食品微生物学实验思考题

微生物学实验原理及思考题答案.txt铁饭碗的真实含义不是在一个地方吃一辈子饭，而是一辈子到哪儿都有饭吃。就算是一坨屎，也有遇见屎壳郎的那天。所以你大可不必为今天的自己有太多担忧。油镜便于观察的原理是什么?

用油镜观察时在油镜与载玻片之间加入了和玻璃折射率相近的香柏油，使进入透镜的光线增多，视野亮度增强，使物象明亮清晰。

1.细调节器每旋转一周使镜筒上升或下降0.1mm.

一。培养基的配制

原理：微生物的生长发育都有一定的营养需要，培养基即人工培养物，为其生长发育提供所需营养的基质。培养基配制好以后必须经过灭菌方能用于分离培养微生物实验。一次培养基的配制和灭菌是微生物实验室中最基本的操作，通过本次实验学习微生物实验室中常用培养基的配制方法和灭菌方法。

1.称药品的钥匙不要混用

称完药品应及时盖紧瓶盖，因为某些成分如蛋白胨极易吸水潮解

调PH时要小心操作，避免回调。

配制培养基应注意哪些问题？

要选定合适的培养基;培养基成分要称量准确；PH要适宜；灭菌要严格。

培养基配制完成后为什么要立即灭菌？已灭菌的培养基如何进行无菌检查？

防止细菌污染培养基

一旦细菌污染了培养基，由于培养基有丰富的营养物质，细菌会段时间内大量产生

这样子就会跟培养物争夺营养物质，另一方面，细菌生长过程中会产生有毒物质致使培养物死亡。放在37℃的恒温箱中一两天后，培养基上没有生长任何微生物的就可以使用（若有微生物则是以菌落出现的 肉眼可以看见）

二。细菌的单染色技术

原理：单染色法师利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。

在中性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以常用碱性染料进行染色。碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易于带负电荷的细菌结合而使细菌着色。

制备染色标本时的注意事项？

选择合适菌龄的细菌；固定时避免火焰直接烘烤破坏细菌形态；染色时间要适宜；水洗时水不能直接冲在涂片处。

制片为什么要完全干燥后才能用油镜观察？

《食品微生物学》课堂教学用思考题和作业题

0 绪论

本章作业题：

教材P8的第1、6、9题：

什么是微生物它包括那些类群

微生物有哪五大共性其中最基本的是哪一个为什么

什么是微生物学学习微生物学的主要任务是什么

微生物学的基本实验技术有哪些试分别阐述之。

区别于其它生物，微生物有何特点你有何体会

认真阅读教材的“绪论”和“结束语”，结合自己的亲身经历谈谈你打算怎样学好“微生物学”这门课程。

补充思考题：

用具体事例说明人类与微生物的关系。

简述微生物学在生命科学发展中的地位，并描绘其前景。

为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人

微生物学研究的基本方法和技术有哪些你现在了解哪些技术你认为微生物学的理论和技术有怎样的联系

试从微生物的特点分析其分布比动植物更广泛的原因，为什么无菌操作技术是一切微生物学工作的基础

一、微生物分类鉴定与命名

本章作业题

• 教材P366-367的第4、5、6、7、8：

什么是种什么是新种任何表示一个种和新种

什么是学名什么是双名法熟悉一批学名对每个生命科学工作者有何重要性

何谓菌株它如何表达正确理解菌株的涵义有何重要意义

什么是模式菌株它和模式菌种有何关系

概念：

菌株、品系、克隆、无性繁殖系、毒株、菌落、菌苔、斜面、分离物、纯培养以及菌种等名词有何区别

本章思考题

• 教材的第12、15、16题：

试比较古生菌、细菌和真核微生物间的主要区别。

用于微生物鉴定的经典指标有哪些随着新的理化技术在微生物鉴定中等应用，经典的分类指标会被淘汰吗何故

现代微生物鉴定技术队发展趋势如何试举例加以说明。

• 教材第21题中微生物的学名(着重于勾画的)。

二、原核微生物

1 观察细菌为何要用染色法，Gram染色法哪步最关键为什么如何保证结果的正确性 2 研究芽孢有何重要的理论和实践意义

3 放线菌的典型形态特征是怎样的

4 会描绘原核细胞的构造模式图，并能说明各构造的重要特点和功能（思考题）

食品微生物学实验指导

实验一环境中微生物的检测

一、目的要求

了解环境中微生物的存生，初步建立从事微生物工作者必须具有的“无菌”概

念，并认识微生物细胞的群体结构—菌落二、基本原理

微生物个体微小，种类繁多且无处不有，但肉眼不可见。若用营养琼脂平板法

进行检测，即可看到细胞繁殖后的群体结构，即菌落。不同的微生物形成的菌落性

状不同，它是认识和鉴别各种微生和的依据之一。

一般细菌在肉汁营养琼脂上的菌落形态，可从形状、大小、色泽、光泽、隆起

度、透明度、表面光滑或粗糙、边缘整齐或不规则等特征加以区别。三、实验材料

牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基5副（供4人用）。四、实验步骤

1.编号每人取牛肉膏蛋胨琼脂平板培养基1副，用特种铅笔在皿盖上注明班、

组号及操作处理号（同桌4人分别记以1、2、3、4），另一副平板培养基皿盖上注以

“CK”字样（对照），但不许打开皿盖。

2.处理操作打开皿盖按下列方法各自进行操作：

（1）在桌面上，使平板培养基于空气中暴露5～10min，盖上皿盖。

（2）用手指在平板培养基表面轻压3～5点，盖上皿盖。

（3）口对平板培养基咳嗽几下，盖上皿盖。

（4）取头发1根，在平板培养基表面任一方向划线3～5条，盖上皿盖。

3.培养操作完毕，将5副培养皿重叠，倒置于28℃温度下培养2～3d。

4.检查取出培养皿，仔细观察各皿中的菌落形态，并统计出每皿菌落数。五、实验报告

将实验结果填入表1—1中。表1—1环境中微生物检测结果

*注：菌落特征描述

1.形状：园状、丝状、不远见则状、假根状。

2.大小：以直径（mm）表示。

3.光泽：玻璃状、蜡质状、油脂状。

4.高度：扁平、隆起、凸形、乳头形。

5.透明度：透明、半透明、不透明。

6.边缘状况：光滑、湿润、干燥、皱褶。六、思考题

1.各处理皿的菌落性状有何异同？

2.环境中微生物检测结果说明什么问题？对你有何启示？皿号菌落各数

（个/皿）优势类群菌落特征（选典型代表描述）

形状大小（mm）色泽光泽高度透明度边缘状况表面状况实验二细菌运动性的观察

一、普通显微镜的使用和细菌形态观察

油镜观察的原理和注意事项

1．原理：油镜的透镜很小,光线通过玻片与油镜头之间的空气时,因介质密度不同,发生折射或全反射,使射入透镜的光线减少,物象显现不清.若在油镜与载玻片之间加入和玻璃折射率相近的香柏油,则使进入透镜的光线增多,视野亮度增强,使物象明亮清晰.

2．注意事项：转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。油镜使用完毕，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用擦镜子蘸取少量二甲苯擦去镜头上的残留油迹，然后用擦镜纸擦去残留的二甲苯。

二、革兰氏染色法

原理：由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是由肽聚糖层厚度和结构决定的。

操作过程：

a. 结晶紫使菌体上色。

b. 碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内。

c. 酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应

G+菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径变小，加上G+菌细胞的细胞壁基本不含脂类，乙醇处理时，不能在壁上溶出缝隙，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。

G-菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色。

d. 蕃红复染：G+呈现紫色，G-呈现红色

1. 哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性，其中最重要的环节是什么？

菌龄选择、涂片环节、加热固定环节、脱色环节。最重要的是脱色环节

2. 进行革兰氏染色时为什么特别强调菌龄不能太老，菌龄太老会出现什么问题？

着色不均匀，染色效果不好，阴性、阳性不明显分不太清楚，问题是不便于在显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌。

3. 革兰氏染色时，初染前能加碘液吗？乙醇脱色后复燃之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色？