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天然药物化学实训天然药物化学实训 1药化教研室天然药物化学实训 1一．说明天然药物化学是一门实验学科，实验教学起着重要的作用。
通过实验要达到以下目的。
1．能检验学生在课堂上所学的理论知识。
使学生对理论知识的理解更加深入，掌握的更加牢固。
2．训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作和实际工作的基本训练。
3．使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。
在实验中，重点是加强对学生基本功的训练。
二．实验须知1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。
若发生事故应立即采取措施并报告指导老师。
2．实验前做好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法；安排好实验计划，争取准时结束；实验过程中应养成及时记录的习惯，凡是观察到的现象和结果及有关数据，应随时如实地记录。
实验完毕，要认真总结，写好实验报告，实验所得的提纯物要包好，贴上标签，交给老师。
3．实验室内应保持安静，不得大声喧嚷，不许抽烟。
进入实验室必须穿工作服，实验过程中，不许随便离开。
4．实验台前应保持整洁，与实验无关的物品不得放在台前。
实验中废弃的固体物，要丢入废物桶内。
5．爱护仪器，节约药品，仪器损坏后应填写报损单，注明原因，由指导教师按规定处理。
6．实验过程中要节约用水、用电。
7．每次实验结束后，值日生应将实验室打扫干净，倾倒废物桶，关好水、电、门窗，方可离去。
实验一粉防已生物碱的提制和鉴识粉防已是防已科千金藤植物粉防已Stephania tetrandraS.Moore的根。
又名汉防已、倒地拱、百木香，是一种解热镇痛药。
中医用于风湿止痛、利尿消肿以及毒蛇咬伤等。
粉防已的有效成分是生物碱，其总碱含量为1.2%左右，主要是粉防已碱（Tetrandrine）和防已诺林碱（Fangchinoline）及轮环藤酚碱（Cyclanoline），本实验经提取，分离可得到其中2个生物碱结晶。
药物化学实验目录实验一阿司匹林的合成 (1)实验二扑炎痛的合成 (3)实验三水杨酰苯胺的合成 (6)实验四阿司匹林铝的合成 (9)实验五苯妥英锌的合成 (12)实验六苯妥英钠的合成 (15)实验七苯佐卡因的合成 (18)实验八磺胺嘧啶锌和磺胺嘧啶银的合成 (22)实验九琥珀酸喘通的合成 (24)实验十磺胺醋酰钠的合成 (26)实验十一巴比妥的合成 (30)实验十二盐酸普鲁卡因的合成 (34)实验十三盐酸普鲁卡因稳定性实验 (38)实验十四对氨基水杨酸钠稳定性实验 (41)实验十五二氢吡啶钙离子拮抗剂的合成 (43)实验十六氯霉素的合成 (45)实验十七氟哌酸的合成 (55)实验十八地巴唑的合成 (65)实验十九亚胺-154的合成的合成 (68)附录重要的实验方法 (70)实验一 阿司匹林（Aspirin ）的合成一、目的要求1. 掌握酯化反应和重结晶的原理及基本操作。
2. 熟悉搅拌机的安装及使用方法。
二、实验原理阿司匹林为解镇痛药，用于治疗伤风、感冒、头痛、发烧、神经痛、关节痛及风湿病等。
近年来，又证明它具有抑制血小板凝聚的作用，其治疗范围又进一步扩大到预防血栓形成，治疗心血管疾患。
阿司匹林化学名为2-乙酰氧基苯甲酸，化学结构式为：OCOCH 3COOH阿司匹林为白色针状或板状结晶，mp.135~140℃，易溶乙醇，可溶于氯仿、乙醚，微溶于水。
合成路线如下：OCOCH 3COOH OHCOOH (CH 3CO)2O H 2SO 4CH 3COOH++三、实验方法（一）酯化在装有搅拌棒及球形冷凝器的100 mL 三颈瓶中，依次加入水杨酸10 g ，醋酐14 mL ，浓硫酸5滴。
开动搅拌机，置油浴加热，待浴温升至70℃时，维持在此温度反应30 min。
停止搅拌，稍冷，将反应液倾入150 mL冷水中，继续搅拌，至阿司匹林全部析出。
抽滤，用少量稀乙醇洗涤，压干，得粗品。
（二）精制将所得粗品置于附有球形冷凝器的100 mL圆底烧瓶中，加入30 mL 乙醇，于水浴上加热至阿司匹林全部溶解，稍冷，加入活性碳回流脱色10 min，趁热抽滤。
药物化学三个经典实验实验一仪器的清洗、阿司匹林的合成在反应过程中，阿司匹林会自身缩合，形成一种聚合物。
在阿司匹林产品中的另—个主要的副产物是水杨酸。
三、实验方法：取2g（14mmol）水杨酸放入125ml的锥形瓶中，慢慢加入5ml（53mmol）乙酸酐，再滴加6滴浓硫酸，摇动使水杨酸溶解，水浴加热5-10min （控制温度85-90℃），冷至室温，即有乙酰水杨酸结晶析出。
若无晶体析出，可用玻璃棒摩擦瓶壁或置于冰水中冷却促使结晶。
晶体析出后再慢慢加入50ml水，继续在冰水中冷却，使晶体完全。
抽滤，用少许水洗涤晶体，抽滤，烘干，计算产率，熔点134-136℃。
[注意事项]1．由于乙酸酐易水解，所以所用仪器必须干燥。
水浴加热时，要注意不要让水蒸气进入三颈瓶中，以防止酸酐和生成的阿司匹林水解。
2．由于分子内氢键的作用，水杨酸和乙酸酐需在150-160°C才能生成乙酰水杨酸。
加入酸的目的主要是破坏氢键的存在，使反应在较低的温度（90℃）下就可以进行，而且大大减少副产物，因此实验中要注意控制温度。
四、思考题1．在阿司匹林的合成过程中，要加入少量的浓硫酸，其作用是什么除硫酸外，是否可以用其他酸代替？2．阿司匹林的合成过程中产生的主要副产物是什么简述其产生的途径及去除方法。
实验二扑热息痛的合成扑热息痛系常用的解热镇痛药，临床上用于发热、头痛、神经痛、痛经等。
化学名N-(4-羟基苯基)-乙酰胺[N-(4-Hydro某yphenyl)-acetamide]，又称醋氨酚(Acetaminophen)化学结构本品为白色结晶或结晶性粉末，易溶于热水或乙醇，溶于丙酮，略溶于水。
一、目的要求1.通过本实验，掌握扑热息痛的性状、特点和化学性质。
2.掌握酰化反应的原理和分馏柱的作用及操作。
OHONHCH3二、实验原理扑热息痛以对氨基酚为原料经醋酐酰化或醋酸酰化反应制得。
本实验采用冰醋酸为酰化剂。
OHONH2+CH3COOHHONHCH3+H2O三、实验方法60ml（或100ml）圆底烧瓶中加入4g对氨基酚，10ml冰醋酸，装一短的刺形分馏柱，其上端装一温度计，支管通过尾接管与接收器（100ml 锥形瓶）相连，接收器外部用冷水浴冷却。
天然药化实验报告篇一：天然药物化学第四组实验报告溶剂法提取茶多酚第四组（李伟、郑良波、刘茜、胡义芳、林芬、陈梦迪）茶多酚（tea-polyphenols，简称TP），又名茶单宁、茶鞣质，是从天然植物茶叶中分离提取的多羟基酚类衍生物的混合物，占茶叶干重的15%~30%。
茶多酚是一种理想的天然食品抗氧化剂，已被列为食品添加剂（GB12493-90）。
此外，它还具有抗癌、抗衰老、抗辐射、清除人体自由基、降低血糖血脂等一系列重要药理功能[1]。
近年来, 茶多酚在食品加工、医药保健、日用化工、农业生产等领域有重要的应用。
因此，有效地提取茶多酚，实现茶多酚的综合利用具有十分重要的意义。
一、实验目的1. 学习从茶叶中提取茶多酚的基本原理和方法，了解茶多酚的一般性质。
2. 掌握用溶剂法提取茶多酚的原理和方法。
3. 进一步熟悉酒精浸渍、回流提取、萃取、旋蒸的基本操作。
二、实验原理茶多酚为淡黄至茶褐色略带茶香的水溶液、粉状固体或结晶，具涩味，易溶于水、乙醇、乙酸乙酯，微溶于油脂，不溶于氯仿和石油醚。
耐热性及耐酸性好，在pH2~7范围及水溶液pH3~4内均十分稳定。
茶多酚极易氧化，特别是在水溶液中或有多酚氧化酶存在时略有吸潮性，在碱性条件下易氧化褐变，遇铁离子生成绿黑色化合物。
茶多酚与大多数金属离子都可发生络合作用，这一特性可用于茶多酚定性定量的检测。
有机溶剂萃取法是将茶叶用有机溶剂（如乙醇、甲醇、丙酮、乙醚等）浸提数次，合并滤液。
滤液经减压蒸馏浓缩，加入适量水后用氯仿萃取, 脱除其中的咖啡因和色素等。
水层用乙酸乙酯进行萃取, 得到含有茶多酚的乙酸乙酯溶液，经浓缩、干燥, 得到茶多酚粗品。
该提取方法的优点是茶多酚提取率相应提高，色素、咖啡因分别脱除，便于对茶叶进行综合利用。
此法缺点是操作费时麻烦, 生产成本高；溶液浓缩能耗大；并由于操作过程中温度较高, 易使茶多酚氧化变质，产品纯度通常只能达到50%~70%。
三、实验流程四、实验试剂干燥茶叶、75%乙醇、氯仿、乙酸乙酯、实验器材电子天平、研体、量筒、烧杯、玻璃棒、旋转蒸发仪、水浴锅、冷凝管、橡胶管、圆底烧瓶、分液漏斗、真空干燥箱五、实验步骤1、称取100g的干燥茶叶捣碎，2、加人适量65~80%乙醇溶剂，混匀，在70℃分别浸渍提取60min,40min, 30min。
药物化学实验指导一、实验准备在进行药物化学实验前，需要进行充分的实验准备。
包括：1.实验器材的准备：根据实验需求，提前准备好所需的实验器材，如烧杯、试管、滴管、烧瓶、搅拌器等。
2.实验试剂的准备：根据实验配方，提前准备好所需的实验试剂，如化学原料、溶剂、催化剂等。
3.实验数据的准备：准备好实验数据记录本，以便记录实验过程中的数据。
二、药物合成反应在进行药物合成反应时，需要注意以下几点：1.了解反应机理：在进行药物合成反应前，需要了解反应的机理，包括反应过程中的化学键变化、反应条件等。
2.选择合适的反应溶剂：根据反应机理，选择合适的反应溶剂，以保证反应的顺利进行。
3.控制反应温度和时间：根据反应条件，控制反应温度和时间，以保证反应的充分和稳定。
4.纯化产物：对反应产物进行纯化，去除杂质，以保证产物的纯度和质量。
三、天然药物提取与分离在进行天然药物提取与分离时，需要注意以下几点：1.选择合适的提取溶剂：根据天然药物的性质和提取目的，选择合适的提取溶剂，以保证提取的有效性和纯度。
2.控制提取温度和时间：根据提取条件，控制提取温度和时间，以保证提取的充分和稳定。
3.分离纯化：对提取液进行分离纯化，去除杂质，以保证产物的纯度和质量。
四、药物结构确证在进行药物结构确证时，需要注意以下几点：1.确定结构式：根据实验结果和文献资料，确定药物的结构式。
2.进行谱图分析：对药物进行谱图分析，如红外光谱、核磁共振谱等，以验证药物的结构式是否正确。
3.进行化合物性质测定：对药物进行化合物性质测定，如熔点、沸点、密度等，以验证药物的纯度和质量。
五、药物质量检测在进行药物质量检测时，需要注意以下几点：1.制定质量标准：根据药物的特点和应用范围，制定合理的质量标准。
2.进行外观检测：对药物的外观进行检测，如颜色、形态、粒度等。
药物化学实验讲义实验室基本常识一、实验室安全药物化学和有机化学一样是一门实践性很强的学科，因此，在进入实验室工作之前，希望参加实验者必须对实验课程的内容，要有充分的准备，而且要通晓实验室的一些基本规则，遵守实验室安全操作须知，才能避免可能发生的一些危险情况。
(一)眼睛安全防护在实验室中，眼睛是最容易受到伤害的。
飞溅出的腐蚀性化学药品和化学试剂，进入眼睛会引起灼伤和烧伤；在操作过程中，溅出的碎玻璃片或某些固体颗粒，也会使眼睛受到伤害。
为了安全起见，在某些实验中，需戴防护目镜。
倘若有化学药品或酸、碱液溅入眼睛，应赶快用大量的水冲洗眼睛和脸部，并赶快到最近的医院进行治疗。
若有固体颗粒或碎玻璃粒进入眼睛内，请切记不要揉眼睛，并赶快到最近的医院进行诊治。
(二)预防火灾有机药物合成实验室中，由于经常使用挥发性的，易燃性的各种有机试剂或溶剂，最容易发生的危险就是火灾。
因此在实验中应严格遵守实验室的各项规章制度，从而可以预防火灾的发生。
在实验室内禁止吸烟。
实验室中使用明火时应考虑周围的环境，如周围有人使用易燃易爆溶剂时，应禁用明火。
一旦发生火灾，不要惊慌，须迅速切断电源、熄灭火源，并移开易燃物品，就近寻找灭火的器材，扑灭着火。
如容器中少量溶剂起火，可用石棉网、湿抹布或玻璃盖住容器口，扑灭着火；其他着火，采用灭火器进行扑灭，并立即报告有关部门或打119火警电话报警。
在实验中，万一衣服着火了，切勿奔跑，否则火借风势会越烧越烈，可就近找到灭火喷淋器或自来水龙头，用水冲淋使火熄灭。
(三)割伤，烫伤和试剂灼伤处理1.割伤遇到割伤时，如无特定的要求，应用水充分清洗伤口，并取出伤口中碎玻璃或残留固体，用无菌的绷带或创口贴进行包扎、保护。
大伤口应注意压紧伤口或主血管，进行止血，并急送医疗部门进行处理。
2．烫伤因火焰或因触及灼热物体所致的小范围的轻度烫伤、烧伤，可通过立即将受伤部位浸入冷水或冰水中约5min以减轻疼痛。
重度的大范围的烫伤或烧伤应立即去医疗部门进行救治。
药物化学实验药物化学实验目的是通过实验加深理解药物化学的基本理论和基本知识，掌握合成药物的基本方法；掌握对药物进行结构修饰的基本方法，了解拼合原理在药物化学中的应用；进一步巩固有机化学实验的操作技术及有关理论知识，培养学生理论联系实际的作风，实事求是，严格认真的科学态度与良好的工作习惯。
在教学过程中，根据不同题目，对学生有不同的要求。
根据第一次课的实际情况尽量多的开展试验，力求选择性地完成1/3的实验科目内容。
基本要求是课前作好预习，查阅有关文献和数据，了解实验的基本原理和方法，课后认真书写实验报告。
本实验教材要在使用过程中不断总结经验，收集反映，以便进一步修正提高。
目录实验一阿司匹林的合成 (1)实验二扑炎痛的合成 (3)实验三水杨酰苯胺的合成 (6)实验四阿司匹林铝的合成 (9)实验五苯妥英锌的合成 (12)实验六苯妥英钠的合成 (15)实验七苯佐卡因的合成 (18)实验八磺胺嘧啶锌和磺胺嘧啶银的合成 (22)实验九琥珀酸喘通的合成 (24)实验十磺胺醋酰钠的合成 (26)实验十一巴比妥的合成 (30)实验十二盐酸普鲁卡因的合成 (34)实验十三盐酸普鲁卡因稳定性实验 (38)实验十四对氨基水杨酸钠稳定性实验 (41)实验十五二氢吡啶钙离子拮抗剂的合成 (43)实验十六氯霉素的合成 (45)实验十七氟哌酸的合成 (55)实验十八地巴唑的合成 (65)实验十九亚胺-154的合成的合成 (68)附录重要的实验方法 (70)重要实验方法的预实验一、液体化合物的分离与提纯方法有机合成产生的液体化合物其分离纯化一般采用蒸馏的方法。
根据待分离组分和理化性性质的不同，蒸馏可以分为简单蒸馏和精馏（分馏）；根据装置系统内的压力不同又可分为常压和减压蒸馏。
对于沸点差极小的组分分离或对产物纯度要求极高的分离，则可应用高真空技术。
参见《有机化学实验》。
二、固体化合物的提纯方法化学合成药物的纯度和质量是关系到人身安危的重大问题。
精心整理药物化学是普通高等学校制药工程专业的专业必修课，药物化学实验则是学生专业技能培养中通过理论和实践密切结合，培养学生实践和创新能力的重要环节。
在普通高校本科教学中，药物化学实验课程教学的主要任务是通过加深学生对基本题的解答培养学生的创新性思维。
为了在药物化学实验教学中适当增加药物化学综合性实验的内容，以培养适应当代社会发展对高层次药学类专业人才的迫切需要，本实验指导引入了部分综合性实验，既突出了药学学科的特点，又恰当地与相关学科紧密相联，这样在培养学生的综合实验能力方面有明显的促进作用。
药物化学有一定的综合性的实验（药物化精心整理目录第一部分药物化学实验室基本知识............................... 错误!未指定书签。
第二部分药物化学实验常用玻璃器皿............................. 错误!未指定书签。
第三部分药物化学基本实验项目................................. 错误!未指定书签。
实验一药物化学实验常用装置的组装 ....................... 错误!未指定书签。
实验二葡萄糖旋光度的测定 ............................... 错误!未指定书签。
实验三阿司匹林的制备及纯度测定 ......................... 错误!未指定书签。
第四部分药物化学综合实验项目................................. 错误!未指定书签。
实验一氯霉素的合成..................................... 错误!未指定书签。
实验二巴比妥的合成..................................... 错误!未指定书签。
实验三苯妥英钠的合成 ................................... 错误!未指定书签。
实验三：药物的性质实验实验目的掌握常用几种典型药物（局麻药、解热镇痛药、心血管系统药物、磺胺类药物）的理化性质及药物鉴别的方法与基本操作。
实验器材 1．仪器试管、白瓷板、乳钵、恒温水浴锅、酒精灯、胶头滴管、漏斗、烧杯、量杯等 2．药品盐酸普鲁卡因、盐酸利多卡因、苯巴比妥(钠、阿司匹林、对乙酰氨基酚 3．试剂稀盐酸、盐酸、稀硝酸、稀硫酸、硫酸、0.1mol／L亚硝酸钠、碱性β－萘酚试液、10％氢氧化钠、氨水、三硝基苯酚试液、碳酸钠试液、硫酸铜试液、硝酸银试液、三氯化铁试液、氯仿、甲醛、亚硝酸钠固体实验指导 (一实验内容与操作步骤 1．盐酸普鲁卡因①取本品约20mg，加稀盐酸lml，振摇使溶，再加0．1 mol／L亚硝酸钠2滴，摇匀，加碱性β—萘酚试液2～3滴，即析出红色或猩红色沉淀。
②取本品约0．1 g，加蒸馏水2m1使之溶解，加10％氢氧化钠1ml，即生成白色沉淀；加热出现油状物；继续加热，产生蒸气(二乙氨基乙醇，可使润湿的红色石蕊试纸变蓝；热至油状物消失后，放冷，小心缓慢滴加盐酸试液，即析出白色沉淀，再加盐酸，沉淀又溶解。
③取本品约10mg，加蒸馏水1ml使之溶解，加稀硝酸1ml，摇匀，滴加硝酸银试液，即析出白色凝胶状沉淀。
分离沉淀，加入适量氨试液，沉淀溶解，再加硝酸试液，沉淀复现。
供试品若为盐酸普鲁卡因注射液，①、③法可直接取注射液进行；②法须将注射液浓缩后再进行。
2．盐酸利多卡因供试液配制：取本品约0.2g，加蒸馏水20ml溶解后，分别进行下列操作： (1取供试液10ml，加三硝基苯酚(苦味酸试液10ml，即生成利多卡因苦味酸沉淀。
(2取供试液2ml，加碳酸钠试液1 ml，硫酸铜试液4～5滴，即显蓝紫色；加氯仿2ml，振摇静置分层，氯仿层显黄色。
(3取供试液5ml，加稀硝酸1ml，摇匀，滴加硝酸银试液，即析出白色凝胶状沉淀。
分离沉淀，加入适量氨试液，沉淀溶解，再加硝酸试液，沉淀复现。
实验一药物的定性鉴别一、试验目的1掌握三氯化铁呈色反应在药物定性鉴别中的应用2了解并熟悉各种药物的鉴别方法及原理二、实验内容及原理三氯化铁呈色反应重氮－偶合反应磺胺类药水解反应（SD、SMZ）铜盐反应解热镇痛药三氯化铁呈色反应酸水解反应抗生素类药（青霉素G钠）火焰着烧反应1、三氯化铁呈色反应：多数可溶于水或醇的酚类药物（如水杨酸、扑热息痛、氨基比林等）能与三氯化铁离子生成蓝色至兰紫色的络合物，此性质常作为该类物质的鉴别反应。
2、铜盐反应：磺酰氨基上的氢原子具有弱酸性，在碱性条件下可被铜离子取代，生成不同颜色的铜盐沉淀。
3、重氮－偶合反应：具有芳香伯胺的化合物在酸性条件下能与亚硝酸生成重氮化合物，重氮盐在碱性条件下可与β－萘酚生成红色的偶氮化合物。
扑热息痛的重氮－偶合反应磺胺类药物的重氮－偶合反应4 水解反应：在水溶液中，有些化合物（如阿司匹林、青霉素盐类等物质）容易在酸、碱、热等条件下发生水解，生成具有不同颜色的难溶性物质。
阿司匹林的水解反应青霉素钠（钾）的酸水解反应三、药品与器材1、药品：阿司匹林、扑热息痛、磺胺甲恶唑（SMZ）、磺胺嘧啶（SD）、青霉素钠（钾）2、试剂：三氯化铁试液，1％氢氧化钠溶液，硫酸铜试液，稀盐酸，0.1 mol/L 的亚硝酸钠试液，碱性β－萘酚试液，碳酸钠试液，稀硫酸3、器皿：玻璃试管，滴管，酒精灯，试管夹，铂耳，水浴锅四、实验步骤1、三氯化铁成色反应（1）取2支试管，用药匙取少量（约30mg）药品（阿司匹林、扑热息痛）分别加入试管中，加约5ml蒸馏水，振摇溶解后加1－2滴三氯化铁试液，观察溶液颜色（显兰紫色的为扑热息痛）。
（2）取1支试管，取上述少量上述无颜色反应的药品于试管中，加约5ml蒸馏水后于酒精灯上微火煮沸，放冷后加1滴三氯化铁试液，溶液应显蓝色（为阿司匹林）2、铜盐反应：取2支试管，分别加入少量（约0.1g）药品（SD、SMZ），加约3ml 蒸馏水，充分摇匀，缓慢滴加1％氢氧化钠溶液至恰好溶解为止（碱切忌过量），再各加硫酸铜试液1－2滴，则产生不同颜色的铜盐沉淀。
实验一槐米中芦丁的提取、精制及含量测定一、实验目的1.掌握水提取法提取黄酮苷的原理及方法。
2.掌握芦丁的精制方法3.掌握分光光度法测定芦丁含量的方法二、实验原理芦丁可溶解于热水，利用不同温度条件下，物质的溶解度不同的特性，通过降低温度使芦丁的浓度达到饱和状态而结晶析出。
三、实验用品仪器：粉碎机、样品筛、电炉、石棉网、布氏漏斗、滤纸、脱脂棉、真空泵、抽滤瓶、天平、圆底烧瓶、冷凝回流管、层析缸、毛细点样管、电吹风、显色喷瓶、分光光度计。
材料：槐花米。
试剂：蒸馏水、硫酸、乙醇、色谱纯甲醇、甲酸、芦丁对照品等。
四、实验方法1.芦丁的提取取槐米20 g，加沸水250 ml，煮沸提取30min，纱布或脱脂棉趁热过滤，残渣同法再操作一次，合并两次滤液。
将滤液适当浓缩（原体积一半）后室温放置析晶，待全部析出后，减压抽滤，用冷蒸馏水洗涤芦丁结晶，抽干，得粗制芦丁（若抽滤堵滤纸可采用离心的方法：离心12000rpm，10min），置空气中干燥后，称重。
芦丁得率（％）＝粗制芦丁（g）÷粗粉重量（g）×100％。
2. 芦丁的精制纯化取粗制芦丁，按照1:60加入蒸馏水，煮沸15min，趁热抽滤，滤液冷却静置后即可析出晶体，抽滤，得芦丁精制品，置空气中干燥后，称重。
3.芦丁的水解（槲皮素的制备）取精制芦丁适量，研细后置于250 ml圆底烧瓶中，按照1:70的量加入2％硫酸，加热回流40~60min，生成鲜黄色沉淀，放冷沉淀，抽滤，沉淀物为芦丁的苷元即槲皮素，用蒸馏水洗至中性，抽干水分，晾干，称重即为粗制槲皮素。
粗制槲皮素再用95％乙醇回流溶解，趁热过滤，加蒸馏水至乙醇浓度为50%，重结晶得精制的含2分子结晶水的槲皮素。
4.芦丁和槲皮素的薄层层析4.1点样：在距离薄层板下边缘2cm处用毛细管点样，原点直径不应超过2～3mm，原点之间距离约为1～2cm。
本实验点1、2、3、4四个样点（1为精制的芦丁，2为芦丁标准品，3为粗制槲皮素，4为精制槲皮素）。
4.2展开：点样后选择合适的展开剂在层析缸内展开。
展开剂的选择，可以参考文献中和自己研究的样品类似物质的分离，也可以在薄层板上每隔2～3cm距离点上样品溶液，待斑点上的溶剂挥发后，向各斑点上分别滴加不同的展开剂展开如图比较，A～D四种溶剂，溶剂B比较适当。
单一的溶剂分离效果不佳时，可以调制混合溶剂进行实验。
溶剂前沿接近薄层板上端时，取出薄层板停止展开。
本实验中展开剂为乙酸乙酯-甲醇-水（8:1:1）展开，展距12cm。
4.3显色：取出的薄层板记录溶剂前沿位置，挥发干展开剂后，用显色剂进行显色。
在薄层板上喷雾10％～20％硫酸后，于100℃以上加热，就可以出现灰褐色斑点，或者在碘蒸气中薰，则出现褐色斑点。
这两种显色方法几乎适用于全部有机化合物。
本实验用碘蒸气显色后观察样品斑点的位置，并计算Rf值。
4.4计算Rf：原点至溶剂前沿距离为a，样品斑点中心至原点距离为b，则Rf＝b/a 。
一般鉴定纯化合物时，Rf值最好在0.4～0.6之间。
被分离物质在展开剂中的Rf值之差最好大于0.05 。
5.槐米中芦丁含量测定5.1色谱条件色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18柱（25cm×4.6mm×5μm），以甲醇-1%冰醋酸水溶液（32：68）为流动相；流速为1.00ml/min；进样量为20μl；柱温为25℃；检测波长257nm。
5.2 标准曲线的制作精确称取120℃真空干燥恒重的芦丁对照品7.9mg（或适量），用甲醇定容于50ml容量瓶中，摇匀，得对照品溶液。
分别精密吸取对照品溶液0.50、1.00、2.00ml于10ml容量瓶中用甲醇定容，然后在上述色谱条件下进样，测定峰面积，以芦丁对照品浓度为横坐标，对应峰面积为纵坐标，进行线性回归绘制标准曲线。
5.3 槐米中芦丁含量的测定精密称取槐米干燥粉末0.1g置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml,称重，超声提取30min（功率250W，频率25kHz），冷却后称重，甲醇补足失重，摇匀过滤。
精密量取续滤液2ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。
取适量样品溶液用0.45μm微孔滤膜过滤后作为供试样品液，进样20μl供试样品液进行色谱分析，计算峰面积，代入回归方程计算样品中芦丁的含量。
5.4 精制芦丁纯度的测定精密称取精制芦丁0.1g置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml,称重，超声提取30min （功率250W，频率25kHz），冷却后称重，甲醇补足失重，摇匀过滤。
精密量取续滤液2ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。
取适量样品溶液用0.45μm微孔滤膜过滤后作为供试样品液，进样20μl供试样品液进行色谱分析，计算峰面积，代入回归方程计算样品中芦丁的含量，并计算精制芦丁样品中芦丁的纯度。
六、作业1.计算热水提取芦丁的得率？2.计算从粗制芦丁到纯化后芦丁的得率。
3.计算由芦丁水解产生粗制槲皮素的得率，乙醇结晶纯化后精制槲皮素的得率。
4.记录芦丁和槲皮素薄层色谱行为并计算Rf值。
5. 线性回归，绘制芦丁标准曲线通过标准曲线计算槐米中芦丁的含量和精制芦丁样品中的芦丁的纯度。
实验二 HPLC法测定甘草中甘草苷的含量一、实验目的1. 了解HPLC原理2. 掌握HPLC测定甘草苷含量的方法二、实验用品仪器：岛津LC－20A高效液相色谱仪、岛津PDA检测器、色谱工作站、赛多利斯万分之一天平。
材料：甘草饮片。
试剂：甲醇、冰醋酸、色谱纯乙腈、超纯水、甘草苷对照品等三、实验方法1.色谱条件色谱柱：C18（25cm×4.6mm×5μm），流动相乙腈-0.5%冰醋酸(1 ∶ 4) ，流速0. 8 mL/min，检测波长276 nm，柱温室温，进样体积10 μL。
2.标准曲线的制作精密量取甘草苷对照品2mg于10ml容量瓶，甲醇溶解配制200μg/ml对照品储备液，然后倍比稀释为50、20、10、5、1μg/ml（分别取200μg/ml对照品储备液2.5、1，0.5，0.25，0.05ml，20％乙腈定容至10ml），然后将200、50、20、10、5、1μg/ml对照品溶液分别进样10 μL。
按色谱条件测定甘草苷峰面积。
以对照品量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程。
3.甘草供试样品的制备及其甘草苷含量的测定精密称取甘草样品粉末0.4g于100ml锥形瓶中，精密加入70％乙醇20ml，精密称定后，置于超声波清洗仪中提取30min，取出冷却至室温，称重，补足失去的溶剂量过滤后精密量取滤液0.5ml于10ml容量瓶中，用20％乙腈稀释至刻度，摇匀，即得供试样品溶液C。
精密称取甘草样品粉末0.4g于150ml圆底烧瓶中，精密加入70％乙醇20ml，精密称重后置于水浴回流提取30min，取出冷却至室温，称重，补足失去的溶剂量，抽滤。
精密量取滤液0.5ml于10ml容量瓶中，用20%乙腈稀释至刻度，摇匀，即得供试样品溶液H。
取适量不同方法制备的供试样品溶液（C和H），用0.45μm微孔滤膜过滤后取10μl进行色谱分析，计算峰面积，代入回归方程计算样品中甘草苷的含量。
四、作业1.线性回归，绘制甘草苷标准曲线2.通过标准曲线计算不同提取方法供试样品液中甘草苷的含量，并比较两种提取方法的优劣实验三超声、回流及压力快速溶剂三种提取方法提取葵花籽油一、实验目的掌握超声波提取、加热回流提取及压力快速溶剂提取法的原理及操作方法。
二. 实验原理1. 超声波提取法超声波振动产生并传递强大的能量，大能量的超声波作用在液体里，在振动处于稀疏状态时，液体会被撕裂成很多的小空穴，这些小空穴一瞬间即闭合，闭合时产生高达几千大气压（称为空化效应）。
这种空化效应在溶剂内部产生强烈冲击波和速度极快的微射流，能使细胞壁破裂，使细胞里边的物质释放出来。
在油脂的提取中加快了油脂的渗出速度，提高了出油率。
2.加热回流提取法当溶剂加到原料中时，溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内，溶解了可溶性物质，而造成细胞内外的浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入药材组织细胞中，如此多次往返，直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡时，将此饱和溶液滤出。
回流提取采用回流加热装置，在水浴中加热回流，以免溶剂挥发损失。
3.压力快速溶剂萃取压力快速溶剂萃取（Pressurized Solvent Extraction， PSE）通过升高压力来提高溶剂的沸点，使萃取循环在常温下进行，所得到的萃取物（状态不变）维持天然活性产物原有的特性。
大大缩短萃取时间提高萃取效率并显著降低溶剂消耗。
此外，循环能自动重复多次，从而确保提取物的充分完全萃取，因此特别适合处理坚硬的物料如根、皮、叶等。
三、实验用品仪器：粉碎机、样品筛、恒温水浴、超声提取仪、布氏漏斗、滤纸、真空泵、抽滤瓶、天平、圆底烧瓶、冷凝回流管、压力快速溶剂萃取仪、旋转蒸发仪等。
材料：葵花籽。
试剂：石油醚。
四、实验方法1.葵花籽油的超声波提取法精密称取向日葵种子100.00g，剥壳，50℃烘干，研磨，过20目筛。
取15.00g粉末于150 mL锥形瓶中，加入105.00 mL石油醚。
设定超声频率59 kHz，功率210W，超声时间15 min，温度40℃。
三角瓶置于超声波提取仪中提取15min，重复提取两次。
抽滤，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到葵花籽油置于青霉素小瓶中，玻璃真空干燥器中干燥，称重。
计算出油率。
2. 葵花籽油的回流提取精密称取干燥的向日葵籽仁粉末15.00g于圆底烧瓶中，加入105.00mL石油醚(沸程30~60℃ )，回流提取6.0h，混合物经过滤后，减压旋转蒸发回收溶剂，油脂干燥后称重，计算出油率。
3. 葵花籽油的压力快速溶剂提取精密称取120.00g葵花籽粉末，800mL石油醚，设定时间为10min，提取温度室温，压力为60bar，进行萃取。
所得葵花籽油干燥后称重，计算出油率。
五、作业1.出油率测定后测定后比较三种提取方法的优劣实验四高速逆流色谱法快速分离锁阳中的原儿茶酸一、实验目的1.了解高速逆流色谱的工作原理2.掌握高速逆流色谱分离甘草酸的方法二、实验原理高速逆流色谱属于逆流色谱的范畴，它的主要分离原理是利用样品在固定相和流动相之间的差异也就是分配比不同而进行分离的，值得注意的是逆流色谱的固定相和流动相都是液体，其主要优点：（1）无不可逆吸附。
聚四氟乙烯管中的固定相无需载体液- 液色谱系统，故而消除了气- 液和固- 液色谱中因使用载体而带来的吸附现象，特别适于分离极性物质和生物活性物质；（2）高回收率。
由于流动相和固定相均为液体，样品可全部回收，分离纯化与制备可同步完成，故特别适于制备性分离；（3）操作简便。
