岛津LC-20AD高效液相色谱仪操作规程

岛津LC-20AD型液相色谱仪操作规程xxx/ZHD14-001一、开机：1. 检查流动相是否足够、在有效期内。

使用前须进行超声脱气15分钟。

脱气后将吸滤头由保护液中换至流动相瓶内。

2. 更换柱温箱内所需的色谱柱，拧紧两端的螺帽，在泵运行过程中检查色谱柱是否有漏液现象。

3. 依次开启输液泵电源、柱温箱、紫外检测器（或荧光检测器）系统、控制器及电脑，最后点击LC-Solution快捷键打开工作站界面。

二、方法：1. 确认系统配置，如紫外/荧光检测器的配置。

2. 登陆LC实时分析后单击数据采集按钮，首先打开A、B泵上的排空阀（open方向旋转180度）。

然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗泵流路3分钟左右。

3. 点击仪器参数视图中“常规”及“高级”按钮设置：测定时间、检测器波长、柱温箱温度、流速以及流动相比例，出现保存设置即保存方法文件，并单击“下载”将设置传送到仪器。

4.系统的启动：点击“开启系统”键（此时泵开始工作，柱温开启）确保窗口状态显示区域显示为“就绪”。

三、进样:1. 观察基线至平衡后，进样前按软件中[零点校正] 按钮校正基线零点准备进样.2. 选择“单次分析/批量分析”，选择数据文件名称及保存路径（注：批处理分析选择“向导”按钮依次按要求进行批处理表的设置）后进行进样分析。

（在样品分析时可以进行暂停和停止操作）3. 完成分析后，清洗色谱柱，若所用水流动相含盐，首先需将水流动相换超纯水清洗20~30分钟；然后用纯甲醇冲洗10分钟即可。

四、关机：清洗完成后，先关闭泵及柱温箱的加热，关闭各组件电源，关闭计算机。

起草人：xxx 审核人：xxx 批准人：xxx。

岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程一、开机前准备1、流动相按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。

无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。

脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。

有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。

将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。

一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B 泵。

注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。

2、色谱柱按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。

色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。

二、开机1、打开Labsolution。

点击自动进样器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。

双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。

标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。

要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。

荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。

2、新建方法文件文件→新建方法文件将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。

设置完成后点击“下载”。

流路排气根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。

以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。

高效液相色谱仪操作规程-岛津岛津LC-20AT高效液相色谱仪页数第1页共5页操作维护规程1 技术参数LC-20A T低压梯度泵梯度方式：低压混合混合溶剂数：4液混合浓度准确度：1%以下SIL-20AC自动进样器：进样量：0.1μL~100μL进样量准确度：1%以下进样量精密度：RSD：0.3%以下（10mL 进样时指定条件下）2 适用范围适用于药物的分离、定性、定量分析3 操作步骤3.1 仪器组成：由DGU-20A5脱气机、LC-20A T低压梯度泵、SIL-20AC自动进样器、CTO-20A 柱温箱、SPD-20A紫外-可见检测器、RF-20A荧光检测器、CBM-20A系统控制器、LC Solution 工作站等组成。

3.2 开机①在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相，标样及样品。

流动相抽滤后超声脱气15分钟，标样和样品0.45um膜过滤。

②接通电源，依次开启A泵、B泵、柱温箱、自动进样器、检测器、系统控制器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。

③泵排空操作：打开LC-20AT泵排空阀（逆时针90度以上），按Purge键，泵开始排空运行。

检查流动相入口Teflon管路没有气泡后，再按Purge键停止排空。

自动进样器排气操作：按Purge键，自动进样器开始排气，系统默认排气时间为25min，且自动进样器排气过程中可同时进行其他操作。

（除进样外）压力调零：按LC-20ATvp泵Func键选择CONTROL 项，按FUNC键直至屏幕显示 ***ml ZERO ADJ项，按Enter键，再按CE键，即完成调零。

然后关紧排空阀（顺时针旋紧）。

岛津LC-20AT高效液相色谱仪页数第2页共5页操作维护规程④再双击Operation∈Analysis 1~4进入实时分析窗口：（根据不同的检测器选择）在开机画面中，User ID选中Admin，不需输入Password，点击OK（可听到峰鸣一声）＊在下面操作中A∈B表示在A菜单下选择B，以此类推。

岛津LC-20AD型高效液相色谱仪操作规程1、检查流动相是否足够、在有效期内。

使用前须进行超声脱气5～10分钟。

脱气后将吸滤头由保护液中换至流动相瓶内。

更换柱温箱内所需的色谱柱，拧紧两端的螺帽，在泵运行过程中检查色谱柱是否有漏液现象。

2、依次开启电脑、柱温箱（40℃）、输液泵电源，紫外检测器在平衡系统大约30min后开启，这样做是为了延长检测器的氘灯寿命。

3、在首先进行的系统平衡时，起始运行时的流速应从低到高进行调节，主要是为保护色谱柱考虑。

（一般起始流速设定为0.5ml/min即可，待基线平稳后调整到检测所要求的流速，目前我们所测样品的要求流速均为1.0ml/min）。

4、在输液泵操作面板上按“func”键，输入流速值“0.5”，按“enter”键。

设定好流速后按“Pump”键，启动输液泵。

如系统中有气泡存在应进行排气（泵压过低或不稳定）。

按“Pump”键停泵，将排气阀旋转90°至水平位置，按面板上的“purge”键，一般2～3分钟即可排除气泡。

按“purge”键停止，将排气阀旋回“close”，按“Pump”键，重新启动输液泵。

5、打开电脑桌面上“N2000在线工作站”，选择“通道2”。

点击“方法”，选择“校正曲线”，单击右上方所需的峰名，界面上出现校正曲线图形，说明此方法被采用。

6、泵运行大约30min左右，启动紫外检测器的电源。

等检测器自检通过后就可进行系统参数的设定并平衡系统。

（当检测器显示屏显示波长值时，如“λ318nm”时，表示自检通过，检测器正常）。

7、点击在线工作站的“数据”、“开始基线”，查看基线的平衡情况。

8、基线平衡过程中，可查看电压值，按检测器操作面板上的“zero”键或点击工作站界面上的“零点校正”，修正检测电压值接近于零。

（进样以后禁止此操作）。

基线稳定后，将流速设定为检测值，更改参数过程中无需停泵。

（检测流速为1.0ml/min）。

9、在系统平衡过程中，可进行进样针的清洗、样品的称量、稀释溶解和过滤等准备工作。

岛津LC-20AD型液相色谱仪操作规程1．目的规范岛津LC-20AD型高效液相色谱仪的使用。

2．范围适用于岛津LC-20AD型高效液相色谱仪的使用。

3．职责质检员对本规程的实施负责。

4．规程4.1 系统组成：本系统由2个LC-20AD溶剂输送泵（分主/A泵和副/B泵）、SIL-20A自动进样阀、SPD-20A紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站和IBM台式电脑等组成。

4.2 准备4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。

4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。

4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。

4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

4.3 开机4.3.1 接通电源，依次开启不间断电源、B泵、自动进样器、检测器、柱温箱、A泵4.3.2 待泵和检测器自检结束后，打开打开色谱工作站，点击按钮“1”，输入用户名:ADMIN。

4.3.3 当SPD-20A发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，LC窗口打开。

4.4 参数设定4.4.1设置新的分析参数时，请从通过键盘在LC窗口的“Instrument Parameters View”中输入参数（即A、B泵的流速，波长，柱温；柱在线时流速一般不超过1ml/min）4.4.2 选择File >Save Method File As，输入方法名称后保存。

4.4.3 点击“Download”键，将保存好的方法下载4.5 更换流动相并排气泡4.5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；4.5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀360°4.5.3 按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，1min再次按A/B泵的[purge]键4.5.4 顺时针转动A/B泵的排液阀,关闭排液阀4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽4.6 平衡系统4.6.1更换流动相并排气泡后，在工作站中输入实验信息并设定各项方法参数4.6.2 等度洗脱方式4.6.2.1 点击“Instrument on/off ”按钮，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。

岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程一．系统配置系统组成：本系统由DGU-20A3 脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（2个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A 紫外-可见检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等组成。

二．准备工作1．流动相准备：使用前按待检测样品的检验方法准备所需的流动相（水使用蒸馏水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L）用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，水相使用前必须过滤，有机相用肉眼观察有颗粒时必须过滤）。

2．色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流动相流向一致（检查柱上“FLOW”流向）。

3．样品溶液配置：配置样品和标准溶液，用合适0.45μm的样品过滤器过滤后待用。

如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。

严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。

4．检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

三．开机、参数设定及平衡系统1．开机：接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。

2．排气泡或更换流动相的操作方法1）将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2）逆时针转动A/B泵的排液阀180o；3）按A/B泵的【purge】键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4）将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。

5）如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。

6）如按以上方法不能排尽气泡，从色谱柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中设流速为5 ml/min冲洗3分钟，停泵后重新接上色谱柱并将流速重新设定为规定值。

3．参数设定1）波长设定：一般设为254nm。

2）流动相设定：流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％冲洗一段时间，等待柱压平稳后可调节到正常流速（调节流速时应该每次增减0.1ml/min，不宜调节过快，柱在线时流速一般不超过1ml/min）。

标准操作规程第 1 页共 4 页1 仪器组成和开机1.1 仪器组成本系统由LC-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、DGU-20A5真空脱气机、CTO-10ASvp柱温箱、SIL-20AC自动进样器、LCsolution色谱工作站（1.21SP1版本）和打印机组成。

1.2 开机将电源插头分别插入插座，打开泵、真空脱气机、紫外检测器、柱温箱和自动进样器的电源开关；打开计算机，鼠标双击桌面上的【LCsolution】图标打开一个窗口。

如需进行在线操作，点击图标，输入用户名和密码，点击【OK】即进入工作站的在线操作页面；如要进行离线分析方法的建立和修改则点击下方的图标；点击【Postrun】图标则进入数据分析和处理界面。

进入在线操作页面后，可看到如下几部分组成：--最上方为命令栏，依次为File、Edit、View、Method等；--命令栏下方为常用命令的快捷操作图标，分别用于样品序列分析、单个样品分析、管路排空、仪器开关等；--左侧为辅助栏，显示几个分析作业流程的操作图标，如系统设置，数据采集，序列表，离线分析等；--中部为数据信号显示栏；--下部为仪器工作参数栏：包括泵、检测器、柱温等；1.3 开机清洗打开泵的排液阀，点击上方快捷命令按钮【Auto Purge】，可对仪器管路进行冲洗。

清洗的管路和清洗时间可在仪器工作参数设置界面中的【Auto Purge】窗口进行选择和设置，可对A、B、C、D四个流动相管路和自动进样器进行清洗。

2 分析方法的建立、保存和调用2.1 分析方法的建立在仪器运行参数设置界面，点击【Normal】出现主要运行参数，点击【Advanced】出现全部运行参数。

2.1.1 采样时间设置在【Data Acquisition】窗口中，左侧【LC Stop Time】框中输入样品运行时间；右侧【Acquisition Time】打勾同时输入检测起始时间和检测结束时间。

2.1.2 输液泵参数设置在【Pump】窗口中，选择【Low pressure gradient】模式，输入总流速和流动相比例。

简化岛津LC20A高效液相色谱仪操作规程一、引言岛津LC20A高效液相色谱仪是一种常用的仪器设备，广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。

本文档旨在简化岛津LC20A高效液相色谱仪的操作流程，提供操作规程，方便使用人员快速上手操作。

二、仪器准备在进行岛津LC20A高效液相色谱仪操作之前，应做好以下准备工作：1.检查仪器状态：确保仪器处于正常工作状态，检查电源、进样器、流动相泵等部件是否正常工作，若发现异常情况应及时处理。

2.准备标准样品和试剂：根据实验需求准备好所需的标准样品和试剂，务必按照要求进行储存和保管。

3.检查流动相液罐：检查流动相液罐是否有足够的液体，如液位过低应及时补充。

4.准备耗材：预先准备好所需的色谱柱、进样器垫片、注射器等耗材，并确保其与实验要求相符。

三、操作步骤根据实验的需要，岛津LC20A高效液相色谱仪的操作步骤主要包括样品进样、流动相泵操作、柱温箱设置等。

以下为基本操作规程：1. 样品进样1.打开岛津LC20A高效液相色谱仪的电源开关，待仪器自检完成后，确保进样器位于初始位置。

2.使用洗槽溶液洗净进样器。

将洗槽溶液注入洗槽中，将进样器连接到洗槽并执行洗涤步骤，直至进样器完全清洗干净。

3.准备好待测样品，使用注射器将样品注入进样器中，注意避免泡沫产生。

4.根据实验需求设置好进样器参数，包括进样体积、进样方式等。

5.执行进样操作，将样品进样到色谱柱中。

2. 流动相泵操作1.打开岛津LC20A高效液相色谱仪的流动相泵电源开关。

2.设置流动相泵的参数，包括流速、梯度程序等。

根据实验需求选择合适的流速和梯度程序。

3.检查流动相液罐液位，如不足应及时补充，确保流动相液罐中有足够的流动相液。

4.执行流动相泵操作，开始流动相的供液。

3. 柱温箱设置1.打开岛津LC20A高效液相色谱仪的柱温箱电源开关。

2.设置柱温箱的温度，根据实验要求选择合适的温度。

3.检查柱温箱温度传感器的连接情况，确保温度传感器与柱温箱连接正常。

岛津高效液相色谱仪LC-20A操作规程一、目的：为了安全、规、正确使用岛津LC-20A型高效液相色谱仪，特制订本操作规程。

二、围：仅适用于岛津LC-20A型高效液相色谱仪。

三、环境要求：温度4 ～35℃，相对湿度为40～80% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。

四、L C-20A高效液相色谱仪工作原理：高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相),由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱流出, 通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到工作软件,数据以图谱形式表现出来。

4.1高效液相色谱仪外观图：图1：高效液相色谱仪外观图开机顺序：A泵→B泵→柱温箱→自动进样器→检测器→系统控制器后→电脑显示器→主机（注：仪器各单元的开关均在左下角）4.2高效液相色谱仪的基本流路：五、样品准备：5.1开机之前，准备好所用的流动相和样品，检查储液器的吸滤头是否在液面以下。

流动相和样品必须通过0.45um过滤器过滤。

5.2 流动相：必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相，并通过0.45um过滤器过滤。

过滤后的流动相必须经过充分脱气，以除去其中溶解的气体O2等，如不脱气易产生气泡、基线噪声增加、灵敏度下降，甚至无法分析。

5.3 查看仪器使用记录，了解仪器当前状况。

图2：真空过滤器图3：超声波清洗器5.4 样品前处理：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理。

图4 样品前处理六、操作规流程：工作软件操作流程概述：6.1 启动：双击LCsolution，“LCsolution Launcher”启动：图5：联机系统“分析”图6：登录界面此时仪器发出“嘀嘀”两声，表明系统与仪器连接成功6.2 设置系统配置：单击，选择自动配置，检查系统与仪器的实际配置是否相符。