分子生物学实验中常用的抗生素配置及工作浓度(word文档良心出品)

①以水为溶剂的抗生素贮存液应用0.22卩山滤器过滤除菌；
②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌；
③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。

注意：镁离子是四环素的拮抗剂。

对于以四环素为筛选抗性的细菌，应使用不含镁离子的培养基，如LB 培养基。

下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度
氨苄青霉素：贮液浓度50 mg/ml溶于水-20 C保存工作浓度20卩g/ml （严紧型质粒）60卩g/ml （松弛型质粒）
羧苄青霉素：贮液浓度50 mg/ml溶于水-20 C保存工作浓度20卩g/ml （严紧型质粒）60卩g/ml （松弛型质粒）
氯霉素：贮液浓度34 mg/ml溶于乙醇-20 C保存工作浓度25
卩g/ml （严紧型质粒）170卩g/ml （松弛型质粒）
卡那霉素：贮液浓度10 mg/ml溶于水-20 C保存工作浓度10
卩g/ml （严紧型质粒）50卩g/ml （松弛型质粒）
链霉素：贮液浓度50 mg/ml溶于水-20 C保存工作浓度10
卩g/ml （严紧型质粒）50卩g/ml （松弛型质粒）
四环素：贮液浓度5 mg/ml溶于乙醇-20 C保存工作浓度10
卩g/ml （严紧型质粒）50卩g/ml （松弛型质粒）质粒类型：。

抗生素
（一）溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。

以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。

乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。

1/1。

常用抗生素‎：备注：（摘自《分子克隆》第三版附录2 ）①以水为溶剂‎的抗生素贮‎存液应使用‎0.22 μm滤器过‎滤除菌；②用乙醇溶解‎的抗生素溶‎液无须过滤‎除菌；③所有抗生素‎贮液都应放‎于不透光的‎容器中保存‎。

氨苄青霉素‎（ampic‎i llin‎）（100mg‎/ml）溶解1g氨‎苄青霉素钠‎盐于足量的‎水(最好是高压‎后的灭菌水‎)中，最后定容至‎10ml。

分装成小份‎于-20℃贮存。

常以25u‎g/ml～50ug/ml的终浓‎度添加于生‎长培养基。

羧苄青霉素‎（carbe‎n icil‎l in）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青‎霉素二钠盐‎于足量的水‎中，最后定容至‎10ml。

分装成小份‎于-20℃贮存。

常以25u‎g/ml～50ug/ml的终浓‎度添加于生‎长培养基。

甲氧西林（methi‎c illi‎n）（100mg‎/ml）溶解1g甲‎氧西林钠于‎足量的水中‎，最后定容至‎10ml。

分装成小份‎于-20℃贮存。

常以37.5ug/ml终浓度‎与100u‎g/ml氨苄青‎霉素一起添‎加于生长培‎养基。

卡那霉素（kanam‎y cin）（10mg/ml）溶解100‎m g卡那霉‎素于足量的‎水中，最后定容至‎10ml。

分装成小份‎于-20℃贮存。

常以10u‎g/ml～50ug/ml的终浓‎度添加于生‎长培养基。

氯霉素（chlor‎a mphe‎n icol‎）（25mg/ml）溶解250‎m g氯霉素‎足量的无水‎乙醇中，最后定容至‎10ml。

分装成小份‎于-20℃贮存。

常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓‎度添加于生‎长培养基。

链霉素（strep‎t omyc‎i n）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素‎硫酸盐于足‎量的无水乙‎醇中，最后定容至‎10ml。

分装成小份‎于-20℃贮存。

常以10u‎g/ml～50ug/ml的终浓‎度添加于生‎长培养基。

萘啶酮酸（nalid‎i xic acid）（5mg/ml）溶解50m‎g萘啶酮酸‎钠盐于足量‎的水中，最后定容至‎10ml。

溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml 50ug/ml -20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml 50ug/ml -20℃Strp（链霉素）水10mg/ml 50ug/ml -20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml -20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml -20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml 50ug/ml -20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml 50ug/ml -20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。

以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生
素容易均应保存于不透光的容器中。

乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤
器过滤除菌；
使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH 调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。

微⽣物实验常⽤抗⽣素浓度配制微⽣物实验常⽤抗⽣素浓度配制----------四川⼤学⽣命学院-微⽣物代谢与⼯程重点实验室1、氨苄青霉素（[Amp]Ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。

分装成⼩份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。

2、羧苄青霉素（[Car]Carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素⼆钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。

分装成⼩份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。

3、甲氧西林（[Met]Methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。

分装成⼩份于-20℃贮存。

常以37.5ug/ml 终浓度与100ug/ml氨苄青霉素⼀起添加于⽣长培养基。

4、卡那霉素（[Kan]Kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。

分装成⼩份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。

5、氯霉素（[Cm]Chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素⾜量的⽆⽔⼄醇中，最后定容⾄10ml。

分装成⼩份于-20℃贮存。

常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。

6、链霉素（[Str]Streptomycin）（50mg/ml）溶解500mg链霉素硫酸盐于⾜量的⽆⽔⼄醇中，最后定容⾄10ml。

分装成⼩份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。

7、萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。

分装成⼩份于-20℃贮存。

常以15ug/ml 的终浓度添加于⽣长培养基。

8、四环素（[Tet]Tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于⾜量的⽔中，或者将⽆碱的四环素溶于⽆⽔⼄醇，定容⾄10ml。

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml)调整pH至7。

0,再补足水至1L。

注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L.2、SOB培养基将下列组分溶解在0。

9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0。

5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。

分成100ml的小份，高压灭菌。

培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。

3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌）。

4、TB培养基将下列组分溶解在0。

9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0。

72mol/LK2HPO4的溶液(2。

31g的KH2PO4和12。

54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml.高压灭菌或用0。

22um的滤膜过滤除菌）.5、2×YT培养基将下列组分溶解在0。

9L水中：蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH（~1ml）调整pH至7.0,再补足水至1L。

注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后,高压灭菌.建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1。

6g色氨酸,因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。

为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。

二、常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项一、酶与载体的分装酶类与载体：T载体(50 ng/μl)用灭菌水稀释4倍（12.5 ng/μl）后分装成10 μl 或20 μl；连接酶（solutionΙ）按5 μl分装；dNTP（10 mM）分装成50 μl；无菌水分装成1 ml；注意：（1）所有分装都必须用已灭菌的管。

（2）所有工具酶和载体的使用过程均在冰浴中进行。

（3）工具酶、载体以及试剂盒等实验室共用物品，用完后必须及时放回原处，以免耽误他人使用。

（4）当你发现你使用的是最后一管（盒）公用物品时，请马上告知负责人购买，以免耽误使用。

（5）感受态，氨苄青霉素和IPTG由研究生轮流负责制备。

每人负责六个月。

其他试剂则由第一位使用新包装的同学分装。

由于分子实验工具酶比较容易失活，必须在冰上进行分装。

二、常见抗生素及IPTG的配置以氨苄青霉素为例：1．准备足够量的1.5 ml的EP管、两个100 ml的离心管、0.22 μm水系滤器、注射器、蒸馏水，以上用品均要进行高压灭菌。

2. 洁净工作台紫外灭菌，然后进行以下操作。

3．称取2 g的氨苄青霉素粉末于离心管中，加入灭菌水至总体积为20 ml，轻摇离心管，至氨苄青霉素粉末完全溶解，以免过滤时堵塞滤膜。

4．用注射器吸取配制好的溶液，然后把滤器安在注射器上，缓缓推动注射器活塞，把溶液经滤膜推至100 ml的离心管中。

注意：动作要缓和，使滤出液出口正对着离心管，还要防止染菌。

5．把100 ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到1.5 ml的EP管中，每管0.5 ml。

在EP管上做好标记，包括名称、浓度、日期等。

6．把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存。

注意：当你发现你使用的是最后一管抗生素时，请马上告知有关人员及时配制，以免耽误使用。

表1.常见抗生素的储存浓度及工作浓度名称储存浓度工作浓度氨苄青霉素（ampicillin）100 mg/ml 50 μg/ml～100 μg/ml卡那霉素（kanamycin）10 mg/ml 10 μg/ml～50 μg/ml氯霉素（chloramphenicol）25 mg/ml 12.5 μg/ml～25 μg/ml链霉素（streptomycin）50 mg/ml 10 μg/ml～50 μg/ml四环素（tetracyyline）10 mg/ml10 μg/ml～50 μg/mlIPTG 1 M 0.05-0.6 mM五、基因扩增1．引物与合成：设计引物序列，发至生工公司进行合成（jinan@）。

常用培养基和抗生素的配制方法1.LB培养基：材料：10g蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠、水至1000mL。

方法：将蛋白胨、酵母提取物和氯化钠加入水中，调整pH值至7.0，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。

2.M9盐基培养基：材料：64gNa2HPO4•7H2O、15gKH2PO4、2.5gNaCl、5gNH4Cl、水至1000mL。

方法：将Na2HPO4•7H2O、KH2PO4、NaCl和NH4Cl加入水中，调整pH值至7.0，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。

3.TSB培养基：材料：17g磷酸二氢钾、20g蛋白胨、5g氯化钠、水至1000mL。

方法：将磷酸二氢钾、蛋白胨和氯化钠加入水中，调整pH值至7.3，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。

4.青霉素琼脂培养基：材料：5g酵母提取物、1g酪蛋白、10gD-葡萄糖、2gK2HPO4、2gKH2PO4、20g琼脂、水至1000mL。

方法：将酵母提取物、酪蛋白、D-葡萄糖、K2HPO4和KH2PO4加入水中，调整pH值至7.0，加入琼脂，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。

抗生素的配制方法：1.青霉素盐酸盐溶液：材料：10g青霉素盐酸盐、水至100mL。

方法：将青霉素盐酸盐加入水中，搅拌至溶解。

2.氨苄青霉素钠盐溶液：材料：10g氨苄青霉素钠盐、水至100mL。

方法：将氨苄青霉素钠盐加入水中，搅拌至溶解。

3.克拉霉素溶液：材料：10g克拉霉素、水至100mL。

方法：将克拉霉素加入水中，搅拌至溶解。

4.挠敏霉素溶液：材料：10g挠敏霉素、水至100mL。

方法：将挠敏霉素加入水中，搅拌至溶解。

5.氯霉素溶液：材料：10g氯霉素、水至100mL。

方法：将氯霉素加入水中，搅拌至溶解。

以上是常用培养基和抗生素的基本配制方法，具体使用时还需要根据实验的需求和文献资料进行相应的优化和调整。

在配制过程中，需要注意配制环境的无菌操作、避免污染和准确称量材料的重量等。

【科研】常见抗生素的配方氨苄青霉素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）缩写：Amp溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）缩写：Cab溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

甲氧西林甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以37.5ug/ml 终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）缩写：Kan溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml ～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

氯霉素氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）缩写：Cm溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

生物实验高清视频教程链霉素链霉素（streptomycin）（50mg/ml）缩写：Sm溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

萘啶酮酸萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

四环素四环素（tetracyyline）（10mg/ml）缩写：Tet溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。

抗生素溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。

以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。

乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；
使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH 调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7。

0，再补足水至1L。

注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

2、SOB培养基将下列组分溶解在0。

9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。

分成100ml的小份,高压灭菌。

培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。

3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌）。

4、TB培养基将下列组分溶解在0。

9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0。

72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。

5、2×YT培养基将下列组分溶解在0。

9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7。

0，再补足水至1L。

注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。

建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1。

6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。

为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉.二、常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml.分装成小份于—20℃贮存。

抗生素之蔡仲巾
千创作
溶剂存储浓度一般使用浓度保管条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。

以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保管于不透光的容器中。

乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；
使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。

经常使用抗生素：宇文皓月备注：（摘自《分子克隆》第三版附录2 ）①以水为溶剂的抗生素贮存液应使用0.22 μm滤器过滤除菌；②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌；③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保管。

氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水(最好是高压后的灭菌水)中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

LB培养基中抗生素的贮液配置和工作液浓度
①以水为溶剂的抗生素贮存液应用0.22 μm滤器过滤除菌；
②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌；
③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。

注意：镁离子是四环素的拮抗剂。

对于以四环素为筛选抗性的细菌，应使用不含镁离子的培养基，如LB培养基。

下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度
氨苄青霉素：贮液浓度50 mg/ml 溶于水-20℃保存工作浓度20 μg/ml （严紧型质粒）60 μg/ml （松弛型质粒）
羧苄青霉素：贮液浓度50 mg/ml 溶于水-20℃保存工作浓度20 μg/ml （严紧型质粒）60 μg/ml （松弛型质粒）
氯霉素：贮液浓度34 mg/ml 溶于乙醇-20℃保存工作浓度25 μg/ml （严紧型质粒）170 μg/ml （松弛型质粒）
卡那霉素：贮液浓度10 mg/ml 溶于水-20℃保存工作浓度10 μg/ml （严紧型质粒）50 μg/ml （松弛型质粒）
链霉素：贮液浓度50 mg/ml 溶于水-20℃保存工作浓度10 μg/ml （严紧型质粒）50 μg/ml （松弛型质粒）
四环素：贮液浓度 5 mg/ml 溶于乙醇-20℃保存工作浓度10 μg/ml （严紧型质粒）50 μg/ml （松弛型质粒）
质粒类型：。

抗生素溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。

以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。

乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；
使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH 调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。

常见实验用溶液的配制方法默认分类 2008-07-04 14:10:54 阅读4 评论0 字号：大中小一、常用溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）：溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份，贮存于-20℃。

1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份，贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA)：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml，然后分装成小份，贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA：配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。

1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。

分⼦⽣物学之常⽤试剂配制⼆三抗⽣素类简介1.抗⽣素溶液的配置⼀般⽤⽆菌⽔或醇类充当溶剂。

2.以⼄醇为溶剂的抗⽣素溶液⽆须除菌处理，⽤⽆菌⽔配的⽤0.45或0.22um⽆菌过滤器过滤除菌（个⼈经验，只要将盛装抗⽣素溶液的容器灭菌处理后可不⽤过滤除菌）。

3.所有抗⽣素溶液均应放于不透光的容器保存，也可⽤锡箔纸包裹。

4.镁离⼦是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使⽤不含镁盐的培养基（如LB培养基）。

5.抗⽣素配制出以后4可保存3个⽉，-20可保存⼀年。

6.配制完成后注意分装。

常⽤抗⽣素1.氨苄青霉素（Amp）（100mg/mL）⽆菌⽔中，最后定容⾄10mL，必要时可以⽤0.45或0.22um⽆菌过滤器过滤。

分装成⼩份于-溶解1g氨苄青霉素钠盐于⾜量的⽆菌⽔20可贮存⼀年，4可贮存3个⽉。

常以25ug/mL～50ug/mL的终浓度添加于⽣长培养基。

2.羧苄青霉素（Car）（50mg/mL）溶解0.5g羧苄青霉素⼆钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10mL。

分装成⼩份于-20贮存。

常以25ug/mL～50ug/mL的终浓度添加于⽣长培养基。

3.甲氧西林（Met）（100mg/mL）溶解1g甲氧西林钠于⾜量的⽔中，最后定容⾄10mL。

分装成⼩份于-20贮存。

常以37.5ug/mL终浓度与100ug/mL氨苄青霉素⼀起添加于⽣长培养基。

4.硫酸卡那霉素（kan）（10mg/mL）溶解100mg卡那霉素于⾜量的⽆菌⽔中，最后定容⾄10mL。

分装成⼩份于-20贮存。

常以10ug/mL～50ug/mL的终浓度添加于⽣长培养基。

5.氯霉素（Chl）（25mg/mL）溶解250mg氯霉素⾜量的⽆⽔⼄醇中，最后定容⾄10mL。

分装成⼩份于-20贮存。

常以12.5ug/mL～25ug/mL的终浓度添加于⽣长培养基。

6.链霉素（streptomycin）（50mg/mL）溶解0.5g链霉素硫酸盐于⾜量的⽆⽔⼄醇中，最后定容⾄10mL。

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7。

0，再补足水至1L。

注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

2、SOB培养基将下列组分溶解在0。

9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。

分成100ml的小份,高压灭菌。

培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。

3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌）。

4、TB培养基将下列组分溶解在0。

9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0。

72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。

5、2×YT培养基将下列组分溶解在0。

9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7。

0，再补足水至1L。

注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。

建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1。

6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。

为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉.二、常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml.分装成小份于—20℃贮存。

时间：二O 二一年七月二十九日 时间：二O 二一年七月二十九日
抗生素之老阳三
干创作
溶剂
Kana （卡那霉素） 水 10mg/ml 50ug/ml -20℃ Amp （氨苄霉素） 水 50mg/ml 50ug/ml -20℃ Strp （链霉素） 水 10mg/ml 50ug/ml
-20℃ Hyp （潮霉素） 水 50mg/ml -20℃ Ca （头孢霉素） 水 50mg/ml
-20℃ Cm （氯霉素） 乙醇 34mg/ml 50ug/ml -20℃ Rif （利福平）
二甲基亚砜（DMSO ）
50mg/ml
50ug/ml
-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um 水膜滤器过滤除菌.以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌.以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理,所有抗生素容易均应保管于不透光的容器中.
乙酰丁香酮（AS ）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml 二甲基亚砜（DMSO ）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml ：2ul 的200mM/L 的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG ）的配置：用水配置成50mg/ml,后使用水膜滤器过滤除菌； 使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES 溶液：1mol/L,精确称量2.1320gMES,加入95ml 的ddH2O,使用5M KOH 调节
PH 至5.3后,定容至100ml,超净台内过滤除菌,-20℃冻存.。

细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0。

9L水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH（～1ml)调整pH至7。

0,再补足水至1L。

注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

2、SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2。

5ml用水补足体积到1L。

分成100ml的小份，高压灭菌.培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁.3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌)。

4、TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌.冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液（2。

31g的KH2PO4和12。

54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。

高压灭菌或用0。

22um的滤膜过滤除菌）。

5、2×YT培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7。

0，再补足水至1L。

注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L，上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L.6、YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌.建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1。

6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。

为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。

二、常用抗生素氨苄青霉素(ampicillin)（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml.分装成小份于—20℃贮存.常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。