微生物的纯培养生长曲线及繁殖
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第六章 微生物的生长及其控制1
获得同步生长的方法： 获得同步生长的方法：
同步培养法
诱导法
筛选法
化化化化 物物化化
过过过 区区区区区区区区过 膜膜膜过
获得同步生长的方法主要有两类： 获得同步生长的方法主要有两类：
环境条件诱导法：变换温度、光线、培养基等。 环境条件诱导法：变换温度、光线、培养基等。造成与正常细 胞周期不同的周期变化。 胞周期不同的周期变化。 机械筛选法：选择性过滤、梯度离心。物理方法，随机选择， 机械筛选法：选择性过滤、梯度离心。物理方法，随机选择， 不影响细胞代谢。 不影响细胞代谢。
☆以细菌为例介绍无分支单细胞微生物群体生长规律，其结 以细菌为例介绍无分支单细胞微生物群体生长规律， 论也基本适用于酵母菌。 论也基本适用于酵母菌。 ☆生长曲线代表了细菌在新的环境中从开始生长、分裂直至 生长曲线代表了细菌在新的环境中从开始生长、 死亡的整个动态变化过程。 死亡的整个动态变化过程。 ☆每种细菌都有各自的典型生长曲线，但它们的生长过程却 每种细菌都有各自的典型生长曲线， 有着共同的规律性。一般可以将生长曲线划分为四个时期。 有着共同的规律性。一般可以将生长曲线划分为四个时期。
二、以数量变化对微生物生长情况进行测定 （一）直接法
将待测样品制成菌悬液，适当稀释， 将待测样品制成菌悬液，适当稀释，加入血球计数板方 格网的计数室内，在显微镜下直接计数； 格网的计数室内，在显微镜下直接计数；因为计数室的 体积一定， 体积一定，所以能够计算出每毫升待测样品中的细胞个 数； 特点：全菌计数，不区分死菌与活菌； 特点：全菌计数，不区分死菌与活菌； 适用于单细胞微生物：细菌、酵母菌； 适用于单细胞微生物：细菌、酵母菌； 要点：菌悬液浓度应在 个细胞/毫升左右 毫升左右； 要点：菌悬液浓度应在108个细胞 毫升左右；
第六章微生物的生长及其控制
t2 - t1
3.322(lgx2-lgx1) t2 - t1
3.322(lgx2-lgx1)
2020/12/8
25
一些细菌的代时
菌名
培养基 培养温度 代时
E. coli（大肠杆菌） 肉汤
37℃ 17min
E. coli
牛奶
37
12.5
Enterobacter aerogenes（产气肠细菌）
肉汤或牛奶 37
一般连续培养器 固定化细胞连续培养器
实验室科研用：连续培养器 发酵生产用：连续发酵罐
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40
（1）恒浊器 — 恒浊连续培养
Ø特点：基质过量，微生物始终以最高速率进行生长 ，并可在允许范围内控制不同的菌体密度；但工艺 复杂，烦琐。 Ø使用范围：用于生产大量菌体、生产与菌体生长相 平行的某些代谢产物，如乳酸、乙醇等。
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23
（二）指数期
1、特点： Ø 生长速率常数R最大，即代时最短; Ø细胞进行平衡生长，菌体大小、形态、生理特征等比较一致; Ø酶系活跃，代谢最旺盛。
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24
x2
2、指数期中的的
三个重要参数
x1
t1
t2
u繁殖代数 n=3.322(lgx2-lgx1)
u生长速率常数R= u代时G=
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29
（三）稳定期
1、特点： （1）R=0，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等，或正生长与负生长相等的动态平衡之中。 （2）菌体产量达到了最高点。 （3）菌体产量与营养物质的消耗间呈现出有规律的比例关系。 （4）细胞内开始积聚糖原、异染颗粒和脂肪等内含物；芽孢杆菌一般在这时开始形成芽孢； （5）通过复杂的次生代谢途径合成各种次生代谢物。
第六章 微生物生长
恒化连续培养
随着细菌的生长，限制性因子的浓
度降低，致使细菌生长速率受限，但同 时通过自动控制系统来保持限制因子的 恒定流速，不断予以补充，就能使细菌 保持恒定的生长速率。 常见的限制性营养物质有作为氮源 的氨、氨基酸；作为碳源的葡萄糖、乳 酸及生长因子，无机盐等。
三、同步培养
微生物细胞极其微小，但它也有一个自小到大 的过程，即个体生长。要研究微生物的个体生 长，在技术上是极为困难的。 目前主要使用的方法是： 同步培养技术分析细胞各阶段的生物化学特性 变化。 电子显微镜观察细胞的超薄切片。
死亡原因？ 营养短缺；代谢毒物增 多；pH、Eh改变；溶氧 不足。
t
时间
稳定期与生产实践
指导思想：延长稳定期。 措施： 1.调节pH； 2.注意降温、通风； 3.中和排除有毒代谢产物； 4.稳定期是生产收获时期，注意把握好收获时机。
（4）衰亡期（老年）
死亡率＞出生率 ？ 细胞畸形 细胞死亡,出现自溶 有的微生物细胞产生或释放出一些产物。 如氨基酸、转化酶、抗生素等。现象。
单细胞微生物典型生长曲线
生 长 速 + 率 0 指 数 期
延滞期 指数期 稳定期 衰亡期
_
菌 数 目 的 对 数 值
延 滞 期
总菌数
稳定期
衰 亡 期
活菌数
0 时间t
微生物的数量很大，都是10的n次方，取对数作图时 方便，0-10代表1～1010
（1）延滞期－“万事开头难”
特征： 代谢活跃，个体体积、重量增加，
（2）指数期（青年）
快，平均代时（繁殖一代的时间）最短， 生长速率常数最大。 细胞的化学组成、形态、生理特性比较一致。
微生物的生长规律
Lactobacillus acidophilus
Milk
Rhizobium japonicum
Mannitol-salts-yeast extract
Mycobacterium tuberculosis
Synthetic
Treponema pallidum
Rabbit testes
Generation Time (minutes)
第二节 微生物的生长规律
一、微生物的个体生长和同步生长
由于微生物细胞极其微小，研究其个体生长存在着技 术上的困难。 •同步生长的概念：一个细胞群体中各个细胞都在同一 时间进行分裂的状态，称为同步生长（synchronous growth） ，进行同步分裂的细胞称为同步细胞。 •同步细胞群体在任何一时刻都处在细胞周期的同一相， 彼此间形态、生化特征都很一致，因而是细胞学、生 理学和生物化学等研究的良好材料
S. lactis
Salmonella typhi（伤寒沙门氏菌）
Azotobacter chroococcum（褐球固氮菌）
Mycobacterium tuberculosis（结核分枝杆 菌）
Nitrobacter agilis（活跃硝化杆菌）
培养基 肉汤 牛奶 肉汤或牛奶 组合 肉汤 肉汤 牛奶 牛奶 乳糖肉汤 肉汤 葡萄糖 组合
2.无分支单细胞微生物的群体生长 曲线
☆以细菌为例介绍无分支单细胞微生物群体生长规律， 其结论也基本适用于酵母菌。
☆生长曲线代表了细菌在新的环境中从开始生长、分裂 直至死亡的整个动态变化过程。
☆每种细菌都有各自的典型生长曲线，但它们的生长过 程却有着共同的规律性。一般可以将生长曲线划分为四 个时期。
★影响延迟期长短的因 素
食品微生物第五章微生物的生长与控制
生长曲线以少量纯培养细菌接种有限的液体培养基，并在培养过程中定时取样测数，可以发现细菌的生长有一定的规律，若以时间为横坐标，菌数的对数为纵坐标，可以绘出一条类似于S形的曲线，这就是细菌的生长曲线。
由生长曲线可将细菌的群体生长划分为4个时期：延迟期、对数期、稳定期、衰亡期。
延迟期这个时期内的细菌细胞通常表现为个体变长，体积增大和代谢活跃，细胞内的RNA含量增加使细胞质的嗜碱性增强，并由于代谢活性的提高而使贮藏物消失；细胞对外界理化因子（如NaCl、热、紫外线、x—射线等）的抵抗能力减弱。
细菌延滞期的长短取决于菌种的遗传特性、菌龄及接种前后培养条件的差异等。
将处于对数期的培养物接种到相同的培养环境中可以缩短乃至消除延滞期。
对数期生长旺盛，代谢活力增强，分裂速度加快，菌数以几何级数增加，代时稳定，其生长曲线表现为一条上升的直线。
稳定期在对数末期，由于营养物质(包括限制性营养物质)的逐渐消耗,有生理毒性的代谢产物在培养基中的积累及培养环境条件中pH和氧化还原电位Eh等对细菌生长不利的变化，使细菌的生长速度降低，增殖率下降而死亡率上升，当两者趋于平衡时，就转入稳定期。
可以通过补料，调节ｐH、温度或通气量等措施来延长稳定期衰亡期细菌在经过稳定期后，由于营养和环境条件进一步恶化,死亡率迅速增加，以致明显超过增殖率，这时尽管群体的总菌数仍然较高，但活菌数急剧下降，其对数与时间呈反比，表现为按几何级数下降，生长曲线直线下垂，有人又称其为对数死亡期。
这个时期的细胞常表现为多形态，产生许多大小或形态上变异的畸形或退化型，其革兰氏染色亦不稳定，许多G+细菌的衰老细胞可能表现为G-。
恒浊法和恒化法培养核心内容是什么？大概过程是指什么？1.恒浊连续培养不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定的连续培养方法叫恒浊连续培养。
在恒浊连续培养中装有浊度计，借光电池检测培养室中的浊度(即菌液浓度)，并根据光电效应产生的电信号的强弱变化，自动调节新鲜培养基流入和培养物流出培养室的流速。
微生物生长与控制
本章学习要点
微生物生长的研究方法 环境因素对微生物生长的影响 微生物生长的控制
生长与繁殖的概念
生长——微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代谢， 当同化作用大于异化作用时，生命个体的重量和体积 不断增大的过程。
繁殖——生命个体生长到一定阶段，通过特定方式产 生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学 过程。
典型的生长曲线
延对 滞数 期期
稳定期
衰亡期
生长速率常数(R)=分裂次数(代)/单位时 间
典型的生长曲线按照生长速率常数（growth race constant）不 同分为延滞期、对数期、稳定期和衰亡期
1.延滞期（lag phase）
其它名称：停滞期、调整期、适应期 1）现象：活菌数没增加，曲线平行于横轴。 2）特点：
2、对数期（logarithmic phase）
其他名称：指数期
指细胞以几何级数速度分裂的一段时期
1）特点：
Ø生长速率常数最大，即代时最短 Ø细胞进行平衡生长，菌体大小、形态、生理特征等比较一致 Ø代谢最旺盛
2） 影响因素：
Ø 菌种 Ø 营养成分 Ø 营养物浓度﹡ Ø 培养温度
E.coli 17 分，结核杆 菌 792—932分
单批培养
连续培养
时间
（二）连续培养器
按控制方式分
内控制（控制菌体密度）：恒浊器 外控制（控制培养液流速、以控制
连
生长速率）：恒化器
续 培
按培养器的级数分
单级连续培养器 多级连续培养器
菌体生成器 产物合成器
养
按细胞状态分
一般连续培养器 固定化细胞连续培养器
器
按用途分 实验室科研用：连续培养器 发酵生产用：连续发酵罐
微生物生长的研究方法 环境因素对微生物生长的影响 微生物生长的控制
生长与繁殖的概念
生长——微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代谢， 当同化作用大于异化作用时，生命个体的重量和体积 不断增大的过程。
繁殖——生命个体生长到一定阶段，通过特定方式产 生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学 过程。
典型的生长曲线
延对 滞数 期期
稳定期
衰亡期
生长速率常数(R)=分裂次数(代)/单位时 间
典型的生长曲线按照生长速率常数（growth race constant）不 同分为延滞期、对数期、稳定期和衰亡期
1.延滞期（lag phase）
其它名称：停滞期、调整期、适应期 1）现象：活菌数没增加，曲线平行于横轴。 2）特点：
2、对数期（logarithmic phase）
其他名称：指数期
指细胞以几何级数速度分裂的一段时期
1）特点：
Ø生长速率常数最大，即代时最短 Ø细胞进行平衡生长，菌体大小、形态、生理特征等比较一致 Ø代谢最旺盛
2） 影响因素：
Ø 菌种 Ø 营养成分 Ø 营养物浓度﹡ Ø 培养温度
E.coli 17 分，结核杆 菌 792—932分
单批培养
连续培养
时间
（二）连续培养器
按控制方式分
内控制（控制菌体密度）：恒浊器 外控制（控制培养液流速、以控制
连
生长速率）：恒化器
续 培
按培养器的级数分
单级连续培养器 多级连续培养器
菌体生成器 产物合成器
养
按细胞状态分
一般连续培养器 固定化细胞连续培养器
器
按用途分 实验室科研用：连续培养器 发酵生产用：连续发酵罐
微生物7 微生物的生长及其控制
第七章 微生物的生长及其控制
z z z z z z
生长 (growth)：个体体积或重量的变化 繁殖 (reproduction)：个体数量的变化 个体生长→个体繁殖→群体生长 群体生长＝个体生长 ＋ 个体繁殖 生长和繁殖是交替进行的 衡量群体生长的量： 重量、体积、密度、浓度、个体数目等 生理指标：测含氮量、测含碳量、测磷、 DNA、RNA、ATP、呼吸
第一节 微生物生长的测定
测定生长量 测体积 称干（湿）重 比浊法 颜色改变单位 生理指标法：测含氮量 测含碳量 测磷、DNA、RNA、ATP 呼吸
微生物生长的测定
测细胞的个数
¾比例计数法 ¾血球计数法 ¾平板活菌计数法：
菌落形成单位 (cfu, colony forming unit） ¾膜过滤法 ¾稀释摇管法
比浊法
turbidity
血球计数法
z
又被称为Petroff-Hausser counting。
平板活菌计数法
平板活菌计数法的两种策略——涂布 和倾注
膜过滤法——用于较稀溶液的计数 方法
膜过滤法
硝酸纤维素滤膜法是最经典的获得同步生长的方法
由于细胞的个体差异，同步生长往往只能维持2-3随后又逐渐转变为随机生长。
邻苯基苯酚
六氯酚
哈拉腙
十六烷基吡啶氯
氯苯甲烷铵
丙炔内酯Disinfectants and antiseptics。
微生物的生长
生活于两极地区 海水及冷藏食品 土壤中、植物体内等环境 人及温血动物体内等环境 生活于堆肥、温泉、土壤 表层等高温环境中
室温
体温
10—20
10—20
25—30
37—40
40—45
40—45
专性
25—45
50—55
70—90
2、温度对微生物的作用 （1）最低生长温度对微生物的影响 最低生长温度是微生物生长的温度下限，低于此温
干热灭菌
恒温干燥法 煮沸
巴斯德消毒法 间歇灭菌
湿热灭菌
高压蒸汽灭菌
超高温灭菌
二、水分和渗透压
微生物细胞的含水量一般为70-90%，孢子或芽孢的含 水量较低，只有60-70%。水分是微生物细胞代谢活动必
不可少的条件，如果外界环境过于干燥，将影响微生物的
正常代谢，甚至会造成细胞死亡。
当环境中缺水或大气相对湿度低于70%时，微生物细
来灭菌。
3、高温灭菌的方法
焚烧 （耐热的金属和玻璃器皿、可燃烧的物品） （常用，140-160℃，2h；耐热的物品） （100℃，15min以上；不耐热的物品） （60-70℃，15-20min；食品、饮料等） （ 100 ℃，每次 2-3h ， 2-3 次；不耐高温的药 品，特殊培养基） （常用，0.2Mpa，121℃，20min；一般培养 基、水、纤维制品） （0.05MPa，110℃，20min；含糖培养基） （130—140℃，0.5—1s，液体的饮料等）
比较一致。
lgN
缓慢期 对数期 稳定期 衰亡期
0
t
3、稳定期（平衡期）
在对数期以后，由于营养物质逐渐消耗，有害代谢
产物积累，pH值变化等，使细胞生活力下降，细胞的 群体的活菌数达到最高并保持一段时间的相对稳定。 特点：处于稳定器的菌体形态大小典型，生理生化反应 脂肪粒等，大多数芽孢菌在这个生长阶段形成芽孢。抗
室温
体温
10—20
10—20
25—30
37—40
40—45
40—45
专性
25—45
50—55
70—90
2、温度对微生物的作用 （1）最低生长温度对微生物的影响 最低生长温度是微生物生长的温度下限，低于此温
干热灭菌
恒温干燥法 煮沸
巴斯德消毒法 间歇灭菌
湿热灭菌
高压蒸汽灭菌
超高温灭菌
二、水分和渗透压
微生物细胞的含水量一般为70-90%，孢子或芽孢的含 水量较低，只有60-70%。水分是微生物细胞代谢活动必
不可少的条件，如果外界环境过于干燥，将影响微生物的
正常代谢，甚至会造成细胞死亡。
当环境中缺水或大气相对湿度低于70%时，微生物细
来灭菌。
3、高温灭菌的方法
焚烧 （耐热的金属和玻璃器皿、可燃烧的物品） （常用，140-160℃，2h；耐热的物品） （100℃，15min以上；不耐热的物品） （60-70℃，15-20min；食品、饮料等） （ 100 ℃，每次 2-3h ， 2-3 次；不耐高温的药 品，特殊培养基） （常用，0.2Mpa，121℃，20min；一般培养 基、水、纤维制品） （0.05MPa，110℃，20min；含糖培养基） （130—140℃，0.5—1s，液体的饮料等）
比较一致。
lgN
缓慢期 对数期 稳定期 衰亡期
0
t
3、稳定期（平衡期）
在对数期以后，由于营养物质逐渐消耗，有害代谢
产物积累，pH值变化等，使细胞生活力下降，细胞的 群体的活菌数达到最高并保持一段时间的相对稳定。 特点：处于稳定器的菌体形态大小典型，生理生化反应 脂肪粒等，大多数芽孢菌在这个生长阶段形成芽孢。抗
微生物的生长与环境条件
迟缓期出现的原因： 微生物接种到一个新的环境，暂时缺乏分解和催化有关底物的酶， 或是缺乏充足的中间代谢产物等。为产生诱导酶或合成中间代谢 产物，就需要一段适应期。
在生产实践中缩短迟缓期的常用手段： (1)利用对数生长期的细胞作为种子；
(2)尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大；
(3)适当扩大接种量
低温保藏菌种，实践中，采用 低温保藏食品，防止杂菌生长
斜面: 4℃ 石蜡油: 4 ℃ 沙土管: 4 ℃ 甘油管: -70℃,液氮 冻干管: 4 ℃ 水: 常温
2、 辐射作用 辐射灭菌(Radiation Sterilization)是利用电磁辐射产生的电磁波 杀死大多数物质上的微生物的一种有效方法。
15
20 25
1.0
1.46 1.77
101.33
135.10 168.88
121.3
126.2 130.4
30
2.10
202.66
134.6
空气排除程度与温度的关系
压力表读数 /Pa
灭菌器内温度/℃
未排除空气 排除1/3空气 排除1/2空气 排除2/3空气 完全排除气
35 70 105 140 175 210
最高温度
高温型微生物 中温型微生物 低温型微生物
高温杀菌 高温使蛋白质、核酸等重要生物大分子发生变性、破坏， 以及破坏细胞膜上的类脂成分，导致微生物死亡。
(1)干热灭菌
烘箱内热空气灭菌 160-170℃，2小时
干热灭菌
火焰灼烧
(2)湿热灭菌 湿热比干热灭菌更好： 水蒸汽的气化热高，更易于传递热量；
72 90 100 109 115 12l
90 100 109 115 121 126
微生物的生长与环境条件
从微生物整体来看:生长的温度范围一般在-10 ℃ ~100 ℃ 极端下限为-30 ℃，极端上限为105~300 ℃ 但对于特定的某一种微生物： 只能在一定温度范围内生长，在这个范围内，每种微生物都有 自己的生长温度三基点，即最低、最适、最高生长温度
➢处于最适生长温度时，生长速度最快，代时最短。 ➢超过最低生长温度时，微生物不生长，温度过低，甚至会 死亡。 ➢超过最高生长温度时，微生物不生长，温度过高，甚至会 死亡。
高温型微生物 中温型微生物 低温型微生物
低温型微生物：专性嗜冷微生物和兼性嗜冷 微生物
中温型微生物：分布最广
高温型微生物：嗜热微生物和极端嗜热微生 物
微生物类型
生长温度
最低
最适
嗜冷微生物
<0
兼性嗜冷微生物
0
嗜温微生物
15～20
嗜热微生物
45
超嗜热或嗜高温微生物 65
15 20～30 20～45 55～65 80～90
生长是一个逐渐发生的量变的过程，是繁殖的基础；繁殖 是一个质变的过程，是生长的结果。
个体生长是指微生物细胞个体吸收营养物质，进 行新陈代谢，原生质与细胞组分的增加为个体生 长。
群体生长是指群体中个体数目的增加。可以用重 量、体积、密度或浓度来衡量。
个体生长个体繁殖 群体生长 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖
衰亡期(Decline或Death phase)：
营养物质耗尽和有毒代谢产物的大量积累，细菌死亡速率超过新 生速率，整个群体呈现出负增长。
(二) 同步培养 p.114
同步培养(Synchronous culture)：
使群体中的细胞处于比较一致的，生长发育均处于同一阶 段上，即大多数细胞能同时进行生长或分裂的培养方法。
项目四：微生物培养技术
一、细菌生长繁殖的条件 （一）营养物质： 包括水、碳水化合物、氮化物、无机盐、
生长因子等。 （二）温度 ：依据细菌对温度的需求不同，可将分为嗜冷菌、
嗜温菌、嗜热菌三大类。大多数病原菌的最适温度为37℃。 （三）PH：大多数细菌的最适pH7.2～7.6 （四）渗透压：细菌细胞需要在适宜的渗透压下生长繁殖 （五）气体：与细菌生长繁殖有关的气体主要是氧和二氧化
（二）根据培养基的用途分：
1、基础培养基 ：如牛肉膏蛋白胨琼脂 这种培养基可供培养一般细菌使用。
2、营养培养基 ：如加血液、血清、葡萄糖、酵母 浸膏等，可供营养要求较高的细菌生长。
3、选择培养基 ：如培养沙门氏菌的培养基中加入 四硫磺酸钠、亮绿，可以抑制大肠杆菌的生长。
4、鉴别培养基 ：如醋酸铅培养基、麦康凯培养基， 依靠指示剂的颜色反应，借以鉴别不同种类的细 菌。
(1)热原质 许多革兰氏阴性菌与少数革兰氏阳性 菌在代谢过程中能合成一种多糖物质，注入人 体或动物体能引起发热反应，称为热原质。
(2)毒素 毒素的产生与细菌的致病性有关，细菌 产生的毒素有内毒素和外毒素两种。
(3)细菌素 是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌 作用的蛋白质 。
(4)维生素 动物机体的正常菌群能合成维生素B和 维生素K，可被机体利用。
5、厌氧培养基 ：如疱肉培养基，可供厌氧菌生长。
(三)按培养基的成分
（1）合成培养基：营养物质的成分及其浓度完全清楚；组 分精确；重复性强。但微生物生长缓慢，所用各种物质成 本昂贵，只在实验室里使用。
（2）天然培养基：采用动植物组织、微生物浸出物等，如 牛肉高蛋白质、玉米粉、麦芽汁、麸皮、马铃薯、酵母膏， 等皮革厂、肉食品加工厂、淀粉厂的付产品配制成。不稳 定、不精确。微生物生长良好，培养基易得，成本低廉， 适于大生产中配制培养基。
生长因子等。 （二）温度 ：依据细菌对温度的需求不同，可将分为嗜冷菌、
嗜温菌、嗜热菌三大类。大多数病原菌的最适温度为37℃。 （三）PH：大多数细菌的最适pH7.2～7.6 （四）渗透压：细菌细胞需要在适宜的渗透压下生长繁殖 （五）气体：与细菌生长繁殖有关的气体主要是氧和二氧化
（二）根据培养基的用途分：
1、基础培养基 ：如牛肉膏蛋白胨琼脂 这种培养基可供培养一般细菌使用。
2、营养培养基 ：如加血液、血清、葡萄糖、酵母 浸膏等，可供营养要求较高的细菌生长。
3、选择培养基 ：如培养沙门氏菌的培养基中加入 四硫磺酸钠、亮绿，可以抑制大肠杆菌的生长。
4、鉴别培养基 ：如醋酸铅培养基、麦康凯培养基， 依靠指示剂的颜色反应，借以鉴别不同种类的细 菌。
(1)热原质 许多革兰氏阴性菌与少数革兰氏阳性 菌在代谢过程中能合成一种多糖物质，注入人 体或动物体能引起发热反应，称为热原质。
(2)毒素 毒素的产生与细菌的致病性有关，细菌 产生的毒素有内毒素和外毒素两种。
(3)细菌素 是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌 作用的蛋白质 。
(4)维生素 动物机体的正常菌群能合成维生素B和 维生素K，可被机体利用。
5、厌氧培养基 ：如疱肉培养基，可供厌氧菌生长。
(三)按培养基的成分
（1）合成培养基：营养物质的成分及其浓度完全清楚；组 分精确；重复性强。但微生物生长缓慢，所用各种物质成 本昂贵，只在实验室里使用。
（2）天然培养基：采用动植物组织、微生物浸出物等，如 牛肉高蛋白质、玉米粉、麦芽汁、麸皮、马铃薯、酵母膏， 等皮革厂、肉食品加工厂、淀粉厂的付产品配制成。不稳 定、不精确。微生物生长良好，培养基易得，成本低廉， 适于大生产中配制培养基。
微生物生长繁殖和控制
(———按营养配比，相对贫乏的营养物)
• 改善废水生物处理系统中效果的关键是什么？
• 防止“冲击”、找出并改善限制因 子
第二节 基质浓度与微生物比生长速率的关系
莫诺方程（monod，1942，France） 描述微生物生长速率和基质浓度之间关系。
max[S]
Ks [S]
vmax[S] v Km [S]
• 事实上，净化污(废)水的微生物适应pH变化的能力 比较强，pH在6.5～8.5均可不加调节。
在废水生物处理中，pH一般在6.5-8.5（6-9）。生物处理 的主体是细菌，它要求pH略为偏碱。过高的pH会使原生动物 运动迟缓，菌胶团解体，影响去除效果；而过低的pH，会使 霉菌大量繁殖，造成污泥膨胀。
一、细菌的生长曲线 各种细菌的生长速率不一，每一种细菌都有各自的生 长曲线，但曲线的形状基本相同。污(废)水生物处理 中混合生长的活性污泥微生物也有类似的生长曲线。
微生物的生长曲线，可分为停滞期、对数期、稳定期和 衰亡期。
1．停滞期/延缓期/迟滞期/调整期
为什么会出现迟缓期呢？
“万事开头难” ! 适应环境（合成相应的酶），营养储备（用于
复制合成） 少量细菌刚接入一定量的新鲜液体培养基中，并不立即生长繁殖， 需要有一个适应过程（产生适应酶）。 细胞物质开始增加，但数量不增加或增加很少。
影响停滞期长短的因素：接种量、菌龄、营养成分等。
处于停滞期的细菌对外界环境条件较敏感，易受外界不良环境条件 的影响而发生变异。
在实际工作中如接种菌种以启动新的水处理设施，投加新鲜 污泥时，接种的细菌不习惯于新环境，会出现或长或短的迟 缓期. 我们可以通过哪些手段缩短迟缓期呢？
• 一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为 宜。
• 改善废水生物处理系统中效果的关键是什么？
• 防止“冲击”、找出并改善限制因 子
第二节 基质浓度与微生物比生长速率的关系
莫诺方程（monod，1942，France） 描述微生物生长速率和基质浓度之间关系。
max[S]
Ks [S]
vmax[S] v Km [S]
• 事实上，净化污(废)水的微生物适应pH变化的能力 比较强，pH在6.5～8.5均可不加调节。
在废水生物处理中，pH一般在6.5-8.5（6-9）。生物处理 的主体是细菌，它要求pH略为偏碱。过高的pH会使原生动物 运动迟缓，菌胶团解体，影响去除效果；而过低的pH，会使 霉菌大量繁殖，造成污泥膨胀。
一、细菌的生长曲线 各种细菌的生长速率不一，每一种细菌都有各自的生 长曲线，但曲线的形状基本相同。污(废)水生物处理 中混合生长的活性污泥微生物也有类似的生长曲线。
微生物的生长曲线，可分为停滞期、对数期、稳定期和 衰亡期。
1．停滞期/延缓期/迟滞期/调整期
为什么会出现迟缓期呢？
“万事开头难” ! 适应环境（合成相应的酶），营养储备（用于
复制合成） 少量细菌刚接入一定量的新鲜液体培养基中，并不立即生长繁殖， 需要有一个适应过程（产生适应酶）。 细胞物质开始增加，但数量不增加或增加很少。
影响停滞期长短的因素：接种量、菌龄、营养成分等。
处于停滞期的细菌对外界环境条件较敏感，易受外界不良环境条件 的影响而发生变异。
在实际工作中如接种菌种以启动新的水处理设施，投加新鲜 污泥时，接种的细菌不习惯于新环境，会出现或长或短的迟 缓期. 我们可以通过哪些手段缩短迟缓期呢？
• 一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为 宜。
发酵工程知识点总结
➢名词解释（每个3分）➢填空题➢单项选择题➢计算题（2题）➢简答题（4-5题）➢分析题（1-2题）➢论述或问答题(1题）第一章1发酵和发酵工程的概念发酵狭义：利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动，来制备微生物菌体或其代谢产物的过程。
广义：凡是培养细胞（动、植物和微生物细胞）来制得产品的过程。
发酵工程研究发酵工业生产过程中，各个单元操作的工艺和设备的一门科学2、发酵工程研究的内容※发酵工业用生产菌种的选育：◆自然选育◆诱变育种◆基因工程育种※发酵条件的优化与控制※生物反应器的设计※发酵产物的分离、提取和精制3、发酵类型1 按发酵产品的类型划分2 按发酵工艺是否需氧划分※厌氧发酵：如酒类发酵、酒精发酵、丙酮丁醇发酵、乳酸发酵和甲烷发酵※通风发酵：如酵母菌生产、抗生素发酵、有机酸发酵、氨基酸发酵和酶制剂生产等3 按发酵工艺培养基的状态划分※固态发酵：主要应用于传统酿造业。
※液态发酵：，是目前发酵工业所采用的主要工艺。
4、发酵工艺培养方法发酵工艺培养方法有：固态发酵工艺和液态发酵工艺1固态发酵工艺※固态薄层发酵※固态厚层（通风）发酵2 液态发酵工艺※液态表面发酵（浅盘发酵）工艺※液态深层通风发酵(Submerged fermentation)液态深层通风发酵是指在无菌条件下，在液体培养基内部进行微生物培养，获得产品的过程。
它包括向发酵罐中通入大量无菌空气、搅拌使空气均匀、培养基灭菌和无菌接种。
液态深层通风发酵是发酵工业使用的主要工艺。
5、分批发酵，分批补料发酵分批发酵(batch-process)：在生物反应器内投入限量培养基后，接入微生物菌种进行培养，完成一个生长周期，获得产品的微生物培养方法。
是目前传统发酵工业所采用的主要发酵形式。
在分批补料发酵：发酵的开始投入一定量的培养基，在发酵过程的适当时期，开始连续补加碳或（和）氮源或（和）其他必需基质，直至发酵液体积达到发酵罐最大操作容积后，将发酵液一次放出，这种操作方式称为补料分批发酵。
微生物群体生长规律
连续式培养两种情况；
• 1.间歇培养 （“坐吃山空型”） • 提问：如何人工进行细菌间歇培养？ • 只有开始时的一次性投料和接种细菌（其余时间
细菌根据环境变化自行生灭） 应用：生理特性研究、生物发酵和生物治污
（二）微生物群体生长规律
一个微生物细胞
合适的外界环境，吸收营养物质，进行代谢
个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加
3.接种量：一般来说， 接种量增大可缩短甚至消除延迟期（发 酵工业上一般采用1/10的接种量）； 4.培养基成分： ◇在营养成分丰富的天然培养基上生长的延滞期比在合成培 养基上生长时短；
◇接种后培养基成分有较大变化时，会使延滞期加长，所以发 酵工业上尽量使发酵培养基的成分与种子培养基接近。
（二）微生物群体生长规律 认识延迟期的特点及形成原因对实践的指导意义
菌种经过延滞期的调整后，细胞开始进入快速分裂阶 段，这一期细胞数目的增加以几何级数(2n)进行，每次 繁殖间隔的时间缩到最短。 （1）微生物特点：
①较小、整齐、健壮、染色均匀； ②代谢活跃 ③生长速率高.； 代时：细胞每分裂一次 所需的时间。 养料的消耗最快。
（二）微生物群体生长规律
培养基中细胞个数之间存在如下关系：
细 菌 数 目
对 数 期
的 对
数 值
0
时间t
如大肠杆菌在20℃时其 代时是35℃条件下的2倍；
伤寒杆菌在含0.125％的 蛋白胨培养基中的代时 为800min，而在含1.0％ 时仅为40min。。
（二）微生物群体生长规律
影响对数期微生物代时的主要因素
①菌种：不同菌种其代时差别极大。大肠杆菌 12.5～17.0 min；嗜酸乳杆菌66～87 min；
各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加
• 1.间歇培养 （“坐吃山空型”） • 提问：如何人工进行细菌间歇培养？ • 只有开始时的一次性投料和接种细菌（其余时间
细菌根据环境变化自行生灭） 应用：生理特性研究、生物发酵和生物治污
（二）微生物群体生长规律
一个微生物细胞
合适的外界环境，吸收营养物质，进行代谢
个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加
3.接种量：一般来说， 接种量增大可缩短甚至消除延迟期（发 酵工业上一般采用1/10的接种量）； 4.培养基成分： ◇在营养成分丰富的天然培养基上生长的延滞期比在合成培 养基上生长时短；
◇接种后培养基成分有较大变化时，会使延滞期加长，所以发 酵工业上尽量使发酵培养基的成分与种子培养基接近。
（二）微生物群体生长规律 认识延迟期的特点及形成原因对实践的指导意义
菌种经过延滞期的调整后，细胞开始进入快速分裂阶 段，这一期细胞数目的增加以几何级数(2n)进行，每次 繁殖间隔的时间缩到最短。 （1）微生物特点：
①较小、整齐、健壮、染色均匀； ②代谢活跃 ③生长速率高.； 代时：细胞每分裂一次 所需的时间。 养料的消耗最快。
（二）微生物群体生长规律
培养基中细胞个数之间存在如下关系：
细 菌 数 目
对 数 期
的 对
数 值
0
时间t
如大肠杆菌在20℃时其 代时是35℃条件下的2倍；
伤寒杆菌在含0.125％的 蛋白胨培养基中的代时 为800min，而在含1.0％ 时仅为40min。。
（二）微生物群体生长规律
影响对数期微生物代时的主要因素
①菌种：不同菌种其代时差别极大。大肠杆菌 12.5～17.0 min；嗜酸乳杆菌66～87 min；
各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加
微生物的生长及其控制
第六章微生物的生长及其控制一、名词解释生长:如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量就不断增加，于是出现了个体细胞的生长。
繁殖:如果这是一种平衡生长，即各种细胞组分是按恰当比例增长时，则达到一定程度后就会引起个体数目的增加，对单细胞的微生物来说，这就是繁殖。
生长限制因子:凡处于较低浓度范围内可影响生长速度和菌体产量的某营养物，就称生长限制因子。
活菌染色法:用特殊染料做活菌染色后再用计数板在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数方法。
菌落形成单位（cfu）:把稀释后的一定量菌样通过浇注琼脂培养基或在琼脂平板上涂布的方法，让其内的微生物单细胞一一分散在琼脂平板上，待培养后，每一活细胞就形成一个单菌落，此即“菌落形成单位”（cfu）。
同步生长:通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的生长状态，成为同步生长。
同步培养:设法使某一群体中的所有个体细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂周期中。
生长产量常数:菌落达到稳定期时，菌体产量达到了最高点（如细菌一般每毫升可达109，原生动物或藻类为106个），而且菌体产量与营养物质的消耗间呈现出有规律的比例关系，这一比例关系为生长产量常数Y：x-x0 x-xY= ------ = ------C0-C Cx为稳定期细胞的干重，x0为刚接种时细胞干重，C为限制性营养物的最初浓度，C为稳定期限制性营养物的浓度。
恒浊器:是一种根据培养器内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培养液流速，以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。
恒化器:是一种设法使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进行生长繁殖的连续培养装置。
连续发酵:连续培养用于生产实践，就称为连续发酵。
嗜冷菌:喜好在温度小于20度下生存的菌，能忍受最低为-30度。
中温菌:喜好温度在20-45度的温度生存的菌，又分室温菌（约25度）与体温菌（约37度）。
嗜热菌:喜好在温度大于45度下生存的菌，能忍受最高为105-150度。
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如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加。
群体内各个个体的进一步生长
精品课件
群体的生长
微生物生长: 在微生物学中提到的“生长”，一般均指群体生长，这一点与
研究大生物时有所不同。
群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖
精品课件
第一节 微生物生长的测定
微生物生长：
微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
精品课件
第二节 细菌的群体生长繁殖
一、生长曲线 生长曲线(Growth Curve)：
细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数的对数为纵座标作图，得到的一条反 映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。
微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量 热计等设备来测定相应的指标。
精品课件
第二节 细菌的群体生长繁殖
微生物的特点： 个体微小
肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个 单个的微生物组成的群体。
生长是一个逐步发生的量变过程， 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。
在高等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是
在单细胞的生物里，由于细胞小，这两个过程是紧密联系
又很难划分的过程。
精品课件
一个微生物细胞
合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。 如果同化作用的速度超过了异化作用
个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加
对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度
平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统
计，长菌的为阳性，未长中的微生物数目。
精品课件
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定
4、显微镜直接计数法 1）常规方法：
采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接 计数（计算一定容积里样品中微生物的数量）。
精品课件
第一节 微生物生长的测定 二 以生物量为指标测定微生物的生长 2、重量法
以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量；
通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量；
测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法
精品课件
第一节 微生物生长的测定 二 以生物量为指标测定微生物的生长
3、 生理指标法
精品课件
一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
精品课件
一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
细菌的生长曲线一般用菌数的对数为纵坐标作图
精品课件
一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
一条典型的生长曲线至少可以分为 迟缓期，对数期，稳定期和衰亡期等四个生长时期
精品课件
一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
第六章 微生物的生长繁殖 第一节 微生物生长的测定 第二节 细菌的群体生长繁殖 第三节 微生物生长繁殖的控制 第四节 菌种的退化、复壮与保藏
精品课件
生长：
生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体 体积扩大的生物学过程。
繁殖： 生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的 生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。
活菌计数：
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
精品课件
第一节 微生物生长的测定 二 以生物量为指标测定微生物的生长
1、比浊法
在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即O.D 表示菌量。
实验测量时应控制在菌浓度与光密度 成正比的线性范围内，否则不准确。
不是直接表示为精品细课件胞数。
精品课件
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 2、膜过滤培养法
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样
品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形
成的菌落进行统计。
精品课件
精品课件
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定
3、The most probable number method（MPN法 最大可能 数法）
精品课件
第一节 微生物生长的测定
精品课件
采用培养平板计数法要求操作熟练， 否则难以得到正确的结果： 样品充分混匀；
每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液；
同一稀释度三个以上重复,取平均值；
每个平板上的菌落数目合适，便于 准确计数；
一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用 菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示，而
细胞内RNA，尤其是rRNA含量增高，合成代谢活跃，核糖体、 酶类和ATP的合成加快，易产生诱导酶。
对外界不良条件反应敏感。
细胞处于活跃生长中，只是分裂迟缓
在此阶段后期，少数细胞开始分裂，曲线略有上升。
精品课件
第二节 细菌的群体生长繁殖
迟缓期出现的原因： 调整代谢
迟缓期(Lag phase)：
将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加， 或增加很少，生长速度接近于零。也称延迟期、适应期。
精品课件
迟缓期的特点：
分裂迟缓、代谢活跃
细胞形态变大或增长，例如巨大芽孢杆菌，在迟缓期末，细胞 的平均长度比刚接种时长6倍。一般来说处于迟缓期的细菌细胞 体积最大
单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化 个体计数
微生物生长的测定
群体重量测定 群体生理指标测定
评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响； 评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果； 客观地反映微生物生长的规律；
精品课件
第一节 微生物生长的测定 一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌） 1、培养平板计数法
缺点：
不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
精品课件
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 4、显微镜直接计数法
2）其它方法： 过滤计数：
可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将 滤膜染色，再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数；
群体内各个个体的进一步生长
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群体的生长
微生物生长: 在微生物学中提到的“生长”，一般均指群体生长，这一点与
研究大生物时有所不同。
群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖
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第一节 微生物生长的测定
微生物生长：
微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
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第二节 细菌的群体生长繁殖
一、生长曲线 生长曲线(Growth Curve)：
细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数的对数为纵座标作图，得到的一条反 映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。
微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量 热计等设备来测定相应的指标。
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第二节 细菌的群体生长繁殖
微生物的特点： 个体微小
肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个 单个的微生物组成的群体。
生长是一个逐步发生的量变过程， 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。
在高等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是
在单细胞的生物里，由于细胞小，这两个过程是紧密联系
又很难划分的过程。
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一个微生物细胞
合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。 如果同化作用的速度超过了异化作用
个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加
对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度
平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统
计，长菌的为阳性，未长中的微生物数目。
精品课件
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定
4、显微镜直接计数法 1）常规方法：
采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接 计数（计算一定容积里样品中微生物的数量）。
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第一节 微生物生长的测定 二 以生物量为指标测定微生物的生长 2、重量法
以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量；
通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量；
测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法
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第一节 微生物生长的测定 二 以生物量为指标测定微生物的生长
3、 生理指标法
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一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
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一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
细菌的生长曲线一般用菌数的对数为纵坐标作图
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一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
一条典型的生长曲线至少可以分为 迟缓期，对数期，稳定期和衰亡期等四个生长时期
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一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
第六章 微生物的生长繁殖 第一节 微生物生长的测定 第二节 细菌的群体生长繁殖 第三节 微生物生长繁殖的控制 第四节 菌种的退化、复壮与保藏
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生长：
生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体 体积扩大的生物学过程。
繁殖： 生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的 生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。
活菌计数：
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
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第一节 微生物生长的测定 二 以生物量为指标测定微生物的生长
1、比浊法
在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即O.D 表示菌量。
实验测量时应控制在菌浓度与光密度 成正比的线性范围内，否则不准确。
不是直接表示为精品细课件胞数。
精品课件
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 2、膜过滤培养法
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样
品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形
成的菌落进行统计。
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一 以数量变化对微生物生长情况进行测定
3、The most probable number method（MPN法 最大可能 数法）
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第一节 微生物生长的测定
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采用培养平板计数法要求操作熟练， 否则难以得到正确的结果： 样品充分混匀；
每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液；
同一稀释度三个以上重复,取平均值；
每个平板上的菌落数目合适，便于 准确计数；
一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用 菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示，而
细胞内RNA，尤其是rRNA含量增高，合成代谢活跃，核糖体、 酶类和ATP的合成加快，易产生诱导酶。
对外界不良条件反应敏感。
细胞处于活跃生长中，只是分裂迟缓
在此阶段后期，少数细胞开始分裂，曲线略有上升。
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第二节 细菌的群体生长繁殖
迟缓期出现的原因： 调整代谢
迟缓期(Lag phase)：
将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加， 或增加很少，生长速度接近于零。也称延迟期、适应期。
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迟缓期的特点：
分裂迟缓、代谢活跃
细胞形态变大或增长，例如巨大芽孢杆菌，在迟缓期末，细胞 的平均长度比刚接种时长6倍。一般来说处于迟缓期的细菌细胞 体积最大
单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化 个体计数
微生物生长的测定
群体重量测定 群体生理指标测定
评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响； 评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果； 客观地反映微生物生长的规律；
精品课件
第一节 微生物生长的测定 一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌） 1、培养平板计数法
缺点：
不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
精品课件
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 4、显微镜直接计数法
2）其它方法： 过滤计数：
可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将 滤膜染色，再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数；