葡萄糖氧化酶生产

Q/370502HLL山东好利来动物药业有限公司企业标准Q/370502HLL 012-2019 混合型饲料添加剂葡萄糖氧化酶Q/370502HLL 012-2019前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。

本标准由山东好利来动物药业有限公司提出并起草。

本标准主要起草人：赵景强、张令令、盖超超。

混合型饲料添加剂葡萄糖氧化酶1 范围本标准规定了混合型饲料添加剂葡萄糖氧化酶产品的分类和代号、要求、抽样、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存和保质期。

本标准适用于以葡萄糖氧化酶（Glucose Oxidase，下文用GOD表示）为原料，以纯化水为载体生产的混合型饲料添加剂葡萄糖氧化酶。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB 10648 饲料标签GB 13078 饲料卫生标准GB/T 14699.1 饲料采样GB/T 18823 饲料检测结果判定的允许误差GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定JJF 1070 定量包装商品净含量计量检验规则中华人民共和国兽药典饲料添加剂目录（中华人民共和国农业农村部）2005年国家质量监督检验检疫总局第75号令《定量包装商品计量监督管理办法》3 分类和代号分类和代号见表1。

表1 分类和代号4 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。

4.1 GOD活力单位在pH为5.6的磷酸缓冲液，30℃温度条件下，每分钟催化1μmol葡萄糖转化为葡萄糖酸所消耗的GOD 的量为一个活力单位，用U表示。

5 要求5.1 鉴别感官指标淡黄色至橙色透明均匀液体，气味微酸。

理化指标应符合表2的规定。

表2 理化指标5.2 pH值4.0～6.05.3 卫生指标符合GB 13078的规定。

5.4 净含量符合标签标注，偏差符合《定量包装商品计量监督管理办法》的规定。

葡萄糖氧化酶法关于《葡萄糖氧化酶法》，是我们特意为大家整理的，希望对大家有所帮助。

葡萄糖氧化酶法在生活起居中大部分人可能也没有听闻过，实际上葡萄糖氧化酶法是一种检测病人是不是高血糖，是不是患糖尿病的一种查验方式，一般较为普遍应用与医院门诊，假如高血糖或是是糖尿病人用葡萄糖氧化酶法来检验結果是十分精确的，下边实际详细介绍葡萄糖氧化酶法。

葡萄糖氧化酶法精确测量血糖浓度的详解生产基本原理疫苗葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)运用氧和水将葡萄糖空气氧化为葡萄糖酸，并释放出来双氧水。

乳酸脱氢酶(peroxidase，POD)在色原性氧蛋白激酶存有时将双氧水溶解为水和氧，并使色原性氧蛋白激酶4-羟基安替比林和酚去氢缩合反应为鲜红色醌类化合物，即Trinder反映。

鲜红色醌类化合物的产生量与葡萄糖成分正比。

生产实验试剂疫苗1．0.1mol/L聚磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)称量没有水磷酸氢二钠8.67g及没有水磷酸二氢钾5.3g溶解纯净水800ml中，用1mol/L 氢氧化钠溶液(或1mol/L盐酸)调pH至7.0，用纯净水定容至1L。

2．酶实验试剂称量乳酸脱氢酶1 200U，葡萄糖氧化酶1 200U，4-羟基安替比林10Mg，叠氮钠100mg，溶解聚磷酸盐缓冲溶液80Ml中，用1 mol/L NaOH调pH至7.0，用聚磷酸盐缓冲溶液定容至100ml，置4℃储存，可平稳3月。

3．酚水溶液称量重水蒸气蒸馏酚100mg溶解纯净水100ml 中，用深棕色瓶存储。

4．酶酚混和实验试剂酶实验试剂及酚水溶液相等混和，4℃能够储放1月。

5．12mmol/L苯甲酸水溶液融解苯甲酸1.4g于纯净水约800ml 中，升温助溶，制冷后加纯净水定容至l L。

6．100mmol/L葡萄糖标准存储液称量已干躁恒重的无水葡萄糖1.802g，溶解12mmol/L苯甲酸水溶液约70Ml中，以12mmol/L 苯甲酸水溶液定容至100ml。

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在进行葡萄糖氧化酶的生产之前，需要进行一系列准备工作。

葡萄糖氧化酶的微生物发酵生产工艺研究摘要：本文针对葡萄糖氧化酶基本特性、应用结构、作用机理等内容展开分析，通过研究做好菌种选育工作、进行发酵条件优化、做好提取纯化工作、进行化学修饰处理等工艺应用要点，其目的在于积累有价值的数据信息，为微生物发酵生产工艺的优化提供参考。

关键词：葡萄糖氧化酶；发酵条件；微生物发酵生产工艺葡萄糖氧化酶在自然界中的来源范围较广，包括动物、植物和微生物，动植物来源的葡萄糖氧化酶种类较多，但产出效率较低。

通过整理微生物发酵生产工艺的相关内容，对于提升葡萄糖氧化酶产出率有着积极地意义。

1葡萄糖氧化酶基本内容概述1.1基本特性葡萄糖氧化酶分子量范围很广，一般在 130kD～175kD之间，具有底物特异性，只能氧化β型葡萄糖，α型葡萄糖则不能被氧化，但是发酵法制备葡萄糖氧化酶过程中菌体可利用的底物除了葡萄糖之外，还有甘露糖、氨基己糖、2-去氧-D-葡萄糖、D-甘露糖、D-果糖等。

在葡萄糖氧化酶发酵处理过程中，经常使用到的抑制剂有Ag+、Hg2+、Gu2+等。

葡萄糖氧化酶的作用温度在30-60℃，同时其最大的光吸收波长在377nm-455nm，处于紫外条件下不会出现荧光问题。

另外固体状态下的葡萄糖氧化酶，其可以在0℃环境下保存1-2年，在-15℃条件下可以存储7-8年。

1.2应用结构从应用结构展开分析，葡萄糖氧化酶属于一种同型二聚体糖蛋白，即是将硫化物共价键作为载体，连接了两个相同的多肽链，其中含有大约11%-13%的糖，同时超过80%的糖属于甘露糖，可将其归类于高露糖型。

同时该氧化酶包含了两个亚基，每一个亚基都包含了一个二核苷酸和黄素腺嘌呤，并且在其结合位点处，也连接着FAD，这也是确保氧化反应链可逆的重要基础。

1.3作用机理葡萄糖氧化酶在应用中的作用机理可以细分为还原反应和氧化反应两部分内容：①在还原反应处理中，葡萄糖氧化酶在应用中也会借助催化氧化反应，将β-D-葡萄糖转换为δ-D-葡萄糖内酯，随后在非酶水解作用下，顺利转换为葡萄糖酸，在此过程中，FAD也会失去电子并转换为FADH；②在氧化反应处理中，2也会在氧气作用下，重新倍氧化成FAD，并且此过程也会产生过氧化氢这一FADH2产物。

登录 | 下载 | 刷新注意：如果你不能正常浏览本页，请关闭上网助手等拦截工具的所有拦截选项!商务版 | 政务版 | 短信 | ENGLISH新型饲料添加剂———葡萄糖氧化酶作者：摘自：中国饲料添加剂网日期：2005-06-09葡萄糖氧化酶(ＧｌｕｃｏｓｅＯｘｉｄａｓｅ,简称ＧＯＤ)是一种需氧脱氢酶,能专一地氧化β-Ｄ-葡萄糖成为葡萄糖酸和过氧化氢。

1928年Ｍｕｌｌｅｒ首先从黑曲霉的无细胞提取液中发现葡萄糖氧化酶。

1960年Ｋｕｓａｉ等、1964年Ｐａｚｕｒ和Ｓｗｏｂｏｄ-ｄａ分别从青霉素和黑曲霉中提纯葡萄糖氧化酶。

1995年,Ｐｅｔｒｕｃｃｉｏｌｉ等用青霉素的突变株生产出葡萄糖氧化酶。

我国自1986年开始研究葡萄糖氧化酶的制备提纯工艺,1998年正式投入生产,1999年农业部将其定为12种允许使用的饲料酶制剂添加剂之一。

1 葡萄糖氧化酶的理化性质高纯度葡萄糖氧化酶为淡黄色粉末,易溶于水,不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等有机溶剂,50%丙酮、60%甲醇能使其沉淀。

一般制品中均含有氧化氢酶,酶的最大光吸收波长为377～455ｎｍ。

在紫外光下无荧光,但在热、酸或碱处理后具有特殊的绿色。

固体葡萄糖氧化酶制剂在0℃下保存至少稳定2年,在-15℃下则可稳定8年。

葡萄糖氧化酶稳定的ｐＨ值范围为3～4,最适ｐＨ值为5,如果没有葡萄糖等保护剂的存在,ｐＨ值大于8或小于3葡萄糖氧化酶将迅速失活。

葡萄糖氧化酶的作用温度为30～60℃,该酶不受乙二胺四乙酸、氰化钾及氟化钠抑制,但受氯化汞、氯化银、对氯汞苯甲酸和苯肼抑制。

2 葡萄糖氧化酶在饲料行业中的应用作为国家允许使用的饲料酶制剂之一,葡萄糖氧化酶在食品、医药、饲料等行业中得到了广泛应用。

葡萄糖氧化酶是一种新型的酶制剂,能够改善动物肠道环境,调节饲粮消化,促进动物生长。

含葡萄糖氧化酶、乳酸过氧化物(ＬＰＯ)和乳铁蛋白的混合饲料添加剂,可用于预防牲畜胃肠道感染、腹泻,并有促进动物生长作用。

葡萄糖氧化酶生产工艺流程英文回答：Glucose oxidase is an enzyme that is widely used in various industries, including food, pharmaceutical, and diagnostic industries. It is primarily used for the production of glucose biosensors, which are used for blood glucose monitoring in diabetic patients. The production process of glucose oxidase involves several steps.Firstly, the enzyme is obtained from a suitable source, such as Aspergillus niger or Penicillium species. These fungal strains are known to produce high levels of glucose oxidase. The source organism is cultured in a suitable growth medium, which provides the necessary nutrients for enzyme production.After the culture reaches the desired biomass, thecells are harvested and the enzyme is extracted. This can be done through various methods, such as cell disruption,centrifugation, or filtration. The extracted enzyme is then purified to remove any impurities or contaminants. This is typically done using techniques like chromatography or ultrafiltration.Once the enzyme is purified, it is immobilized or stabilized to improve its stability and longevity. Immobilization can be achieved through various methods, such as covalent attachment to a solid support or encapsulation within a matrix. This immobilized enzyme can then be used for various applications, including glucose biosensor production.In the case of glucose biosensor production, the immobilized enzyme is typically combined with other components, such as an electrode and a mediator. The electrode provides a surface for the enzyme to react with glucose, while the mediator helps in transferring electrons between the enzyme and the electrode. This combination is then encapsulated within a suitable housing to protect it from external factors.The final step in the production process is quality control and testing. The produced glucose oxidase is tested for its activity, stability, and other parameters to ensure its effectiveness and reliability. This includes testingits performance in various conditions, such as pH and temperature variations.Overall, the production process of glucose oxidase involves steps like culture, extraction, purification, immobilization, and quality control. Each step is crucial to ensure the production of a high-quality enzyme for various applications, including glucose biosensor production.中文回答：葡萄糖氧化酶是一种广泛应用于食品、制药和诊断等多个行业的酶。

葡萄糖氧化酶一、酶的简介葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase，简称GOD)能够在有氧气的条件下专一性催化β-D- 葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢,高纯度GOD的制剂为淡黄色粉末、易溶于水，完全不溶于乙醚、氯仿、甘油和乙二醇[1]。

50%丙酮、66%甲醇能使其沉淀。

它广泛地分布于动物、植物和微生物体内，但由于微生物具有生长繁殖速度快，来源广等特点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源，微生物中的主要生产菌株为黑曲霉和青霉。

葡萄糖氧化酶是用黑曲霉等发酵制得的一种需氧脱氢酶，对人体无毒、副作用，具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等功能，它广泛应用于食品、饲料、医药等行业中，具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等作用。

【2】二、菌种及培养基2.1 菌种：以黑曲霉H1-9b为菌种，在发酵罐中装入培养基2.2 发酵培养基(g/L)：蔗糖80、蛋白胨3、KH2PO4 2、MgSO4·7H2O 0.7、KCl 0.5、NaNO3 4，pH5.5；斜面培养基(g/L)：蔗糖30、NaNO32、K2HPO41、KCl 0.5、MgSO4 0.5、FeSO40.01、琼脂20，pH5.5【3】。

发酵条件为：26～29摄氏度，pH值自然，通风量0．3m3／(m3·min)，搅拌速度400r／min。

发酵液离心分离得菌丝体，经研磨(因葡萄糖氧化酶是一种胞内酶，提取时首先必须先研磨破壁)后过滤，得到含葡萄糖氧化酶的滤液即酶液。

[4]三、工艺流程葡萄糖氧化酶制备流程图原料预处理培养基配制灭菌无菌空气制备发酵产品的分离纯化菌种的制备和种子培养葡萄糖氧化酶下游工艺流程图3.1葡萄糖氧化酶的发酵3.1.1种子液培养在斜面培养基上接种黑曲霉H1-9b 孢子，28℃培养4 ～5 d 。

3.1.2摇瓶发酵250mL 锥形瓶中分装50mL 发酵培养基，121℃灭菌20min，接种黑曲霉H1-9a 孢子浓度为104个/mL，28℃、200r/min 摇床培养80h 即达产酶高峰。

葡萄糖氧化酶一、酶的简介葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase，简称GOD)能够在有氧气的条件下专一性催化β-D- 葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢,高纯度GOD的制剂为淡黄色粉末、易溶于水，完全不溶于乙醚、氯仿、甘油和乙二醇[1]。

50%丙酮、66%甲醇能使其沉淀。

它广泛地分布于动物、植物和微生物体内，但由于微生物具有生长繁殖速度快，来源广等特点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源，微生物中的主要生产菌株为黑曲霉和青霉。

葡萄糖氧化酶是用黑曲霉等发酵制得的一种需氧脱氢酶，对人体无毒、副作用，具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等功能，它广泛应用于食品、饲料、医药等行业中，具有去除葡萄糖、脱氧、杀菌等作用。

【2】二、菌种及培养基2.1 菌种：以黑曲霉H1-9b为菌种，在发酵罐中装入培养基2.2 发酵培养基(g/L)：蔗糖80、蛋白胨3、KH2PO4 2、MgSO4·7H2O 0.7、KCl 0.5、NaNO3 4，pH5.5；斜面培养基(g/L)：蔗糖30、NaNO32、K2HPO41、KCl 0.5、MgSO4 0.5、FeSO40.01、琼脂20，pH5.5【3】。

发酵条件为：26～29摄氏度，pH值自然，通风量0．3m3／(m3·min)，搅拌速度400r／min。

发酵液离心分离得菌丝体，经研磨(因葡萄糖氧化酶是一种胞内酶，提取时首先必须先研磨破壁)后过滤，得到含葡萄糖氧化酶的滤液即酶液。

[4]三、工艺流程葡萄糖氧化酶制备流程图原料预处理培养基配制灭菌发酵产品的分离纯化菌种的制备和种子培养葡萄糖氧化酶下游工艺流程图3.1葡萄糖氧化酶的发酵3.1.1种子液培养在斜面培养基上接种黑曲霉H1-9b 孢子，28℃培养4 ～5 d 。

3.1.2摇瓶发酵250mL 锥形瓶中分装50mL 发酵培养基，121℃灭菌20min，接种黑曲霉H1-9a 孢子浓度为104个/mL，28℃、200r/min 摇床培养80h 即达产酶高峰。

葡萄糖氧化酶简介及其应用1.葡萄糖氧化酶简介葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）是动物体内消化道不能分泌的酶；是一种需氧脱氢酶，系统命名为β-D-葡萄糖氧化还原酶，能专一地氧化分解β-D-葡萄糖为葡萄糖酸和过氧化氢，同时消耗大量的氧气。

葡萄糖氧化酶反应的最初产物不是葡萄糖酸，而是中间产物δ-葡萄糖酸内酯，δ-葡萄糖酸内酯以非酶促反应自发水解为葡萄糖酸。

葡萄糖氧化酶通常与过氧化氢酶组成一个氧化还原酶系统。

葡萄糖氧化酶在生产上一般采用的霉菌是黑曲霉和青霉属菌株。

早在1904年人们就发现了葡萄糖氧化酶，直到1928年Muller 才首先从黑曲霉的无细胞提取液中发现葡萄糖氧化酶，在研究了其催化机理后正式将其命名为葡萄糖氧化酶，并将其归入脱氢酶类。

我国自1986年开始研究葡萄糖氧化酶的制备提纯工艺，1998年正式投入生产，1999年农业部将其定为可以使用的饲料酶制剂。

产自特异青霉和黑曲霉的葡萄糖氧化酶已被列人农业部《饲料添加剂品种目录（2013)》第四大类酶制剂。

1.1葡萄糖氧化酶形态及特性高纯度葡萄糖氧化酶分子质量为150~152ku,为淡黄色粉末，易溶于水，不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等有机溶剂，50%丙酮溶液和60%甲醇溶液能使其沉淀。

1.1.1耐受PH值葡萄糖氧化酶在pH为3.0~7.0时具有很好的稳定性，最适pH为5-6。

如果没有葡萄糖等保护剂的存在，pH大于8或小于3时葡萄糖氧化酶将迅速失活。

1.1.2耐受温度葡萄糖氧化酶作用温度为30~60℃，固体葡萄糖氧化酶制剂在0℃下至少可稳定保存2年，在－15℃下则可稳定保存8年。

实际生产的耐高温的葡萄糖氧化酶有两类：①常规菌种产生的葡萄糖氧化酶经过包被工艺处理；②耐高温菌株产生的葡萄糖氧化酶，不用包被就能耐高温。

1.1.3光谱葡萄糖氧化酶的最大光吸收波长为377~455nm，在紫外光下无荧光，但经热、酸或碱处理后具有特殊的绿色。

葡萄糖氧化酶电极原理
葡萄糖氧化酶电极是一种用于测量血糖浓度的传感器。

它的工作原理基于葡萄糖氧化酶催化氧化葡萄糖产生电子，进而产生电流的效应。

葡萄糖氧化酶是一种在生物体内广泛存在的酶，它能够促使葡萄糖分子发生氧化反应。

在葡萄糖氧化酶电极内部，一个薄膜通常被涂覆在电极表面，并含有葡萄糖氧化酶。

当血液样品加到电极的葡萄糖氧化酶表面时，葡萄糖分子会与葡萄糖氧化酶结合。

这种结合形成一个葡萄糖-葡萄糖氧化酶
复合物。

葡萄糖氧化酶在复合物的催化下，将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并释放出电子。

这些电子将通过电极表面的电导体传输，并导致电流的产生。

电流的大小和葡萄糖浓度之间存在一定的线性关系。

通过测量电流的强度，可以间接推断出血液中的葡萄糖浓度。

葡萄糖氧化酶电极的优点在于其快速、灵敏和准确的测量结果。

它被广泛应用于血糖仪和其它葡萄糖监测设备中。