实验三 粗脂肪的定量测定─索氏提取法教程教案

实验三粗脂肪的提取和定量测定—索氏提取法一、实验目的1、掌握粗脂肪的提取方法，熟悉索氏提取法的操作。

2、学习如何测定样品的粗脂肪含量。

3、加深对生物大分子的认识，了解脂肪在生物体中的重要性。

二、实验原理1、粗脂肪提取脂肪具有亲油性，可以被有机溶剂提取。

索氏提取法是一种常用的粗脂肪提取方法。

在索氏提取法中，采用乙醚/醋酸乙酯（1：1）的溶液作为提取剂。

样品加入一定量提取剂中，经过适当的震荡、离心、蒸发浓缩和干燥等步骤，得到脂肪提取物。

将脂肪提取物加入硫酸中，经过酸解、加热、冷却和干燥等步骤后，得到脂肪酸甲酯。

通过气相色谱仪测定脂肪酸甲酯的含量，进而计算出样品中粗脂肪的含量。

三、实验操作（1）取适量已干燥样品，称重，记录质量。

（2）将样品放入索氏提取器的提取篮中，加入10mL乙醚/醋酸乙酯（1：1）溶液。

（3）起动提取器，以回流的方式进行提取，搅拌速度要适中，避免溅出溶液。

（4）提取30分钟后关闭提取器，将提取篮取出，用5mL提取液将其冲洗，并将提取篮放置于洗涤瓶上，使其流干。

（5）将提取篮置于已预热至100℃的蒸发皿内，用热风器将乙醚/醋酸乙酯挥发干燥。

（6）将蒸发皿置于70℃恒温箱中干燥至常重，取出，并记录质量。

（2）将粗脂肪提取物转移到20mL玻璃瓶中，加入2mL浓硫酸。

（3）在冷水浴上，加热约2小时，待样品变成棕色液体后取出，冷却。

（4）加入1mL冰醋酸冷却，混匀。

（5）加入0.2g氯化钠，混匀。

（6）转移待测样品到10mL移液管中。

（7）在10mL皮囊中，加入4mL正己烷，混匀。

（8）离心5分钟，取上层正己烷，并转移到气相色谱管中。

（9）气相色谱条件：柱：DB-23；FID检测器；柱温：120℃；检测器温：250℃。

（10）记录脂肪酸甲酯的含量，并计算出样品中粗脂肪的含量。

四、实验注意事项1、进行实验前，将索氏提取器和蒸发皿等器皿用乙醚或甲醇洗涤，并在烘箱中干燥。

2、在进行气相色谱柱装载前，必须将固定相和管柱内壁进行彻底清洗，以免污染样品。

粗脂肪的提取和定量测定一、目的1．学习和掌握用索氏（Soxhlet）提取器提取脂肪的原理和方法。

2．学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。

二、原理利用脂类物质溶于有机溶剂的特性。

在索氏提取器中用有机溶剂（本实验用石油醚，沸程为30～60℃）对样品中的脂类物质进行提取。

因提取的物质是脂类物质的混合物，故称其为粗脂肪。

索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分组成的（图9-1），提取管两侧分别有虹吸管和连接管。

各部分连接处要严密不能漏气。

提取时，将待测样品包在脱脂滤纸包内，放入提取管内。

提取瓶内加入石油醚。

加热提取瓶，石油醚气化，由连接管上升进入冷凝器，凝成液体滴入提取管内，浸提样品中的脂类物质。

待提取管内石油醚液面达到一定高度，溶有粗脂肪的石油醚经虹吸管流入提取瓶。

流入提取瓶内的石油醚继续被加热气化、上升、冷凝，滴入提取管内，如此循环往复，直到抽提完全为止。

本法为重量法，将由样品抽提出的粗脂肪，蒸去溶剂，干燥，称重，按后面给的公式计算，求出样品中粗脂肪的百分含量。

三、器材四、试剂和材料1．样品芝麻种籽将洗净、晾干的芝麻种籽放在80～100℃烘箱中烘4小时。

待冷却后，准确地称取2～4g，置于研钵中研磨细，将研碎的样品及擦净研钵的脱脂棉一并用脱脂滤纸包住用丝线扎好，勿让样品漏出。

或用特制的滤纸斗装样品后，斗口用脱脂棉塞好。

放入索氏提取器的提取管内，最后再用石油醚洗净研钵后倒入提取管内。

2．石油醚（化学纯，沸程30～60℃）。

五、操作洗净索氏提取瓶，在105℃烘箱内烘干至恒重，记录重量。

将石油醚加到提取瓶内约为瓶容积的1/2～2/3。

将样品包放入提取管内。

把提取器各部分连接后，接口处不能漏气。

用70～ 80℃恒温水浴加热提取瓶，使抽提进行16小时左右，直至抽提管内的石油醚用滤纸检验无油迹为止。

此时表示提取完全。

提取完毕，取出滤纸包，再回馏一次，洗涤提取管。

再继续蒸馏，当提取管中的石油醚液面接近虹吸管口而未流入提取瓶时，倒出石油醚。

实验三食品中粗脂肪含量的测定(索氏抽提法)实验目的：本实验的目的是通过索氏抽提法，测定不同食品中粗脂肪的含量，了解不同食品的脂肪含量，为人们选食和营养均衡提供依据。

实验原理：实验的原理是通过索氏抽提法提取脂肪，测定样品中粗脂肪的含量。

实验中将样品和一定量的有机溶剂混合，使用回流萃取器进行索氏抽提，将脂肪提取出来，并在温度和压力稳定的条件下蒸干有机溶剂，待溶剂蒸发后，测定被提取出来的物质的质量，即可计算出样品中的粗脂肪含量。

实验步骤:1. 实验前取适量实验材料，将其取样，粉碎或切碎并称重，记录样品质量m1。

2. 取100ml 密封瓶，加入适量醇石油。

将样品加入密封瓶中。

3. 放入回流萃取器中进行索氏抽提，抽提时维持恒温67℃，使用不大于200ml 的醇石油做提取剂，抽提时间不小于6h。

4. 抽取完脂肪后，将瓶口涂上石蜡，放入恒温器中，温度为86℃左右进行沸腾，使溶剂蒸干。

5. 待残留物质沸腾至干燥，放入烘箱中保温至30min，然后取出来，待其冷却，称取残留物质的质量m2，计算粗脂肪含量的质量百分数 (w) 。

6. 粗脂肪含量 (w) 的计算方法为：w=(m2-m1)/m1×100%实验注意事项：1. 实验过程中，注意安全，避免有机溶剂的蒸气和溶液的吸入和触及皮肤，使用化学品时戴好防护手套和护目镜。

2. 每次实验前检查设备，确保可以正常工作，并且易燃易爆品储存在远离火源和热源的地方，避免发生安全事故。

3. 在进行实验过程中，要摆正样品瓶，避免回流管上有水汽倒流到瓶内，并不断提醒实验者注意。

4. 保持索氏提取器和恒温器的温度和压力稳定，避免影响实验结果。

实验结果分析：通过实验，测定出不同食品的粗脂肪含量，根据实验结果可以看出，动物性食品和一些油脂类食品的粗脂肪含量较高，如牛奶，牛肉等。

而一些蔬菜和水果中的粗脂肪含量则相对较低。

因此，在日常生活中，可根据个人体质和身体需要，合理搭配食物，保持膳食均衡，避免摄入过多脂肪对身体造成影响。