湛江叉鞭金藻藻种培养：

收稿日期:2021-08-15基金项目:温州市科技项目(X20190014)作者简介:李腾腾(1993 ),男,山西霍州人,助理工程师,学士,主要从事单细胞藻类培养研究工作,E-mail:1635822879@㊂通信作者:方军,高级工程师,主要从事滩涂贝类遗传育种研究工作,E-mail:hyj1206@㊂文献著录格式:李腾腾,王紫薇,任鹏,等.温度及光照对4种饵料微藻生长的影响[J].浙江农业科学,2021,62(10):2074-2078.DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.20211049温度及光照对4种饵料微藻生长的影响李腾腾1,王紫薇2,任鹏1,蓝天一1,邵艳卿1,方军1∗(1.浙江省海洋水产养殖研究所浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室温州市海洋生物遗传育种重点实验室中国水产科学研究院海洋贝类工程技术研究中心,浙江温州㊀325005;2.宁波大学,浙江宁波㊀315211)㊀㊀摘㊀要:微藻是许多贝类㊁海参㊁虾类等经济动物苗种生产㊁幼体培育的重要饵料生物,其生长速度和营养成分组成对育苗的效率和质量都有重要影响㊂由于在苗种大规模人工繁育过程中控制水体盐度㊁生化组成以及病害防治等成本过高,同时为了减少水产兽药使用对苗种产生的不必要影响,本文采用试验与生产相结合的方法,主要研究了温度和光照强度等因素对威氏海链藻9021(Thalassiosira weissflogii )㊁牟氏角毛藻(Chaetocerosmuelleri )㊁湛江叉鞭金藻(Dicrateria zhanjiangensis )和亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis )4种常用饵料微藻大规模生产培养的影响㊂温度试验结果表明:牟氏角毛藻和亚心形扁藻的适宜生长温度为26~29ħ,此温度下比生长率最大,μ牟氏角毛藻为0.565,μ亚心形扁藻为0.358;湛江叉鞭金藻的适宜温度为29~32ħ,此温度下μ湛江叉鞭金藻为0.533;威氏海链藻9021的适宜温度为23~26ħ,此温度下μ威氏海链藻9021为0.278㊂光照强度试验结果表明:晴天条件下牟氏角毛藻㊁湛江叉鞭金藻和亚心形扁藻的生长均优于阴天,而威氏海链藻9021在阴天条件下的生长要快于晴天㊂温度和光照强度对湛江叉鞭金藻㊁威氏海链藻9021的双因子影响分析表明:不同水体温度以及光照强度对湛江叉鞭金藻和威氏海链藻9021的生长有显著性差异,共同影响着微藻的比生长速率和最大生物量,因此,实际生产培养中不能单看比生长率来判断一个藻种的适宜培养条件㊂本研究确定了4种常用微藻生产性培养的适宜环境条件,为不同季节气候条件下选择适合培养的饵料微藻种类提供参考,有助于水生生物养殖生产过程中幼虫培育存活率㊁苗种产量的提高㊂关键词:微藻;温度;光照强度中图分类号:S-3㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:0528-9017(2021)10-2074-05㊀㊀近年来,我国贝类㊁虾类等养殖快速发展,苗种需求旺盛㊂2017年我国虾类育苗量为12518亿尾,比2016年(10752亿尾)同比增长16.42%,其中南美白对虾2017年为9552亿尾,比2016年(8028亿尾)同比增长18.97%;2017年贝类育苗量248406亿粒,比2016年同比增加4%[1]㊂虾类和贝类育苗过程中的关键因素是水质和饵料[2],而水质受地理环境㊁气候变化和经济活动等的影响,人为调控能力较弱,因此,饵料微藻的选择及培养关系着虾㊁贝苗种繁育和养殖生产㊂微藻几乎是贝类幼苗唯一的饵料选择[3],影响着贝类的营养㊁生理和繁殖[4]㊂微藻是体形微小(2~30μm)㊁能进行光合作用的低等植物的总称,具有可利用光能㊁生长繁殖快㊁对环境适应性强和易培养等特点[5]㊂常见的饵料微藻约有20多个属㊁40多个种,包括硅藻㊁金藻和绿藻等种类,除应用在贝类和虾类的育苗过程外,还广泛应用于浮游动物如轮虫㊁桡足类等的培养[6]㊂不同种类的微藻有着不同的适宜培养条件,目前国内外关于环境因素对微藻生长影响的研究很多[7-10],但大多停留在试验室阶段,生产培养相关方面的研究鲜有报道㊂本试验选取威氏海链藻9021(Thalassiosira weissflogii )㊁牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri )㊁湛江叉鞭金藻(Dicrateria zhanjiangensis )以及亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis )4种生产培养上较为常见的饵料微藻进行二级扩大性培养,探究培养水体温度和外界光照强度对饵料微藻繁殖生长的影响,以期为浙江沿海地区虾㊁贝等水产经济动物的人工育苗提供饵料微藻培养的坚实依据,为不同季节㊁梅雨㊁高温㊁台风等恶劣天气条件下微藻种类选择及培养策略提供技术性指导㊂1㊀材料与方法1.1㊀材料㊀㊀试验用藻种威氏海链藻9021株系由宁波大学海洋学院提供,牟氏角毛藻㊁湛江叉鞭金藻和亚心形扁藻株系由浙江省海洋水产养殖研究所清江试验基地藻种库提供㊂1.2㊀培养方法与条件㊀㊀培养液母液配置按 宁波大学3号 配方配置,NaNO3100g,K2HPO410g,FeSO4250mg, MnSO425mg,Na2EDTA10g,V B10.6mg,V B12 5μg,海水1000mL㊂试验所用海水为二级沙滤海水,经10g㊃m-3漂白粉清洗并暗处理至少24h进行消毒㊂接种前加入3g㊃m-3的Na2S2O3并充分曝气,使用余氯试剂盒检测水体中余氯残留,待水体中有效氯完全中和后接种㊂试验使用容器为50L塑料桶,先用高锰酸钾溶液消毒,再经消毒水冲洗2~3次干燥后备用,尼龙薄膜和充气管煮沸高温消毒㊂在50L塑料白桶中加入30L已完全中和的消毒海水,并加入50mL培养液母液,取处于对数生长期的藻种接种,同时设置3个平行组,并测定微藻的起始培养浓度㊂然后用透明尼龙薄膜封口,自然光照下,充气一次性培养,每天使用温度计和照度计监测水温与光照强度变化,及时调节温度(通过移位至阴凉通风处或用加热棒升温)和光照强度(通过调节遮阴网以达到试验要求)㊂1.3㊀温度试验㊀㊀设置5个温度梯度:17~20ħ㊁20~23ħ㊁23~26ħ㊁26~29ħ㊁29~32ħ㊂光照强度为10000~20000lx,海水盐度为18ɢ,pH为8.1~8.3㊂1.4㊀光照试验㊀㊀光强过高会造成微藻的死亡,结合浙江当地降雨情况(阴雨天实际光照强度为980~10180lx,晴天实际光照强度为9700~76600lx),通过调节遮阴网的密度将光照调控在20000lx左右,将光照分为两个梯度,阴天为1000~10000lx,晴天为10000~20000lx,水体温度26~29ħ,海水盐度为18ɢ,pH为8.1~8.3㊂1.5㊀温度和光照的正交试验㊀㊀对威氏海链藻9021株以及湛江叉鞭金藻进行正交试验㊂设置5个温度梯度(17~20ħ㊁20~ 23ħ㊁23~26ħ㊁26~29ħ㊁29~32ħ)和两个光照强度(1000~10000lx和10000~20000lx)的正交试验,海水盐度为18ɢ,pH为8.1~8.3㊂1.6㊀比生长率的计算㊀㊀每天固定上午10:00取样,用Lugol碘液固定,在显微镜下使用血球计数板计数并计算生物量,每个样品计数3次,取平均值㊂通过公式μ= (1n X t-ln X0)㊃t-1计算比生长率,其中X0指初始藻类细胞数量,X t指t d后藻类细胞数量㊂2㊀结果与分析2.1㊀温度对微藻生长的影响㊀㊀不同温度条件下4种饵料微藻的生长曲线如图1所示㊂4种饵料微藻的生长周期和最大生物量均随温度的变化而变化,4种饵料微藻自接种第2天生物量均有显著增长,达到最大生物量后维持几天,之后迅速进入衰败期㊂微藻与其他水生生物一样,对水环境的温度有一定的适应性,过高或过低的温度均会抑制微藻的生长,水体温度过高甚至会造成微藻的迅速死亡㊂有些研究者认为对于光合自养生物而言,当超出适宜温度范围时,温度主要是通过控制物质与能量代谢过程中酶的动力学来影响其生长,此外,超出适温范围的温度对于微藻的伤害作用可能是由于出现了不同程度的质壁分离[11]㊂从本试验的结果可以看出,温度对4种饵料微藻的生长有显著影响㊂湛江叉鞭金藻在17~29ħ均可正常生长,温度高于29ħ时,尽管比生长率获得最大值,但其生长明显受到抑制;牟氏角毛藻在17~32ħ时可正常生长,因此属于广温种,在26~32ħ能快速到达平台期,在17~26ħ时生长则受到一定程度的抑制;威氏海链藻9021在17~ 32ħ均可正常生长,同样为广温种,在高温和低温下均能快速生长;亚心形扁藻在17~26ħ能快速生长且具有较高的最大生物量,高于26ħ时生长则受到一定程度的限制,当温度高于29ħ时生长明显受到抑制㊂2.2㊀光照强度对微藻生长的影响㊀㊀光照是微藻生长必不可少的,但过高的光照会对藻细胞造成一定程度的伤害,过低的光照则很大程度上抑制藻细胞的生长㊂不同光照强度下4种饵料微藻的生长曲线如图2所示㊂结果表明:光照强度对4种饵料微藻生长有显著影响㊂随着光照强度的增加,牟氏角毛藻㊁湛江叉鞭金藻和亚心形扁藻㊀㊀图例温度条件后无相同小写字母者表示组间差异显著(P<0.05)㊂图1㊀不同温度条件下4种饵料微藻的生长曲线图例光照条件后无相同小写字母者表示组间差异显著(P<0.05)㊂图2㊀不同光照强度下4种饵料微藻的生长曲线的最大生物量均有所增加,且比生长速率有显著差异㊂有研究表明:光照强度越高,细胞分裂越快,生物量越大[12]㊂而威氏海链藻9021呈现出相反的现象,在阴天情况下生长要优于晴天㊂2.3㊀温度和光照的正交试验㊀㊀湛江叉鞭金藻在1㊁8㊁9㊁10等3组条件下有较大比生长速率,但由于其生物量受到严重的抑制,达不到实际生产过程中的需求,因此,我们认为26~ 29ħ㊁10000~20000lx是湛江叉鞭金藻大规模培养的适宜条件,此时比生长速率为0.396(表1㊁图3)㊂表1㊀正交试验中湛江叉鞭金藻的比生长率处理温度/ħ光照/lx比生长率117~201000~100000.387217~2010000~200000.255320~231000~100000.209420~2310000~200000.251523~261000~100000.227623~2610000~200000.238726~291000~100000.271826~2910000~200000.396929~321000~100000.5101029~3210000~200000.533图3㊀湛江叉鞭金藻的最大生物量㊀㊀威氏海链藻在温度26~29ħ㊁光照强度1000~ 10000lx试验组生长状况最好,比生长速率最大(μ为0.291)(表2㊁图4),据此我们可以认为这是威氏海链藻9021的适宜培养条件㊂表2㊀正交试验中威氏海链藻9021的比生长率处理温度/ħ光照/lx比生长率117~201000~100000.276217~2010000~200000.147320~231000~100000.197420~2310000~200000.163523~261000~100000.279623~2610000~200000.278726~291000~100000.291826~2910000~200000.174929~321000~100000.2541029~3210000~200000.253图4㊀威氏海链藻9021最大生物量3　讨论3.1㊀温度对微藻生长的影响㊀㊀温度是影响微藻生长和繁殖的重要环境因子之一,微藻对温度的耐受能力因种类不同而存在巨大差异,各种藻类对温度的要求不同,有其各自的适应范围[13]㊂主要通过影响微藻细胞生理活动的活性和其对水体营养物质的利用率,这两种影响方式并存,是共同作用又相互竞争的关系[14]㊂申哲民等[15]研究表明,年均气温每增加1.0ħ,年均藻类生物量会增加0.145倍,且水体富营养化程度越显著,温度升高对藻类生长的影响越大㊂从本试验的结果来看,虽然生产性培养的饵料微藻有些为广温性藻类,但生产中需要快速㊁高效地提供高浓度的藻液㊂因此,尽管有部分试验结果表明在29~ 32ħ条件下湛江叉边金藻具有很高的比生长率,但达不到大规模培养所需要的生物量,因此,该条件并不是大规模生产的最佳培养条件㊂本研究发现,在26~29ħ,10000lx~20000lx条件下湛江叉鞭金藻获得较大的比生长速率,同时具有较高的最大生物量,为大规模培养的最佳条件㊂春秋季的水温为17~26ħ,适宜于大规模培养湛江叉鞭金藻㊁威氏海链藻9021以及亚心形扁藻作为水产苗种的饵料,牟氏角毛藻少量培养搭配使用㊂夏季高温期水温为26~32ħ,适宜大规模培养威氏海链藻9021和牟氏角毛藻作为苗种的饵料㊂这与陈贞奋[16]关于牟氏角毛藻的研究结果相同,湛江叉鞭金藻可作为开口饵料小规模少量培养㊂3.2㊀光照强度对微藻生长的影响㊀㊀光照是单细胞藻培养中最重要的影响因子之一,浮游植物需要通过光合作用制造有机物维持自身生长㊁繁殖㊂浮游藻类生产量的季节变化与光照条件的季节差异有着直接关系,水生藻类光合作用的强弱,取决于透入水中的光照强度和光质[17]㊂对于光能自养的浮游植物而言,光能是一个不断变化的资源;很多种类浮游植物都表现出对光照相同的生理适应,即其生长速率随着光照强度从零到某一个适宜光照强度的增加而相应地增加[18]㊂本试验中湛江叉鞭金藻㊁牟氏角毛藻和亚心形扁藻在强光条件下(10000~20000lx)的比生长率均明显大于弱光条件(1000~10000lx),而威氏海链藻9021在弱光条件下的比生长率明显大于强光条件,故为喜阴种,但最大生物量较高光组低,可能是由于随着生物量的增加,水体透光性降低,藻细胞对光的利用降低,减缓了细胞分裂[19],从而抑制了生长㊂因此,威氏海链藻9021是一种在弱光条件下比较容易培养的饵料微藻,在江浙地区梅雨季节,连续阴雨天无法提供充足光照的条件下可以很好地替代角毛藻作为水产经济苗种中后期培育的饵料㊂综上所述,温度和光照的变化会影响饵料微藻的比生长率和最大生物量,在适宜的温度㊁光照条件下培养合适的饵料微藻可以极大程度上加快饵料微藻的提供效率,从而减轻饵料供应不足的压力㊂据统计,浙江沿海一带春季阴冷多雨,平均温度维持在13~18ħ,夏季为梅雨季,降水量充足,气温25~30ħ;秋季气温变化较大,气温16~21ħ,降雨量较少;冬季晴冷少雨,气候较干燥,气温3~9ħ㊂因此,在了解不同饵料微藻的适宜培养环境的情况下,关注水体温度和光照变化,提前做好准备工作,可以有效防止饵料供应出现断层㊂参考文献:[1]㊀中国农业出版社.中国渔业统计年鉴2018[M].北京:中国农业出版社,2018.[2]㊀吴杨平,张雨,陈爱华,等.江苏沿海贝类育苗中单胞藻培养的实用技术[J].水产养殖,2018,39(9):24-26.[3]㊀郑严,马志珍,周利.现代生物饵料培养及开发利用[M].北京:中国农业出版社,2004.[4]㊀陈自强,寿鹿,廖一波,等.微藻饵料对双壳贝类幼体生长影响的研究进展[J].科技通报,2013,29(7):46-55,67.[5]㊀邱楚雯,王韩信.饵料藻类的研究进展[J].水产科技情报,2018,45(3):127-132.[6]㊀李色东,刘涛.饵料微藻在南美白对虾育苗中的应用[J].海洋与渔业,2014(11):62-63.[7]㊀茅华,许海,刘兆普.温度㊁光照㊁盐度及pH对旋链角毛藻生长的影响[J].生态科学,2007,26(5):432-436.[8]㊀葛红星,陈钊,李健,等.pH和氮磷比对微小原甲藻和青岛大扁藻生长竞争的影响[J].中国水产科学,2017,24(3):587-595.[9]㊀朱昔恩,黎大勇,熊建华,等.接种密度㊁氮㊁磷㊁碳㊁硅㊁维生素对牟氏角毛藻生长的影响[J].普洱学院学报,2018,34(6):9-14.[10]㊀陈建业,林丹,黄健,等.不同氮源㊁磷源营养盐对亚心型扁藻(Platymonus subcordiformis)生长的影响[J].福建水产,2014,36(4):258-263.[11]㊀RAVEN J A,GEIDER R J.Temperature and algal growth[J].New Phytologist,1988,110(4):441-461. [12]㊀郭艳琴.环境因素对黄河藻类生长影响的研究[D].包头:内蒙古科技大学,2010:31-39.[13]㊀朱明,张学成,茅云翔,等.温度㊁盐度及光照强度对海链藻(Thalassiosira sp.)生长的影响[J].海洋科学,2003,27(12):58-61.[14]㊀王菁,陈家长,孟顺龙.环境因素对藻类生长竞争的影响[J].中国农学通报,2013,29(17):52-56. [15]㊀申哲民,张涛,马晶,等.富营养化与温度因素对太湖藻类生长的影响研究[J].环境监控与预警,2011,3(2):1-4.[16]㊀陈贞奋.牟氏角毛藻的培养研究:Ⅰ.盐度㊁磷酸盐和硝酸盐浓度对生长繁殖的作用[J].海洋学报(中文版),1982(5):608-616.[17]㊀尚帅.温度㊁光照对长江口几种优势藻类生长的影响研究[D].上海:上海师范大学,2017.[18]㊀THOMPSON P.The response of growth and biochemicalcomposition to variations in daylength,temperature,andirradiance in the marine diatom Thalassiosira pseudonana(Bacillariophyceae)[J].Journal of Phycology,1999,35(6):1215-1223.[19]㊀石娟,潘克厚.不同光照条件对小新月菱形藻和等鞭金藻8701生长及生化成分的影响[J].中国水产科学,2004,11(2):121-128.(责任编辑:王新芳)。

单细胞藻,轮虫培养技术要点福建饵料动物培育技术讲班讲稿单细胞藻和轮虫是饵料浮游动物中最重要的基础性生物饵料。

在水产养殖中，单细胞藻的作用越来越重要，它不仅为鱼、虾、贝类等水产经济动物提供饵料，还可以作为鱼虾配合饲料的重要添加物，起到营养平衡与强化效果，有利于培育健壮的苗种。

同时，单细胞藻作为培养轮虫的优质饵料，可以提高轮虫的营养价值。

以下是单细胞藻和轮虫培养的实用技术要点：1、单细胞藻培养实用技术要点1.1 选用适当的单细胞藻种类。

不同的水产动物需要不同种类的单细胞藻，如养鱼池水中以适量绿藻为宜，养虾池水中以适量硅藻为宜，而贝类幼体在浮游期以金藻和绿藻为宜，在匍匐期则以底栖硅藻为宜。

1.2 清洁培养器具。

在培养单细胞藻前，必须清洁培养器具，以避免污染和细菌感染。

1.3 分级培养小球藻。

小球藻是最常用的单细胞藻之一，分级培养可以提高单细胞藻的品质和数量。

1.4 营养和接种。

单细胞藻的营养和接种非常重要，充足的养分和适当的接种量可以促进单细胞藻的生长和繁殖。

1.5 管理工作要点。

培养过程中需要注意管理工作，如控制温度、光照、通风等。

1.6 PVC透明塑袋培养。

PVC透明塑袋培养是一种简单易行的单细胞藻培养方法，适用于小规模生产。

1.7 敌害生物防控。

在单细胞藻培养过程中，需要注意敌害生物的防控，如藻类寄生虫、藻类食草动物等。

1.8 防治措施。

对于已经感染病菌的单细胞藻，需要采取相应的防治措施，如加入抗生素等。

1.9 单细胞藻的浓缩和冷藏。

单细胞藻的浓缩和冷藏可以延长其保存时间，方便后续使用。

2、轮虫培养实用技术要点2.1 轮虫个体的大小。

不同种类的轮虫个体大小不同，需要根据不同的需求选择合适的轮虫。

2.2 生态性。

轮虫的生态性对其培养有很大的影响，需要了解轮虫的生态性和生长规律。

2.3 繁殖特点。

轮虫的繁殖特点也需要了解，以便控制轮虫的数量和质量。

2.4 食性和食料。

轮虫的食性和食料也是轮虫培养中需要注意的问题，需要选择适当的饵料。

第14卷第4期大连水产学院学报V ol.14N o.4 1999年12月JOURNA L OF DA LI AN FISHERIES UNI VERSITY Dec.1999文章编号:1000-9957(1999)04-0007-06湛江等鞭金藻的超微结构研究毛连菊,　张从尧,　由学策(大连水产学院养殖系,辽宁大连116023)摘要:用光学(相差)显微镜、扫描电镜和透射电镜观察了湛江等鞭金藻的外部形态和内部结构。

湛江等鞭金藻有两条比藻体略长的鞭毛,两鞭毛几乎等长、光滑、无突起和纤毛。

藻体表面无鳞片包被。

细胞内有一整块杯形色素体,细胞核在杯形色素体中,白糖素1～2个位于细胞中前部。

细胞内有线粒体、内质网和高尔基体,还有由两个椭圆形小体组成的眼点都位于细胞的前端。

关键词:湛江等鞭金藻;超微结构;形态中图分类号:Q949126+2 文献标识码:A湛江等鞭金藻(Isochrysis zhangjiangensis Hu1992)[1]是一种分布广泛的微小型海洋浮游单细胞藻类,属于金藻门Chrys ophyta,金藻纲Chrys ophyceae,等鞭金藻目Is ochrysidales,等鞭金藻科Is ochrysidaceae[2]。

等鞭金藻是海产经济双壳类动物幼虫良好的基础饵料。

由于其个体小,繁殖快,营养丰富,运动速度适中,又无含纤维素的细胞壁[2～4],易被贝类幼虫捕捉吞食和消化吸收。

因此,国内各双壳贝类育苗室都有培养。

此金藻最初称之为湛江叉鞭金藻,1992年由定种人更名为湛江等鞭金藻。

笔者对其超微结构的研究与Parke[5]、G reen[6]对球等鞭金藻和叉鞭金藻的描述有明显的不同,可望通过对湛江等鞭金藻超微结构的研究能为分类,为其归属提供可靠依据。

1　材料和方法湛江等鞭金藻由大连水产学院水产养殖研究所育苗室藻种间提供。

培养液为康威(C onway)方。

正常培养的藻液经离心浓缩取样。

透射电镜样品用体积分数为215%戊二醛固定后离心,用012mg/L的琼脂包埋,体积分数为1%锇酸固定,磷酸缓冲液冲洗,上升系列酒精脱水,S purrπs树脂包埋,Re2 ichert Jung E超薄切片机切片,经醋酸铀和柠檬酸铅双重染色后在J E M-1200EX透射电镜下观察拍照。

《饵料生物培养》……………………………………………………………………………………………..一名词解释：（每题4分，共20分）1.饵料生物：指成为饵料的生物的总称。

是指在海洋、湖泊等水域中自然生活的各种可供水产动物食用的水生生物。

2.活饵料：是指经过筛选的优质饵料生物，人工培养后，以活体作为养殖对象食用的专门饵料，它们和养殖对象共同生活在一起，在水中正常生长、繁殖，是活的生物。

3.指数生长期：指细胞迅速增长，呈指数方式生长。

4.单胞藻：即单细胞藻类，个体微小，也可称作微藻。

5.单种培养：分离培养的藻种虽然只有一种，但还混杂细菌的生长。

二填空题：（每空1.5分，共30分）1、单胞藻类培养按培养纯度分（纯培养）、（单种培养）和（混合培养）三种方式。

2、单胞藻类培养按采收方式分（一次性培养）、（半连续培养）和（连续培养）三种方式3、光照对单细胞藻类的影响通过光源、光质（光的波长）、光量（光照强度）、光周期和供光途径来实现4、成功接种的关键是把握好藻种的（质量）、藻种的（数量）和接种的（时间）。

5、单细胞藻类的培养过程可分为(消毒),(培养液制备),(接种)、(培养管理)及采收五个步骤6、轮虫生殖，主要是由雌体行（单性生殖）。

雌体的卵有两种，一种叫做非需精卵，一种叫做需精卵。

7、褶皱臂尾轮虫的生殖有（单性生殖）和（两性生殖）两种，两种生殖方式随环境条件的变化而交替进行。

1.我国能进行培养的微藻有哪些，试举出6种。

答：绿藻：衣藻、小球藻、栅藻、扁藻、盐藻。

蓝藻：念珠藻、鱼腥藻、螺旋藻。

硅藻：菱形藻、小环藻、褐指藻、角毛藻。

隐藻：隐藻、红隐藻。

金藻：单鞭金藻、锥囊藻；海水种类的湛江叉鞭金藻、球等鞭金藻。

黄藻：异胶藻2．活体饵料具有什么样的优点？活饵料具有什么优点：1,、水质：一般不会影响水质，甚至克改善。

2、营养：营养丰富，适合需要，且可通过筛选获得养殖对象某发育阶段营养需要的饵料效果好的生物饵料种，如螺旋藻3、大小适口：几微米到十几微米的开口饵料、人工饵料难以达到4、方便摄食：运动能力和分布水层5、嗜食性和消化：喜吃且易消化。

几株海洋微藻固定化培养及在西施舌人工育苗中的应用研究在传统的海水育苗生产中, 由于高密度养殖, 水体中氨氮等有毒物质含量的不断增加, 极易引起养殖环境的水质恶化。

同时悬浮饵料微藻的供应方式也容易造成饵料的流失, 从而严重影响动物苗种的生长发育。

固定化细胞技术是构建生物反应器的一项重要生物工程技术, 对饵料微藻进行固定化培养, 可以达到两个目的: 一个是改善水质, 另一个是为鱼虾蟹幼苗提供活饵料。

因此, 研究适于海水育苗水体的饵料微藻固定化的培养条件, 探索固定化微藻作为育苗环境水质改良调节剂的新方法, 对于固定化细胞技术在水产养殖领域的发展应用, 具有一定的理论与实际意义。

本研究对几株海洋微藻进行固定化培养, 开展以下几方面的研究：1、对8株水产养殖中常用的饵料微藻以及3株自然海域分离的野生海洋微藻进行固定化培养摸索, 并选择有代表性的叉鞭金藻(Diorateria sp．)和云微藻(Chlorellasp．)两株藻种作为深入研究的材料。

通过测定藻珠内细胞生物量的变化, 研究固定化对藻生长的影响。

同时运用单因子实验方法和均匀设计实验方法进行固定化条件优化。

优化的固定化条件包括氯化钙浓度、海藻酸钠浓度、藻珠大小、接种量等。

得到适于两种海洋微藻固定化的条件是: 3％海藻酸钠浓度、0.31mol／L氯化钙、1.2#针头(藻珠d=4.4mm±0.1mm)、10~6cell／mL接种量。

研究结果为海洋微藻的进一步规模固定化培养与应用提供实验参数与可资借鉴的方法。

2.以三种不同类型的藻种为实验材料进行固定化培养, 从形态结构和生理生化上研究固定化对藻细胞的影响。

运用透射电子显微技术对固定化微藻细胞进行超微结构观察, 借用荧光显微技术和激光扫描共聚焦技术对固定化藻细胞的生理活性进行研究, 结合测定藻细胞内代谢产物胞内多糖含量和蛋白质含量的变化, 探讨固定化培养对藻细胞形态和生理生化的影响。

为海洋微藻固定化培养与研究提供理论依据3、将六株固定化海洋微藻引入西施舌幼虫和幼贝人工育苗养殖环境, 通过测定水体中氨氮和亚硝酸氮含量的变化, 测量幼虫和幼贝的生长量, 研究固定化藻珠对育苗水体水质的调控作用以及对幼苗成活率与生长的影响。

单细胞藻种质分离、培养和应用的技术操作规范单细胞藻种质分离、培养和应用的技术操作规范第一章常见单细胞藻的生物学简介第一节绿藻一、扁藻扁藻属绿藻门，绿藻纲，团藻目，衣藻科，扁藻属。

常用种类有青岛大扁藻和亚心形扁藻。

形态特征：亚心形扁藻的藻体一般扁压，细胞前面观广卵形，前端较宽阔，顶端前部凹陷。

鞭毛4条由凹陷处生出。

细胞内有一个大型、杯状、绿色的色素体，后端有一个呈内上开口的杯状蛋白核，有一个到数个红色眼点比较稳定地位于蛋白核附近、细胞中间略前。

原生质体里有一个细胞核。

细胞外有一层薄薄的纤维质细胞壁。

细胞长11~16微米，宽7~9微米，厚3.5~5微米。

能快速活泼游动。

繁殖方式：无性繁殖，细胞纵分裂形成2个（少数情况下4个）子细胞，环境不良时形成休眠孢子。

生态条件：1、盐度亚心形扁藻为广盐性，在8‰~80‰盐度的水中均能生长繁殖。

最适盐度在30‰~40‰之间。

2、温度亚心形扁藻为广温性，在7~30℃的范围内均能生长繁殖，最适范围在20~28℃之间。

3、光照亚心形扁藻在光照强度为1000~20000勒克斯范围内都能生长繁殖，最适光照强度约在5000~10000勒克斯之间。

4、酸碱度一般在pH6~9的范围内均能生长繁殖，最适范围约在pH7.5~8.5之间。

绿藻门的藻类在含有机质丰富的水中生长良好。

二、盐藻盐藻属绿藻门，绿藻纲，团藻目，盐藻科，盐藻属。

主要培养种类是盐藻，又称杜氏藻。

形态特征：盐藻没有细胞壁，细胞外只有一层弹性膜，所以体形变化很大，有梨形、椭圆形、长颈形和纺锤形等。

细胞内有一个杯状的色素体，色素体内的色素主要是叶绿素，生活条件不良时产生血红素，藻体呈红色。

在色素体内靠近基部有一个大的蛋白核，有一个红色眼点位于细胞上部。

原生质体中央有一个细胞核。

前端生出两条等长的鞭毛，鞭毛比细胞长约1/3。

细胞长16~24微米，宽10~13微米。

繁殖方式：无性繁殖，细胞纵分裂形成2个子细胞，环境不良时行有性生殖。

核农学报2024，38（3）：0532~0539Journal of Nuclear Agricultural Sciences不同光周期对湛江等鞭金藻生长、岩藻黄素含量和光合作用及相关基因表达的影响宋奕珩1龚一富1， *刘博悦1郦露群1王何瑜2（1宁波大学海洋学院，浙江宁波315832；2宁波大学食品与药学学院，浙江宁波315832）摘要：为研究不同光周期对湛江等鞭金藻（Isochrysis zhanjiangensis）细胞生长和岩藻黄素含量的影响，及其光合作用和基因表达调控机理，本研究测定了5种光周期条件下湛江等鞭金藻岩藻黄素、叶绿素含量和叶绿素荧光参数，利用实时荧光定量聚合酶链式反应（RTq-PCR）研究光合作用和岩藻黄素合成关键酶基因表达水平。

结果表明，18L∶6D光周期条件下，湛江等鞭金藻细胞生长最快。

当光周期为12L∶12D时，湛江等鞭金藻岩藻黄素产量最高，为4.35 mg·L-1。

当光周期为6L∶18D时，湛江等鞭金藻单位细胞岩藻黄素含量最高，为0.33 mg·105 cells-1，与光周期12L∶12D、18L∶6D和24L∶0D相比分别提高了5.3%、39.1%和63.5%（P<0.01）。

光合生理指标结果表明，随着光周期时间的增加，湛江等鞭金藻叶绿素含量及叶绿素荧光参数中PSⅡ实际光合量子产率Y（Ⅱ）和非光化学淬灭系数（qP）呈下降趋势，与岩藻黄素含量的变化趋势一致。

RTq-PCR结果表明，随着光周期时间的增加，湛江等鞭金藻Rubisco酶大亚基基因（rbcL）、八氢番茄红素脱氢酶基因（pds）、番茄红素β-环化酶基因（lcyb）和玉米黄素环氧酶基因3（zep3）表达呈下降趋势，与岩藻黄素含量的变化趋势一致，说明光周期可能通过rbcL、pds、lcyb和zep3调控岩藻黄素合成。

光周期通过调控光合作用和岩藻黄素生物合成相关基因表达影响湛江等鞭金藻中岩藻黄素的积累。

实验一常用单细胞藻类的形态观察一、实验目的：观察并识别作为饵料生物的代表性单细胞藻类的种类，为后继单细胞藻类的分离和培养做准备。

二、实验器材：1、藻种绿藻门：Chlorophyta小球藻Chlorella sp.盐藻Dunaliella sp.青岛大扁藻Platymonas helgolandica var. tsingtaoensis亚心形扁藻Platymonas subcodiformis微绿球藻Nannochloropsis oculata硅藻门：Bacillariophyta三角褐指藻Phaeodactylum tricornutum小新月菱形藻Nitzschia closterium f. minutissima中肋骨条藻Skeletonema costatum牟氏角毛藻Chaetoceros muellerixx门：ChrysophytaxxPavlova viridis球等鞭金藻Isochrysis galbana湛江等鞭金藻Isochrysis zhanjiangensisxx门：Cyanophyta钝顶螺旋藻Spirulina platensisxx门：Xanthophyta异胶藻Heterogloeasp.2、实验器材光学显微镜，载玻片，盖玻片，胶头滴管，鲁哥氏碘液，甲醛溶液，滴瓶，无菌水，擦镜纸，吸水纸三、操作步骤及要求：用胶头滴管吸取液体培养的各种藻类样品，滴到载玻片上（若藻种浓度大用无菌水稀释），用显微镜（低倍和高倍）观察细胞的形态大小，色素分布，运动方式，然后用碘液或甲醛固定样品，观察细胞的鞭毛着生情况（长度、数量），细胞的内部结构等。

四、结果与讨论：1、描绘5种藻类形态、构造图，描述各种藻类的特征颜色。

运动性的藻类，描述其细胞游动方式。

2、用甲醛固定样品与用碘液固定样品，在观察细胞结构上有何不同的效果？实验二饵料生物个体及筛网xx大小的测量一、实验目的：1、学会并掌握使用目测微尺和台测微尺在显微镜下测量物体大小。

杜氏盐藻与4种海洋微藻间的化感作用潘远健;金刚;代建国;丁莉;张丽君;栾崇林;于化泓【摘要】利用交叉培养结合高效液相色谱分析的方法，研究了杜氏盐藻与球等鞭金藻、叉鞭金藻、湛江等鞭金藻和小球藻之间的化感作用，并测定了受试后球等鞭金藻和杜氏盐藻的SOD活力。

结果表明：（1）杜氏盐藻与球等鞭金藻、青岛叉鞭金藻、湛江等鞭金藻及小球藻之间存在着显著的化感作用，其中，湛江等鞭金藻、青岛叉鞭金藻胞外滤液对杜氏盐藻的生长有明显的抑制作用，杜氏盐藻胞外滤液明显地抑制小球藻的生长；（2）青岛叉鞭金藻、湛江叉鞭金藻、球等鞭金藻和小球藻胞外滤液萃取物分别至少由6种、8种、6种和6种物质组成；（3）微藻胞外滤液对受试藻SOD酶活性有明显影响。

%Together with high performance liquid chromatography (HPLC) analysis, the method of cross culture is applied to research the allelopathy among the Dunaliella salina, Isochrysis galbana,Dicrateria inornata, Isochrysis zhangjiangensis and Chlorella vulgaris. Besides, the SOD activity ofI. galbana and D. salina is measured. Results indicate that:① a significant allelopathy exists among theD. salina, I. galbana,D. inornata, I. zhangjiangensis and C. vulgaris, in which the extracellular filtrate of Isochrysis zhangjiangensis and Dicrateria inornata distinctively inhibits the growth of D. salina; the extracellular filtrate of D. salina inhibits the growth of C. vulgaris.② The extracellular filtrate ofD. inornata, I. zhangjiangensis, I. galbana and C. vulgaris respectively consists of at least 6, 8, 6, 6 kinds of components;③ The extracellular filtrate has obvious influence on the SOD enzyme activity of the subjected algae.【期刊名称】《深圳职业技术学院学报》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】7页(P47-53)【关键词】微藻;杜氏盐藻;化感作用【作者】潘远健;金刚;代建国;丁莉;张丽君;栾崇林;于化泓【作者单位】深圳职业技术学院深圳市大规模细胞培养技术和细胞资源库公共技术服务平台，广东深圳 518055; 南昌大学生命科学与食品工程学院，江西南昌330031;深圳职业技术学院深圳市大规模细胞培养技术和细胞资源库公共技术服务平台，广东深圳 518055;深圳职业技术学院深圳市大规模细胞培养技术和细胞资源库公共技术服务平台，广东深圳 518055;深圳职业技术学院深圳市大规模细胞培养技术和细胞资源库公共技术服务平台，广东深圳 518055;深圳职业技术学院深圳市大规模细胞培养技术和细胞资源库公共技术服务平台，广东深圳518055;深圳职业技术学院深圳市大规模细胞培养技术和细胞资源库公共技术服务平台，广东深圳 518055;南昌大学生命科学与食品工程学院，江西南昌330031【正文语种】中文【中图分类】Q178.532由水体富营养化导致的有害藻类暴发性生长，已成为一个世界性的环境问题[1]．传统的藻类控制方法主要有化学、物理和微生物抑藻、动物捕食等．这些方法都不同程度地存在缺陷，如产生次二次污染、费用高等．而藻类的化感作用为解决上述问题提供了一种新颖的思路．化感作用是物种之间的基本生态关系之一，通过分泌至周围环境的化感物质来调节物种的数量或者产生其它生态效应．化感物质通常是植物生长过程中产生的次级代谢物，它们对藻类的化感作用专一性较好，并且一般都能在自然条件下降解[2]．因此，植物化感作用控藻方法是一种生态安全性好，有良好的应用前景的方法．已有较多研究涉及陆生植物和大型水生植物的提取物对藻类生长的控制效果．例如 Nakai 等研究表明，水生植物可以通过连续释放化感物质来抑制藻类的生长[3]．但是，微藻之间的化感作用报道还不多．本实验以微藻的胞外滤液作为基础实验用液，运用交叉培养的方法[4]，探讨分析了球等鞭金藻（Isochrysis galbana）、叉鞭金藻(Dicrateria inornata)、湛江等鞭金藻(Isochrysis zhangjiangensis Hu. Var. sp)以及小球藻（Chlorella vulgaris）与杜氏盐藻（Dunaliella salina）间的化感作用，同时通过测定受试藻的SOD活力和高效液相色谱分析球等鞭金藻等4种海洋微藻胞外滤液的萃取物，以期获知胞外滤液中化感物质的相关信息，为利用化感作用原理应用于经济微藻的生产和水体富营养化的治理提供有价值的参考．1.1 藻种杜氏盐藻、球等鞭金藻、叉鞭金藻、湛江等鞭金藻和小球藻为本实验室保存，经传代培养后作为实验材料．1.2 主要仪器和试剂Spectra Max M2酶标仪（北京九宇鑫泰生物技术有限公司），高效液相色谱仪（深圳宝域科技有限公司），净化工作台（蚌埠净化设备厂），280高压灭菌锅（上海申安医疗器械厂），微量移液枪，小型离心机，SOD活力测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）．1.3 微藻胞外滤液的制备采用PES培养液培养微藻，盐度为30.5‰，培养温度为（25±1）℃．培养液所用海水为人工配制海水，高温灭菌冷却后待用．所用试验器皿先经浸泡，烘干，高压灭菌，冷却后使用．试验操作均在超净工作台无菌条件下进行．培养液体积为150 mL．培养条件：光照强度3000 Lux，光暗周期12 L：12 D．每天摇动培养瓶3次并随机调换摆放位置，以防止藻细胞附壁沉淀和减少光照误差．微藻胞外滤液的收集方法：培养 15 d 后，将生长至衰退期的供体藻离心收集其藻液，用灭菌人工海水(盐度为30.5‰)离心洗涤l-2次．再往无菌藻体中加入50mL的无菌人工海水，混匀，置于光照培养架中浸提．3d后离心收集上清液．上清液需多次离心直至上清中镜检不出藻体，再用无菌0.22 μm微孔滤膜过滤一次，以完全去除藻体．所得上清液即为微藻胞外滤液，储存于4 ℃保存备用．1.4 微藻在胞外滤液中的培养1.4.1 杜氏盐藻在4种海洋微藻胞外滤液中的培养将4种微藻胞外滤液按不同体积比分别加入PES培养基，体积比分别为0、20%、40%、60%、80%，各配制100 mL，分别接种6×105/ mL的杜氏盐藻，置于组培架培养，温度25℃，光照强度3000 Lux，光暗周期为12 L：12 D，每个培养瓶设定3 个平行样．1.4.2 微藻的胞外滤液萃取物的制备以及萃取物对杜氏盐藻生长的影响将4 种微藻胞外液各 100 mL pH调至2.5，用乙酸乙酯萃取，50 ℃蒸干后，将萃取物分别加入100 mL PES培养基中，均用于培养杜氏盐藻，接种密度为6×105/mL ．培养条件同1.4.1．1.5 SOD酶活力的测定分别取球等鞭金藻和小球藻0～60%体积比胞外滤液作用后盐藻的待测藻液40 mL，6000 r/min离心5 min，倾去上清夜，加入5 mL的0.1mol/L的磷酸钠缓冲液(pH7.0)混匀，6000 r/min离心5 min，重复洗涤一次．再离心后得到的藻体当中加入5mL磷酸钠缓冲液(pH.70)．在冰水浴条件下用超声波细胞破碎机600W 破碎5min，再于4000 r/min离心10 min，上清液即为超氧化物歧化酶SOD粗酶液，用于SOD活力的测定．SOD活性按试剂盒说明测定．1.6 微藻胞外滤液萃取物的高效液相色谱分析取适量微藻胞外滤液萃取物，用乙酸乙酯溶解后，进行高效液相色谱分析．色谱条件：流动相为乙腈-水（体积比为70:30）；色谱柱ZORBAX Eclipse XDB-Cl8，ID 4.6 mm×150 mm，5 µm；0.3 mL / min恒流洗脱；检测波长：UV-235 nm，进样量10µL．2.1 四种海洋微藻胞外滤液对杜氏盐藻生长的影响通过测量藻细胞的光密度值，依据光密度值与细胞密度之间的关系，可简便快捷地得知微藻的生长情况[5,6]．图1显示了杜氏盐藻在4种海洋微藻胞外滤液不同体积比混合液中的生长曲线．从图1可以看出，当湛江等鞭金藻、叉鞭金藻胞外滤液体积比大于20%时，对杜氏盐藻的生长都有明显的抑制作用，并且这种抑制作用随胞外滤液体积比的增大而加强．球等鞭金藻胞外滤液体积比较低时，明显促进杜氏盐藻生长，而体积比大于60%时，抑制了杜氏盐藻的生长．小球藻胞外滤液体积比在0～20%时，对杜氏盐藻的生长起促进作用，而体积比大于20%时则抑制杜氏盐藻的生长．2.2 杜氏盐藻胞外滤液对四种海洋微藻生长的影响由图 2可以看出，杜氏盐藻胞外滤液明显地抑制了小球藻的生长，并且随胞外滤液比例的增大对小球藻生长的抑制作用更加明显．然而，当胞外滤液体积比大于20% 时，杜氏盐藻胞外滤液明显地促进了球等鞭金藻的生长．杜氏盐藻胞外滤液对叉鞭金藻和湛江等鞭金藻的影响有所不同，当滤液体积比在20%～40%范围时，杜氏盐藻胞外滤液促进了叉鞭金藻的生长，当滤液体积比在 20%～60%范围内，杜氏盐藻胞外滤液明显地促进湛江等鞭金藻的生长，仅当胞外滤液体积比大于80% 时对其生长才呈现抑制作用．2.3 微藻的胞外滤液萃取物对杜氏盐藻生长的影响4种海洋微藻胞外滤液的萃取物对杜氏盐藻生长的影响结果如图3所示．除了球等鞭金藻的胞外滤液萃取物可以促进杜氏盐藻的生长以外，其余均抑制杜氏盐藻的生长，且抑制作用类似于它们各自的胞外滤液对杜氏盐藻生长的抑制效果．2.4 SOD酶活性SOD对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，它可以清除自由基，使细胞免受伤害，能够使植物在一定程度上忍耐、减缓或抵抗逆境胁迫．有研究发现，芦苇中分离得到的抑藻活性组分能够降低藻细胞中超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）的活性，引起某些脂类的过氧化①Li F M, Hu H Y. Isolation and characterization of a novel antialgal allelochemical from Phragmites communis[J]. Applied and Environmental Microbiology, (in press).．SOD酶活性越高，其抵抗力越强[7]．球等鞭金藻和小球藻胞外滤液体积比在0～60%范围内，对杜氏盐藻SOD活性的影响分别如图4和图5所示．从图4可以看出，在球等鞭金藻胞外滤液对杜氏盐藻的作用中，40%的胞外滤液SOD活性最大，说明藻体内抗氧化系统得到了增强，SOD活性上升，以清除体内产生的过量的自由基，进而减轻藻体所受到的伤害，提高其抵抗力和促进细胞增殖．在图5中，小球藻藻胞外滤液体积比为20%时，杜氏盐藻SOD活性最高，随后逐渐降低，表明细胞液中自由基由少变多，机体内受到了一定的伤害，从而抑制细胞增殖．2.5 微藻的胞外滤液萃取物的高效液相色谱分析结果利用高效液相色谱分析了4 种海洋微藻胞外滤液萃取物的成分（图6）．青岛叉鞭金藻胞外滤液萃取物产生6个主要峰（图6a），出现时间分别为6.768，8.013，9.846，10.630，12.924，26.017 min．湛江叉鞭金藻胞外滤液萃取物产生8个主要峰（图6b），出现时间分别为4.950，6.814，8.051，8.905，9.832，10.814，12.939，25.650 min．球等鞭金藻胞外滤液萃取物产生6个主要峰（图6c），出现时间分别为6.825，8.045，9.830，10.814，12.924，25.606 min．小球藻胞外滤液萃取物产生6个主要峰（图6d），出现时间分别为6.817，8.078，9.821，10.798，12.898，25.564min．由此可知，叉鞭金藻，湛江叉鞭金藻，球等鞭金藻和小球藻胞外滤液萃取物分别至少由6种、8 种、6 种和6种物质组成．这些物质的具体化学信息还有待进一步研究．化感效应包括3种类型：抑制效应、促进效应和中性效应[8]．目前，已经有相关文献报道了雨生红球藻（Haematococcus pluvialis）[9]、中肋骨条藻（Skeletonema costatum）[10]、强壮前沟藻（Amphidinum carterae Hulburt）、青岛大扁藻（Platymonas helgolondica var.tsingtaoensis）[11]和某些赤潮微藻[12,13]等微藻的化感作用．本研究利用交叉培养方法确定了杜氏盐藻与球等鞭金藻、叉鞭金藻、湛江等鞭金藻和小球藻之间存在着显著的化感作用（图1和图2）．其中，球等鞭金藻、杜氏盐藻胞外滤液对彼此之间的生长起相互促进作用．而湛江等鞭金藻和叉鞭金藻胞外滤液对杜氏盐藻，以及杜氏盐藻胞外滤液对小球藻的抑制作用则比较显著，说明同一种藻对不同的受体藻会产生多种的化感效应类型．杜氏盐藻与湛江等鞭金藻的相互化感效应类型不同，其中湛江等鞭金藻胞外滤液对杜氏盐藻的生长产生促进作用，而杜氏盐藻胞外滤液对湛江等鞭金藻的生长则产生抑制作用．本研究结果显示，在所选5种海洋微藻中，叉鞭金藻、湛江等鞭金藻和小球藻的胞外滤液的乙酸乙酯萃取物能明显抑制杜氏盐藻的生长，球等鞭金藻的胞外滤液的乙酸乙酯萃取物则能促进杜氏盐藻的生长．因此，这不仅证明杜氏盐藻与球等鞭金藻等4种海洋微藻间存在着显著的化感作用，同时也说明这4种海洋微藻胞外滤液中的化感物质可以通过有机溶剂提取获得．其它研究也有类似结果[1]．本研究还发现，受杜氏盐藻各个体积比胞外滤液作用的球等鞭金藻SOD酶活性均显著高于对照组，可能的原因是其SOD酶活性足以保护其免受伤害，使生物量免遭不利影响，该藻的抗逆性得到加强，提高了机体的生理生化机制，从而加快藻细胞的生长繁殖速度．杜氏盐藻SOD活力在高浓度（60%）的小球藻胞外滤液作用下低于对照组，SOD酶的平衡遭受破坏且新的平衡难以重新建立，从而导致细胞受到损伤，其细胞密度和生物量的增长受到抑制．因此笔者认为，微藻生长环境发生改变时，SOD酶活性间接的体现了受体藻的促进和抑制效应类型，即受体藻SOD酶活性高，滤液对其生长会产生促进作用，活性低则反之，二者间很可能存在某种线性关系．通过高效液相谱法（HPLC）较好地分离出小球藻，叉鞭金藻，球等鞭金藻和湛江等鞭金藻的胞外滤液萃取物的成分．由图6可知，这些微藻滤液中存在着数量不等和种类不同的化感物质．杜氏盐藻和球等鞭金藻均为营养价值和经济价值较高的微藻，两者之间的胞外滤液可以相互促进彼此的生长，同时杜氏盐藻胞外滤液还可以对小球藻产生抑制作用，为利用化感作用原理应用于经济微藻的生产和水体富营养化的治理上提供一定参考．【相关文献】[1] Paerl H W and Huisman J. 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