藿香正气丸的质量标准研究

藿香正气丸的质量标准研究

陈雪琴;周仔莉;贾文江;王艳萍

【摘 要】目的 建立藿香正气丸的薄层鉴别和含量测定方法.方法 采用TLC法定性鉴别藿香正气丸中的广藿香、厚朴、陈皮、白芷、甘草及白术;采用HPLC法测定制剂中橙皮苷、厚朴酚及和厚朴酚的含量.结果 藿香正气丸中广藿香、厚朴、陈皮、白芷、甘草及白术的TLC图谱斑点清晰、重复性好、专属性强、分离较好、方法简便.制剂中橙皮苷、和厚朴酚及厚朴酚的线性范围分别为0.95～9.46,0.32～3.16和0.89～8.90 μg,水丸平均加样回收率分别为100.63％,101.41％和100.17％,RSD值分别为0.94％,1.23％和0.45％;浓缩丸平均加样回收率分别为100.87％,101.30％和100.40％,RSD值分别为1.28％,1.14％和1.22％;2个指标测定的精密度、重复性、稳定性和准确度RSD值均低于3.00％.结论 该方法简便、快捷,结果准确、可靠,可作为该制剂的质量控制标准.

【期刊名称】《西北药学杂志》

【年(卷),期】2019(034)001

【总页数】5页(P20-24)

【关键词】藿香正气丸;TLC法;HPLC法;质量标准

【作 者】陈雪琴;周仔莉;贾文江;王艳萍

【作者单位】商洛市药品检验所,商洛726000;商洛市药品检验所,商洛726000;商洛市药品检验所,商洛726000;商洛市药品检验所,商洛726000

【正文语种】中 文 【中图分类】R282

藿香正气丸(水丸及浓缩丸)是由广藿香、紫苏叶、白芷、白术(炒)、陈皮、半夏(制)、厚朴(姜制)、茯苓、桔梗、甘草、大腹皮、大枣和生姜制成[1]，具有解表化湿、理气和中的功效[2-8]，用于外感风寒、头痛昏重等症，临床一般用于治疗感冒、荨麻疹、酸中毒和气滞胃痛等病症[9-14]。此方制剂简单、疗效明确，已被应用多年，但现有的质量标准仅限于简单的显微观察及一些常规检查项，为更好地控制其质量，参考对加味藿香正气丸的研究[15-19]及藿香正气水、藿香正气滴丸等的标准[20-26]，本文分别对藿香正气丸水丸和浓缩丸主要成分进行TLC鉴别和含量分析研究，以期为其提供更全面的质控标准。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waters e2695型高效液相色谱仪(美国沃特世公司)；赛多利斯SQP型电子分析天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司)；AS1512560型超声波清洗机(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)；四号药筛(湖南省常德粒度分析仪器厂)。

1.2 试药 橙皮苷对照品(批号110721-201617，质量分数为96.1%)，和厚朴酚对照品(批号110730-201614，质量分数为99.3%)以及厚朴酚对照品(批号110729-200411)均购自中国食品药品检定研究院；藿香正气丸(水丸)(批号160501，陕西香菊药业集团有限公司)，(批号：007509，007607，陕西汉王药业有限公司)；藿香正气丸(浓缩丸)(批号160504，南京同仁堂药业有限责任公司)，(批号20160201，黑龙江葵花药业股份有限公司)，(批号20150807，马鞍山天福康药业有限公司)，(批号14C30，兰州佛慈制药股份有限公司)；乙腈、甲醇均为色谱纯；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 广藿香和厚朴的TLC鉴别 取本品浓缩丸2.5 g(水丸6 g)，研细，加乙醚20 mL，超声处理(150 W，45 Hz)15 min，过滤，挥干滤液，残渣加乙酸乙酯1 mL溶解，作为供试品溶液。另取和厚朴酚、厚朴酚及百秋李醇对照品适量，分别加乙酸乙酯制成3种质量浓度均为1 mg·mL-1的对照品溶液。分别吸取上述供试品溶液10 μL，3种对照品各5 μL，点于同一硅胶G板上。展开剂为乙酸乙酯-石油醚(60～90 ℃)-甲酸(15∶85∶2)，展开，取出，晾干，喷以50 mL·L-1的香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。结果表明，供试品色谱与对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点。见图1A。

图1 TLC图

A.广藿香、厚朴：1.厚朴酚对照品；2.和厚朴酚对照品；3.百秋李醇对照品；N1～N4.浓缩丸供试品；S1～S3.水丸供试品。B.陈皮：S1～S3.水丸供试品；N1～N4.浓缩丸供试品；1.陈皮对照药材；2.橙皮苷对照品。C.甘草：1.甘草酸铵对照品；S1～S3.水丸供试品；N1～N4.浓缩丸供试品。D.白术：N1～N4.浓缩丸供试品；S1～S3.水丸供试品；1.白术对照药材。E.白芷：S1～S3.水丸供试品；1.白芷对照药材；2.欧前胡素；3.异欧前胡素；N1～N4.浓缩丸供试品。

Fig.1 TLC chromatograms

A.Herba Pogostemonis and Magnolia officinalis Cortex:1.magnolol

reference substance；2.honokiol reference substance；3.autumn lee

alcohol reference substance；N1-N4.concentrated pills sample；S1-S3.water pills sample.B.Pericarpium Citri Reticulatae:S1-S3.water pills

sample；N1-N4.concentrated pills sample；1.Pericarpium Citri Reticulatae

contrast medicinal materials；2.aurantiamarin reference

substance.C.Glycyrrhizae Radix et Rhizoma:1.monoammonium

glycyrrhizinate reference substance；S1-S3.water pills sample；N1-N4.concentrated pills sample.D.Rhizoma Atractylodis Macrocephalae:N1-N4.concentrated pills sample；S1-S3.water pills sample；1.Rhizoma

Atractylodis Macrocephalae contrast medicinal materials.E.Angelicae

Dahuricae Radix:S1-S3.water pills sample；1.Angelicae Dahuricae Radix

contrast medicinal materials；2.imperatorin reference substance；

3.isoimperatorin reference substance；N1-N4.concentrated pills sample.

2.2 陈皮的TLC鉴别 取本品浓缩丸2.5 g(水丸6 g)，研细，加水20 mL，超声处理(150 W，45 Hz)5 min使溶解，加20 mL环己烷振摇提取，分取水层(环己烷液备用)，用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液(水层备用)，挥干溶剂，加甲醇2 mL使残渣溶解，作为供试品溶液。称取0.5 g陈皮对照药材，加20 mL甲醇，超声处理(150 W，45 Hz)30 min，过滤，挥干溶剂，加甲醇1

mL使残渣溶解，作为对照药材溶液。取橙皮苷对照品，制成甲醇饱和溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液5 μL，对照品溶液和对照药材溶液各2 μL，点于同一硅胶G(用40 mL·L-1醋酸钠溶液制备)薄层板上。展开剂为甲醇-乙酸乙酯-水(17∶100∶10)，展开，取出，晾干，喷50 mL·L-1的三氯化铝乙醇溶液，置于紫外光灯365 nm处检视。结果显示，供试品色谱中在与陈皮对照药材色谱和橙皮苷对照品色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。见图1B。

2.3 甘草的TLC鉴别 取2.2项下的水层，加正丁醇振摇提取3次，每次10 mL，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次10 mL，弃水层，回收正丁醇液的溶剂至干，加甲醇2 mL使残渣溶解，作为供试品溶液。取适量甘草酸铵对照品，加甲醇制成质量浓度为2 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液。分别吸取上述2种溶液各3

μL，点于同一硅胶GF254板上，展开剂为正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(10∶3∶4)，展开，取出，晾干，置于紫外光灯254 nm处检视。结果显示，供试品色谱中，在与甘草酸铵对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点。见图1C。 2.4 白术的TLC鉴别 取本品浓缩丸2.5 g(水丸6 g)，研细，加20 mL正己烷，超声处理(150 W，45 Hz)15 min，过滤后挥干溶剂，残渣加正己烷1 mL使溶解，作为供试品溶液。称取1 g白术对照药材，同法制成对照药材溶液。分别吸取供试品溶液和对照药材溶液各5 μL，点于同一硅胶G板上。展开剂为乙酸乙酯-石油醚(1∶5)(60～90 ℃)，展开，取出，晾干，置于紫外光灯365 nm处检视。结果显示，供试品色谱中在与白术对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。见图1D。

2.5 白芷的TLC鉴别 取2.2项下的环己烷液，低温回收溶剂至干，加1 mL乙酸乙酯溶解残渣，作为供试品溶液。取白芷对照药材0.5 g，加乙醚10 mL，浸渍振摇1 h，过滤后挥干滤液，加乙酸乙酯1 mL使残渣溶解，作为对照药材溶液。取异欧前胡素和欧前胡素对照品各适量，分别加乙酸乙酯制成质量浓度均为1

mg·mL-1的2种对照品溶液。吸取供试品溶液和白芷对照药材溶液各5 μL，对照品溶液各3 μL，点于同一硅胶G板上。展开剂为乙醚-石油醚(2∶3)(60～90 ℃)，展开，取出，晾干，置于紫外光灯365 nm处检视。结果显示，供试品色谱中，在与白芷对照药材及异欧前胡素和欧前胡素对照品色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。见图1E。

2.6 HPLC测定

2.6.1 色谱条件的确定与系统适用性实验 填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相A为乙腈，流动相B为水，梯度洗脱，洗脱程序为：0～30 min为25%→75%A，30～40 min为75%→80%A，40～60 min为80%→25%A；流速为1.0

mL·min-1；波长为283 nm；柱温为25 ℃。按照橙皮苷、厚朴酚与和厚朴酚峰计算理论塔板数应不低于3 000，供试品溶液的制备见2.6.3项下方法，取供试品各20 μL，分别注入液相色谱仪，橙皮苷、厚朴酚与和厚朴酚理论塔板数均大于3

000，分离度大于1.5，符合要求。 2.6.2 混合对照品溶液的制备 精密称取对照品橙皮苷、和厚朴酚以及厚朴酚11.80，5.0和8.40 mg，置于同一25 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液。制成含橙皮苷、和厚朴酚以及厚朴酚对照品质量浓度分别为0.453，0.199和0.336 μg·mL-1的混合对照品溶液。

2.6.3 供试品溶液的制备 精密称取研细的藿香正气丸(水丸)和藿香正气丸(浓缩丸)2.17和0.83 g，分别置于250 mL具塞锥形瓶中，精密加入体积分数为70%的甲醇溶液25 mL，混匀，称定质量，超声30 min，放冷，补足减失的质量，过滤，取续滤液，过0.45 μm微孔滤膜，即得供试品溶液。见图2。