第十章 化脓性细菌 (purulent bacterium)
一、概念：化脓性细菌是一类能够感染人体并引起化脓性炎症的细菌。
二、分类：
1． 化脓性球菌：G+，葡萄球菌属，链球菌属
G-，脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌
2． 化脓性杆菌：G-，大肠埃希菌属，假单胞菌属
第一节 葡萄球菌属 (Staphylococcus)
在自然界分布广泛，是最常见的化脓性球菌。
模式代表菌株：金黄色葡萄球菌 (S. aureus)
一、 生物学性状
1． 形态与染色：
G+球菌，典型排列方式为葡萄串状，无特殊结构（体外）
2． 培养特性
温度：28-38℃（37℃）；pH：4.5-9.8（7.4）
培养基：普通培养基生长良好.血琼脂平板上生长繁茂并形成全透明溶血环（β溶血）
菌落：中等大小（1-2mm），圆形，光滑，不透明，各种脂溶性色素
3． 生化反应
4． 分类
根据色素，生化反应等不同类型，分为三种：
主要性状 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌
菌落色素 金黄色 白色 白色或柠檬色
血浆凝固酶 ＋ － －
α溶血素 ＋ － －
SPA ＋ － －
甘露醇发酵 ＋ － －
致病性 强 弱 无
5． 抗原结构
（1） 葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A, SPA）
性质：①细菌细胞壁的表面蛋白
②可与人类、豚鼠、小鼠等多种哺乳动物IgG的Fc段非特异性结合，结合后的抗原抗体复合物有以下作用：
a. 抗吞噬
b. 损伤血小板，引起超敏反应
c. 可用于协同凝集试验
（2） 荚膜：黏附作用
（3） 多糖抗原：存在于细胞壁，为磷壁酸中的组分，分为两群
A群――金黄色葡萄球菌
B群――表皮葡萄球菌 (S.epidermidis)
6． 抵抗力
（1） 抵抗干燥，热（80℃，30min），盐（10-15％）
（2） 碱性染料敏感（结晶紫，龙胆紫）
（3） 耐药菌株迅速增多 二、 致病性
第十一章
临床免疫检测仪器
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免疫分析和测定的对象是抗原或抗体，不论是经典的凝集反应还是现代免疫标记技术，其基础都是抗原抗体反应。很显然，在免疫分析技术中，获得优质、专一、高效价和高灵敏的抗体是任何免疫分析技术的物质基础。抗体研究领域的进展大致可分为3个阶段： （1）以1890年Behring发现白喉抗毒素--第一代多克隆抗体为代表，其特点是用抗原免疫动物来获得多克隆抗体；（2）以1975年Kohler创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表；（3）以1994年Winter以基因工程方法制备抗体为代表，这是抗体研究领域出现的又一次技术革命。随着抗体技术制备的日趋进步和抗体载体/（标记物）的不断发现，可以预见，免疫学检测的内容将会越来越多，检测方法和设备也将不断推出，更新，由此对基础和临床免疫研究将起到极大的促进作用。
本部分内容重点介绍目前国内外有关免疫分析仪特别是酶免自动分析技术的应用发展、抗体制备研究概况，免疫检测技术和新型抗体的研究进展。
一、 临床免疫分析仪
目前，在实验室采用的免疫测定分析测定的技术主要有酶免疫、免疫比浊、化学发光、电子发光、荧光偏振以及时间分辨荧光免疫测定及相关自动免疫分析测定仪。各种不同原理的自动免疫测定分析仪在临床实验室中应用越来越广，大大减轻了实验室人员的劳动强度，也极大地提高了测定的准确性和重复性。国内自20世纪80年代生化自动分析仪即取得实际应用。而免疫测定因方法学的特殊性，自动化发展较迟，20世纪80年代后才有自动化分析系统问世。目前除放射免疫测定外，几乎所有的免疫测定方法均可进行全自动分析。除酶免疫测定外，基于其他原理的全自动免疫分析仪必须使用与仪器配套的测定试剂，而有些全自动酶免疫分析系统则属于开放式的，符合标准的各种品牌的ELISA试剂盒均可应用，这样的全自动免疫分析仪灵活性较好，也比较经济。而配套进口试剂一般都较为昂贵，从而限制了相应设备在基层实验室的应用。
猪的血清学试验：对结果的解释
Porcine serology: Interpreting the Results 作者：Carlos Artigas博士 (西班牙Hipra研究室兽医技术服务主任) 译者：秦崇德(上海市农业科学院畜牧兽医研究所)
正处在新世纪之初的当今，信息是我们在所有领域取得进展的最有价值的工具。正是由于这个原因，我们必须从一开始就将血清学分析作为从猪体和猪场取得信息的一个途径。 临床兽医每天并且以后仍将越来越多地在所有与健康和生产率有关的领域内利用血清学分析。在养猪生产中，对于血清学实验室得出的结果进行正确的分析，非常有助于我们得到为作出决策以及改进任何生产参数所需要的信息。
当今猪场的生产水平都非常高，这就使得猪场的疾病处于非常动态化的状况之中，尤其是当突然出现新的、容易引发其它疾病或本身就可引起免疫抑制的病毒性病原体的时候。由于这一动态状况，我们决不能忘记对猪场中所有可控制的参数进行控制的重要性，而这些参数中的一种就是猪的免疫状态。
对于猪来说，疾病就意味着生产率下降，疾病必须被看作是许多问题的集合，而不应被看作是单个的问题。血清学分析则是使这一问题集合得到解决所必需的工具。
血清学分析为我们提供了了解免疫学状态的机会，而我们可将所了解的信息用于： · 预防新的疾病进入猪场：新的疾病进入猪场，主要发生在引进新的后备母猪时；了解公猪中心的免疫状态，就可在采用人工授精时预防将新的疾病引入猪场； · 确定免疫接种的最佳时间：对于许多疾病来说，非常重要的就是要了解母源抗体水平的下降情况； · 了解猪群的健康状况：定期进行血清学分析，就可对不同次取样的分析结果进行比较，从而了解猪群的正常免疫状态(每个猪场的正常免疫状态都是互不同的)； · 进行疾病诊断：在猪场发生了某种疾病时，我们可进行血清学研究而将研究结果与该猪场的正常情况进行比较。发生感染之后，抗体水平通常会在15天内增高2～3倍，具体时间取决于疾病的种类； · 判断保护力水平的高低：在免疫接种之后，我们可根据血清学分析结果而得知血液中抗体水平是否达到了预期水平，这对于了解疾病来说也是非常重要的。在有些情况下，IgG的水平并不能代表保护力水平的高低。 要控制猪场的免疫学状态，是很容易的，费用也不高。说做起来容易，是因为兽医是经常对猪采血的，而且又有许多实验室能够进行高质量的血清学分析。血清学分析的成本非常低，采用ＥＬＩＳＡ技术，我们就可在很短的时间内完成多项测试。 为了能通过血清学分析得到优良的结果和信息，兽医和实验室必须以团队精神协同工作。 临床兽医在开始取样之前必须弄清一些基本问题： · 是哪些猪？ · 有多少猪？ · 如何取样？ · 如何递送样品？ · 什么样的递送服务？ · 哪个实验室？ · 哪一类分析最好 一旦澄清了问题的答案，就可以在一切都得到完全控制的安全条件下开始采样。 另一方面，实验室必须保证他们所作的分析，从接收样品开始直到将结果送达兽医为止的整个过程，都以优良的质量得到完成。 实验室应该按照GLP或ISO的规则，确保分析结果的质量。实验室所遵循的所有标准确保实验室拥有合格的人员、标准而有效的实验设备、采用标准化的试剂、向兽医提供明白无误的结果。 兽医和实验室之间良好的协同工作，可使我们获得非常有价值的结果，其中包含着准确的信息，使我们能据以作出最佳的决策。 定 义 血清学试验：按Tizard的说法，血清学试验是研究如何检测血清中特异性抗体的科学。 血清：血清是血液在凝固过程中分离出来的液体。 血浆：血浆是血液的液体部分。 抗体：抗体是机体为抵抗入侵机体的外来病原体而产生的第二道防卫手段。抗体由蛋白质组成，其结构和编码决定了它可与特定的抗原起反应。抗体可因与新型外来病原体直接接触而产生主动免疫力，也可通过吸吮母乳获得抗体而获得被动免疫力。 免疫学血清分析：研究抗体的动态水平，样品采集于不同的时间或在同一时间采集。 所有抗体检测技术的目的都是揭示感染后或免疫接种后产生的特定抗原／抗体复合体的量。血清学实验室采用的技术有许多不同的种类，例如快速玻片凝集试验、血凝抑制试验、补体结合试验、ELISA(酶联免疫吸附试验)，等等。当今血清学实验室最常用的技术就是ELISA试验，因为采用这一技术能快速进行大量分析，并得到可靠而经济的结果。 在酶联免疫试验中，酶联免疫吸附试验利用标记的结合物(通常是过氧化物酶)使抗原/抗体反应可被肉眼所见。依情况的不同，总是存在一个抗原被结合的固相。最后，会发生变色反应，对其可用ELISA阅读器对其度量从而进行定量，并且总是能对分析的血清进行定性。 ELISA技术有不同的类别，但一般来说，我们可将其分为以下几种：夹心ELISA、间接ELISA、和竞争性ELISA(表１)。
第 1 页 军团菌血清学试验
文章目录*一、军团菌血清学试验的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、军团菌血清学试验的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、军团菌血清学试验的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、军团菌血清学试验的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、军团菌血清学试验的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应
军团菌血清学试验的基本信息
1、定义 军团菌病是近20年来新发现的一种呼吸道传染病,其病原广泛分布于自然界,死亡率高。中国最早在1982年发现军团菌病的病例,并从患者的痰、肺组织及旅馆冷却塔空调水中分离出嗜肺军团菌,尚出现过小范围内流行。军团菌对生长条件有特殊要求,且培养、鉴定周期较长,故血清学检查是诊断此病的重要指标。
用已知不同血清型嗜肺军团菌的诊断菌液,与被检血清混合,如有相应抗体存在,可发生抗原抗体反应,出现肉眼可见的凝集为阳性。
2、专科分类 传染病检查
第 2 页 3、检查分类 病原微生物检查
4、适用性别 男女均适用
5、是否空腹 空腹
军团菌血清学试验的正常值和临床意义
1、正常值 O1∶80。
H1∶160。
A1∶80。
B1∶80。
2、临床意义 军团菌病患者的阳性率为75%～85%。采取急性期和恢复期双份血清测定,其滴度增长≥4倍,且效价≥1∶160时,或单份血清≥1∶320均有诊断价值。
结果阳性可能疾病:军团菌肺炎、军团菌病。
军团菌血清学试验的检查过程及注意事项
1、检查过程 取10mm×100mm试管15排,每排8支,各加生理盐水0.5ml。
另取15mm×150mm试管1支,加生理盐水9ml及待检血清1ml混匀,成为1∶10稀释血清。加入每排第1支试管内各0.5ml。 第 3 页 每排第1管开始,进行倍比稀释至第6管,第7管做为不含血清的菌液对照,第8管做阳性对照。
