枯草芽孢杆菌Bs_15在枣树体内_省略_定殖及其对土壤微生物多样性的影响_余贤美
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枯草芽孢杆菌、春雷霉素对黑土微生物的生态影响的开题报告题目:枯草芽孢杆菌、春雷霉素对黑土微生物的生态影响一、研究背景和意义黑土是我国重要的农业资源,具有优质水分保持能力、土壤肥力高等特点。
然而,由于现代农业的发展,大量的农业化肥、农药等化学品被广泛使用,导致黑土微生物群落的分布和数量发生变化,引起生态环境问题。
因此,了解黑土中微生物群落的组成及其生态影响,对于维护黑土生态环境具有重要的意义。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和春雷霉素是常用的生物农药,对一些农业有害生物有极强的杀灭作用。
然而,这些生物农药对黑土微生物的生态影响却鲜有研究。
因此,本研究选取枯草芽孢杆菌、春雷霉素为研究对象,研究其在黑土中的生态影响,为生物农药在实际应用中提供科学依据。
二、研究目的1. 探究枯草芽孢杆菌、春雷霉素在黑土中的生态影响。
2. 分析枯草芽孢杆菌、春雷霉素对黑土微生物的影响及其恢复能力。
3. 为优化生物农药在农业生产中的应用提供科学依据。
三、研究内容和方法1. 采集黑土样品,经过处理后分为对照组和分别添加一定浓度的枯草芽孢杆菌、春雷霉素组。
2. 利用高通量测序技术对黑土微生物群落进行测序分析,比较不同组之间的差异。
3. 通过土壤微生物孔板计数法、流式细胞术等方法,量化不同处理组的微生物数量和数量变化。
4. 评价枯草芽孢杆菌、春雷霉素对黑土微生物群落生态系统中的影响,探究黑土微生物群落的恢复能力。
四、预期结果和意义预期结果:1. 枯草芽孢杆菌、春雷霉素对黑土微生物群落的组成和数量具有显著影响。
2. 枯草芽孢杆菌、春雷霉素对黑土微生物群落的生态系统具有破坏作用,黑土微生物群落恢复速度较慢。
3. 在实践中,应严格控制生物农药使用量和频次,防止对农业生态环境带来负面影响。
意义:1. 对于生物农药在农业生产中的应用提供了科学依据,促进生物农药的合理应用。
2. 为黑土生态环境的维护提供科学依据,推动可持续农业的发展。
枯草芽孢杆菌的作用众所周知微生物菌肥之功效和价位的特殊主要是因为添加了活性有益菌!所以菌种的作用对于微生物肥料来说是最重要的。
今天我们主要了解应用最广泛的“枯草芽孢杆菌”·······菌肥一般都离不开它!微生物菌种都是靠生物发酵培育得来的。
真正的枯草芽孢杆菌是一种生物制剂,对作物、对土壤都有很好的生长调节作用,基本是多功能的,不是只针对一点起作用,最重要的是它的使用效果是累加的,是单纯的肥料或激素达不到的。
根据长期的实践结果和研究表明枯草芽孢杆菌对改善土壤、提高农作物品质有以下9种作用。
1.抗生作用抗生作用是指拈抗微生物通过产生代谢产物在低浓度下就能够对病原微生物的生长和代谢产生抑制作用,从而来影响病原微生物的生存和活动。
近半个世纪以来,人们从枯草芽孢杆菌不同菌株的代谢产物中分离纯化了多种有效的抗菌物质。
2.溶菌作用枯草芽孢杆菌的溶菌作用主要表现在是通过吸附在病原菌的菌丝上,并随着菌丝生长而生长,而后产生溶菌物质造成原生质泄露使得菌丝体断裂;或者是产生抗菌物质通过溶解病原菌孢子的细胞壁或细胞膜,致使细胞壁穿孔、畸形等现象从而抑制孢子萌发。
3.诱导植物产生抗性及促进植物生长诱导植物产生抗性作用是指枯草芽孢杆菌不但能够抑制植物病原菌,而且还能够诱发植物自身抗病机制从而增强植物的抗病性能的作用。
什么是PGPR国际上把土壤中能促进植物生长的根际自生细菌通称为植物促生根圈细菌,简称为PGPR。
其中以枯草芽孢杆菌的抗逆性最强、功能最多、适应性最广、效果最稳定。
枯草芽孢杆菌能够产生类似细胞分裂素、植物生长激素的物质,促进植物的生长使植物抵抗病原菌的侵害。
4.保护环境。
枯草芽孢杆菌大量应用于生物肥料。
当作用于作物或土壤时,能够在作物根际或体内定殖,并起到特定肥料效应。
目前,微生物肥料在培肥地力,提高化肥利用率,抑制农作物对硝态氮、重金属、农药的吸收,净化和修复土壤,降低农作物病害发生,促进农作物秸秆和城市垃圾的腐熟利用。
枯草芽孢杆菌在土壤生态系统中的功能与作用研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种广泛存在于土壤中的益生菌,其在土壤生态系统中拥有重要的功能与作用。
研究表明,枯草芽孢杆菌具有促进植物生长、增强土壤肥力、抑制植物病原菌和土壤病害、降解有机物质和减少污染物等方面的能力。
首先,枯草芽孢杆菌能够与植物根系形成共生关系,促进植物生长和发育。
通过产生植物生长激素和有益的代谢产物,这种细菌能够促进植物根系的生长,并提高植物对营养元素的吸收利用效率。
枯草芽孢杆菌还能够抑制植物叶片上的有害菌群,增强植物的自抗病能力,降低植物的病害发生率。
其次,枯草芽孢杆菌在土壤肥力的提高和维持中起着重要作用。
这种细菌具有强大的有机酸分解能力,能够降解残留的植物残渣和有机物质,将其分解成有机酸和可溶性营养物,提供给植物和其他微生物的营养需求。
同时,枯草芽孢杆菌还能够固氮和解磷,将大气中的氮转化为植物可利用的形式,促进植物的生长,并将土壤中的磷溶解,增加土壤的磷有效性。
此外,枯草芽孢杆菌对土壤中的病原菌和病害有抑制作用。
通过产生一系列的抗生素和抗菌物质,枯草芽孢杆菌能够抑制土壤中一些常见的病原菌,如根腐病菌、立枯病菌等,减少植物病害的发生。
此外,它还能与土壤中的其他益生菌相互作用,增加土壤抗生性,提高土壤中对病原微生物的综合抵抗能力。
枯草芽孢杆菌还具有降解有机物质和减少污染物的能力。
这种细菌能够分解有机物质中的复杂结构,将其转化为简单的无机盐和气体等形式,降解有机污染物的浓度和毒性。
同时,枯草芽孢杆菌还能够吸附和分解土壤中的重金属和有机化合物,减少其对土壤和水体的危害,提高土壤的生态安全性。
综上所述,枯草芽孢杆菌在土壤生态系统中具有重要的功能和作用。
它可以促进植物生长和发育,增强土壤肥力,抑制植物病原菌和土壤病害,降解有机物质和减少污染物。
因此,深入研究枯草芽孢杆菌在土壤生态系统中的功能与作用,将有助于推动可持续农业和农田生态安全的发展。
枯草芽孢杆菌对土壤群落结构的影响作者:邱萌萌吴玉斌陆洪省来源:《南方农业·下旬》2021年第01期摘要采用含毒介质法研究枯草芽孢杆菌对茄链格孢菌和灰葡萄孢菌菌丝生长的抑制能力,采用高通量测序的方法探究枯草芽孢杆菌对土壤浸出液中真菌菌群群落结构的影响。
结果表明,枯草芽孢杆菌对茄链格孢菌和灰葡萄孢菌菌丝生长的抑制率达到100%;在门分类水平上,枯草芽孢杆菌会明显改变土壤浸出液中真菌菌群的群落结构。
因此,枯草芽孢杆菌可作为生防菌广泛应用。
关键词枯草芽孢杆菌;含毒介质法;高通量测序中图分类号:S476;S154.36 文献标志码:B DOI:10.19415/ki.1673-890x.2021.03.084芽孢杆菌是土壤和植物微生态区系的优势生物种群,具有很高的抗逆能力和抗菌防病作用。
枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌中性状优良的分离株,其生理特征多样,在自然界中广泛分布,极易分离培养。
枯草芽孢杆菌不仅可以广泛存在于土壤、植物根际表面和其他外部环境中,而且可以存在于植物体内,是植物体内常见的内生细菌,尤其是在植物的根部、茎部。
该菌不仅对人畜无毒无害,不污染环境,而且能产生多种抗菌素和酶,具有广谱抗菌活性和极强的抗逆能力。
枯草芽孢杆菌可通过成功定殖至植物根际、体表或体内的方式,与病原菌竞争植物周围的营养,分泌抗菌物质以抑制病原菌生长,同时诱导植物防御系统抵御病原菌入侵,改变植物根际土壤中微生物群落结构,从而达到生防的目的,已成为一种理想的生防细菌[1-3]。
高通量测序技术是目前应用最广泛的新一代测序技术,与传统的琼脂培养基培养、Biolog 平板法、磷脂脂肪酸、PCR-DGGE和RFLP等分析方法相比,具有通量高、灵敏度高、准确性高和运行成本低等特点。
高通量测序技术通过检测土壤微生物细胞内特定遗传物质(原核微生物16S rRNA、真核微生物18S rRNA)的碱基序列,可以更全面、准确地分析土壤中微生物群落的多样性,已广泛应用于土壤微生物群落的研究中[4-6]。
枯草芽孢杆菌的生物防治机制及效果评估枯草芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)是一种广泛应用于生物农药的重要微生物。
它发现于1901年,最初用于治理蚕食害虫,后来又被用于防治农作物和森林中的许多其他害虫。
枯草芽孢杆菌的生物防治机制主要涉及其产生的杀虫晶体蛋白和细菌产物。
首先,枯草芽孢杆菌通过产生杀虫晶体蛋白(cry蛋白)来防治害虫。
这些杀虫晶体蛋白是由菌株分泌的一种内毒芽孢准晶蛋白所组成。
当害虫摄入枯草芽孢杆菌或接触菌株分泌的晶体蛋白时,蛋白会在害虫的中肠内溶解,并释放出毒素。
这些毒素具有高度的特异性,只对某些昆虫具有杀伤作用,对人类和其他非目标生物无害。
其次,枯草芽孢杆菌通过产生其它细菌产物来对抗害虫。
这些细菌产物包括抗菌肽、酸、酶和其它生物活性分子。
抗菌肽能够杀死害虫的细菌感染,保护枯草芽孢杆菌在害虫体内生长和繁殖。
酸和酶能够改变害虫的生理环境,导致害虫死亡。
此外,枯草芽孢杆菌还能分泌一些生物活性分子,如胞外抗氧化物和抗生物膜物质,来抑制害虫的营养吸收和生长发育。
枯草芽孢杆菌的防治效果评估主要通过实验室研究和田间实验来进行。
在实验室研究中,首先需要筛选出高毒力的枯草芽孢杆菌菌株,然后通过培养菌株并提取晶体蛋白,通过浓度和时间的变化来确定其对害虫的毒力。
同时,还需要评估杀虫晶体蛋白对非目标生物的毒性,以确保安全性。
实验室研究还可以利用分子生物学技术对枯草芽孢杆菌中产生杀虫晶体蛋白的基因进行分析,从而进一步优化杀虫晶体蛋白的产量和毒力。
田间实验是评估枯草芽孢杆菌生物防治效果的重要方法。
在田间实验中,首先需要确定目标害虫的发生和危害程度,然后选择适当的施药时间和浓度,将枯草芽孢杆菌菌株喷洒在农作物上。
经过一段时间后,观察农作物上害虫的死亡情况和防治效果。
此外,还需要考虑如何最大限度地降低枯草芽孢杆菌对环境和非目标生物的影响,以及如何合理利用生物农药与化学农药相结合,提高农作物的产量和质量。
枯草芽孢杆菌的生态功能及应用前景枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种常见的土壤中存在的革兰氏阳性细菌。
它具有广泛的生态功能和广泛的应用前景。
本文将分别从枯草芽孢杆菌的生态功能和应用前景两个方面进行详细的介绍。
首先,枯草芽孢杆菌在土壤中具有重要的生态功能。
它是一种很强的生防菌,能够对许多植物病原真菌和细菌进行拮抗作用,如白色念珠菌、灰霉病菌等。
其产生的抗生素能够有效抑制病原菌的生长繁殖,保护植物免受病原菌的侵害。
此外,枯草芽孢杆菌还能够分泌一系列的酶类物质,如纤维素酶、蛋白酶等,能够分解土壤中的有机物质,促进养分的释放和循环利用。
因此,枯草芽孢杆菌对土壤的生态系统有着积极的影响,有助于维持土壤的健康和平衡。
其次,枯草芽孢杆菌在农业、环境保护和食品安全等领域具有广泛的应用前景。
首先在农业领域,枯草芽孢杆菌可以作为一种生物农药,用于防治农作物的病害。
相比化学农药,生物农药更环保、安全,并且可以降低对环境的污染。
枯草芽孢杆菌的抗菌活性能够有效地抑制农作物的病原微生物,提高农作物的产量和质量。
其次,在环境保护领域,枯草芽孢杆菌具有治理土壤和水体中污染物的潜力。
枯草芽孢杆菌可以降解有机废弃物和油污,将其转化为二氧化碳和水等无害物质,减少对环境的污染。
此外,枯草芽孢杆菌还可以吸附重金属离子和放射性物质,从而减少它们对环境和人体的危害。
此外,枯草芽孢杆菌还有潜力应用于食品安全领域。
它具有抗菌、抗真菌和抗氧化等活性,可以有效地抑制食品中的病原微生物和腐败菌的生长繁殖。
同时,枯草芽孢杆菌产生的一些代谢产物,如多糖和多肽,具有保湿和抗氧化的功能,可以被应用于食品添加剂的生产,提高食品的保鲜性和品质。
总之,枯草芽孢杆菌作为一种常见的土壤细菌,具有广泛的生态功能和应用前景。
它可以作为一种生防菌在农业领域应用,能够对农作物的病虫害进行有效防治;同时还可以用于土壤和水体的污染治理,具有环境保护的潜力;此外,在食品安全领域也有着重要的应用前景。
探索:枯草芽孢杆菌国内外关于枯草芽孢杆菌的研究与应用已有100多年的历史,早期大部分工作集中在形态观察、分类鉴定、生理机制、功能发掘及防治等方面。
近年来,对枯草芽孢杆菌的研究渐进到遗传学与分子生物学领域,研究内容体现在特定功能基因的寻找并克隆到需要的物种中或者通过诱变、基因工程等手段对枯草芽孢杆菌生产菌进行遗传改造等。
1.枯草芽孢杆菌的生物拮抗作用:枯草芽孢杆菌生长过程中能代谢分泌细菌素(枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素等)、脂肽类化合物、有机酸类物质等,这些代谢产物可有效抑制病原菌的生长或溶解病原菌,以致杀死病菌,高抗重茬。
枯草芽孢杆菌分泌的酶类有几丁质酶抗菌蛋白对多种植物病原菌具有强烈抑制作用。
枯草芽孢杆菌代谢分泌的脂肽类化合物可用于防治小麦白粉病、稻瘟病、赤霉病、纹枯病、炭疽病、黄瓜霜霉病、番茄青枯病、灰霉病、等植物病害。
2.枯草芽孢杆菌具有竞争优势:枯草芽孢杆菌施入土壤后,和其它微生物争夺氧气和营养物质,具有竞争排它性,它在作物根部形成了优势生物种群。
通过这种方式,-草芽孢杆菌就有效的防止了其它病菌的侵入,获取周围菌的营养,病原菌的生长受到抑制,枯草芽孢杆菌像疫苗一样起到了防病抗病的作用。
3.枯草芽孢杆菌可诱导植物产生抗性:枯草芽孢杆菌能通过诱发植物自身抗病机制增强植物的抗病性能,具有诱导植物抗病性作用。
-枯草芽孢杆菌激活植物的天然防御机制,使植物免受病原物危害减轻危害,这是-枯草芽孢杆菌作为生防菌发挥生防作用的一个重要方面。
4.枯草芽孢杆菌的杀菌溶菌作用:枯草芽孢杆菌可在病原菌的菌丝上伴随生长,分解消耗消耗病原菌,使病菌菌丝发生断裂、解体细胞消解,这样病原菌就不能进一步侵染植株。
5.枯草芽孢杆菌可大幅促进植物生长:枯草芽孢杆菌在防病抗病的同时,它还可诱导作物产生吲哚乙酸等物质,提高作物生长刺激素的水平,从而促进作物生长繁殖。
尽管当前化学杀菌剂在农药产业仍占主导地位。
但枯草芽孢杆菌杀菌剂具有对人畜相对安全、环境兼容性好、不易产生抗药性等优点,因而更符合现代社会对农业生产及有害生物综合防治(IPM)的要求。
枯草芽孢杆菌使用说明枯草芽孢杆菌,听起来是不是很专业?它就是咱们生活中一个不起眼的小帮手。
别看名字有点儿拗口,这小家伙可是个了不起的角色。
你知道吗?它在土壤里就像个勤劳的小蚂蚁,默默地工作,帮助植物更好地生长,简直就是植物界的保姆。
说起这家伙,真是让人爱不释手。
它的好处多得数不胜数,像是为植物保驾护航,保护它们免受各种病菌的侵扰,真是个“贴心小棉袄”。
咱们平时种花种菜,很多时候都想让植物长得更茁壮。
可别小看了这枯草芽孢杆菌,它不仅能提高植物的免疫力,还能让土壤更加肥沃。
要是你觉得土壤干巴巴的,没关系,来点儿枯草芽孢杆菌,立刻给土壤加点儿营养。
就像给自己喝一杯营养奶昔,嗖的一下,身体立马有劲儿。
这小东西还能分泌一些对植物有益的物质,简直就是个“调味师”。
它帮植物吸收营养,能把土壤里的矿物质变得更容易被植物吸收,这样植物就能长得更加健康。
说到使用,枯草芽孢杆菌可真是方便。
你可以把它拌到土里,或者稀释后喷洒在叶子上。
就像给植物洗个澡,清爽又舒服。
它耐高温、耐干旱,真是个“百变小天才”,无论你是在北方的干旱地区,还是南方的潮湿环境,它都能适应。
用起来也简单,跟喝水似的,随便往土里一撒,植物就能感受到它的温暖。
要是你每天都给植物来点儿,它们肯定会笑得合不拢嘴。
很多人用它的时候,还不知道这小家伙的神奇之处。
除了让植物长得更好,它对环境也有好处。
可以说是个“环保小卫士”。
它能减少化肥的使用,让土壤恢复生机,保护咱们的地球母亲。
植物不仅能长得好,连空气也变得更清新,简直是一举两得。
你想想,周围的花花草草都长得旺盛,空气清新,简直就像走进了仙境,心情都变得好起来。
使用它的时候也得讲究方法。
别想着越多越好,适量才是关键。
就像咱们喝酒,喝多了可就闹心了。
这小家伙用得当,效果才能最大化。
别急,慢慢来,给植物一点儿时间,它们会把你想要的回报都送回来。
使用后,观察植物的变化,简直就像看着小宝宝慢慢长大,心里那个满足啊,别提有多开心了。
枯草芽孢杆菌的简介和在各领域的作用一、枯草芽孢杆菌简介枯草芽孢杆菌,是芽孢杆菌属的一种。
单个细胞0.7~0.8×2~3微米,着色均匀。
无夹馍,周生鞭毛,能运动。
革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。
菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色。
枯草芽抱杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。
枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧,造成肠道低氧,促进有益厌氧菌生长,并产生乳酸等有机酸类,降低肠道PH值,间接抑制其他致病菌生长。
枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类,在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用,能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素,提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性,在饲料中应用广泛。
它还可以用来改善水质,应用在污水处理和环境保护中。
和其他微生物混合使用,还可以用于生物肥料和土地改良等。
二、枯草芽孢杆菌的应用领域枯草芽孢杆菌是一种很好的菌种,应用领域很广,可以运用在饲料公司。
用作饲料添加剂。
可以用在生物有机肥公司,用作生物肥料的发酵剂,可以应用在养殖场,直接添加给动物吃,可以应用在鱼塘净化水质。
或者一些城市环境监测部门或环保公司,他们勇于污水或污染物的处理。
以及一些糖厂或公司用于治理污染等.三、枯草芽孢杆菌在农业中的作用1、提高作物抗病、抗寒、抗旱能力2、增加土壤养分、改良土壤结构、提高化肥利用率;3、促进土壤中的有机质分解成腐殖质,刺激作物生长。
4、促进作物生长、成熟、降低成本、增加产量、提高收入;5、有一定的固氮、解磷、解钾作用。
四、枯草芽孢杆菌在水产种的作用1、枯草芽孢杆菌有肥水的作用枯草芽孢杆菌制剂种的活菌,可以在水中产生多种分解酶,将有机肥中的大分子分解成为小分子,但这一过程发生在芽孢杆菌激活扩繁殖之后。
枯草芽孢杆菌的致病机制及其在植物保护中的潜力探究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种广泛存在于土壤和水体中的益生菌,被广泛应用于农业领域。
本文将探索枯草芽孢杆菌的致病机制以及其在植物保护中的潜力。
一、枯草芽孢杆菌的致病机制1. 产生抑菌物质:枯草芽孢杆菌能够产生一系列抑制其他微生物生长的抗生素,如抗生素枯草芽孢素、固体青霉素等。
这些抗生素可以抑制其他植物病原菌的生长,从而减少植物病害的发生。
2. 产生酶分解物质:枯草芽孢杆菌能够产生一系列分解物质,如纤维素酶、鞘氨醇酸酯酶等。
这些酶可以分解植物细胞壁的纤维素和鞘氨醇酸酯,使得植物病原菌失去侵染植物的能力。
3. 激活植物免疫反应:枯草芽孢杆菌能够通过与植物细胞壁的特定分子结合,激活植物的免疫反应。
这种免疫反应可以增强植物的抵抗能力,提高其对病原菌的抵抗力。
4. 竞争资源:枯草芽孢杆菌能够利用土壤中的有限资源,与其他植物病原菌竞争生存。
它可以通过占用营养物质和空间等方式,降低其他病原菌的生存能力,减少植物病害的发生。
二、枯草芽孢杆菌在植物保护中的潜力1. 生物防治植物病害:枯草芽孢杆菌具有广谱抗菌活性,可以有效地防治许多植物病害,如蔓割病、立枯病、白粉病等。
与传统的化学农药相比,枯草芽孢杆菌没有残留物,对环境无毒,可以减少对生态系统的影响。
2. 促进植物生长发育:枯草芽孢杆菌可以分解土壤中的有机物质,释放出植物所需的营养物质,促进植物的生长发育。
同时,枯草芽孢杆菌还可以调节植物的激素水平,提高植物的抗逆性,增强植物对环境的适应能力。
3. 提高作物产量和品质:枯草芽孢杆菌可以促进作物的根系生长,增加植物对水分和养分的吸收能力,提高作物的产量和品质。
此外,枯草芽孢杆菌还可以减少作物的病原菌感染,减少农药的使用量,提高作物的食品安全性。
4. 应用于土壤改良:枯草芽孢杆菌可以改良土壤结构,提高土壤质量,增加土壤通气性和保水性。
它可以分解有机废弃物,促进有机物质的循环利用,缓解土壤退化和污染问题。
枯草芽孢杆菌在农业领域的应用研究进展枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种常见的土壤细菌,具有广泛的应用潜力。
在农业领域,枯草芽孢杆菌的应用研究进展主要包括以下几个方面。
枯草芽孢杆菌在农业生物防治中的应用。
枯草芽孢杆菌具有广谱的抗菌作用,可以对多种病原菌和病害产生抑制作用。
研究表明,枯草芽孢杆菌产生的抗菌物质可以有效抑制木霉菌、立枯病菌等多种病原微生物的生长。
枯草芽孢杆菌被广泛应用于农业生物防治中,用于控制作物病害的发生和传播。
枯草芽孢杆菌在土壤改良中的应用。
枯草芽孢杆菌能够产生多种有益代谢产物,例如植物生长调节剂和有机酸等,这些代谢产物可以改善土壤结构,促进植物的生长和发育。
研究表明,枯草芽孢杆菌可以增强植物的养分吸收能力,提高土壤肥力,并且减轻土壤的盐碱化和重金属污染等不利因素对植物生长的影响。
枯草芽孢杆菌在土壤改良中具有很大的应用潜力。
枯草芽孢杆菌的应用还涉及到土壤生态系统的保护和修复。
土壤生态系统是农业生产的基础,但受到了多种因素的破坏,如化学农药的过度使用、土壤侵蚀和土壤污染等。
枯草芽孢杆菌可以通过改善土壤微生物群落结构和功能,提高土壤的生态效应和稳定性。
研究表明,枯草芽孢杆菌的应用可以促进土壤有机质的积累,改善土壤结构和水分保持能力,并减少土壤中的有害物质含量。
枯草芽孢杆菌在土壤生态系统的保护和修复方面具有一定的潜力。
枯草芽孢杆菌在农业领域的应用研究进展非常广泛。
未来的研究应重点关注枯草芽孢杆菌生物防治作物病害的机制研究、土壤改良的技术优化以及枯草芽孢杆菌在植物营养和生物促进剂中的应用效果评估等方面,以进一步推动枯草芽孢杆菌在农业领域的应用。
枯草芽孢杆菌研究概况国内外关于枯草芽孢杆菌的研究与应用已有100多年的历史,早期大部分工作集中在形态观察、分类鉴定、生理机制、功能发掘及防治等方面。
近年来,对枯草芽孢杆菌的研究渐进到遗传学与分子生物学领域,研究内容体现在特定功能基因的寻找并克隆到需要的物种中或者通过诱变、基因工程等手段对枯草芽孢杆菌生产菌进行遗传改造等。
2.1国外研究概况1945年Johnson等报道,枯草芽孢杆菌具有防治植物病害的作用。
此后,用枯草芽孢杆菌制备生防制剂防治植物病害的研究成为国内外研究的热点。
1980年Papavizas G C报道,枯草芽孢杆菌可以防治水稻等作物的多种土传真菌病害。
1992年Hwang等报道,用枯草芽孢杆菌可以防治豌豆的Rhizoctoni根腐病。
20世纪90年代后,国外已有多种枯草芽孢杆菌制剂投放市场。
美国Agraquest公司用枯草芽孢杆菌(B.subtilis)QST 713菌株和QST 2808菌株分别开发出活菌杀菌剂Serenade TM和Souata AS,已在美国登记使用,叶面施用可防治蔬菜、樱桃、葡萄、葫芦和胡桃的白粉病、霜霉病、疫病、灰霉病等细菌和真菌病害。
GBO3(商品名为Kodiak)和MBI 600(商品名为Subtilex)分别由美国Gustafson公司和Microbio Ltd公司开发,根部施用或拌种可防治镰刀菌(Fusarium spp.)、曲霉属(Aspergillus spp.)、链格孢属(Alternaria spp.)和丝核菌属(Rhizoctonia spp.)引起的豆类、麦类、棉花和花生根部病害。
2001年Gustafson将解淀粉枯草芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌混合制成混合生防药剂,称为BioYield。
解淀粉枯草芽孢杆菌变种(B.subtilis var.amyloliquefaciens FZB24)作为植物促长剂被Taensa公司商品化生产,商品名Taegro TM。
枯草芽孢杆菌与解磷细菌对猕猴桃园土壤及果实品质的影响邵阳;崔孟奇;田霄鸿;曹翠玲;胡景江【摘要】在大田条件下,采用两因素两水平完全正交试验设计方案,从立体生态角度研究了在猕猴桃树体根围施用枯草芽孢杆菌和解磷细菌后对土壤理化性质、土壤微生物数量及果实品质的影响。
结果表明,混合施用枯草芽孢杆菌和解磷细菌后,土壤速效磷、铵态氮含量及磷酸酶活性分别是对照的1.93倍、1.34倍及2.15倍;果实成熟后,其硬度、可溶性糖含量、VC 含量分别是对照的1.21倍、1.06倍、1.18倍,可滴定酸含量降低,是对照的88%。
多元回归统计分析表明,果实品质与土壤有机质、速效磷及磷酸酶活性相关性显著。
混合施用枯草芽孢杆菌和解磷细菌可用来改良高龄猕猴桃果园土壤,且能提高果实品质。
%The reaserch was to explore the effects of Bacillus Subtilis and Phosphobacteria ,which supplied to the rooting zone of Kiwi fruit ,on soil physical ,chemical and microbial population in the rhizosphere soil and the fruit quality by orthogonal experiment of two factors and two levels in the field .The physical ,chemical and microbial population of soil ,leaves and fruits were measured respectively .Results showed that the trees dealt with both of Bacillus Subtilis and Phosphobacteria to the rooting zone had the best signification .The soil available P ,ammonium N contents and phos-phatase activity was 1 .93 ,1 .34 and 2 .15 times the amount of the unprocessed .The firmness ,soluble sugar and Vitamin C content was1 .21 ,1 .06 ,1 .18 times the amount of the unprocessed .The unprocessed titratable acid was 88% of the trees dealt with both of Bacillus Subtilis and Phosphobacteria .The data being analyzed ,fruit quality had a significationpositive correlation with organic matter ,available P contents and phosphatase activity .It is considerable to use both of Bacillus Subtilis and Phosphobacteria to improve the soil characteristic and the fruit quality .【期刊名称】《干旱地区农业研究》【年(卷),期】2016(034)005【总页数】5页(P180-184)【关键词】猕猴桃;有益菌;土壤养分;改良分析【作者】邵阳;崔孟奇;田霄鸿;曹翠玲;胡景江【作者单位】西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学资源环境学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100【正文语种】中文【中图分类】S663.4猕猴桃(ActinidiaChinensis)俗称阳桃、毛桃等,属猕猴桃科(Actinidiaceae)猕猴桃属(Actinidia)植物,是原产于我国的古老野生木质藤本果树。
枯草芽孢杆菌对环保以及农作物的作用枯草芽孢杆菌是一种新型的微生物源生物农药。
枯草芽孢杆菌在防治水稻、小麦、花生、番茄、辣椒、大豆、玉米等作物上的病害有较好的效果,特别是针对小麦白粉病、赤霉病、纹枯病等病害的防治效果更佳,田间增产率更是达到了10%~50%。
枯草芽孢杆菌具有更强的营养物质竞争能力以及氧气竞争优势;定殖、繁殖速度更快,迅速抑制其它病原微生物生存,起到“贴身”保护植物,确保植物健康成长的作用,所以国内专家对枯草芽孢杆菌的评价是“用量少,防效好,绿色又环保,增产又增收”。
一、枯草芽孢杆菌的特点1、绿色环保:对人畜无毒无害、不污染环境、对作物安全。
2、高效广谱:能产生多种抗菌素和酶,具有广谱抗菌活性和极强的抗逆能力。
3、增产提质:枯草芽孢杆菌还能够分泌促进作物生长的活性物质,使植株叶片浓绿肥厚,提高作物免疫力,增产提质效果显著,发酵过程中产生多种氨基酸,对作物有生长调节的作用。
二、枯草芽孢杆菌的作用1、提高作物抗病、抗寒、抗旱能力。
2、增加土壤养分、改良土壤结构、提高肥料利用率。
3、促使土壤中的有机质分解成腐殖质,刺激作物生长。
4、促进作物生长、成熟、降低成本、增加产量、提高收入。
5、有一定的固氮、解磷、解钾作用。
三、枯草芽孢杆菌的作用方式1.竞争作用:拌种或灌根后,枯草芽孢杆菌能够在作物种围、根表面、根内部以及通过植物导管传导到地上部分而在作物根表、根内、茎部、叶部等位点定殖和繁殖,保护作物根部不受病菌侵染和抑制作物体内病原菌扩散,从而达到防病作用。
2.杀菌作用:枯草芽孢杆菌在作物根表、根内、茎部、叶部等位点定殖和繁殖过程中,能产生脂肽类和蛋白类等杀菌物质,从而杀死作物病原菌,达到防病效果。
3.促生作用:枯草芽孢杆菌具有解磷作用,可以将土壤中无效磷转化为能被作物吸收的有效磷,促进作物根系及植株生长,提高了作物的抗病性。
四、枯草芽孢杆菌使用方法1、稻瘟病、纹枯病、稻曲病。
施药方法:水稻孕穗破口期和齐穗期各施药一次。
简析:枯草芽孢杆菌温馨提示②宣传推广、信息调研请拨打编辑部电话************③查看往期精彩内容,点击文末阅读原文,通过关键词查找对应文章………………广告………………近年来,国家对农药的管控力度越来越强,因此绿色健康的农药成分以及使用方式越来越受推崇,这促进了生物农药的发展,尤其是被称为“菌”中之王的枯草芽孢杆菌,其作用范围不断扩大。
枯草芽孢杆菌(B.subtilis)在自然界中广泛存在,活跃于土壤、植物根际、体表等外界环境中,同时还是植物体内常见的内生细菌,对人畜无毒无害,不污染环境,具有显著的抗菌活性和极强的抗逆能力。
其不仅在防治水稻、小麦、花生、番茄、辣椒、大豆、玉米等作物上的病害有较好的效果,对于田间增产率更是达到了10%~50%。
01登记情况在新登记的枯草芽孢杆菌中,主要有5个不同的菌株-QST713、FMCH002、GB03、BU1814及AIB/BS03菌株,而登记这些枯草芽孢杆菌的公司主要是一些大型跨国农化企业,如拜耳、巴斯夫、富美实及被拜耳收购前的AgraQuest公司。
所有登记的枯草芽孢杆菌制剂都为生物杀菌剂,其中富美实公司利用枯草芽孢杆菌FMCH002菌株及地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)FMCH001菌株开发的商品名为F4018-4除了可作为种子处理剂使用,用于防治种子腐烂病、苗期立枯病及破坏性线虫,于2019获得加拿大农药登记。
而在现在的中国农药信息网上,一共有87个有关枯草芽孢杆菌的登记,剂型多为可湿性粉剂。
02作用机理与功效枯草芽孢杆菌在生物防治上主要是通过竞争作用、产生抑菌物质及激活作物防御系统来达到抑菌防病的效果。
1、竞争作用,抑制病菌生长枯草芽孢杆菌可以在作物根际、体表以及土壤中快速、大量的定殖和繁殖,并且能够进入根系,通过导管传导到地上部,在作物根内、茎部、叶片等部位定殖和繁殖,通过对养分和空间的竞争,有效阻止病菌侵染、抑制作物体内病原菌的扩散,从而达到抑菌防病的作用。
常见的生物菌对农作物和土壤的功效一、枯草芽孢杆菌:增加作物抗逆性、固氮。
二、巨大芽孢杆菌:解磷(磷细菌),具有很好的降解土壤中有机磷的功效。
三、胶冻样芽孢杆菌:解钾,释放出可溶磷钾元素及钙、硫、镁、铁、锌、钼、锰等中微量元素。
四、地衣芽孢杆菌:抗病、杀灭有害菌,五、苏云金芽孢杆菌:杀虫(包括根结线虫),对鳞翅目等节肢动物有特异性的毒杀活性。
六、侧孢芽孢杆菌:促根、杀菌及降解重金属,七、胶质芽孢杆菌:有溶磷、释钾和固氮功能,分泌多种酶,增强作物对一些病害的抵抗力。
八、泾阳链霉菌:具有增强土壤肥力、刺激作物生长的能力。
九、菌根真菌:扩大根系吸收面,增加对原根毛吸收范围外的元素(特别是磷)的吸收能力。
十、棕色固氮菌:固定空气中的游离氮,增产。
十一、光合菌群:是肥沃土壤和促进动植物生长的主力部队。
十二、凝结芽孢杆菌:可降低环境中的氨气、硫化氢等有害气体。
提高果实中氨基酸的含量。
十三、米曲霉:使秸秆中的有机质成为植物生长所需的营养,提高土壤有机质,改善土壤结构。
十四、淡紫拟青霉:对多种线虫都有防治效能,是防治根结线虫最有前途的生防制剂。
三种以上多种复合菌相互促进、相互补充,抗土传病害效果远远大于单一菌种。
有益菌群相互协同,共同作用,能使作物达到高产丰产的效果.1、促进快速生长:菌群中的巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌等有益微生物在代谢过程中产生大量的植物内源酶,可明显提高作物对氮、磷、钾等营养元素的吸收率。
2、调节生命活动,增产增收:菌群中的胶冻样芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等有益菌可促进作物根系生长,须根增多。
有益微生物菌群代谢产生的植物内源酶和植物生长调节剂经由根系进入植物体内,促进叶片光合作用,调节营养元素往果实流动,膨果增产效果明显。
与施用化肥相比,在等价投入的情况下可增产15%—30%。
3、果实品质明显提高:菌群中的侧孢芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌等可降低植物体内硝酸盐含量20%以上,能降低重金属含量,可使果实中Vc含量提高30%以上,可溶性糖提高2—4度。
枯草芽孢杆菌对植物的协生作用研究近年来,由于随着人们对自然环境的破坏以及化学肥料与农药的过度使用,植物的营养吸收能力不断减弱,导致土壤质量不断下降,这对于农业生产和自然生态造成了很大的困扰。
因此,如何提高土壤中植物的养分吸收能力,是生态修复中亟需解决的问题。
在这个问题中,选择合适的植物营养促进菌(简称植物促生菌)对于提高土壤中的营养水平有着很大的作用。
在这些植物促生菌中,枯草芽孢杆菌是一种十分重要的菌株,它可以帮助植物增强吸收土壤营养的能力,提高植物的产量和品质。
一、枯草芽孢杆菌的基本概述枯草芽孢杆菌,是一种短小的革兰氏阳性杆菌,其形态为沙漏形或胃囊形。
它可以在广泛的温度和pH值范围内生长,同时可以稳定地存在于土壤中。
枯草芽孢杆菌的一项鲜明特点就是,它对氮的固氮作用十分突出。
在自然环境下,它与许多植物都可以通过形成作用来建立着一种协生关系,这有助于高效地增强植物对营养的吸收能力。
二、枯草芽孢杆菌的营养特点以及养分促进作用1. 枯草芽孢杆菌提供氮源枯草芽孢杆菌对氮元素的固氮能力是它最明显的营养特点之一。
通过对自然界中氮素的还原,枯草芽孢杆菌能够将氮元素转化为植物可直接利用的氨态氮,从而为植物提供充足的氮源。
2. 枯草芽孢杆菌提供磷源除了氮元素外,磷元素也是植物所必需的一种营养素,但其在土壤中的含量往往比较低。
而枯草芽孢杆菌特有的溶磷酸酶活性可以帮助矿化土壤磷,并将其转化为植物可吸收的磷酸盐,从而为植物提供充足的磷元素。
3. 枯草芽孢杆菌提供钾源钾元素是植物体内常见的微量元素之一,它对于提高植物免疫力有很重要的作用。
枯草芽孢杆菌通过分泌有机酸来矿化土壤中的钾元素,并转化为植物可利用的钾离子,从而为植物提供充足的钾源。
三、如何利用枯草芽孢杆菌增强植物的吸收能力?1. 选择合适的生态范围进行施肥枯草芽孢杆菌适应性很广,可以适应于不同区域的生态环境,所以在施用时要先根据作物的种类和当地的实际情况作出选择,这样既能更好地增进植物吸收养分的效果,也可以提高农作物的产量和品质。
枯草芽孢杆菌Bs—15对柿树炭疽病的离体防治效果作者:余贤美侯长明王洁张坤鹏艾呈祥来源:《山东农业科学》2017年第07期摘要:为探讨枯草芽孢杆菌Bs-15对柿树炭疽病的防治潜能,通过平板对峙试验研究Bs-15对柿树炭疽病菌的抑制作用,并通过离体接种试验,研究Bs-15对柿树炭疽病的防治效果。
结果显示,在对峙平板中形成稳定而明显的抑菌带,宽为(0.56±0.05)cm;离体接种试验中,先接种Bs-15菌悬液后接种菌饼处理比先接种菌饼再接种Bs-15菌悬液处理对柿树炭疽病的防治效果好,其抑制率分别为54.76%和47.62%,防治效果分别为78.54%和70.04%,说明枯草芽孢杆菌Bs-15可能通过产生诱导抗性提高防效。
本试验结果表明,枯草芽孢杆菌Bs-15对柿树炭疽病有较好的防治效果,可作为潜在的生防菌株,为柿树炭疽病的防治提供新的途径和方法。
关键词:枯草芽孢杆菌;柿树炭疽病;哈锐炭疽菌;平板对峙试验;离体接种试验中图分类号:S436.65 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2017)07-0125-03Abstract To investigate the control potential of Bacillus subtilis Bs-15 on persimmon anthracnose, the inhibition of Bs-15 to Colletotrichum horri was studied via dual-culture test, and the control effect of Bs-15 on persimmon anthracnose was studied via in vitro inoculation experiment. The results showed that the inhibition zone in dual-cultured plate was (0.56±0.05)cm. The in vitro inoculation experiment showed that the control effect of spraying the bacterium suspension of Bs-15 before inoculating the pathogenic disk was better than that of spraying the bacterium suspension of Bs-15 after inoculating the pathogenic disk with the inhibition ratio of 54.76% and 47.62% and the control efficiency of 78.54% and 70.04%, respectively. It indicated that Bs-15 might have better control efficiency by producing the induced resistance. The results indicated that because of good effect on persimmon anthracnose, Bs-15 could be used as a potential biocontrol bacterial strain and provide a new path and method for control of persimmon anthracnose.Keywords Bacillus subtilis; Persimmon anthracnose; Colletotrichum horri; Dual-culture test; In vitro inoculation experiment柿树炭疽病是危害柿树的一种毁灭性病害,严重时可造成巨大的经济损失,已成为阻碍柿树产业发展的重要因素[1,2]。
DOI:10.16409/ki.2095-039x.2014.04.00230(4)497-502 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2014年8月枯草芽孢杆菌Bs-15在枣树体内和土壤中的定殖及其对土壤微生物多样性的影响余贤美1,侯长明2,王海荣1,安淼1,张琼1,王中堂1,周广芳1*(1. 山东省果树研究所,泰安 271000;2. 山东省农业科学院,济南 250100)摘要:为明确枯草芽孢杆菌Bs-15在枣树定殖能力及其对土壤微生物多样性的影响,本研究通过盆栽试验研究了菌株Bs-15在枣树体内和土壤中的定殖情况,通过固体平板法和Biolog方法分析了菌株Bs-15对土壤微生物种群数量和功能多样性的影响。
结果显示,通过浇灌法和涂抹叶片法,菌株Bs-15均能在枣树根、茎、叶和土壤中成功定殖,定殖量达到104 cfu/g以上的水平。
接种菌株Bs-15后,土壤中细菌和放线菌的数量略有增加,而真菌数量的增长速度极显著下降。
Biolog ECO微生物平板分析结果显示,菌株Bs-15提高了土壤中微生物的每孔颜色平均变化率,72 h后达到极显著差异;提高土壤微生物多样性指数,其中Shannon多样性指数、Simpson多样性指数和McIntosh多样性指数的差异达到极显著水平,Simpson均匀度和McIntosh均匀度的差异达到显著水平。
本研究结果表明菌株Bs-15具有良好的定殖能力,提高了土壤微生物的整体活性以及土壤微生物种群和功能多样性。
关 键 词:枯草芽孢杆菌;定殖;微生物种群;土壤微生物;功能多样性中图分类号:S476;S154.36 文献标识码:A 文章编号:1005-9261(2014)04-0497-06 Colonization of Bacillus subtilis Bs-15 in Jujube Plant and Soil and Its Influence on theMicrobial Diversity in the SoilYU Xianmei1, HOU Changming2, WANG Hairong1, AN Miao1, ZHANG Qiong1,WANG Zhongtang1, ZHOU Guangfang1*(1. Shandong Institute of Pomology, Tai’an 271000, China; 2. Shandong Academy of Agricultural Sciences, Ji’nan 250100, China)Abstract:We evaluated the colonization of B. subtilis Bs-15 in jujube (Zizyphus jujuba Mill. ‘Jinsi 4’) plants and its rhizospheric soil via pot experiments, and measured its effects on the community structure and functional diversity of soil microbes. Results showed that the Bs-15 colonized well in jujube plant and soil by irrigating and leaf daubing, with no less than 104 cfu/g of colonization amount. The number of bacteria and actinomycetes in soil increased but without significance, while that of fungi decreased significantly after Bs-15 inoculation. The Biolog ECO microplates analysis showed that averaged well color development (AWCD) value of the microbial communities in the Bs-15 inoculated soil increased a little before 72 h, and increased significantly after 72 h. In the presence of Bs-15, the parameters (Shannon index, Simpson index and McIntosh index) of the functional diversity of the soil microbial communities increased significantly at 0.01 level, and Shannon uniformity and McIntosh uniformity increased significantly at 0.05 level.Key words: Bacillus subtilis; colonization; microbial communities; soil microorganism; functional diversity植物病害的生物防治是现代农业生产主流方向之一,而生防菌在实际应用中会受到很多因素的影响,在土传病害生防实践中,生防菌被引入土壤时,往往会受到土壤中土著微生物的抑菌作用、生防菌与植收稿日期:2013-12-13基金项目:国家自然科学基金(31100086);国家科技支撑计划(2013BAD14B0301);山东省农业良种工程(2012LZ012,2013LZ12-01)作者简介:余贤美(1976-),博士,副研究员,E-mail:yuxianmei95@;*通信作者,研究员,E-mail:gkskyb@。
498 中国生物防治学报第30卷物根部亲和能力以及其它非生物因子的影响,这是生物制剂防治植物土传病害防效不稳定的重要原因之一[1,2]。
因此,作为生防因子的生防菌能否在靶标植物及其根际定殖,以及对植株根围微生物的影响已成为筛选、评定土传病害生防菌的一个重要指标,并最终决定该生防菌的开发利用潜力[3]。
土壤微生物是维持土壤质量的重要组成部分,土壤微生物多样性能敏感地反映生态系统的功能演变及环境等的影响[4~6]。
生防菌的引入可能会破坏土壤原有微生物的群落结构和功能,从而对整个生态系统产生有害的影响,最大的潜在影响是引入微生物对土壤小生境中原有微生物的取代作用,导致土壤生态系统的多样性和(或)机能降低[7]。
并且,向土壤中引入生防细菌可能会对群落中原有的非病原真菌产生非目标效应,Glandorf等[8]将基因修饰的假单胞菌GMM和未经修饰的野生型菌株WCS358r引入均会对根围原有真菌微生物系统的组成产生短暂的影响;对用这两种菌处理的小麦根围PCR(一种真菌抑制物质)检测发现,基因修饰的假单胞菌GMM处理的小麦根围有PCR,而未经修饰的野生型菌株WCS358r处理的根围则没有。
而所有引入的菌株,不论有没有经过基因修饰,都没有影响土壤微生物种群的代谢能力、土壤硝化潜能、纤维素分解能力、植株的高度和产量。
这些结果表明引入生防菌对土壤微生物群落可能没有大的影响。
这也表明和野生型菌株相比,基因改良菌株对土壤微生态的影响并没有显著的差异。
但是,不论生防菌有无经过基因修饰,在应用前必须对其在农业生态环境中的行为和对土壤生态系统的潜在影响进行风险评估。
枯草芽孢杆菌Bs-15对稻瘟病菌Magnaporthe grisea、芋疫病菌Phytophthora colocasia、西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp. niveum、辣椒枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum、瓜果腐霉Pythium aphaniderm atum等15个病原菌具有较强的抑制作用,而且在温室中对辣椒枯萎病的防效达到44.4%,并诱导产生系统抗性,且具有良好的促进植物生长的作用[9~11]。
本研究分析了枯草芽孢杆菌Bs-15在枣树体内和土壤中的定殖情况,通过Biolog微平板法研究了该菌株对土壤微生物群落及其功能多样性的影响,旨在为枯草芽孢杆菌Bs-15对生态环境的影响及风险性评估提供科学依据,为菌株Bs-15的实际开发应用奠定基础。
1材料与方法1.1 材料供试菌株枯草芽孢杆菌B. subtilis Bs-15为本实验室分离并保存,枣树Zizyphus jujuba Mill.植株为“金丝4号”根蘖分株。
1.2 方法1.2.1 菌株标记本试验选择抗生素利福平作为枯草芽孢杆菌Bs-15抗性标记药剂[12]。
首先将拮抗细菌在牛内膏蛋白胨培养基上划线活化,挑取单菌落转入含利福平5 μg/mL牛肉膏蛋白胨液体培养基中,于30 ℃、200 r/min条件下培养24 h,然后在含有利福平5 μg/mL的牛肉膏蛋白胨培养基(NB)平板上划线培养,待长出单菌落后转入下一浓度梯度中,依次经过含利福平10、20、50、100、150、180、200 μg/mL牛肉膏蛋白胨培养基诱导,直至筛选到稳定的抗利福平200 μg/mL的突变菌株。
1.2.2 土样采集从施用缓释有机肥(山东沃地丰生物肥料有限公司)的枣园中,随机挑选10株“金丝4号”5年树龄的枣树,于根围25 cm范围内,采集0~20 cm深的土壤,土质为砂壤土,微酸性,每株土壤分别过筛去除杂质,并等量混匀备用。
1.2.3 菌株Bs-15的定殖将“金丝4号”枣树根蘖分株栽于盆钵中,成活后备用。
将菌株Bs-15突变株在利福平200 μg/mL的NB培养基中,30 ℃、200 r/min条件下振荡培养24 h,调整菌液浓度,采用浇灌法(用菌液浇灌土壤,使土壤中菌液浓度达到3×106 cfu/g)和涂抹叶片法(菌液浓度3×106 cfu/mL,在叶片上涂抹)进行接种,分别于接菌后1、3、7、14、21、28 d取样进行定殖量的检测[13]。
分别称取0.5 g 根、茎、叶和土,置于装有100 mL、pH 7.0的无菌磷酸缓冲液的三角瓶中,于30 ℃、200 r/min条件下培养30 min,取样品悬浮液1 mL,稀释10倍,取100 μL稀释液,均匀涂布于含利福平200 μg/mL的NB平板上,30 ℃恒温培养2 d,观察并统计平板上的菌落数量。