碳水化合物的代谢试验
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2023年检验类之临床医学检验技术(中级)能力提升试卷A卷附答案单选题(共30题)1、下列组合错误的是A.急性淋巴细胞白血病-POX染色阴性B.红血病--幼红细胞PAS染色阴性C.慢性淋巴细胞白血病--血片分类计数中以成熟小淋巴细胞为主D.急性粒细胞白血病--原始粒细胞中可见Auer小体E.急性早幼粒细胞白血病--出血倾向严重【答案】 B2、国家计量局对于“量出式”吸量管的标记A.用“E”是表示B.用“A”是表示C.用“TC”是表示D.用“TD”是表示E.用“TT”是表示【答案】 D3、I型变态反应皮内试验结果判断主要是()。
A.风团B.红晕C.红肿和水疱D.红肿E.硬结【答案】 A4、HiCN的最大吸收峰位于A.634nmB.504nmC.587nmD.540nmE.578nm【答案】 D5、十二指肠引流液检查中,C胆汁是指A.十二指肠液B.胆总管液C.肝胆管液D.胆囊液E.肝内胆管液【答案】 C6、在质控中,质控血清的检测结果超过A.在控B.失控C.在警告范围D.无意义E.仍然有效【答案】 B7、糖尿病患者,尿糖(+),其血糖至少为()。
A.4.8mmol/LB.6.8mmol/LC.8.8mmol/LD.10.8mmol/LE.12.8mmol/L【答案】 C8、患者女,43岁,因腹痛1天前往医院就诊断。
尿干化学分析仪:亚硝酸盐(+),白细胞(+),红细胞(-);细菌121/ul,尿红细胞4.5/ul,尿白细胞8.98/ul。
显微镜镜检:红细胞0~1/HP,白细胞0~3/HP,细菌偶见。
结合三种方法结果。
可以判断干化学法亚硝酸盐结果为假阳性。
关于亚硝酸盐检测的叙述,错误的是()。
A.阴性结果可排出菌尿的可能B.标本放置时间过久可呈假阳性C.尿液中含有亚硝酸还原酶导致假阳性D.阳性不能完全肯定泌尿系统感染E.标本被亚硝酸盐或偶氮试剂污染可呈假阳性【答案】 A9、检测尿中β2-微球蛋白是监测()A.肾小球功能B.恶性肿瘤C.泌尿系统感染D.肾小管功能E.良性肿瘤【答案】 D10、手工法网织红细胞显微镜计数法,染色液可为A.巴氏染液B.姬姆萨染液C.瑞特染液D.新亚甲蓝染液E.HE染液【答案】 D11、关于乙型肝炎的叙述错误的是()。
碳水化合物碳水化合物(carbohydrate)是由碳、氢和氧三种元素组成,由于它所含的氢氧的比例为二比一,和水一样,故称为碳水化合物。
它是为人体提供热能的三种主要的营养素中最廉价的营养素。
食物中的碳水化合物分成两类:人可以吸收利用的有效碳水化合物如单糖、双糖、多糖和人不能消化的无效碳水化合物,如纤维素,是人体必须的物质。
糖类化合物是一切生物体维持生命活动所需能量的主要来源。
它不仅是营养物质,而且有些还具有特殊的生理活性。
例如:肝脏中的肝素有抗凝血作用;血型中的糖与免疫活性有关。
此外,核酸的组成成分中也含有糖类化合物——核糖和脱氧核糖。
因此,糖类化合物对医学来说,具有更重要的意义。
自然界存在最多、具有广谱化学结构和生物功能的有机化合物。
可用通式Cx(H2O)y来表示。
有单糖、寡糖、淀粉、半纤维素、纤维素、复合多糖,以及糖的衍生物。
主要由绿色植物经光合作用而形成,是光合作用的初期产物。
从化学结构特征来说,它是含有多羟基的醛类或酮类的化合物或经水解转化成为多羟基醛类或酮类的化合物。
例如葡萄糖,含有一个醛基、六个碳原子,叫己醛糖。
果糖则含有一个酮基、六个碳原子,叫己酮糖。
它与蛋白质、脂肪同为生物界三大基础物质,为生物的生长、运动、繁殖提供主要能源。
是人类生存发展必不可少的重要物质之一。
发现历史在人们知道碳水化合物的化学性质及其组成以前,碳水化合物已经得到很好的作用,如今含碳水化合物丰富的植物作为食物,利用其制成发酵饮料,作为动物的饲料等。
一直到18世纪一名德国学者从甜菜中分离出纯糖和从葡萄中分离出葡萄糖后,碳水化合物研究才得到迅速发展。
1812年,俄罗斯化学家报告,植物中碳水化合物存在的形式主要是淀粉,在稀酸中加热可水解为葡萄糖。
1884年,另一科学家指出,碳水化合物含有一定比例的C、H、O三种元素,其中H和O的比例恰好与水相同为2:1,好像碳和水的化合物,故称此类化合物为碳水化合物,这一名称,一直沿用至今。
高级卫生专业资格(正高副高)微生物检验技术专业资格(正高副高)模拟题2021年(57)(总分100,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 奋森螺旋体最常见所致疾病是A. 梅毒B. 咽峡炎C. 皮肤感染D. 猫抓病E. 流行性斑疹伤寒2. 以下是用于病毒分离培养的传代细胞系,除外是A. WI-38B. HeLaC. Hep-2D. VeroE. FL3. 关于白假丝酵母菌,下述哪项是错误的A. 在玉米粉培养基上可长出厚膜孢子B. 在沙氏培养基上形成酵母样菌落C. 在营养丰富培养基上长出菌丝D. 属于单细胞条件致病性真菌E. 是婴幼儿鹅口疮的病原体4. 下列哪种试验属于细菌的生化反应A. CAMP试验B. 结核菌素试验C. 抗"O"试验D. 肥达反应E. 外斐反应5. 药敏试验筛选耐甲氧西林青霉素葡萄球菌(MRS),其筛选率最高的方法:A. 试管稀释法B. 微量稀释法C. 琼脂稀释法D. 纸片扩散法E. 肉汤稀释法6. 关于医院感染和社区感染的叙述,下列哪项正确A. 前者为外源性,后者为内源性B. 二者的病原体均为多重耐药C. 二者的易感者相同D. 前者的病原体主要是条件致病菌,后者为典型致病菌E. 前者较易治疗,后者较难治疗7. 女,22岁,住院一周后出现呼吸道感染症状,实验室细菌检查结果为:氧化酶试验、硝酸盐还原试验和动力均为阴性,应考虑引起这一感染的细菌是A. 铜绿假单胞菌B. 不动杆菌C. 莫拉菌D. 产碱杆菌E. 黄杆菌8. 属于蛋白质和氨基酸的代谢试验的是A. VP试验B. 吲哚试验C. 氰化钾试验D. 硝酸盐还原试验E. 触酶试验9. 不能用高压蒸气灭菌法灭菌的A. 普通培养基B. 手术器械包C. 玻璃器皿D. 生理盐水E. 血清10. 乙醇消毒剂常用的浓度是A. 100%B. 95%C. 75%D. 50%E. 30%11. 下列细菌直接涂片即可作出初步鉴定的是A. 流感嗜血杆菌B. 百日咳鲍特菌C. 大肠埃希菌D. 白喉棒状杆菌E. 鼠疫耶尔森菌12. 关于脊髓灰质炎病毒,下列哪项叙述是正确的?A. 是有包膜的RNA病毒B. 病后免疫力不持久C. 只有一个血清型D. 临床都是麻痹型E. 口服OPV比注射IPV效果好13. 关于紫外线杀菌的叙述,不正确的是A. 紫外线的杀菌作用与波长有关B. 紫外线损坏细胞的DNA构型C. 紫外线的穿透力弱,所以对人体无损害D. 紫外线适用于空气和物体表面消毒E. 一般用低压水银蒸汽灯来做紫外线杀菌14. 下列哪种病毒易发生潜伏感染A. 乙型脑炎病毒B. 水痘-带状疱疹病毒C. 流感病毒D. 乙型肝炎病毒E. 脊髓灰质炎病毒15. 甲型流感病毒最易发生变异的抗原是A. 神经氨酸酶(NA)B. 血凝素(HA)C. 核蛋白(NP)D. M蛋白E. 多聚酶蛋白(PA)16. 关于高压蒸气灭菌法的叙述,不正确的是A. 灭菌效果最好,目前应用很广泛B. 适用于耐高温和潮湿的物品C. 可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物D. 通常压力为203.43kPaE. 通常温度为121.3℃17. 鉴定真菌时,使用的标准培养基是A. 中国蓝培养基B. 血液培养基C. Sabouraud培养基D. Korthof培养基E. 克氏双糖铁培养基18. 卡介苗(BCG)是通过有毒力的牛型结核分枝杆菌经下列哪种变异形成的?A. 形态结构变异B. 毒力变异C. 抗原性变异D. 耐药性变异E. 菌落变异19. 可直接用暗视野显微镜观察运动的病原体是:A. 螺旋体B. 衣原体C. 支原体D. 立克次体E. 病毒20. 在白假丝酵母菌的鉴定中有诊断意义的真菌孢子是A. 大分生孢子B. 小分生孢子C. 厚膜孢子D. 关节孢子E. 芽生孢子21. 放线菌引起外伤性创伤感染,标本检查应首选A. 抗原检测B. 核酸检测C. 直接显微镜检查D. 分离培养E. 生化试验22. 关于血清学试验结果分析时错误的是:A. 试验阳性说明机体接触过相应病原体B. 单次试验阳性不能完全证明新近感染C. 试验阴性不能完全排除相应病原体感染D. 试验阳性即有辅助诊断意义E. 双份血清标本,后者抗体效价比前者高四倍或四倍以上有诊断意义23. 配制完成的培养基pH应与规定的PH相差:A. +0.1B. +0.2C. +0.3D. +0.4E. ±0.524. 医院感染检测的内容包括:A. 病原体B. 易感人群C. 媒介因素D. 环境E. 以上都是25. 2岁男孩,诊断为败血症,血培养鉴定为B群链球菌,患者青霉素过敏,下列哪些药敏试验是必要的:A. 该菌对青霉素的敏感试验B. 该菌对万古霉素的敏感试验C. 该菌对红霉素的敏感试验D. 该菌对头孢噻肟的敏感试验E. 该菌对头孢他定的敏感试验26. 硝酸盐还原试验属于A. 碳水化合物的代谢试验B. 蛋白质和氨基酸的代谢试验C. 呼吸酶类试验D. 复合生化试验E. 有机盐利用试验27. 不能杀死细菌芽胞的方法是A. 高压蒸气灭菌法B. 间歇蒸气灭菌法C. 流动蒸气灭菌法D. 干烤法28. 作为判断灭菌的效果的监控菌株是A. 分枝杆菌B. 嗜热脂肪芽孢杆菌C. 弧菌D. 大肠埃希菌E. 葡萄球菌29. 下列细菌中一般不采用革兰染色法的是:A. 大肠埃希菌B. 金黄色葡萄球菌C. 铜绿假单胞菌D. 结核分枝杆菌E. 草绿色链球菌30. 被狂犬咬伤后最正确的处理方式是A. 注射狂犬病病毒免疫血清+抗病毒药物B. 注射大量丙种球蛋白+抗病毒药物C. 清创+抗生素D. 清创十接种疫苗+注射狂犬病病毒免疫血清E. 清创+注射狂犬病病毒免疫血清31. 某建筑工人,施工时不慎从2楼跌落,造成下肢股骨、腔骨多处开放性骨折,仅经过复位包扎固定处理。
食用型甘薯块根碳水化合物代谢特性及与品质的关系史春余;王汝娟;梁太波;王振林【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2008(041)011【摘要】[目的]探讨食用型品种块根碳水化合物代谢特性及与品质的关系.[方法]以淀粉型品种为对照,选用典型的食用型品种于2004~2005年2个生长季在山东农业大学试验农场进行试验研究.试验采用块根膨大过程中定期取样的方法,观察块根膨大过程中可溶性糖、淀粉及淀粉组分含量的变化、淀粉酶活性变化及其与甘薯收获期块根品质的关系.[结果]与淀粉型品种比较,食用型品种块根总淀粉含量、直链淀粉含量以及支链淀粉含量均较低,可溶性总糖和β-胡萝卜素含量较高;块根粉的高峰黏度和崩解值等较高.糊化温度较低;块根蒸煮食味较好.栽秧100 d以后,食用型甘薯块根总淀粉含量和β-淀粉酶活性下降,可溶性总糖含量提高,其变化趋势与淀粉型品种相反.[结论]食用型品种块根膨大后期,由于淀粉酶的作用导致淀粉分解是其总淀粉含量较低、可溶性总糖含量较高的一个重要原因.【总页数】8页(P3878-3885)【作者】史春余;王汝娟;梁太波;王振林【作者单位】山东农业大学农学院/作物生物学国家重点实验室,山东泰安,271018;山东农业大学农学院/作物生物学国家重点实验室,山东泰安,271018;山东农业大学农学院/作物生物学国家重点实验室,山东泰安,271018;山东农业大学农学院/作物生物学国家重点实验室,山东泰安,271018【正文语种】中文【中图分类】S5【相关文献】1.甘薯块根特性的生态变异及其与产量和品质的关系 [J], 后猛;马代夫;李强;辛国胜;吴问胜;王良平;张允刚;王欣;唐维;李秀英2.腐植酸对食用型甘薯块根硝酸盐积累的影响 [J], 柴沙沙;史春余;张立明;柳洪鹃;王翠娟3.腐植酸提高食用型甘薯块根可溶性糖含量的生理基础 [J], 柳洪鹃;李作梅;史春余;张立明4.9个食用型甘薯品种生长期间块根总黄酮含量的变化 [J], 田欢;李静;王璐璐;黄雨;冉海榕;李佳欣;傅玉凡5.9个食用型甘薯品种生长期间块根总黄酮含量的变化 [J], 田欢;李静;王璐璐;黄雨;冉海榕;李佳欣;傅玉凡因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
2014年检验师真题好难1、以下哪种疾病不属于原发性免疫缺陷病A、婴儿暂时性丙种球蛋白缺乏症B、选择性IgA缺乏症C、选择性IgG亚类缺陷症D、多发性骨髓瘤E、性联丙种球蛋白缺乏症恰当答案:D答案解析:多发性骨髓瘤属于免疫增殖病,不是原发性免疫缺陷病。
2、链球菌病毒感染后肾小球肾炎常出现何型超敏反应A、Ⅰ型B、Ⅱ型C、Ⅲ型D、Ⅳ型E、速发型恰当答案:C答案解析:链球菌感染后肾小球肾炎发生Ⅱ、Ⅲ型超敏反应,但常发生于Ⅲ型超敏反应(约占80%)。
3、有关McAb的特性,以下哪项描述不对A、生物活性专一B、特异性弱C、纯度高D、大多源自于人-人杂交瘤细胞E、无效蛋白含量少恰当答案:D答案解析:单克隆抗体大多来自于鼠一鼠杂交瘤细胞,即小鼠的致敏B细胞与小鼠的骨髓瘤细胞杂交。
4、某男,16岁,时存有酱油色尿而去求诊。
红细胞形态正常,Hb90g/L,网织红细胞3.8%,抗人球蛋白试验(-),酸化血清试验阳性,冷暖甲状腺试验(-)。
本例可以确诊为A、运动性血红蛋白尿B、自身免疫性溶血性贫血C、阵发性寒冷性血红蛋白尿D、热凝集素血综合征E、PNH恰当答案:E答案解析:PNH确诊实验是ham试验。
5、某女,46岁,嘏3子,因头晕,不振,面色苍白1年求诊。
平时月经量多,存有消化性溃疡病史3年。
检查:RBC2.0×10 /L,Hb60g/L,WBC和PLT正常,血清铁蛋白10μg/L,骨髓铁染色内铁(-),外铁(-)。
最可能将的确诊就是A、巨幼细胞性贫血B、再造障碍性贫血C、缺铁性贫血D、铁粒幼细胞性贫血E、溶血性贫血恰当答案:C答案解析:缺铁性贫血的铁染色结果是骨髓细胞外铁消失,细胞内铁减少,血清铁蛋白下降。
6、用自动血液分析仪展开血液分析,新宠的抗凝剂就是A、EDTA-KB、肝素C、双草酸盐D、草酸盐E、枸橼酸钠恰当答案:A答案解析:乙二胺四乙酸(EDTA)盐可与钙离子结合成螯合物,从而阻止血液凝固。
由于其对血细胞形态影响很小,根据国际血液学标准化委员会(International Committee Standard of Hematology,ICSH)建议,血液分析首选的抗凝剂为EDTA-K 。
初级临床医学检验技士专业知识-21(总分:100.00,做题时间:90分钟)一、A1型题 (总题数:23,分数:46.00)1.辅助性T细胞的标志性抗原为(分数:2.00)A.CD3+、CIM+、CD8- √B.CD3+、CD4+、CD8+C.CD3+、CD4-、CD8-D.CD3+、CD4-、CD8+E.CD3-、CD4+、CD8-解析:[解析] 辅助性T细胞的标志性抗原为CD3+、CD4+、CD8-,细胞毒性T细胞的标志性抗原为CD3+、CD4-、CD8+。
2.化学发光酶免疫分析的反应中,对鲁米诺起催化作用的酶是(分数:2.00)A.HRP √B.ALPC.AHPPDD.PR3E.β-Gal解析:[解析] 对鲁米诺起催化作用的酶是HRP。
用HRP标记抗原或抗体,与待测标本反应后形成酶标记抗原-抗体复合物,作用于鲁米诺产生发光效应。
3.临床上用于确诊疟疾的检测方法是(分数:2.00)A.间接荧光抗体试验B.间接红细胞凝集试验C.ELISA法D.显微镜检疟原虫√E.斑点免疫结合试验解析:[解析] 显微镜检疟原虫是确诊疟疾的“金标准”。
其他四项均为疟原虫抗体的检测方法。
4.根据免疫复合物(IC)的物理学性质,常用于检测CIC的方法是(分数:2.00)A.超速离心法B.分子超滤法C.PEG沉淀法√D.冷球蛋白沉淀法E.聚丙烯酰胺凝胶电泳法解析:[解析] 常用于检测循环免疫复合物(CIC)的方法是聚乙二醇沉淀法(PEG)沉淀法。
5.单克隆丙种球蛋白病的首选检测是(分数:2.00)A.免疫电泳B.测Ig含量C.骨髓检测D.血清蛋白区带电泳√E.以上都不对解析:[解析] 血清蛋白电泳即用电泳方法测定血清中各类蛋白占总蛋白的百分比,对于诊断单克隆丙种球蛋白病提供有效证据。
6.AIDS是何类疾病(分数:2.00)A.B细胞免疫缺陷病B.体液免疫缺陷病C.联合免疫缺陷病D.获得性免疫缺陷综合征√E.以上都不对解析:[解析] AIDS的病理基础就是HIV病毒攻击CD4 + T淋巴细胞,使机体免疫功能丢失。
绪论1. 微生物的定义与特点一,微生物的概念与特点; 微生物的分类;1. 微生物(microorganism )是一群个体微小,结构简洁,肉眼不能直接观察,必需借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观看到的微小生物的总称;2. 微生物的特点个体微小,结构简洁比表面积大,吸取多,转化快繁衍快,代谢强适应强,易变异种类多,分布广1. 微生物类型依据微生物大小,结构和组成不同分为三类型2. 病原微生物的定义病原微生物:是指能引起动物,植物或人类产生疾病的微生物;3. 医学微生物学的进展简史;.微生物的发觉与讨论(1)列文虎克创造显微镜,最早观看到微生物;微生物学讨论的创始人:巴斯德,科赫,李斯特第一章第一节细菌的基本性状细菌的形状与结构1.细菌细胞壁的结构和功能,肽聚糖结构及其化学组成;革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区分(一)细胞壁化学组成与结构,革兰染色共有组分:肽聚糖特别组分:G+ 菌,G- 菌不同革兰阳性菌细胞壁特别组分:磷壁酸革兰阴性菌细胞壁特别组分:外膜革兰阴性菌细胞壁肽聚糖2.细胞壁的功能::聚糖骨架,四肽侧链(1)维护细菌固有形状和抗击低渗作用;(2)物质交换作用;(3)屏障作用;(4)免疫作用;(5)致病作用;(6)与细菌药物敏锐性有关;G+ 菌与G- 菌细胞壁结构比较. 细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同,. 细菌细胞膜可形成一种特有的结构,称2.细菌荚膜,鞭毛和菌毛的功能;荚膜:功能:由磷脂和多种蛋白质组成,中介体;但不含胆固醇;有抗吞噬和抗击杀菌物质的杀菌作用,增强细菌的侵袭力,构成细菌致病力的重要因素之一;②具有免疫原性;③鉴别细菌和血清学分型鞭毛:功能:细菌的运动器官菌毛一般菌毛:具有黏附性,与细菌致病性有关;性菌毛:与细菌的遗传变异相关3.芽胞结构特点,意义,与消毒灭菌的关系;细菌L 型的形状特点,检验要点;芽胞:某些细菌(主要为革兰阳性杆菌)在肯定条件下,细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强,具有多层膜状结构,通透性很低的圆形或卵圆形的小体;L 型细菌:细胞壁缺陷的细菌;常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中;依据细胞壁缺陷程度分:原生质体(完全失去细胞壁,见于原生质球(细胞壁部分缺损,见于G+菌,仅在高渗环境中存活)G-菌,在高渗或非高渗环境中均能存活)4.G+ 菌和G- 菌细胞壁结构的差异及其意义;其次节细菌的生理细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;IMViC 试验的组成及机制;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义;细菌的生长繁衍(一)细菌生长繁衍的条件1. 充分的养分物质2. 相宜的酸碱度3. 合适的温度4. 必要的气体环境包括:水,碳源,氮源,生长因子等;多为~;多数病原菌为35℃~37℃;O2 和CO 2;主要是按细菌对O2 的需要与否,将细菌分为:细菌生长繁衍的规律细菌的繁衍方式:无性二分裂;细菌的繁衍速度:大多数细菌20~30 分钟即可分裂一次;2.细菌的养分类型和养分机制,自氧菌与异氧菌的概念;3.细菌的生长曲线及其特点;(一)能量代谢细菌猎取能量的途径——生物氧化;细菌能量代谢的主要类型:(二)分解代谢检测细菌糖分解产物的常用试验:糖发酵试验,甲基红试验,VP 试验等;检测细菌蛋白质和氨基酸分解产物的常用试验:吲哚(靛基质)试验,硫化氢试验,苯丙氨酸脱氨酶试验等;其他检测细菌分解产物的常用试验:尿素分解试验,枸橼酸盐利用试验等;第三节细菌与环境1 正常菌群的概念和生理功能;条件致病菌的概念2.正常菌群的生理功能;条件致病菌的概念3.消毒,灭菌,无菌,无菌操作等概念;高温消毒灭菌法及其应用;二,细菌的掌握(一)基本概念:消毒杀死物体或介质中病原微生物的方法;灭菌杀灭物体或介质中所有微生物的方法;无菌无活菌存在的状态;无菌操作防止微生物进入机体或物体的操作技术;防腐防止或抑制细菌生长繁衍的方法;4.常用物理和化学消毒灭菌方法及其应用;噬菌体与宿主的相互关系;其次章真菌的基本性状真菌的概念真菌的分类真菌孢子与细菌芽胞的区分第三章病毒的基本性状病毒的大小病毒的结构病毒的增殖病毒的复制周期第四章微生物与感染细菌致病三大因素细菌内外毒素的区分毒血症,菌血症,败血症,脓毒血症的概念全身感染的类型其次篇第五章第一节微生物检验的基本技术细菌的检验技术细菌形状检验技术细菌染色的一般程序染色标本检查的一般程序革兰氏染色法,抗酸染色法的原理,方法; 2.革兰染色法【方法】其次节细菌的接种与培育技术调配—溶化—调Ph—过滤澄清—分装—灭菌—检定—储存细菌在各种培育基上的生长现象及观看要点;培育基的概念培育基的分类第三节细菌的生化鉴定技术糖( 醇,苷)类发酵试验,O/F 试验,MR 试验,VP 试验的原理,操作,结果判定要点及其应用;I 试验,C 试验,氧化酶,触酶,血浆凝固酶氢氧化钾拉丝试验及理,操作要领,观看结果要点及其应用;一,碳水化合物的代谢试验1,糖(醇,苷)类发酵试验KIA 和TSI 的试验原原理:多糖→单糖→丙酮酸→酸性产物→pH ↓ →呈酸性变色(或显现气泡2,O/F 试验(或产气)原理:依据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同,将细菌分为氧化,发酵和产碱型三类3,甲基红试验原理:细菌发酵葡萄糖,产生丙酮酸,进一步分解生成大量混合酸,使培育pH 下降至以下,加入甲基红后,出现红色反应;为甲基红试验阳性;4,V-P 试验原理:细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境中,乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰,二乙酰与胍基化合物结合,生成红色化合物,是为V-P 试验阳性;5,β-半乳糖苷酶试验(ONPG )原理:有的细菌可产生β -半乳糖苷酶,能分解邻硝基酚β-D 半乳糖苷(ONPG) 而生成黄色的邻硝基苯酚,该试验也称为ONPG 试验;6,七叶苷水解试验原理:某些细菌能分解七叶苷产生葡萄糖与七叶素,七叶素与培育基中的Fe2+结合后,形成黑色的化合物,使培育基变黑;二,蛋白质和氨基酸的代谢2,硫化氢试验硫化氢与培育基中的亚铁盐或铅盐结合生原理:细菌产生酶,分解含硫氨基酸生成硫化氢,成黑色化合物;3,尿素酶试验原理:细菌产生脲酶,水解尿素生成氨和二氧化碳,培育基呈碱性反应4,苯丙氨酸脱氨酶试验使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸,苯丙酮酸与三氯化铁作用,原理:细菌产生苯丙氨酸脱氨酶,形成绿色化合物三,碳源利用试验枸橼酸盐利用试验细菌在生长过程中分解枸橼酸原理:有的细菌能利用培育基中的枸橼酸盐作为唯独的碳源,盐产生碳酸盐,使培育基呈碱性反应四,酶类试验1,氧化酶(细胞色素氧化酶)试验,能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧原理:某些细菌具有氧化酶(细胞色素氧化酶)化生成红色的醌类化合物2,触酶试验继而形成氧分子显现原理:细菌产生的触酶(过氧化氢酶)能催化过氧化氢放出初生态氧,气泡;3,凝固酶试验(试管法)原理:金黄色葡萄球菌能产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白;4,凝固酶试验(玻片法)原理:金黄色葡萄球菌能产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白5,硝酸盐仍原试验原理:某些细菌能仍原培育基中的硝酸盐为亚硝酸盐,亚硝酸盐与醋酸作用,生成亚硝酸,亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸,再与α-萘胺结合,生成N- α-萘胺偶氮苯磺酸(红色化合物第六章真菌检验技术真菌感染性疾病的微生物学检查原就第七章病毒检验技术病毒标本的采集和运输留意事项;第八章细菌对抗菌药物敏锐试验药物敏锐试验的基本概念,常用方法抗菌药物敏锐试验方法纸片扩散法稀释法E-test 法需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏锐试验告);(K-B 法和稀释法的原理,方法,结果判定及正确发报第三篇第十章常见微生物鉴定技术需氧和兼性厌氧球菌葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌,淋病奈瑟菌的主要形状特点,培育特性,分类依据及分类;病原性球菌标本采集种类,检验鉴定程序,鉴定要点,检验鉴定依据及报告要点;第十一章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌第一节肠杆菌科概述肠杆菌科细菌:杆菌,多数有鞭毛,菌毛2.发酵葡萄糖,兼性厌氧3.氧化酶阴性4.仍原硝酸盐为亚硝酸盐5.触酶(+)肠道挑选性培育基:麦康凯琼脂,伊红美蓝琼脂,SS琼脂等肠杆菌科抗原:O抗原(菌体抗原),K 抗原(荚膜抗原),H抗原(鞭毛抗原)等肠杆菌科鉴定依据: 1.革兰染色2. 触媒,氧化酶,硝酸盐仍原3.KIA ,MIU ,IMViC , 其他生化反应4.血清玻片凝集(鉴定到种,型或血清型)IMViC 试验:吲哚(I ),甲基红(M),VP(V),枸橼酸盐利用(C)四种试验,常用于鉴定肠道杆菌;二,埃希菌属形状染色: 1. 短杆菌2. 革兰染色阴性3. 有鞭毛4. 有菌毛培育特性:符合肠杆菌特点EMB——紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落S-S ——桃红色乳糖发酵菌落生化反应:IMViC(++-- )大肠杆菌KIA:A A +-血清型表示法:O:K:HETEC肠毒素:耐热肠毒素(ST)o不耐热肠毒素(L T),65 C30min 被破坏引起腹泻的大肠埃希菌:肠产毒性大肠埃希菌ETEC肠致病性大肠埃希菌EPEC肠侵袭性大肠埃希菌EIEC肠出血性大肠埃希菌EHEC肠凝结性大肠埃希菌EAECEIEC 毒力测定试验:豚鼠眼结膜试验卫生学标准:每ml 饮水中细菌总数≤100 个,每1000ml 水中大肠杆菌菌群数≤ 3 个,每100 ml 瓶装汽水,果汁中,大肠杆菌菌群数≤三,沙门菌属5 个;对人类有致病性:肠热症;食物中毒;败血症-形状染色:G杆菌;周身鞭毛培育和生化反应:不分解乳糖分解葡萄糖;分解蛋白质,产生H2S伤寒沙门菌菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落伤寒沙门菌菌落特点(SS):无色透亮或半透亮,中心黑色菌落伤寒沙门菌KIA:K A-+标本实行:第1-2W,血,骨髓;第2-3W,粪便,尿;全程取骨髓肥达反应: 用已知伤寒沙门菌O,H 和甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌H 抗原与病人血清做定量凝集试验,用以帮助诊断肠热症;TO≥1:80,TH≥1:160;PA,PB 均≥1:80 才有意义;动态观看:双份血清抗体四倍上升有诊断意义四,志贺菌属形状染色:符合肠杆菌特点,有菌毛,无鞭毛,无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区分点培育特性:肠道鉴别培育基上的无色透亮,乳糖不发酵菌落抗原分类:依据O抗原分4 群,40 余型,我国常见 B 群A 群——痢疾志贺菌群——福氏志贺菌BC群——鲍氏志贺菌群——宋氏志贺菌D培育和生化反应:不分解乳糖分解葡萄糖菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落KIA:K A--MIU:---外毒素: A 群(Ⅰ,Ⅱ型)产生志贺毒素(ST)有3 种生物活性1. 肠毒素:类似ETEC毒素,霍乱肠毒素作用——水样泻2. 细胞毒性:对人肝细胞,肠黏膜细胞有毒性,引起变性坏死3. 神经毒性:损耗动物神经系统(麻痹,死亡)快速诊断:荧光菌球试验;协同凝集试验六,变形杆菌属形状染色:有周鞭毛培育特性:扩散生长,有迁徙生长现象;在培育基中(含5%琼脂)加入%石炭酸就形成单个菌落;肠道挑选性培育基上形成无色透亮菌落变形杆菌KIA:K A+ +MIU:+ +/- +八,耶尔森菌属历史:三次世界性大流行,是我国重点监控的自然疫源性传染病;—形状染色:G 球杆菌,两极浓染培育特性:一般培育基,生长缓慢,24-48h ,R 型“破草帽”状菌落菌落特点(EMB,MA C):无色透亮菌落甲类烈性传染病:鼠疫(黑死病)常见临床类型:腺鼠疫,败血型鼠疫,肺鼠疫标本采集:临床标本(淋巴结穿刺液,血液或痰标本);非临床标本(尸检取病变组织,鼠标本应严格消毒体表,再进行采集)其次节弧菌科一群菌体短小,弯曲成弧形或直杆状的革兰阴性细菌;具有一端单一鞭毛,运动快速;弧菌科细菌广泛分布于自然界,以水中最为多见弧菌属(一)霍乱弧菌霍乱弧菌的疫源地:印度恒河三角洲(O1群,古典生物型);印尼苏拉威西岛(O1群,埃托生物型);孟加拉湾(O139 群)已发生七次世界性的霍乱大流行:均由霍乱弧菌的O1群引起,前六次为霍乱弧菌的古典生物型,第七次为埃尔托生物型形状:新从患者标本中分别出的细菌革兰染色阴性,弧形或逗点状;在患者“米泔水”样便中,可呈头尾相接的“鱼群”样排列;菌体一端有鞭毛,悬滴观看时呈“穿梭”样运动培育特性:养分要求不高,故用Ph8.4-9.2 碱性培育基;分别(挑选)能在无盐培育基中生长(区分其它弧菌);在的碱性胨水中经35℃4~6h 增菌后可在液体表面大量繁衍形成菌膜抗击力:较弱;水源性传播,水性爆发;怕酸,正常胃酸4min霍乱肠毒素(C T):最猛烈的致泻毒素吐泻期:猛烈吐泻,米泔样免疫力:病人愈后可获得坚固免疫O1 群霍乱弧菌的O 抗原:由A,B,C 三种抗缘由子组成;通过不同组合可形成三个型别:由AB组成小川型,AC组成稻叶型,ABC组成彦岛型常用的挑选性培育基:1. 硫代硫酸盐- 枸橼酸盐- 胆盐- 蔗糖(TCBS) 琼脂平板:霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈黄色2.4 号琼脂,庆大霉素琼脂:生长并将培育基中的碲离子仍原成元素碲, 形成灰褐色菌落中心3. 能在无盐培育基上生长古典生物型和埃尔托生物型的区分试验:羊红细胞溶血;鸡红细胞凝集;V-P 试验;多粘菌素 B 敏锐试验;Ⅳ组噬菌体裂解;Ⅴ组噬菌体裂解标本采集和运输:在发病早期,尽量在使用抗菌药物之前采集标本;取患者“米泔水”样便,亦可实行呕吐物或尸体肠内容物,或实行肛门拭子;标本应防止接触消毒液;实行的标本最好就地接种碱性胨水增菌;不能准时接种者可用棉签挑取标本或将肛门拭子直接插入卡-布运输培育基中动力和制动试验:直接取“米泔水”样便,制成悬滴( 或压滴) 标本后,在暗视野或相差显微镜下直接观看呈穿梭样运动的细菌;同法重新制备另一标本涂片,在悬液中加入 1 滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清( 效价≥1:64) ,可见最初呈穿梭状运动的细菌停止运动并发生凝集,就为制动试验阳性快速诊断:将标本接种于含有霍乱弧菌荧光抗体的碱性蛋白胨水中,经37℃4~6h,如有霍乱弧菌,在荧光显微镜下可见发荧光的菌球;本法适用于做大量标本的初筛SPA协同凝集试验:以霍乱弧菌IgG 型抗体与SPA阳性葡萄球菌结合作为试剂,与米泔水样便或增菌液作玻片凝集,立刻显现明显凝集者(+++)为阳性粘丝试验:将%去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成深厚菌液,1min 内悬液由混变清,并变得粘稠,以接种环挑取时可以拉出丝来(二)副溶血性弧菌具有嗜盐性形状:革兰阴性杆菌,有鞭毛(极单毛)培育特性:在无盐培育基上不能生长,最适合生长的氯化钠浓度为 3.5%,超过8%不能生长TCBS琼脂平板: 蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落第三节非发酵革兰阴性杆菌非发酵革兰阴性杆菌:一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧,无芽胞的革兰阴性杆菌一,假单胞菌属铜绿假单胞菌所致疾病:条件致病菌;医院感染的重要病原菌;大面积烧伤创面感染的重要病原菌生物学特性:革兰阴性,长短不一,单鞭毛,氧化酶阳性生长温度:25~42℃分别培育与鉴定: 1. 血平板上毛玻璃样,金属光泽,生姜味2. 可产生多种色素:荧光素与绿脓素血琼脂平板:透亮溶血环O/F 试验:氧化型第四节其他革兰阴性苛氧菌一,嗜血杆菌属流感嗜血杆菌所致疾病:原发化脓性感染及继发性感染,包括脑膜炎,鼻咽炎,关节炎,心包炎,鼻窦炎及中耳炎等生物学特性:革兰阴性短小球杆菌分别培育:需要X,V 因子;养分要求高,血琼脂平板培育基,巧克力琼脂培育基菌落特点:巧克力琼脂培育基, 小,无色透亮菌落卫星现象:当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培育时,靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大,远离葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较小四,布鲁菌属传染源:病兽,以羊,牛,猪多见传播途径:病兽的组织,尿,乳液等通过人体的皮肤,呼吸道,消化道进入人体易感人群:发病以青壮年为主,从事兽医,皮毛加工,屠宰的工人发病率较高临床表现:长期发热,多汗;关节疼痛及全身乏力,疼痛微生物特性:革兰阴性短小球杆菌培育特性:需氧菌,养分要求较高;生长缓慢(5~7 天)第十二章革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌革兰阳性无芽胞杆菌白喉棒状杆菌+形状与染色: G瘦长微弯的杆菌;一端或两端膨大呈棒状;常排列呈V,L,X 等文字形;异染颗粒——形状上的鉴别特点培育特性:养分要求高,吕氏血清斜面或鸡蛋斜面亚碲酸钾BAP:挑选鉴别培育基,黑色菌落——鉴别依据毒力试验: 1. 体外法:琼脂平板毒力试验(Elek 平板毒力测定);SPA协同凝集试验;对流电泳2. 体内法:用豚鼠作毒素革兰阳性需氧芽胞杆菌属- 抗毒素中和试验其次节炭疽芽胞杆菌临床意义:炭疽是人兽共患的急性传染病,皮肤炭疽,肠炭疽,肺炭疽等炭疽毒素:爱护性抗原,致死因子,水肿因子传染源:患病食草动物及其制品或被污染物传播途径: 1. 接触——皮肤炭疽食用——肠炭疽2.吸入——肺炭疽3.+形状染色: 致病菌中最大的G杆菌;两端平切,竹节状;有毒株可有明显荚膜芽胞: 1. 椭圆形,小于菌体,位于菌体中心2. 多在有氧条件下形成,25~30℃,在培育基中,土壤内,动物尸体解剖后暴露在空气中,都易形成芽胞3. 在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞,尸体严禁解剖培育特性: 1. 一般培育基上卷发状菌落:12~15h 不溶血,18~24h 稍微溶血3. 肉汤:絮状沉淀生长4. 明胶:37℃18~24h 表面液化成漏斗状,由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状;5.NaHC O3BAP:有毒株-- 黏液型菌落,挑取时呈粘丝状( 鉴别要点)无毒株—粗糙型菌落抗原构造: 1. 菌体多糖抗原:与毒力无关,耐热,耐腐败,长时间煮沸仍能与特异性抗体发生环状沉淀反应(Ascoli 热沉淀反应),特异性不高,可作追溯性诊断2. 荚膜多肽抗原:荚膜肿胀试验,对本菌鉴定有意义标本的采集与处理: 死于败血症的动物,严禁宰杀和解剖,可消毒皮肤后割取耳朵,舌尖采集少量血液串珠试验: 炭疽芽胞杆菌在每毫升含有0.05-0.5U 青霉素的培育基中,可发生形状变异,形成大而匀称的圆球状并相连如串珠状第十三章分枝杆菌属分枝杆菌是一类瘦长略带弯曲的杆菌,含有分枝菌酸,有分枝生长的趋势而得名;具有抗酸性,故又称抗酸杆菌;结核分枝杆菌所致疾病:通过呼吸道,消化道和损耗的皮肤等多途径感染机体,引起多种脏器的结核病,其中以肺结核为多见致病物质:荚膜,脂质和蛋白质等菌体成分免疫性:有菌免疫或称传染性免疫,细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用微生物特性: 1. 分枝状,略带弯曲的抗酸杆菌,抗酸性染色法染色后结核分枝杆菌呈红色,背景呈蓝色2. 专性需氧,养分要求较高,最适生长温度为35℃,生长缓慢, 2 ~5w 才显现肉眼可见的如菜花样粗糙型菌落;结核菌素试验:纯蛋白衍生物(PPD),注入皮内后如受试者已感染结核,就结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合,形成迟发型超敏反应性炎症机体抗结核免疫特点:传染,免疫,超敏反应共存第十四章厌氧性细菌破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,肉毒梭菌的形状特点,培育特性;厌氧性细菌的检验鉴定要点和报告方式;第十五章螺旋体,支原体,衣原体,立克次体第一节螺旋体螺旋体:是一种瘦长,松软,螺旋状,运动活泼的原核细胞型微生物钩端螺旋体所致疾病:钩端螺旋体病传染源与储存宿主: 自然疫源性疾病,鼠类和猪为主要储存宿主传播途径:间接接触传播(接触被含菌尿液污染的水源),血液传播,垂直传播生物学特性: 1. 螺旋一端或两端呈钩状2. 有两根周浆鞭毛,运动活泼-3. G,但不易着色,镀银染色成棕褐色梅毒螺旋体所致疾病:梅毒1. 先天性:母体通过胎盘传给胎儿2. 获得性:性传播获得性梅毒临床分期:分为三期1. Ⅰ期(初期)梅毒:感染后 3 周左右局部显现无痛性硬下疳,感染性极强;2. Ⅱ期梅毒:发生于硬下疳显现后2~8 周,全身皮肤,粘膜常有梅毒疹,全身淋巴结肿大3. Ⅲ期(晚期)梅毒:发生感染 2 年后,病变可波及全身组织和器官;基本损害为慢性肉芽肿;病损内螺旋体少但破坏性大-生物学特性:G,但不易着色,镀银染色呈棕褐色;对青霉素,四环素,红霉素等抗生素敏感微生物学检查:标本:Ⅰ,Ⅱ期梅毒取下疳渗出液,梅毒疹渗液或淋巴结穿刺液;先天性梅毒取脐血其次节支原体支原体:是一类没有细胞壁,形状上呈多样性,可通过细菌滤器,能在无生命培育基中生长-的最小的原核细胞型微生物;因其生长后能形成分枝长丝,故命名为支原体;G,但不易着色,Giemsa 染色呈淡紫色;油煎蛋样的菌落所致疾病:支原体肺炎冷凝集试验: 肺炎支原体感染后,患者血清中显现冷凝集素,能在0-4 ℃条件下凝集人红细胞(37℃时却无此效应);此凝集试验为非特异性的,是肺炎支原体感染的帮助诊断试验衣原体:是一类专性活细胞内寄生,具有特殊发育周期,且能通过细菌滤器的,介于立克次体与病毒之间的原核细胞型微生物第一胜利分别鉴定出沙眼衣原体:我国学者汤飞凡于1956 年能引起人类疾病的衣原体:主要有沙眼衣原体和肺炎衣原体-立克次体:是一类专性活细胞内寄生的G原核细胞型微生物,是引起斑疹伤寒,恙虫Q病,热等传染病的病原体;与节肢动物关系亲密,大多是人畜共患病的病原体反应(外斐反应):大部分立克次体与一般变形杆菌某些菌株(X19,X k,X2)的Weil-Felix菌体抗原有共同的抗原成分,故可用这些变形杆菌的菌体抗原与不同稀释度的患者血清做凝集反应,诊断立克次体病;第十六章常见真菌1.真菌的概念,生物学性状;真菌感染性疾病的微生物学检查原就;皮肤癣真菌,白假丝酵母菌,新生隐球菌的形状特点及微生物学检验;2.真菌感染性疾病的微生物学检查原就;皮肤癣真菌,白假丝酵母菌,新生隐球菌的形状特征及微生物学检验;第十七章常见病毒第一节呼吸道病毒1.正粘病毒(流感病毒)的结构,型别,抗原变异与流行的关系;微生物学检验;2.正粘病毒(流感病毒)的型别,抗原变异与流行的关系;其次节肝炎病毒1. HAV ,HBV ,HCV ,HDV ,HEV 五型肝炎病毒的生物学特性,微生物学检验;2.乙肝五项的结果分析及临床意义第三节逆转录病毒HIV 的微生物学检验;1. HIV 的生物学特性,致病性,免疫性与防治原就;2.HIV 的生物学特性;第四节其他病毒1.流行性乙型脑炎病毒,出血热病毒,狂犬病毒,疱疹病毒,人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性;以上病毒的微生物学检验;2.流行性乙型脑炎病毒,出血热病毒,狂犬病毒,疱疹病毒,人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性;第五节肠道病毒1.肠道病毒的共性,种类;2.脊髓灰质炎病毒的生物学特性,致病性与微生物学检验;第十八章临床常见标本的细菌学检验1.临床常见标本采集及运输,检验程序,报告方式,血液标本的细菌学检验,痰液标本的细菌学检验,脑脊液标本的细菌学检验;2.粪便标本的细菌学检验,尿液标本的细菌学检验,脓标本的细菌学检验;。
其原理为:由于细菌各自具有不同的酶系统,对糖的分解能力不同,有的能分解某些糖产生酸和气体,有的虽能分解糖产生酸,但不产生气体,有的则不分解糖。
据此可对分解产物进行检测从而鉴别细菌。
具体试验方法有:①糖类发酵试验是鉴定细菌最常用的生化反应,特别是对肠杆菌的鉴定尤为重要;②葡萄糖代谢类型鉴别试验;③七叶苷水解试验;④淀粉水解试验;⑤甲基红试验;⑥V-P试验;⑦β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)。
1.糖(醇、苷)类发酵试验(1)原理:由于各种细菌含有发酵不同糖(醇、苷)类的酶,故分解糖类的能力各不相同,有的能分解多种糖类,有的仅能分解l~2种糖类,还有的不能分解。
细菌分解糖类后的终末产物亦不一致,有的产酸、产气,有的仅产酸,故可利用此特点以鉴别细菌。
(2)培养基:在培养基中加入0.5%~l%的糖类(单糖、双糖或多糖)、醇类(甘露醇、肌醇等)、苷类(水杨苷等)。
培养基可为液体、半固体、固体或微量生化管几种类型。
(3)方法:将分离的纯种细菌,以无菌操作接种到糖(醇、苷)类发酵培养基中,置培养箱中培养数小时至两周后,观察结果。
若用微量发酵管,或要求培养时间较长时,应保持湿度,以免培养基干燥。
(4)结果:接种的细菌,若能分解培养基中的糖(醇、苷)类产酸时,培养基中的指示剂呈酸性反应。
若产气可使液体培养基中倒管内或半固体培养基内出现气泡,固体培养基内有裂隙等现象。
若不分解,培养基中除有细菌生长外,无任何其他变化。
(5)应用:是鉴定细菌最主要和最基本的试验,特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。
2.氧化-发酵试验(0/F试验)(1)原理:细菌在分解葡萄糖的过程中,必须有分子氧参加的,称为氧化型。
氧化型细菌在无氧环境中不能分解葡萄糖。
细菌在分解葡萄糖的过程中,可以进行无氧降解的,称为发酵型。
发酵型细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖。
不分解葡萄糖的细菌称为产碱型。
利用此试验可区分细菌的代谢类型。
(2)培养基HL:Hugh-Leifson培养基。
(3)方法:将待检菌同时穿刺接种两支HL培养基,其中一支培养基滴加无菌的液体石蜡(或其他矿物油),高度不少于lcm.将培养基于35℃培养48h或更长。
(4)结果:两支培养基均无变化为产碱型或不分解糖型;两支培养基均产酸为发酵型;若仅不加石蜡的培养基产酸为氧化型。
(5)应用:主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别,前者均为发酵型,而后者通常为氧化型或产碱型。
也可用于葡萄球菌与微球菌间的鉴别。
3.β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)(1)原理:有的细菌可产生β-半乳糖苷酶,能分解邻-硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG),而生成黄色的邻-硝基酚,在很低浓度下也可检出。
(2)试剂:0.75MONPG溶液:取80mg溶于l5ml蒸馏水中,在加入缓冲液(6.9gNaH2P04溶于45ml蒸馏水中,用30%NaOH调整pH为7.0,再加水至50m1)5ml,置4℃冰箱中保存。
0NPG溶液为无色,如出现黄色,则不应再用。
(3)方法:从克氏双糖铁培养基上取菌,于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液,加入一滴甲苯并充分振摇,使酶释放。
将试管置37℃水浴5min,加入0.25mlONPG试剂,水浴20min~3h观察结果。
(4)结果:菌悬液呈现黄色为阳性反应,一般在20~30min内显色。
(5)应用:迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性,而不发酵乳糖的细菌为阴性。
本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。
4.七叶苷水解试验(1)原理:有的细菌可将七叶苷分解成葡萄糖和七叶素,七叶素与培养基中枸橼酸铁的二价铁离于反应,生成黑色的化合物,使培养基呈黑色。
(2)培养基:七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。
(3)方法:将待检菌接种于七叶苷培养基中,培养后观察结果。
(4)结果:培养基变为黑色为阳性,不变色者为阴性。
(5)应用:主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别,前者阳性,后者阴性。
也可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别。
5.甲基红试验(1)原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸可进一步分解,产生甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基的pH降至4.5以下,当加入甲基红试剂则呈红色,为甲基红试验阳性。
若细菌分解葡萄糖产酸量少,或产生的酸进一步转化为其他物质(如醇、酮、醚、气体和水等),则培养基的酸度仍在pH6.2以上,故加入甲基红指示剂呈黄色,是为阴性。
(2)培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基。
(3)方法:将待检菌接种于上述培养基中,培养2~4d,于培养基内加入甲基红试剂,立即观察结果。
(4)结果:呈现红色为阳性;橘红色为弱阳性;黄色为阴性。
(5)应用:主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌,前者为阳性,后者为阴性。
此外肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性,而肠杆菌属、哈夫尼亚菌属则为阴性。
6.V-P试验(1)原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧产生乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在碱性环境中,被空气中的氧氧化为二乙酰,进而与培养基内蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用,生成红色化合物,则为V-P试验阳性。
若培养基中胍基含量较少,则可加入少量含胍基化合物,如肌酸或肌酐等。
试验时加入a-萘酚可加速此反应。
(2)培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基。
(3)方法:将待检菌接种于上述培养基中,于35℃培养48h后加入甲液(6%α-萘酚酒精溶液)和乙液(40%KOH 溶液),振摇。
(4)结果:在数分钟内出现红色为阳性;如无红色出现且于35℃4h后仍如故者即为阴性。
(5)应用:本试验常与甲基红试验一起使用,因为前者阳性的细菌,后者通常为阴性。