(黔科合J 字[2009]2104号);贵州省科学技术基金资助项目(黔科合J 字(2006)2052号);贵州大学人才科研基金资助项目。
收稿日期:2009-03-25壳寡糖诱导和白粉菌侵染的辣椒叶片防御酶系活性研究肖仲久1,2,3,蒋选利1,2,李小霞3,张素勤1(1.贵州大学农学院,贵州贵阳550025;2.贵州大学贵州省山地农业病虫害重点实验室,贵州贵阳550025;3.遵义师范学院生物系,贵州遵义563002) 摘 要:以遵义朝天椒为供试材料,用壳寡糖喷雾处理辣椒叶片后再接种辣椒白粉菌,系统地研究了壳寡糖对辣椒防御酶活性变化的影响。
结果表明:壳寡糖喷雾处理辣椒后,辣椒叶片中多酚氧化酶(PPO )、过氧化物酶(POD )、苯丙氨酸解氨酶(PAL )活性较对照都有明显增加,其中PPO 和PAL 峰值提前(处理后接种)。
试验证明,壳寡糖处理后,随着酶活性增强,辣椒的系统抗病性得到表达,二者有一定的相关性。
关键词:壳寡糖;白粉菌;辣椒;防御酶中图分类号:S 641.304+.1 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2009)08-0016-04 壳寡糖又称寡聚氨基葡糖、甲壳低聚糖,是由壳聚糖降解而成,是2~10个氨基葡糖通过βΟ1,4糖苷键连接而成的低聚糖[1]。
对许多植物Ο病原物系统的研究表明,植物对病原物侵入的生理生化反应是以酶的催化活动来实现的,寄主防御酶可催化一些诱导型抗病物质的合成,影响寄主的抗病反应[2]。
该课题组前期的研究已经证明,以壳寡糖为激发子,可启动辣椒的防卫反应,抑制白粉菌的扩展[3]。
基于此,试验以壳寡糖喷雾处理辣椒健康植株后再接种辣椒白粉病菌Leveillula taurica (Lev.)Arn ,拟探讨壳寡糖诱导处理后辣椒叶组织防御酶活性变化及其与辣椒白粉病抗性诱导效果的关系,为植物诱导抗性的应用和抗病机制研究提供更多理论依据,促进诱导抗病性技术在实践中的应用。
1 材料与方法1.1 材料供试植物材料:供试品种为贵州当地辣椒栽培种遵义朝天椒,由贵州大学植物病理学教研室提供。
将种子消毒后播种于80cm ×40cm ,高约30cm 的育苗盆中,待幼苗长至8~10片真叶时,将植株移栽到直径约20cm ,高约25cm 的瓷盆中,每盆2~3株,置于温室中培养。
病原菌:供试病原菌辣椒白粉病菌Leveillula tauri 2ca (Lev.)Arn 分生孢子采自贵州省贵阳市花溪区湖潮乡磊庄辣椒基地自然发病的植株,在辣椒苗圃进行繁殖,用时用毛笔将其刷下,配置成孢子悬浮液(105个/mL )。
供试药剂:壳寡糖购自大连中科格莱克生物科技有限公司,聚合度2~10。
1.2 方法试验处理及采样方法:辣椒成株期,选用长势均一的健壮植株供试。
用质量浓度50μg/mL 的壳寡糖溶液喷施供试植株下部第3片真叶,24h 后在喷药叶的上位叶片,采用喷雾法接种孢子浓度为105个/mL 的白粉菌。
试验设处理(喷壳寡糖溶液后接种)、空白对照(喷清水不接种病菌)、接种对照(不喷药,只喷清水和接种病菌)和喷药对照(只喷壳寡糖溶液不接种),并对不需接种的对照进行隔离。
各重复3次。
接种后0.5、1、2、3、4、5、6、7d 分别采收处理和对照的叶片样品供试。
采样叶片为第5叶,叶片样品装入封口袋中,做好标记,放入-80℃冰箱中保存供试。
1.2.1 酶液的提取 多酚氧化酶(PPO )活性提取:剪取辣椒叶片0.5g 。
加1mL 磷酸缓冲液(0.05mol/L ,p H 7.0),冰浴中研磨,10000g 离心10min ,上清液为PPO 粗提液。
过氧化物酶(POD )粗提液的提取:剪取辣椒叶片0.5g ,加入0.05mol/L 预冷的磷酸纳缓冲液(p H 7.8)5mL ,冰浴研磨,然后于10000rpm 离心10min ,上清液即为酶粗提液。
苯丙氨酸解氨酶(PAL )粗提液的提取:剪取辣椒叶片0.5g ,加入3M 预冷的提取液(含5mmol/L 巯基乙醇和0.5%PVP 的0.05mol/L ,p H 8.8的硼酸缓冲液),冰浴研磨,然后于10000rpm 离心10min ,上清液即为酶粗提液。
βΟ1,3Ο葡聚糖酶粗提液的提取:剪取辣椒叶片0.5g ,加入0.05mol/L 预冷的醋酸Ο醋酸纳缓冲液(p H 5.0)5mL ,冰浴研磨,然后于10000rpm 离心10min ,上清液即为酶粗提液。
611.2.2 酶活性的测定 参照其他植物酶活性的测定方法,几种酶活性均采用比色法测定[4Ο7]。
多酚氧化酶(PPO)活性的测定:取1.5mL0.2mol/L的邻苯二酚和3mL的磷酸缓冲液,加入0.5mL酶液。
对照管加入高温灭活的酶液。
每处理重复3次,30℃下反应15min,用0.1mL10%的偏磷酸终止反应,记录398nm波长下的吸光值。
酶活单位以1min内引起OD398变化0.01的酶量为1个酶活性单位(U),酶活大小以U/g(FW)表示。
过氧化物酶(POD)活性测定:取酶液50μL,加入2.95mL0.05mol/L,p H7.8的磷酸纳缓冲液,0.025 mol/L愈创木酚1mL,摇匀后,30℃预热3min,再加入0.2mol/L H2O21mL,立即计时,并测定OD470,每1min 读数1次,读3min内的变化值,以高温灭活的酶液做对照,所加试剂和测定管相同。
每处理重复3次,酶活单位以1min内引起OD470变化0.01的酶量为1个酶活性单位(U),酶活大小以U/g(FW)表示。
苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定:向3mL的反应介质(2mL的提取缓冲液和1mL的20mmol/L LΟ苯丙氨酸)中,加入0.2 mL的酶液,对照加入2.2mL的提取缓冲液和1mL的LΟ苯丙氨酸,37℃反应60min,加入0.8mL的40%的三氯乙酸终止反应,10000rpm离心10min,取上清测定290nm的光吸收。
每处理重复3次。
酶活单位以OD290变化0.01为1个酶活性单位(U),酶活大小以U/g (FW)表示。
βΟ1,3Ο葡聚糖酶活性测定:向试管中加入0.4mL的昆布多糖底物溶液(2.5mg/mL)和0.1mL 的酶液,再加入1mL醋酸钠缓冲液,对照不加酶液,多加0.1mL缓冲液。
37℃水浴中反应30min,随后加入2mL DNS溶液终止反应,置于沸水浴中5min,冷却。
记录540nm波长下的吸光值,对照标准曲线求出样品液中的还原糖量。
以1g鲜组织1h产生1μg还原糖的酶量为1个酶活性单位(U)。
2 结果与分析2.1 壳寡糖诱导辣椒抗白粉病性的表达壳寡糖处理的辣椒植株在接种后10d叶正面开始产生褪绿或淡黄色的小斑点,对照接种的植株8d就产生同样症状,16d对照叶片背面密生肉眼可见的白色粉状孢子,壳寡糖处理的植株20d才出现。
25d时待对照植株发病充分时统计病情指数,壳寡糖处理的病情指数仅为6.96,对照达32.38。
2.2 壳寡糖处理对多酚氧化酶(PPO)活性的影响在整个取样时期,壳寡糖喷雾处理后(除第6天),未接种白粉菌的叶片多酚氧化酶(PPO)活性基本上都高于对照(CK未接种)(图1)。
在处理后0.5d,酶活性就显著增加,处理后2d达到第1个高峰,为对照的137.02%;壳寡糖喷雾处理后接种,与对照(CK接种)的酶活性变化趋势相似,处理后2d即出现第1个峰值,为对照的137.02%。
二者第2个峰值出现的时序有明显差异(壳寡糖处理后接种第5天出现酶活性出现第2个峰值,为对照的129.28%,对照在第6天才出现第2个峰值),壳寡糖喷雾处理后接种,提前了酶活性的时序(比接种对照提前了1d)。
可见,壳寡糖喷雾处理可提高辣椒叶片中PPO的活性,且壳寡糖喷雾处理对辣椒叶片中PPO活性的影响可能主要是提前了酶活性的时序。
图1 壳寡糖处理并接种后辣椒叶片PPO活性变化Fig.1 Changes of PPO activity in pepper inoculated with Leveillula taurica(Lev.)Arn after oligochitosan pretreatment2.3 壳寡糖处理对过氧化物酶(POD)活性的影响由图2可以看出,壳寡糖喷雾处理后,未接种白粉菌的辣椒过氧化物酶(POD)活性与对照(CK未接种)在测定时间内均呈现2个活性高峰,但壳寡糖喷雾处理酶活性明显高于对照。
在处理后2d,酶活性就达到第1个峰值,为对照的128.7%。
2d后酶活性开始有所下降,在处理后5d达到第2个峰值,为对照的141.51%;壳寡糖喷雾处理后接种,除第3天和第6天酶活性略低于对照(CK接种)外,其他取样时间的酶活性均高于对照。
并于第5天达到酶活性最高峰值,为对照的120.48%。
结果表明,壳寡糖喷雾处理后辣椒叶片中过氧化物酶(POD)活性大幅度提高。
图2 壳寡糖处理并接种后辣椒叶片POD活性变化Fig.2 Changes of POD activity in pepper inoculated with Leveillula taurica(Lev.)Arn after oligochitosan pretreatment2.4 壳寡糖处理对苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响由图3可以看出,在接种1d内,壳寡糖喷雾处理后71和各对照叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL )活性基本变化不大,在接种后第1天活性均有所降低,但壳寡糖喷雾处理后接种的降低幅度最小,然后酶活性逐渐上升。
壳寡糖处理后未接种白粉菌的辣椒苯丙氨酸解氨酶(PAL )活性明显高于对照(CK 未接种),在处理后3d ,酶活性就达到第1个峰值,为对照的221.43%,然后酶活性开始有所下降,在处理后5d 达到第2个峰值,为对照的145.5%;壳寡糖喷雾处理后接种,除第4天酶活性略低于对照(CK 接种)外,其他取样时间的酶活性均高于对照。
酶活性出现2个高峰,但对照仅出现1个高峰,并提前了酶活性的时序(比接种对照提前了2d )。
并于第5天达到酶活性最高峰值,为对照的126.98%。
以上结果表明,壳寡糖喷雾处理后7d 内提高了辣椒叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL )活性。
图3 壳寡糖处理并接种后辣椒叶片PAL 活性变化Fig.3 Changes of PAL activity in pepper inoculated with Leveillulataurica (Lev.)Arn after oligochitosan pretreatment2.5 壳寡糖处理对βΟ1,3Ο葡聚糖酶活性的影响从图4可以看出,与其他酶活性相比,在整个取样期,βΟ1,3Ο葡聚糖酶活性变化幅度较小,峰值不是很明显。