固相萃取-气相色谱法测定三七中38种农药残留
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CHINA PORT SCIENCE AND TECHNOLOGY
固相萃取-气相色谱法测定三七中38种农药残留
张飞*
摘 要 三七中药材产品经乙睛提取，盐析，采用C18和硅胶固相萃取柱净化后，用气相色谱仪检测38种有机氯、
拟除虫菊酯农药残留含量「结果表明：C18和硅胶固相萃取柱净化能够有效除去三七药材中挥发油、有机酸、皂昔等大
部分共萃物和干扰组分，获得较好的净化效果；3个不同浓度水平添加回收率在78.6% ~ 120.3%之间，相对标准偏差为
0.1% - 12.5%；校准曲线线性相关系数均大于0.999。该方法操作简单、快速稳定、除杂效果明显，适用于三七中药材产
品中多种农药残留的日常检测工作「
关键词C1&硅胶；固相萃取；气相色谱；农药残留；三七；中药材
Determi nation of 38 Pesticide Residues in Panax
Notoginseng with Solid Phase Extraction Column
Purification and Gas Chromatography
ZHANG Fei* 1
第一作者：张飞(1986—),男，汉族，助理工程师，从事食品及农产品检验工作，E-mail： ****************1.天保海关云南文山6630991. TianBao Customs, Wenshan Yunnan 663099Abstract The Chinese herbal medicinal product of Wenshan panax notoginseng was extracted with acetonitrile, salted out,
and purified with C18 and silica gel solid phase extraction column. The residual content of 38 kinds of organochlorine and pyrethroid
pesticides was detected by gas chromatography. Purification can effectively remove most co-extracted substances and interfering
components such as volatile oils, organic acids, sapon ins, etc., and achieve a better purification effect； the recovery rate of high and
low concentration levels is 78.6%-120.3%, the relative standard deviation is 0.1%-12.5%； The linear correlation coefficients of the
calibration are all greater than 0.999. The method is simple to operate, fast and stable, and has obvious impurity removal effects. It is
suitable for daily detection of multiple pesticide residues in Chinese medicinal products Wenshan panax notoginseng.
Keywords C18； silica gel； solid phase extraction ； gas chromatography； pesticide residues； panax notoginseng； Chinese herbal
medicinal
三七是我国三大名贵中药材之一，享有“北人参
南三七”的美誉，是血塞通、云南白药等多种药品的
重要原料来源。然而三七作为一种药食同源的产品， 其种植、加工过程中难免会造成农药残留污染，给产
品质量和消费者身体健康造成影响，同时由于我国中
药材农药残留标准与国际标准存在一定差距，欧洲、
72中国口岸科学技术
美国、日本等发达国家严格的技术性贸易措施，使得
农药残留污染成为制约三七中药材走向世界的一个重
要因素。
目前，三七药材中农药残留含量的测定主要包括
样品前处理和仪器分析两大步骤.其中以前处理最为
关键，包括目标化合物的提取、净化等内容。由于
三七中含有皂昔、有机酸、氨基酸、黄酮、笛醇、糖
类、挥发油、色素等复杂的植物化学成分，对有机氯
和拟除虫菊酯等农药残留目标化合物的检测产生严重
干扰，因此净化成为三七药材农药残留检测的关键。
文献记载和报道的净化方法有固相萃取、固相微萃取、
QuEChERS、浓硫酸磺化、基质固相萃取净化（MSPD ）
和碳纳米管等，其中又以弗罗里硅土柱、C18柱、氨
基柱、活性炭柱、石墨化碳/氨基复合柱等固相萃
取柱的应用最为广泛。除此之外，我国也发布了专
门针对三七药材农药残留检测方法的产品标准，如
GB/T 19086-2008《地理标志产品文山三七》山规定
了六六六、滴滴涕、五氯硝基苯和甲霜灵的检测方法。
2017年中国中药协会发布并实施的《无公害三七药
材及饮片农药与重金属及有害元素的最大残留限量》
团体标准冏，是迄今为止针对性最强、检测项目和限
量规定最全、最为广泛的三七药材产品农药残留检测
标准，标准采用水和乙睛振荡提取，QuEChERS提取
盐分离，Carb/NH2净化，气相色谱-质谱和液相色谱-
质谱法测定三七药材及饮片中206项农药残留。
我国药典（2020版）四部通则农药残留测定方法冋
中，关于有机氯和拟除虫菊酯农药残留的测定，分别
采用浓硫酸、凝胶渗透色谱（GPC ）配合弗罗里硅土柱、
混合小柱（无水硫酸钠、弗罗里硅土、微晶纤维素和
氧化铝）以及分散固相萃取的方式净化，其中分散固
相萃取使用了硅胶等吸附材料，美国药典⑷则直接使
用硅胶固相萃取柱净化。除上述药典方法之外，未见
硅胶材料或其柱产品用于三七农药残留检测的文献报
道。最常用的有机氯和拟除虫菊酯净化柱为弗罗里硅
土柱，其与硅胶柱虽同属于正相柱，结构和吸附原理
相似，但硅胶较弗罗里硅土极性更大，吸附性能更强,
更适宜极性杂质的综合吸附和有机氯、拟除虫菊酯等
弱极性目标化合物的洗脱，本文以C18和硅胶固相萃取柱作为三七药材产品
提取液净化的手段，操作简单、快速有效，对目标物
和共萃物的分离净化效果较好.验证方法的线性、回
收率、检出限和精密度等指标获得满意结果.为三七
药材产品的农药残留日常检测和快速筛查提供参考
1实验部分
1.1仪器、试剂与材料
美国安捷伦公司7890A气相色谱仪.配电子捕获
检测器（ECD）；瑞士梅特勒公司METTLER AE240
万分之一分析天平；德国IKA公司IKA-WERKE
HS501 digital KS501数显震荡摇床；德国Sigma台式
高速冷冻离心机3K15；德国IKA公司IKA MS3涡旋
混合器；瑞士 Buchi公司R-215型旋转蒸发仪；大德
公司DF-45中药材连续投料粉碎机器；临海谭氏真
空设备有限公司SHZ-II1B循环水式多用真空泵。
38种有机氯和拟除虫菊酯农药试剂购于农业农
村部环境保护监测所，浓度lOO^g/mL,正己烷介质；
乙睛，色谱纯，默克公司；无水硫酸钠，分析纯，国
药集团化学试剂有限公司.用前在650°C灼烧4 h,
贮存于干燥器中备用；氯化钠，分析纯，国药集团
化学试剂有限公司；Supelclean ENVI-18固相萃取
小 柱,2 g/12 mL, Supelco 公 司；DiscoverY DSC-Si
SPE 小柱,500 mg/6 mL, Supelco 公司。
三七药材样品三七根（15 ~ 60头不等），购于
文山三七国际交易市场。
1.2实验方法
1.2.1农药标准溶液的配制
标准中间液，根据每种农药在仪器上的响应和
分离情况将混标溶液分为2组，分组情况见图1、
图2,除氯菊酯、氯氧菊酯两种外，分别将其余28
种有机氯农药和8种拟除虫菊酯农药，用正己烷稀
释至20|xg/mL,取50|xL±述溶液与氯菊酯、氯氧
菊酯母液（lOOng/mL ）配制成混合标准溶液，其中
氯菊酯、氯氧菊酯混标浓度为Sjig/mL,其余28种
有机氯农药和8种拟除虫菊酯混标浓度为1 iig/mL
标准系列溶液.分别取标准中间液50“L、
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IOOjjlL, 200qL用正己烷稀释至ImL,得到标准溶液
系列I质量浓度分别为C 0.05卩g/mL、D 0.1 g/mL、E
0.2jig/mL,再取100»LD、E用正己烷稀释至］mL,
得到标准溶液系列II质量浓度分别为A 0.01 p_g/mL、
B0.02^g/mL,标准溶液系列I、II按照浓度从低到高
分另 为 A 0.01 |x g/mL、B0.02p.g/mL、C 0.05 p, g/mL、
D 0.1 p, g/mL s E 0.2 |i g/mL,以此绘制标准工作曲线。
上述农药标准溶液均贮存于-18 ± 4°C冰箱中。
1.2.2样品制备
三七样品采用四分法缩分，取约100 g样品，用
粉碎机粉碎，过100目标准检验筛，常温干燥器中保
存备用。
1.2.3目标化合物提取
准确称取粉碎好的样品2.0 g（精确至0.0001 g）
于80 mL离心管中，加纯水10 mL涡旋混匀，浸泡30
min,再加入乙睛50 mL振荡提取30 min,加入3 ~ 5 g
氯化钠后剧烈振摇1 min,然后在6000 r/min下离心
5 min,取上清液10 mL待净化。
1.2.4共萃物分离净化
将Supelclean Envi -18柱放入固定架上，将上述
提取液转移至固相萃取小柱上，加样前先用10 mL乙
睛预洗，下接平底烧瓶，并用15 mL乙睛洗涤小柱，
将收集的提取液和洗涤液在45弋水浴中旋转浓缩至
近干，2mL正己烷复溶，待下一步净化。将DSC-Si SPE小柱放入固定架上，小柱中加入
lcm高的无水硫酸钠层，用5 mL二氯甲烷-正己烷
（1：9）、5mL正己烷溶液预洗.弃去淋洗液，待淋
洗液面高于无水硫酸钠层1 ~ 2 mm时，加入2 mL
正己烷提取液，用20 mL -氯甲烷-正己烷（1：9）
混合溶液洗脱.收集洗脱液，并于45弋水浴中旋蒸
转浓缩至近干，加入5mL正己烷进行溶剂置换，重
复1 ~ 2次，最后用正己烷定容至2 mL,用于气相
色谱仪测定。
1.2.5气相色谱条件
色谱柱：安捷伦HP-5色谱柱，规格：30
m x0.25 mm x0.25|xm；柱温箱升温程序：60弋保持
1 min,以 20°C/min 升温至 180°C,保持 1 min,以
5°C/min升温至280°C.保持6 min；进样口温度：
280°C；检测器温度：300°C ；载气：高纯％（纯度
