菌种活化_操作方法

菌种的活化操作步骤
菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养，逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。

菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化，让菌种逐渐适应培养环境。

要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。

目前国际国内常用的菌种保存方法包括：定期移植法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、80℃冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。

对于不同的保存方式活化的方式也不同：
1、定期移植法的菌种复苏较简单，直接转接即可。

2、液体石蜡法保存的菌种在复苏时，挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上，生长繁殖后，再重新转接一次。

3、沙土管法保存菌种在复苏时，在无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上，长出菌落后再转接一次。

或取沙土粒于适宜的液体培养基中，增殖培养后再转接斜面。

活化菌种的方法菌种是微生物学研究中非常重要的一部分，它们可以用于制备各种发酵产品，如酸奶、酒、酱油等。

但是，菌种经过一段时间的保存后，会出现休眠或死亡的现象，这就需要进行活化处理，使其恢复生命活力。

本文将介绍几种常见的活化菌种的方法。

一、温度法温度法是最常用的活化菌种方法之一。

该方法是将被保存的菌种移至适宜的温度环境下进行培养，使其恢复生命活力。

具体方法是将菌种从冰箱中取出，放置于适宜的温度环境中进行培养。

一般情况下，大多数菌株的培养温度为30℃左右。

二、营养法营养法是通过添加适当的营养成分来活化菌种。

该方法适用于营养成分缺乏、菌种处于休眠状态的情况。

具体方法是将保存的菌种接种到含有适量营养成分的培养基中进行培养。

常用的营养成分包括葡萄糖、酵母粉、胰蛋白胨等。

三、pH法pH法是通过改变培养基的pH值来活化菌种。

该方法适用于菌种处于休眠状态、培养基酸碱度不适宜的情况。

具体方法是将保存的菌种接种到pH值适宜的培养基中进行培养。

一般情况下，大多数菌株的适宜pH值为6.5-7.5。

四、氧气法氧气法是通过调节培养环境氧气含量来活化菌种。

该方法适用于需氧菌株、培养环境氧气含量不足的情况。

具体方法是将保存的菌种接种到含有适量氧气的培养基中进行培养。

常用的氧气供应方式包括摇床培养和搅拌培养。

五、复苏法复苏法是通过多种活化手段的组合来活化菌种。

该方法适用于菌种处于极度休眠状态、多种单一活化手段无法恢复生命活力的情况。

具体方法是将保存的菌种接种到含有多种活化成分的培养基中进行复苏培养。

常用的活化成分包括葡萄糖、酵母粉、胰蛋白胨、氧气等。

总之，活化菌种是菌种保存和利用中的重要环节。

选择合适的活化方法可以使菌种恢复生命活力，保证其在后续的利用中发挥更好的作用。

活化菌种的方法菌种的活化是指将冷冻、干燥或其他方式保存的菌种重新复苏，使其具有生物活性和生长能力的过程。

活化菌种的方法有很多种，根据菌种的特点和保存方式的不同，选择不同的方法进行活化。

本文将介绍几种常见的活化菌种的方法。

一、液体培养法液体培养法是一种简单、易操作的活化菌种方法。

首先将保存的菌种接种到含有适当营养成分的液体培养基中，然后在适当的温度、湿度和通气条件下培养。

液体培养法的优点是适用范围广，可以用于多种菌种的活化，且容易控制生长条件，可以获得较高的活化率。

但液体培养法需要较长的时间才能获得足够的活化菌种，而且需要较大的培养设备和操作空间。

二、固体培养法固体培养法是将保存的菌种接种到含有适当营养成分的固体培养基上，然后在适当的温度、湿度和通气条件下培养。

固体培养法的优点是可以获得单个菌落，可以对菌株进行纯化和鉴定。

但固体培养法的缺点是需要较长时间才能获得足够的活化菌种，而且需要较大的培养设备和操作空间。

三、滴定法滴定法是将保存的菌种加入到含有适当营养成分的液体培养基中，然后逐渐加入新的培养基，使菌株逐渐适应新的环境。

滴定法的优点是可以逐渐适应新的环境，可以获得较高的活化率。

但滴定法需要较长的时间才能获得足够的活化菌种，而且需要较大的培养设备和操作空间。

四、化学处理法化学处理法是利用化学物质对保存的菌种进行处理，使其重新复苏。

常用的化学处理方法包括酸碱处理、渗透压处理、氧化还原处理等。

化学处理法的优点是操作简单，可以获得较高的活化率。

但化学处理法对菌株的适应性要求较高，有可能对菌株造成伤害，影响其生物活性和生长能力。

五、生物处理法生物处理法是利用其他微生物对保存的菌种进行处理，使其重新复苏。

常用的生物处理方法包括共培养法、共生法、共生菌法等。

生物处理法的优点是可以利用其他微生物对菌株进行适应性调节，可以获得较高的活化率。

但生物处理法对微生物的适应性要求较高，且需要较长时间才能获得足够的活化菌种。

菌种活化操作步骤引言：菌种活化是一项重要的实验室技术，用于使冷冻保存的微生物菌种恢复活力并进行后续研究。

本文将介绍菌种活化的操作步骤，以帮助读者正确进行实验并获得可靠的结果。

一、准备工作1.1 材料准备确保准备好以下实验材料：- 冷冻保存的菌种样本- 无菌培养基- 无菌培养皿或试管- 灭菌的移液器和吸头- 灭菌的培养箱或恒温培养箱- 无菌操作台或洁净工作台1.2 环境准备在进行菌种活化之前，必须确保实验环境的无菌和洁净。

清洁操作台或洁净工作台，并使用适当的消毒剂擦拭工作表面。

同时，确保培养箱或恒温培养箱已经预热到适当的温度。

二、菌种活化步骤2.1 无菌操作在进行菌种活化之前，务必进行无菌操作。

戴上手套，使用灭菌的移液器和吸头，避免任何外界污染。

2.2 菌种接种将冷冻保存的菌种样本取出，迅速将其转移到无菌培养基中。

使用移液器，将适量的菌种悬浮液滴入无菌培养皿或试管中。

确保每个培养皿或试管只接种一种菌种。

2.3 培养条件设置根据菌种的特性，设置适当的培养条件。

这包括温度、pH值、培养基成分等。

将接种好的培养皿或试管放入预热好的培养箱或恒温培养箱中。

2.4 培养过程管理在菌种活化的过程中，需要定期观察和管理培养过程。

这包括检查培养皿或试管中的菌落形态和生长情况，以及调整培养条件，如温度和培养基的补充。

2.5 菌种分离与保存当菌种活化成功后，可以进行菌种分离和保存。

使用无菌技术，将菌落转移到新的培养皿或试管中，并进行进一步的鉴定和研究。

同时，将一部分菌种保存在冷冻条件下，以备将来使用。

结论：菌种活化是一项关键的实验技术，为后续的微生物研究提供了可靠的菌种资源。

通过正确的操作步骤，可以成功地活化冷冻保存的菌种，并获得可靠的实验结果。

在进行菌种活化实验时，务必遵循无菌操作规范，并根据菌种的特性进行适当的培养条件设置和管理。

这将有助于保证实验的准确性和可重复性，为微生物研究提供坚实的基础。

菌种活化的操作方法
菌种活化的操作方法包括以下几个步骤：
1. 选择合适的培养基：根据菌种的特性选择适合它生长和繁殖的培养基，例如普通营养琼脂培养基、选择性琼脂培养基等。

2. 预处理培养基：将培养基加热至融化状态后，待其降温至大约45-50摄氏度时，加入适量的菌种悬浮液。

3. 均匀混合：用铁线或玻璃棒将菌液和培养基充分混合均匀。

4. 倒入培养器：将混合后的培养基倒入培养器（如琼脂培养皿或试管）中，使其均匀覆盖整个培养器底部。

5. 固化培养基：让培养器中的培养基自然凝固，或者将其放置在恒温箱中以加速凝固。

6. 培养：将已固化的培养基置于适当的环境中，如温度、湿度等适宜的条件下培养。

7. 观察生长情况：根据菌种的特性和培养的要求，定期观察并记录菌种的生长情况，如菌落形态、颜色等。

需要注意的是，不同的菌种可能有不同的活化方法，因此在操作前最好查阅相关的文献资料，或者咨询专业人员的建议。

此外，操作时要保持清洁，避免外界微生物的污染。

安瓿瓶冻干菌种活化（来源小木虫论坛）
操作步骤：1）安管的开封：a用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安管；b用火焰将安管顶端加热；c滴无菌水至加热的安管顶端使玻璃开裂；d用锉刀或镊子敲下已开裂的安管顶端。

2）菌株恢复培养：a用无菌吸管吸取0.3-0.4ml适宜的液体培养基，滴入安管内轻轻振荡，使冻干菌体溶解成悬浮状。

b取约0.2ml菌体悬液移植于指定的琼脂斜面或平板培养基，剩余的菌液注入指定的液体培养基内（3-4ml），在建议温度下培养。

活化的代数根据菌株而定，有传2-3次，有的要5-6次才能用于工业生产，总之，看菌株的状态吧
试管斜面保存只能短期，一个月左右，相对来说，甘油保存法效果好些，且简单易行，保存方法：取菌液与15%甘油等体积混匀，于-20度保存。

菌种活化工艺流程说明
一、目的
本工艺流程的目的是重新活化已经冷冻保存的菌种,使其恢复生长复制功能。

二、应用范围
本工艺流程适用于所有需要从-80°低温贮存恢复的各种细菌菌种。

三、必需设备与材料
1. 试管
2. 转移枪或吸杆
3. 液体压缩氮槽
4. 37°或28°恒温培养箱
5. 理想培养基
四、流程操作
1. 取出低温保存的菌种草液,放在振荡机中,振荡均匀。

2. 用转移枪或吸杆取出少量菌种草液,转移至含有理想培养基的试管中。

3. 将菌种试管置入37°或28°恒温培养箱中培养恢复。

4. 每隔24小时观察菌变化,直到见到菌落增长。

5. 培养48小时后,菌种正式进入对数生长期,即完成活化。

五、注释
以上流程仅供参考,细节操作请根据不同菌种的生理要求进行调整。

活化过程需严格规范执行,以确保菌种活性的完全恢复。

菌种活化的一般步骤菌种活化是指将处于休眠或非生长状态的菌种重新恢复到活跃生长的状态。

菌种活化是微生物实验室中常见的操作步骤之一，也是进行微生物研究和实验的基础。

一般而言，菌种活化的步骤可以分为以下几个阶段。

第一阶段：选择适宜的培养基菌种活化的第一步是选择适宜的培养基。

不同的菌种对培养基的要求有所不同，因此需要根据菌种的特性选择合适的培养基。

常用的培养基包括琼脂培养基、液体培养基和固体培养基等。

第二阶段：制备培养基在选择好合适的培养基之后，需要按照配方将培养基制备出来。

制备培养基的过程包括称量培养基原料、加入适量的蒸馏水、加热溶解、高压灭菌等步骤。

第三阶段：接种菌种接种菌种是菌种活化的关键步骤。

首先需要从菌种保存液或冰冻物中取出菌株，然后在无菌条件下将菌株接种到培养基中。

接种方法可以采用平板接种、液体接种或斜面接种等不同的方式。

第四阶段：培养菌种接种完成后，需要将培养基含有菌株的培养皿放入恰当的培养条件下进行培养。

培养条件包括温度、pH值、氧气含量等因素。

根据菌种的特性，选择合适的培养条件进行培养，以促进菌株的生长和繁殖。

第五阶段：观察和记录在菌种活化的过程中，需要及时观察和记录菌株的生长情况。

观察菌株的生长速度、菌落形态、颜色等特征，并记录在实验笔记中。

这些观察和记录可以为后续的实验和研究提供重要的参考依据。

第六阶段：分离纯培养菌种活化的最终目的是获得纯培养的菌株。

在观察和记录菌株的生长情况后，可以根据菌落的形态特征进行分离纯培养。

分离纯培养的方法包括传代培养、单菌落挑选等。

通过分离纯培养，可以获得纯净的菌株用于后续的实验和研究。

总结起来，菌种活化的一般步骤包括选择适宜的培养基、制备培养基、接种菌种、培养菌种、观察和记录以及分离纯培养。

这些步骤的顺序和操作方法可以根据具体的实验目的和菌种特性进行调整和优化。

通过合理的菌种活化步骤，可以获得活跃的菌株，为后续的微生物研究和实验提供可靠的实验材料。

菌种活化与传代一、菌种活化下列步骤请在无菌环境下操作：1、把冻干菌种管、灭菌1ml 滴管、双碟、镊子、营养肉汤培养基、营养琼脂斜面数支，移入接种室或净化工作台。

2、先用砂轮将冻干菌种安瓶颈部挫出刻痕,再将冻干菌种管外壁用75%乙醇擦洗消毒、稍干，用75% 乙醇棉擦净，放在灭菌双碟内，待干。

点燃酒精灯，将菌种管的封口一端在火焰上，烧灼红热，用灭菌滴管吸取营养肉汤培养基，滴在灼热的菌种管封口一端，使骤冷而炸裂。

（有些商品化的产品打开更方便）3、取灭菌镊子，在火焰旁，将炸裂的管口打开，放入灭菌双碟内，另取1支灭菌滴管，在火焰旁吸取营养肉汤少许（无菌水也可），加至菌种管底部，将冻干菌搅动促使溶解，随即吸出管内菌液，分别接种至营养琼脂斜面及普通肉汤内，并将滴管及菌种管投入消毒液内，将已接种的营养肉汤及营养琼脂斜面进行培养。

( a ) 适用细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基或无菌水，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。

( b ) 适用霉菌、酵母菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml无菌水，滴入内管内，待干燥粉末溶解后，以无菌吸管吸取并滴入约含有5ml无菌水之试管内，轻微震荡使其均匀后，静置30至60分钟。

4、某些菌种经过冷冻干燥保存后，迟滞期较长，必须等培养二倍时间后才能长出，且再经过一、二次继代培养才能正常生长。

经过以上的努力后仍培养失败，才视为不能活化。

二、菌种传代1、培养基应新鲜制备，如斜面已无冷凝水者，不宜再使用。

标签上写上菌名及接种日期。

至冰箱取出的菌种斜面，应在室温放置约30分钟，待温度平衡后再移入接种室或超净工作台。

2、点燃酒精灯，用左手握住菌种斜面，将管口靠进火焰旁，右手拿接种棒后端，将接种环烧红30秒，随后将全部接种棒金属部分在火焰上烧灼，往返通过3次。

左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手用无名指、小指及掌部夹住棉塞，拨开棉塞，将接种环伸人管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下，稍冷却再移至菌苔上，刮去少量菌苔，随即取出接种棒，并将菌种管口移至火焰旁。

放入-20度的环境保藏菌种，并不是很好。

最好用液氮保藏或者-70度的冰箱的保藏，菌种比较稳定。

其实，菌种的活化步骤如下：
第一天：
1、放入4℃，一直到变成液状；（用液氮保藏直接放入37度的温水中，待变成液体状，直接划线培养）
2、制备固体培养基，灭菌后，在超净工作台进行以下操作：
3、制备液倒入无菌培养皿，每培养皿约25ml；
4、待凝固后，用接种环，划板；
5、水平放置半小时以上，待菌吸附在培养基上。

5、用保鲜膜或者封口膜密封培养皿，倒置于37℃恒温箱中过夜；
第二天：
6、制备150mL液体培养基，灭菌后，在超净工作台进行以下操作：
8、挑平板上单个菌落，至液体培养液中，200rpm摇床过夜；
这样培养的菌液放入4度冰箱，可以在一周内做后续的实验。

但是超过一周，就别用了。

还有上述的平板放到4度的冰箱里，可以在两周内重新扩大培养成菌液。

但是超过2周，就别用了，活性和特性都不稳定。

菌种的活化方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：菌种活化是指将菌种从休眠状态激活至活跃状态的过程，使其恢复生长和繁殖能力。

良好的活化方法可以提高菌种的发酵效率和产量，保证产品的质量稳定性。

下面将介绍一些常用的菌种活化方法。

一、前处理菌种在储存过程中可能会受到损伤或降解，因此在进行活化之前首先要进行前处理。

常见的前处理方法包括：将菌种在富含营养物质的培养基中培养一段时间，以恢复其活力；采用低温冷冻保存的菌种需先进行解冻和复苏处理；对于被冷冻干燥的菌种，需要通过加入适量水或培养基来复苏。

二、温度调节温度是影响菌种活化的一个重要因素。

一般来说，大多数菌种的适宜生长温度在25-35摄氏度之间。

在活化菌种时应根据不同菌种的特性和环境条件调节适宜的温度，提供一个适宜的生长环境，促进菌种的恢复和生长。

三、培养基选择培养基的选择对菌种的活化也有很大的影响。

一般来说，应选择含有适当营养成分、低毒性和无污染的培养基，以促进菌种的复苏和生长。

对于不同种类的菌种可能需要选择不同的培养基，以满足其特定的生长和营养需求。

四、氧气供应氧气是微生物生长和代谢所必需的。

在活化菌种时，应保证有足够的氧气供应，以促进菌种的代谢活动和生长。

可以通过搅拌、通气等方式增加培养基中的氧气含量，提高菌种的代谢和生长速度。

五、PH值调节PH值是影响菌种生长的另一个重要因素。

不同菌种对PH值的适应范围不同，因此在活化菌种时应考虑到不同菌种的PH值需求。

一般来说，绝大多数菌种的适宜生长PH值在6-8之间，因此应选择适当的PH值培养基来活化菌种。

六、添加生长因子有些菌种对特定生长因子有较高的依赖性，缺乏这些生长因子会导致其生长迟缓或死亡。

在活化菌种时，可以考虑添加一些生长因子或促生长物质，以帮助菌种更快地复苏和生长。

不过，需要根据菌种的特性和需求来确定添加何种生长因子以及添加的浓度。

七、时间控制菌种活化的时间一般较长，需要耐心等待。

在活化菌种时，应根据菌种的生长速度和复苏程度来控制活化时间，不能过早打断或过早结束。

安瓿管菌种活化的标准操作流程1.准备培养基和所需的试管或培养皿。

Prepare the culture medium and the required test tubes or petri dishes.2.将培养基加热至适当的温度，以杀灭其中的细菌。

Heat the culture medium to the appropriate temperature to kill any bacteria present.3.在无菌条件下，将培养基分装至试管或培养皿中。

Under sterile conditions, transfer the culture mediuminto the test tubes or petri dishes.4.将安瓿管菌种从冷藏保存中取出。

Remove the ampoule of fungal culture from cold storage.5.用无菌的工具打开安瓿管。

Use sterile tools to open the ampoule.6.将适量的安瓿管菌种接种到培养基表面。

Inoculate an appropriate amount of fungal culture onto the surface of the culture medium.7.用无菌的棉签或吸管轻轻均匀涂抹菌种。

Gently spread the fungal culture evenly using a sterile cotton swab or pipette.8.确保接种完全无菌，避免外界细菌的污染。

Ensure the inoculation is completely sterile and free from contamination by external bacteria.9.密封好试管或培养皿，避免空气和细菌进入。

Seal the test tubes or petri dishes to prevent the entry of air and bacteria.10.将试管或培养皿放入恒温培养箱中，保持适当的温度和湿度。

菌种活化步骤
日期：2007-6-26 18:31:28 点击次数2519 发布单位：EM 录入：李清
一、安瓿瓶装微生物菌种开封
1-1、用浸过70％酒精的脱脂棉擦净安瓿瓶。

1-2、用火焰将安瓿瓶口加热灭菌。

1-3、用镊子将铝封口撕开。

二、菌株恢复培养
2-1、用无菌吸管，吸取0.3-0.4ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。

2-2、取约0.2ml菌体悬浮液，移植于指定的琼脂斜面培养基上，剩余的菌液，注入指定的液体培养基内（3-4ml），然后在建议的温度下培养。

三、注意事项
3-1、菌种活化前，请将安瓿瓶保存在5-10℃的环境下。

3-2、厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态。

3-3、某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。

四、制作ＥＭ菌液
4-1、菌种活化:用ＥＭ菌种10克、红糖0.1公斤（红糖先用热水溶化），加入1公斤的水。

注：（先把水加热到100°C后加入红塘或白糖，而后继续加热5分钟。

冷却到40°C时加入ＥＭ菌种），密闭发酵(35°C-40°C温度)下活化3天，打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。

可以作为液体菌种使用。

4-2、制作原液：将活化好的液体菌种加入二级发酵罐。

菌种——二级发酵罐(密闭) (加水比例:按1:10的比例加入) 二级发酵液:（10%的无菌糖水！0.1%琼脂粉！温度35-40度！发酵5-7天！）成品发酵液标准（气味：酸甜！PH值：4.0-5.0！活菌含量：100亿/ml ！）。

活化冻存菌种的标准程序
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活化冻存菌种是实验室中常见的一项操作，其标准程序如下：
1．准备工作：检查菌种冻存管，确保其无裂缝、变形等异常情况。

同时，确保冻存管标签清晰，以便识别。

2．取出冻存管：将冻存管从冰箱中取出，放置在室温下，待其回温至室温。

3．菌种取出：使用75%酒精对冻存管口进行消毒，然后用无菌操作钳取出菌种。

注意，操作过程中要避免菌种的污染。

4．菌种活化：将取出的菌种放入适宜的培养基中，然后将其放入恒温培养箱中，设定适当的温度和时间进行活化。

一般情况下，活化的温度为37℃，时间为2小时。

5．菌液制备：将活化的菌种用无菌生理盐水或其他适宜的液体培养基进行悬浮，制备成菌液。

6．菌液检测：取适量菌液进行生化试验、显微镜观察等检测，以确认菌种的活性。

7．菌液保存：将检测合格的菌液进行分装，放入冰箱或低温保存柜中保存。

注意事项：
1．整个操作过程应在无菌环境下进行，避免菌种的污染。

2．菌种的活化时间应根据具体的菌种类型和冻存条件进行调整。

3．菌液制备时，应确保菌液的浓度适宜，避免过浓或过稀。

4．对于贵重或特殊的菌种，建议进行复壮处理，以提高其存活率。

第1篇一、实验目的本实验旨在掌握蘑菇接种和培养的基本技术，了解蘑菇的生长习性，提高对蘑菇菌种和培养基的认识，为今后蘑菇栽培提供理论依据和技术支持。

二、实验材料1. 实验仪器：无菌操作台、酒精灯、接种针、培养皿、试管、恒温培养箱、显微镜等。

2. 实验材料：蘑菇菌种（如平菇、香菇、金针菇等）、PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）、无菌水、生石灰、脱脂棉等。

三、实验方法1. 菌种活化（1）将蘑菇菌种取出，用无菌水清洗表面，然后用无菌脱脂棉擦干。

（2）将菌种接种到PDA培养基平板上，放入恒温培养箱中，在适宜温度下培养。

（3）观察菌落生长情况，当菌落生长旺盛时，即可用于接种培养。

2. 接种培养（1）将活化后的菌种接种到装有新鲜PDA培养基的试管中，放入恒温培养箱中培养。

（2）定期观察菌丝生长情况，当菌丝长满试管时，即可进行转接培养。

3. 转接培养（1）将长满菌丝的试管取出，用无菌水清洗表面，然后用无菌脱脂棉擦干。

（2）将菌丝接种到装有新鲜PDA培养基的培养皿中，放入恒温培养箱中培养。

（3）观察菌落生长情况，当菌落生长旺盛时，即可进行出菇培养。

4. 出菇培养（1）将长满菌丝的培养皿取出，用无菌水清洗表面，然后用无菌脱脂棉擦干。

（2）将菌丝接种到装有新鲜培养基的菌袋中，放入出菇室中培养。

（3）观察出菇情况，当菌丝长满菌袋，出现菇蕾时，即可收获。

四、实验结果与分析1. 菌种活化菌种在PDA培养基平板上生长良好，菌落生长旺盛，无污染现象。

2. 接种培养接种后的试管菌丝生长迅速，菌丝呈白色，菌丝体粗壮，无污染现象。

3. 转接培养转接后的培养皿菌丝生长良好，菌落生长旺盛，无污染现象。

4. 出菇培养出菇培养期间，菌丝长满菌袋，出现菇蕾，菇蕾生长旺盛，无污染现象。

五、实验结论通过本次实验，掌握了蘑菇接种和培养的基本技术，了解了蘑菇的生长习性。

实验结果表明，蘑菇菌种在适宜的条件下生长良好，出菇效果显著。

在今后的蘑菇栽培中，应根据蘑菇的生长习性，优化接种和培养条件，提高产量和品质。

-1-冷冻干燥菌种的活化方法
一、菌种管开启方法
1用浸过75％酒精的脱脂棉擦净菌种管。

2将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。

3将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。

4用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。

二、菌种活化培养
1.用无菌吸管吸取0.3mL-0.4mL 适宜（※）的液体培养基，滴入菌种管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解成悬浮状液体。

一般细菌建议使用胰蛋白胨大豆肉汤（TSB ）、脑心浸液肉汤（BHI ）等高营养的培养基；
嗜盐性弧菌建议使用含3%-3.5%氯化钠的胰蛋白胨大豆肉汤；
乳酸菌建议使用MRS 肉汤；
真菌建议使用真菌培养基；
2.取约0.2mL 菌悬液，转接于特定的琼脂培养基斜面或平板上，剩余的菌液注入特定的液体培养基（3mL-4mL ）内，然后再按照菌种的特性，在一定温度下进行培养。

三、注意事项
1菌种活化前，请将冻干菌种管冷藏保存在5℃-10℃环境下。

2厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态。

3菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。

4菌种活化及使用过程应做好安全防护工作。

甘油保藏菌种活化步骤
嘿，你问甘油保藏菌种活化步骤？那咱就来好好聊聊。

要活化甘油保藏的菌种啊，首先得准备好东西。

得有干净的培养皿、培养基啥的，就像做饭得先把锅碗瓢盆准备好一样。

然后呢，从冰箱里把保藏的菌种拿出来。

这时候可不能太着急，得慢慢拿，别把菌种给弄坏了。

就像拿宝贝一样，小心翼翼的。

接着，在无菌操作台上进行操作。

把菌种轻轻地取一点，放到培养基上。

这就像给小种子找个家一样。

放好菌种后，把培养皿放在合适的温度下培养。

不能太热也不能太冷，就像人睡觉要找个舒服的温度一样。

在培养的过程中，要经常观察菌种的生长情况。

看看有没有长出来，长得好不好。

就像照顾小婴儿一样，得时刻关注着。

如果菌种长得不好，就得找找原因。

是不是温度不合适
啊，是不是培养基有问题啊。

就像医生看病一样，得找到病根才能治好。

我给你讲个事儿吧。

我有个朋友，他在实验室里做菌种活化。

一开始他不太会，弄得手忙脚乱的。

后来他按照正确的步骤来，先准备好东西，然后小心地取出菌种，放到培养基上，再放在合适的温度下培养。

他每天都认真观察，最后菌种长得可好了。

他可高兴了，觉得自己的努力都没有白费。

所以啊，甘油保藏菌种活化要准备好东西，小心取出菌种，放在培养基上培养，经常观察。

只要你认真做，肯定能活化出好的菌种。

加油吧！。

低温保存管（【2 】cryotube）中之一般菌种暂时存放及活化A. 低温保存管之暂时存放及解冻1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温前提下.2. 预备37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精,不可以火加温,以免安全;若以37℃水浴代替,应避免水中微生物污染）,个中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小）,液面不可高达管塞.3. 将 cryotube 从低温保存前提中掏出,置于37℃浴槽之小试管架上.4. 不断稍微动摇 cryotube,液面不可高至管塞,直至结冰完整消融（约需 2 分钟）.B. 菌株活化: 在无菌操作下1. 用无菌微量吸管,从已消融之 cryotube 汲取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液,滴入固态指定造就基(造就基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘邻近,以划线法接种于造就基.2. 将接种好的造就基置于指定温度的造就箱中造就.C. 划线法1. 手持金属接种环,用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红,并不断往返烧烤金属固定杆之前约 10 公分,等待约 10 秒钟,将接种环前端轻触造就基边缘凝胶（无菌体部份）,待接种环完整冷却后,以环沾黏菌滴,由造就基边缘向中心轻轻横划紧接的并行线,直到涵盖 1/3 造就基为止（I 区）.2. 灼烧接种环,待数秒冷却后,扭转造就基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）.3. 反复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区.4. 灼烧接种环,将接种环归位.D. 图示（1）金属接种环（2）平板划线法冷冻湿润管之开管解释下列步骤请在无菌情况下操作：1.以沾有70%酒精的棉花,擦拭外管,在火焰上加热外管之尖端.2.滴数滴无菌水于加热处,使外管决裂,再以硬棒敲破尖端.3.掏出隔热纤维纸和内管,以灭菌过的镊子掏出内管之棉塞.4.( a ) 实用于细菌用无菌吸管,汲取0.3-0.5 ml指定之液体造就基,滴入内管内,并稍微震动（可用该吸管协助）,直到平均悬浮.( b ) 实用于霉菌.酵母菌用无菌吸管,汲取0.3-0.5 ml无菌水,滴入内管内,待湿润粉末消融后,以无菌吸管汲取并滴入约含有5ml无菌水之试管内,稍微震动使其平均后,静置30至60分钟.5.取0.1-0.2 ml之菌体悬浮液于指定的平板造就基上,做划线分别造就或做成一系列之稀释,用无菌L型玻棒平均涂抹,以磨练菌种之纯度及活化情况,而残剩的菌体则全体移入指定的液体造就基内,并依指定的温度造就之.6.某些菌种经由冷冻湿润保存后,迟滞期 ( lag period ) 较长,必须等造就二倍时光后才能长出,且再经由一.二次继代造就 (Subculture) 后才能正常发展.经由以上的尽力后仍造就掉败,才视为不能活化.7.若菌种未能活化,或活化之菌落有疑问时,请于收到菌种之一个月内,以问题菌株反响单传真至本中间,即进行处理.8．未开封之冷冻湿润管,请冷藏于4℃冰箱,切勿冷冻保存.双歧杆菌的活化请问列位双歧杆菌的冻干粉怎么活化？活化造就基是什么？活化时光？活化时须要特殊留意什么？感谢！--------------------------------------------------------------------------------脱脂乳7份+豆奶3份混均,加2%的酵母浸出液,2%的酪蛋白胨,0.1%的抗坏血酸,葡萄糖2%,混溶分装试管,应用间歇灭菌法(同上)灭菌,冷却,低温保存,备用.双歧杆菌为厌氧菌,需进行厌氧造就.在无氧前提下,打开湿润菌种菌管,用接菌环取冻干菌种于双歧杆菌活化造就基内,38℃恒温厌氧造就24ｈ,取深层活化菌种传入下一代造就基中深层造就,重回生化传至第5代,每代均为38℃及24ｈ.--------------------------------------------------------------------------------一般传两代今后,才能正常应用！常用活化造就基液体造就基有PYG固体有TPY活化办法,ATCC推举：1.冻干粉菌开封今后,用心理盐水,消融！接种于液体造就基上！造就为正常发展时光的二倍,36±1℃ 2.然后将其离心集菌,接种于平板上,养为正常发展时光的二倍,36±1℃自我感到,液体造就基活化不好用！我的活化办法：冻干粉菌开封今后,用小牛血清消融！接种于TPY固体造就基上！造就为72H,36±1℃ ,然后挑菌,接种于平板上,造就为72H,36±1℃即可。