感冒灵提取过程近红外光谱在线检测技术研究作者：陈国权潘红烨刘雪松张跃飞邵平王龙虎来源：《中国中药杂志》2016年第08期[摘要]中药材提取过程是感冒灵颗粒剂生产过程的首个环节，对药品质量影响显著。
该文在线采集感冒灵中药材提取过程近红外光谱图，以高效液相色谱和差重法为参照方法，采用一阶导数法处理近红外光谱，运用偏最小二乘回归法（PLSR）分别建立提取液中蒙花苷、绿原酸和固含量的定量校正模型。
采用相关系数（r）、交叉验证均方差（RMSECV）、校正集均方差（RMSEC）和验证集均方差（RMSEP）等指标优化建模参数，考察模型性能。
3种质量控制指标的模型相关系数均达到095以上，蒙花苷和绿原酸、固含量的RMSEC和RMSEP分别为0010 4和0009 47，0009 34和0142，0055 5和0008 42，在线分析所建模型，预测值与实际测定值相关系数均大于097，其预测相对偏差（RSEP）分别为814%，817%，986%。
研究结果表明，利用近红外光谱技术可以实现感冒灵中药提取过程多指标的在线检测和实时监控，该技术可用于生产过程中质量控制，缩小中间体批次差异性，保证药品质量稳定性，也为后续的产品质量回溯提供了实时生产数据。
[关键词]近红外光谱；提取过程；在线监测；感冒灵[Abstract] Extraction of the four Chinese herbals is the beginning step of the production process of coldrine granules and influences on drug quality significantly In this paper， the online near infrared spectrum was collected during the extraction process of coldrine and then preprocessed by the first derivative Partial least square regression （PLSR） model was developed for the quantity indicators of linarin， chlorogenic acid and solid content， according to results of both HPLC and weightloss as reference methods The correlation coefficient， root mean square error of crossvalidation （RMSECV）， root mean square error of calibration （RMSEC） and root mean square error of prediction （RMSEP） were used to optimize model parameters and confirm their performance Correlation coefficients of three quality control indicator models reached more than095Values of RMSEC of linarin， chloroenic acid and solid content were 0010 4， 0009 34 and 0055 5， respectively And the values of RMSEP were 0009 47， 0142 and 0008 42， respectively The models， built online analyze data， revealed that the correlation coefficients of predicted values and measured values were greater than 097 and values of RSEP of linarin， chloroenic acid and solid content were 814%， 817% and 986%， respectively The results showed that the NIR method could achieve the online detection and realtime monitoring of multiindexes during the extraction process of coldrine The technology could be used for drug quality control in the process of practical production， reducing the batch differences and ensuring pharmaceutical quality stability In addition， it could provide realtime production data for subsequent product quality backtracking[Key words]nearinfrared spectroscopy； extraction process； online monitoring； coldrine granulesdoi：10.4268/cjcmm20160804近红外光谱技术（nearinfrared spectroscopy）因其无污染、样品无需前处理和快速检测等优点[13]，已经广泛应用于中药原药材质量快速评价[45]、生产过程在线质量控制及成品的有效成分含量快速测定等方面[6]。
感冒灵颗粒[7]是由三叉苦、野菊花、岗梅、金盏银盘等4味中药与对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、咖啡因等化药组成的，中西结合治疗感冒的药品。
在感冒灵颗粒生产过程，中药材的提取[8]是其首个环节，而且提取工艺会直接影响药品的质量与疗效。
在感冒灵大品种技术升级项目实施过程中，为了提高中药生产工艺并建立有效的过程控制方法，本文研究了感冒灵中药提取过程实时监控技术，即采用近红外光谱技术建立感冒灵提取液中固含量、蒙花苷和绿原酸含量的在线检测模型，实现了中药提取装置内溶液3个指标成分含量变化的实时监控。
感冒灵提取过程近红外光谱在线检测技术的应用，不仅有利于对感冒灵提取过程的质量控制，也为药品质量回溯提供了大量的基础数据。
1材料1 000 L多功能中药提取设备（浙江温兄机械阀门有限公司）；Bruker MATRIXF近红外光谱仪（德国布鲁克），配有透射检测器和采样系统；Waters alliance E2695高效液相色谱仪（Waters，USA）；H1650W高速离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）；SG5200 HPT超声波清洗机（上海冠特超声仪器有限公司）。
野菊花、三叉苦、金盏银盘和岗梅药材均由华润三九医药股份有限公司提供，并由浙江大学药学院徐娟华副教授鉴定，分别为菊科植物野菊的干燥头状花序、芸香科植物三叉苦的干燥茎和枝、菊科植物金盏银盘的干燥全草、冬青科植物梅叶冬青的干燥根及茎。
乙腈（色谱纯，默克公司）；甲酸（分析纯，阿拉丁公司）。
蒙花苷对照品（成都曼斯特生物科技有限公司，MUST15101207）、绿原酸对照品（成都曼斯特生物科技有限公司，MUST15041814），纯度995%。
2方法21提取工艺与近红外光谱采集生产过程在线监测系统见图1。
每次取100 kg中药材（三叉苦273 kg、野菊花137 kg、金盏银盘182 kg、岗梅409 kg）于提取罐中，加水煎煮提取2次，每次2 h。
整个提取过程实现升温、保温、煎煮、出药和除渣的全自动控制。
为提高测量精度和准确性，本研究建立了新的近红外在线检测系统，并采用静态光谱采集方法。
采集光谱前，关闭阀门1～3；光谱采集完成后，打开阀门3，开始取样；取样结束后，关闭阀门3，同时开启阀门1和2，使新鲜药液持续经过流通池。
采集参数如下：光谱采集时间间隔10 min，以空气为参比，扫描次数32次，分辨率8 cm-1，扫描范围4 000～12 000 cm-1。
光谱数据的采集、传输和处理通过OPUS软件完成。
22固含量测定感冒灵提取过程的固含量测定采用差重法，取烘干至恒重（连续2次称重差异小于5 mg）的扁形瓶（X0），取约5 mL提取液，精密称定（X1），置干燥箱中105 ℃烘5 h，取出置干燥器中冷却30 min，称重，再置干燥箱中烘1 h，精密称重（X2），质量差异5 mg以上者继续置干燥箱中烘，直至差异小于5 mg。
根据减失质量，计算供试品中固含量（%）。
固含量=（X2-X0）/（X1-X0）×100%23绿原酸与蒙花苷含量测定231 色谱条件色谱柱Waters X Bridge Shield RP18（46 mm×250 mm，5 μm），进样量10 μL，柱温30 ℃，流速10 mL·min-1，检测波长334 nm，流动相05%甲酸（A）乙腈（B），洗脱梯度（0～7 min，13%B；7～27 min，13%～30%B；27～35 min，35%～40%B；后运行15 min）。
232 供试品制备取适量提取液样品溶液于15 mL离心管中，在转速13 000 r·min-1条件下离心10 min，取上清液，即得。
233 对照品制备精密称取2 mg蒙花苷对照品置于20 mL量瓶中，以甲醇溶解定容，备用。
精确称取2 mg绿原酸对照品于20 mL量瓶中，以甲醇溶解定容，备用。
234线性、精密度和重复性考察取蒙花苷储备液，按梯度进行稀释，配成9个不同浓度的工作液，进样分析。
以色谱峰面积（Y）对进样浓度（X）进行线性回归。
线性范围为0～1202 g·L-1，r=0999 5。
取绿原酸储备液，按梯度进行稀释，配成9个不同浓度的工作液，进样分析。
以色谱峰面积（Y）对进样浓度（X）进行线性回归。
线性范围为0～0324 1 g·L-1，r =0999 9。
取批号为15121201的提取终点样品，按232方法处理后，按231液相条件连续进样6次，绿原酸和蒙花苷的峰面积RSD分别为052%，050%，表明仪器精密度良好。
取相同提取液，按照232方法制备6份样品溶液，以231色谱条件，测得6份样品中绿原酸和蒙花苷的峰面积RSD分别为029%，035%，表明该方法重复性良好。
