总结报告-生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》 精品

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的：1. 学习叶绿体中色素的提取和分离的方法；2. 观察叶绿体中不同色素的吸收光谱。

实验原理：叶绿体是植物细胞中的特殊细胞器，其中含有多种色素，包括叶绿素 a、叶绿素 b、类胡萝卜素等。

这些色素能够吸收不同波长的光线，并转化为化学能以参与光合作用。

本实验利用溶剂提取和色谱柱分离的方法，将叶绿体中的色素提取出来，并通过紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。

实验步骤：1. 取一片鲜叶（最好选择深绿色的叶片）切碎，加入适量的乙醇或醋酸乙酯中浸泡，使叶绿体释放出色素。

注意保持容器密封以避免光照。

2. 将浸泡片刻半小时，使叶绿体彻底释放色素。

3. 将叶绿体悬液过滤，收集含有色素的过滤液。

4. 取一支色谱柱，填充色谱吸附剂（如硅胶），再用无色溶剂（如正己烷）预洗一次。

5. 将收集到的含色素液体加入色谱柱中，用无色溶剂洗脱，收集不同色素的洗脱液。

6. 用紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。

实验结果：根据实验数据得到不同色素的吸收光谱曲线，可观察到叶绿素 a 在400-500 nm波长范围内有最大吸收峰，叶绿素 b 在450-550 nm波长范围内有最大吸收峰，类胡萝卜素在500-600 nm波长范围内有最大吸收峰。

根据吸收光谱的不同，可以推测各色素在光合作用中的吸收波长和参与的反应。

实验结论：通过该实验，我们成功地提取和分离了叶绿体中的色素，并观察到不同色素的吸收光谱。

这些实验结果可以帮助我们深入了解植物光合作用的机制，以及不同色素在光合作用中的作用。

同时，该实验也展示了提取和分离生物样品中化学物质的基本实验技巧和原理。

《叶绿体色素的提取和分离》实验报告
叶绿体是植物细胞中的一种细胞质器，主要功能是光合作用。

叶绿体包括一系列色素，其中最重要的是叶绿素。

在本实验中，我们将提取和分离叶绿体色素，以便进一步分析其
结构和功能。

实验步骤：
1. 从新鲜的叶子中剪下片段，用无菌蒸馏水洗涤。

2. 用离心机将叶片离心，离心速度为1000 rpm，时间为5分钟。

3. 将上清液取出并过滤，过滤剂为细孔过滤纸。

5. 将上清液取出，并用1ml无菌蒸馏水洗涤叶绿体色素。

7. 取出上清液，将其光度值调至0.4-0.6。

（400nm处）
8. 将上述上清液转入紫外吸收仪中，观察叶绿素的吸收曲线。

实验结果：
实验得出的叶绿体色素提取液中，吸收最强的波长为680nm和430nm。

这对应着叶绿
体和类胡萝卜素的吸收峰。

实验得到的叶绿体色素移液后，需要经过离心的过程，这样可去除混杂物质，获得更
为纯净的叶绿素。

通过以上实验，我们成功地提取和分离了叶绿体色素。

叶绿素是植物所特有的，它起
到了光合作用的关键作用。

实验中的提取和分离方法，可以为进一步的分析叶绿素的结构
和功能提供帮助。

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》随着社会一步步向前发展，我们都不可避免地要接触到报告，写报告的时候要注意内容的完整。

那么，报告到底怎么写才合适呢？以下是小编整理的生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》，欢迎大家分享。

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》1一、实验目的1. 学会提取和分离叶绿体中色素的方法。

2. 比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。

故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。

叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的`溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。

三、材料用具取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。

四、实验过程（见书Ｐ54）1.提取色素：2.制备滤纸条：3.色素分离，纸层析法。

（不要让滤液细线触及层析液）4.观察：层析后，取出滤纸，在通风处吹干。

观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。

结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。

五、讨论1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？2．提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》2一、实验目的1、学会提取和分离叶绿体中色素的方法。

2、比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。

故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。

《叶绿体色素的提取和分离》实验报告实验目的1. 学习叶绿体色素的提取、分离方法。

2. 通过叶绿体色素提取、分离方法的学习了解叶绿体色素的相关理化性质。

3. 为进一步研究各叶绿体色素性质、功能等奠定基础。

实验原理叶绿体色素包括绿色的叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色的类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类,它们均以色素蛋白复合体形式存在于类囊体膜上。

两类色素均不溶于水而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。

由于提取液中不同色素在固定相和流动相中的分配系数不同,所以可借助分配层析方法将其分离。

实验仪器与药品1. 绿色植物如菠菜等的叶片。

2. 研钵、漏斗、三角瓶、剪刀、滴管、康维皿、圆形滤纸(直径11cm)。

3. 95%乙醇、石英砂、碳酸钙、展层剂。

展层剂按石油醚:丙酮:苯10:2:1的比例配制(V/V)。

实验步骤1. 叶绿体色素的提取(1)取菠菜或其它新鲜植物叶片4~5片(4g左右),将其洗净、擦干并去掉中脉,剪碎后置入研钵中。

(2)研钵中加入95%乙醇2~3 ml及少许石英砂、碳酸钙研磨至匀浆,再加95%乙醇5ml,然后以漏斗过滤之,即为色素提取液。

2. 叶绿体色素的分离(1)取圆形定性滤纸一张(直径应小于康维皿直径)于其中心扎一圆形小孔(直径约3mm),另取长方形滤纸条一张(5cm×1.5cm),用滴管吸取乙醇叶绿体色素提取液沿滤纸条的长度方向涂抹,注意涂抹色素扩散宽度应限制在0.5cm以内,风干后再重复操作数次。

然后沿长度方向将滤纸条卷成纸捻,使涂抹过叶绿体色素溶液的一侧恰在纸捻的一端。

(2)将纸捻带有色素的一端插入圆形滤纸的小孔中,使与滤纸刚刚平齐(勿突出)。

(3)在康维皿中央小室中加入适量的展层剂,把带有纸捻的圆形滤纸平放在康维皿中央小室上,使纸捻下端浸入展层剂中,迅速盖好培养皿。

展层剂将借助毛细管作用顺纸捻扩散至圆形滤纸上,使叶绿体色素在固定相(滤纸中吸附有水分的纤维素)和流动相(展层剂)间反复分配,从而使不同色素得到分离,分离结果为滤纸上可见到各种色素的同心圆环。

实验八叶绿体中色素的提取和分离教学目的1．初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。

2．探索叶绿体中有几种色素。

实验原理1．叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。

2．色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。

实验程序1）称取5g绿色叶片并剪碎提取色素2）加入少量sio2、caco3和5ml丙酮收集到试管内并塞紧管口1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时到达滤液细线）制滤纸条2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线滤液划线2）干燥后重复划2-3次1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准）纸上层析（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中3）用培养皿盖盖上烧杯观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）最宽：叶绿素a；最窄：叶绿素b；相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b；相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。

实验关键1．选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。

如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。

2．画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行，重复2-3次。

3．层析时不要让滤液细线触及层析液。

注意事项1．因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。

2．在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。

3．分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。

【同类题库】．下列哪一种液体不能作为叶绿体中色素提取液？（c）a．丙酮溶液b．酒精溶液c．水溶液 d．汽油．在叶绿体中色素的提取与分离实验中，扩散速度最快的色素是（d）a．叶绿素ab．叶绿素b c．叶黄素 d．胡萝卜素．将菠菜叶表皮细胞和人的口腔上皮细胞制成装片，从盖玻片一侧滴入30%的蔗糖溶液，另一侧用吸水纸重复吸收几次，分别放在显微镜下观察，其结果是（d）a．前者发质壁分离，后者也发生质壁分离b．前者发生质壁分离，后者破裂c．前者发质壁分离，后者质壁分离复原 d．前者发生质壁分离，后者皱缩．如果没有丙酮和菠菜叶，要保证分离后色素带清晰，可以用来替代的最佳实验材料是（a）a．酒精和麦苗 b．酒精和大白菜 c．蒸馏水和大白菜d．蒸馏水和麦苗．用韭菜做“叶绿体色素的提取和分离实验”，下列不能用作提取剂的是（a）a．水 b．丙酮 c．酒精 d．ccl4．为了提取绿色植物叶绿体中的色素，在研磨绿叶时加入少许碳酸钙，其作用是（b）a．调节ph，加速色素溶解 b．调节ph，防止叶绿素被破坏c．使绿叶研磨充分 d．有利于四种色素的分开．在研磨绿叶时，下列哪种物质不需要加入（b）a．丙酮b．层析液 c．碳酸钙 d．二氧化硅．（多选）某学生在做“叶绿体色素的提取和分离实验”时，收集到的滤液呈淡绿色，其原因可能是（ac）a．叶片较老较黄 b．加入的二氧化硅多了些c．研磨不充分d．漏斗基部塞的脱脂棉多了些．做色素提取和分离实验的正确装置是图中（d）．在进行叶绿素提取和分离实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是（c）a．滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实验结果b．滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散c．色素会溶解在层析液中而使结果不明显d．滤纸条上几种色素会混合起来．某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的是圆形滤纸，装置如下图。

植物生理学实验报告叶绿体色素的提取分离理化性质和叶绿素含量的测定引言：叶绿体是植物细胞中的一个重要细胞器，其中主要存在着叶绿素等色素，它们在光合作用中起着重要的作用。

研究叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定，对于了解光合作用的机理以及研究植物生理生化过程具有重要意义。

本实验旨在通过实验手段提取叶绿体色素，进行色素的分离、理化性质的研究和叶绿素含量的测定。

材料与方法：材料：菠菜叶片、研钵、磨杵、丙酮、乙醇、石油醚、叶绿素提取液、测色皿、高锰酸钾溶液、浓硫酸。

方法：1.取适量菠菜叶片放入研钵中，加入适量丙酮，用磨杵捣碎成糊状。

2.将捣碎的菠菜糊状物转移到玻璃漏斗中，用石油醚冲洗3次，使叶绿体附着物进一步析出。

3.将漏斗中的上清液收集，并加入适量乙醇，振摇混合，使叶绿素慢慢析出。

4.将释放出的叶绿体颗粒通过离心机离心沉淀10分钟，收集沉淀。

5.取收集到的叶绿体沉淀，加入适量叶绿素提取液，用乳钙酸钠解离剂进行叶绿素含量的测定。

6.将其中一部分叶绿体溶液加入高锰酸钾溶液，观察颜色变化。

7.将其余叶绿体溶液与浓硫酸混合，观察颜色变化。

结果与讨论：通过上述方法，我们成功地提取并分离出菠菜叶片中的叶绿体色素。

加入石油醚可以去除一部分杂质，使叶绿体进一步纯化。

加入乙醇可以使叶绿素从叶绿体中溶出。

通过离心沉淀，我们收集到了叶绿体的沉淀物。

叶绿体的提取液与高锰酸钾溶液反应后呈现蓝色或紫色，这是由于高锰酸钾通过氧化反应将一些具有现菌酮结构的物质氧化为合成叶绿素的前体物质所引起的。

这种反应也证实了叶绿体的存在。

叶绿体溶液与浓硫酸混合后呈现蓝绿色，这是由于浓硫酸通过剥离叶绿体周围的蛋白质和其他有机物质，将叶绿素分子释放出来，产生颜色变化。

叶绿素的含量测定是通过与乳钙酸钠解离剂反应来进行的。

乳钙酸钠解离剂能够与叶绿体中的叶绿素结合，并形成稳定的叶绿素-乳钙酸钠络合物。

这种络合物通过光密度的测定，可以根据比色法来测量叶绿素的含量。

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验目的本次实验的主要目的是了解叶绿体中色素的提取和分离方法，掌握色素的分离技术，并了解不同色素对叶绿体的作用。

实验原理叶绿体是植物和藻类细胞中最重要的细胞器之一，也是进行光合作用的场所。

其中，叶绿素是其最主要的色素，在光合作用中起到吸收太阳能的作用。

叶绿体中还包含其他色素，如类胡萝卜素、花青素等，它们具有吸收不同波长的光线的能力。

叶绿体中色素的提取和分离主要利用其不同的亲水性和亲油性，通过不同的溶剂将其提取出来，并进行分离、纯化。

其中，有机溶剂如丙酮、乙醇等可以提取出叶绿素和类胡萝卜素等亲油性色素，而酸性溶液可以提取出卟啉类、铁类等亲水性色素。

实验步骤1.取适量菠菜叶，去掉梗部，用清水反复洗净，去除表面的灰尘。

2.将菠菜叶放入离心管中，加入约5毫升丙酮，使用手持式超声波仪器超声处理10分钟。

3.将超声处理后的菠菜混合物离心10分钟，待叶绿体沉淀下来。

4.取叶绿体沉淀，加入少量乙酸乙酯，经超声震荡3分钟。

5.将混合物离心10分钟，分离出上层的色素提取液，放置在离心管中。

6.加入冷水，将提取液分层，即可分离出不同色素。

7.将分离好的色素涂于色谱纸上，将色谱纸浸泡至溶液面之下，待上端溶液移动至色素液的1/2处时，取出晾干，即可得到不同色素的分离结果。

实验结果通过叶绿体中色素的提取和分离实验，我们成功地分离出了叶绿体中的色素，其中包括叶绿素、类胡萝卜素等。

在色谱纸上的分离结果如下：色素名称相对迁移率叶绿素0.48氧化型叶绿素0.39类胡萝卜素0.92实验分析在本次实验中，我们使用丙酮和乙酸乙酯等溶剂成功地提取了叶绿体中的色素，也尝试了不同溶剂对色素的亲水性和亲油性的作用。

通过色谱纸的分离结果，我们可以清晰地观察到各色素的迁移情况，进一步了解到不同色素在不同溶剂中的特点和性质。

实验总结叶绿体中色素的提取和分离是生物学实验中常见的实验之一，通过本次实验，我们加深了对叶绿体和其中色素的了解，掌握了相关的实验技术和方法。

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验目的1. 掌握叶绿体色素的提取和分离方法；2. 了解叶绿体色素的成分和结构特点；3. 通过实验观察，加深对叶绿体结构和功能的理解。

实验原理叶绿体是植物细胞中的一种独特细胞器，因为其含有叶绿素而呈现绿色。

叶绿体是光合能量的主要场所，能够将光能转化为化学能，进而为生物体提供能量。

叶绿体中含有多种色素，如叶绿素、类胡萝卜素等。

其中，叶绿素是最重要的色素，其分子结构由一个类胡萝卜素环（porphyrin环）和一个酰基侧链（phytyl侧链）组成。

叶绿素在光合作用中起着重要的作用，它能够吸收光线，将光能转化为化学能，进而提供生物体所需的营养。

叶绿体中的色素可以通过酒精沉淀的方法进行提取和分离。

酒精沉淀方法是根据不同色素在不同酒精浓度下的溶解度差异来进行色素分离的。

在实验操作中，首先要将植物组织用液氮或手动研磨方法研磨成细碎的粉末，然后将其置于离心管中，加入一定比例的酒精，并放置在温水浴中摇匀，使颜料完全溶解。

接着，将混合液离心，待沉淀出现后将上层液体倒出，待沉淀干燥后即可得到色素提取物。

实验步骤1. 准备材料。

首先准备好新鲜的菠菜叶片、冰醋酸和95%酒精；2. 研磨植物组织。

将菠菜叶片用液氮或手动研磨器研磨成细碎的粉末；3. 加入酸性试剂。

将研磨后的菠菜叶片粉末加入1ml冰醋酸，使其均匀分散；4. 加入酒精。

向组织粉末中缓慢加入5ml 95%酒精，搅拌均匀；5. 离心。

将混合液置于离心管中，进行离心30分钟；6. 取上层液体。

取离心后上层液体，避免沉淀、残渣的干扰；7. 干燥。

将取出的上层液体放置在冷暗处自然晾干；8. 分析。

对干燥后得到的叶绿体色素进行观察和分析。

实验结果实验分析本次实验使用了经典的酒精沉淀法对叶绿体中的色素进行提取和分离。

酒精沉淀法是比较简单、有效的提取方法，但是在实验中需要注意操作细节，比如酒精的浓度需要控制好，否则会影响色素的分离效果。

叶绿体中的色素具有不同的波长吸收谱，通过对其吸收谱的分析，可以确定叶绿体中各种色素的相对量和种类组成。

生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的：1. 学习叶绿体色素的提取和分离方法。

2. 了解叶绿体中色素的组成和结构。

实验原理：叶绿体是植物和藻类细胞中含有叶绿素的细胞器。

叶绿体中有多种不同类型的色素，包括叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等。

这些色素通过吸收太阳光能量进行光合作用。

提取叶绿体中的色素可以使用酒精提取法。

酒精可以溶解叶绿体膜，使色素溶解到酒精中。

然后，使用色谱技术可以将不同类型的色素分离出来。

实验材料：1. 鲜叶样品2. 酒精3. 氯仿4. 丙酮实验步骤：1. 将鲜叶样品切碎并置于研钵中。

2. 加入足够量的酒精，用研钵研磨混合，直到叶碎细胞完全破裂。

3. 使用滤纸过滤混合物，得到澄清的叶绿体提取物。

4. 将叶绿体提取物转移到试管中，加入少量氯仿。

5. 等待一段时间，观察到叶绿体提取物分为两个层次：上层为酒精层，下层为氯仿层。

6. 使用滴管将上层的酒精取出，置于干燥的容器中保存。

7. 将下层的氯仿层转移至另一个试管中。

8. 加入适量的丙酮，轻轻摇匀，观察色素在丙酮中溶解。

9. 使用滤纸过滤丙酮溶液，得到单一色素溶液。

实验结果：从叶绿体提取物中分离出不同类型的色素，如叶绿素a、叶绿素b等。

通过色素的溶解性质和色谱技术，可以将这些色素分离出来。

实验总结：通过本次实验，我们学习了叶绿体中色素的提取和分离方法。

了解了叶绿体中的色素组成和结构。

同时，也掌握了使用色谱技术进行色素分离的基本步骤。

这对于进一步研究叶绿体的功能和光合作用具有重要意义。

实验报告九：绿叶中色素的提取和分离实验目的：1、进行绿叶中色素的提取和分离2、探究绿叶中含有几种色素材料用具：菠菜绿叶，干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10mL），天平，无水乙醇，层析液，二氧化硅、碳酸钙。

实验原理：绿叶中的色素能够溶解在中，所以，可以用提取绿叶中的色素。

绿叶中的色素不只一种，它们都能溶解在中。

但在中的____ 不同：溶解度高的随层析液在滤纸上，反之则慢。

这样几分钟之后，绿叶中的色素就会随在滤纸上扩散而。

实验步骤：1、提取绿叶中的色素（1）称取5g绿叶，剪碎，放入研钵中。

（2）向研钵中放入少许 ____ 和 ___ ，再加入10mL ，进行迅速而充分的研磨。

（3）将研磨液迅速倒入玻璃漏斗进行过滤。

将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。

2、制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成略小于长与直径的滤纸条，将滤纸条的一端剪去，并在距这一端处用铅笔画一条细的横线。

3、画滤液细线：用吸取少量滤液，沿均匀画出一条细线。

待干后，再画一两次。

4、分离绿叶中的色素：将适量的倒入试管中，将滤纸条轻轻插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口。

（也可用小烧杯代替试管，用盖住小烧杯。

）5、观察与记录观察试管内滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色。

将观察的结果记录下来。

注意事项：1、如使用体积分数为95%的乙醇，一定要加入适量的，以除去乙醇中的。

2、层析液为挥发性化学物质，为避免吸入过多，本实验应该在条件下进行，在实验结束后及时用 ___ 洗手。

3、层析时不能让触及层析液。

1．纸层析法分离叶绿体色素时，滤纸条下端第二条色素带名称和颜色分别是A．叶绿素a、蓝绿色 B．叶绿素b、黄绿色 C．胡萝卜素、橙黄色 D．叶黄素、黄色2．进行叶绿体色素提取和分离实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是A．滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响结果 C．色素会溶解在层析液中而使结果不明显B．滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散 D．滤纸条上的几种色素会混合起来3.提取和分离叶绿体中色素的实验中，正确的操作顺序应该是（）A. 进行纸层析——制取滤液——在滤纸条上画线——将实验材料剪碎研磨B. 制取滤液——进行纸层析——在滤纸条上画线——将实验材料剪碎研磨C. 将实验材料剪碎研磨——在滤纸条上画线——制取滤液——进行纸层析D. 将实验材料剪碎研磨——制取滤液——在滤纸条上画线——进行纸层析4．在圆形滤纸的中央滴上叶绿体的色素滤液进行色素分离，看到近似同心环状的四个色素圈，排列在最外圈的一个呈（）A. 蓝绿色B. 黄绿色C. 黄色D. 橙黄色。

实验报告课程名称：植物生理学及实验实验类型：探索、综合或验证实验项目名称：叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定一、实验目的和要求掌握植物中叶绿体色素的提取分离和性质鉴定、定量分析的原理和方法二、实验内容和原理以青菜为材料，提取和分离叶绿体色素并进行理化性质测定和叶绿素含量分析。

原理如下：1.叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂.常用95%的乙醇或80%的丙酮提取。

2.皂化反应。

叶绿素是二羧酸酯，与强碱反应，形成绿色的可溶性叶绿素盐，就可与有机溶剂中的类胡萝卜素分开。

3.取代反应。

在酸性或加温条件下，叶绿素卟啉环中的Mg2+可依次被H+和Cu2+取代形成褐色的去镁叶绿素和绿色的铜代叶绿素。

H+取代Mg2+, Cu2+ (Zn2+)取代H+。

4.叶绿素受光激发，可发出红色荧光，反射光下可见红色荧光。

透射光下呈绿色，反射光下呈红色。

5.光谱分析。

叶绿素吸收红光和兰紫光，红光区可用于定量分析，其中645和663用于定量叶绿素a,b及总量，而652可直接用于总量分析。

三、主要仪器设备1.天平（万分之一）、可扫描分光光度计（UV-1240）、离心机2.研具、各种容（量）器、酒精灯等四、操作方法与实验步骤1.定性分析a)称取鲜叶3-5g，并逐步加入乙醇15ml，磨成匀浆取匀浆过滤，并倒入三角瓶中，同时观察荧光现象。

b)取三角瓶中约1ml溶液于小试管。

加KOH数片剧烈摇均，加石油醚1ml和HO 1ml分层后观察。

2c)取代反应：加醋酸约1ml，取1/2加醋酸铜粉加热。

观察颜色变化。

2. 叶绿素和类胡萝卜素的吸收光谱测定：a) 取皂化反应的上层黄色石油醚溶液→稀释（470nm OD 0.5-1） b) 取下层绿色溶液（留1/3），反复用石油醚粹取,直到无类胡萝卜素,离心得叶绿素(盐)→稀释（663nm OD 0.5-1）c) 两者在400-700nm 处扫描光谱，分别测定类胡萝卜素和叶绿素的吸收峰3. 叶绿素定量分析：鲜叶0.1g ，加1.9mlH 2O ，磨成匀浆，取2份0.2ml 加95%酒精4.8ml,摇匀，8000转离心5min,上清液在645，652，663测定OD ，计算Chla,Chlb 和Chl 总量的值。

植物叶片中色素的提取、分离和含量测定班级姓名学号；实验一：植物叶片中色素的提取、分离实验原理（1）提取色素的原理：叶绿体中的色素属于色素，不溶于水，易溶于溶剂，故可用等有机溶剂来提取。

绝大多数色素见光易分解，需要避光保存。

（2）法分离色素的原理：不同色素在层析液中的不同。

溶解度大的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度快；溶解度小的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度慢。

实验材料和器材实验步骤1、称量植物材料：用天平秤取植物材料（两人一组,每组一种植物材料）。

剪刀剪碎，放入研钵中。

2、提取色素：用药匙加入少许二氧化硅和碳酸钙，用移液枪吸取5ml无水乙醇，快速研磨。

加入如下试剂的作用：SiO2：___________；CaCO3_____________________酒精（或丙酮）：____________________________________。

3、画细线：在滤纸条的一端剪去两角。

在距离这一端1cm 处，折一条横线。

用尺子沾取少量滤液，在滤纸条上沿折横线，压出一条细而直的滤液细线。

待滤液干后，再在背面划线。

每种材料，制备两个滤纸条。

4、分离叶绿体中的色素将滤纸条（有滤液细线的一端朝下），分别轻轻插入到水层析液和石油醚丙酮的层析液中，盖上盖子。

注意：不能让滤液细线触及层析液，防止色素溶解在层析液中，影响扩散结果。

同心圆装置：用纸捻快速吸取滤液,放入同心圆装置中。

层析液为石油醚丙酮的层析液。

5、分析层析结果色色颜色。

实验二：色素的含量测定实验原理：用混合提取液（丙酮：乙醇：蒸馏水=：：1）浸提法测定。

实验步骤1、浸提色素。

分别称取菠菜叶、油菜叶、月季红色叶、月季绿色叶、银杏黄色叶、爬山虎红色叶，加入10ml提取液，放入37度恒温箱中浸提24小时。

2、读值。

分光光度计分别在波长440nm、645nm和663nm 处测定并记录光密度值，通过OD值计算叶绿素含量。

3计算。

根据以下公式计算叶绿素浓度：叶绿素a（Ca，mg·L-1）=×A663–×A645。

叶绿体中色素的提取和分离方案一【实验原理】（1）叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮中，所以，可以通过研磨法用丙酮提取叶绿体中的色素(若无丙酮亦可用酒精代替)。

（2）纸层析法：层析液（在60℃～90℃下分馏出来20份石油醚+ 2份丙酮+ 1份苯混合而成）是一种脂溶性很强的有机溶剂。

叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同(溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。

)这样，几分钟之后，叶绿体中的色素就在扩散过程中分解开来。

所以，可以用纸层析法分离出叶绿体中的色素。

【实验器材】新鲜的绿色菠菜叶片，干燥的定性滤纸，烧杯，研钵，小玻璃漏斗，脱脂棉，载玻片，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒，天平。

丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。

【实验过程】（一）提取绿色叶片中的色素：1、用天平称取5g绿色的叶片，用剪刀剪碎，放入研钵中；2、向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入5ml丙酮。

由于丙酮具有一定的毒性并且很容易挥发。

为了尽量少的吸入丙酮，可以将一片滤纸盖在研钵上，纸的中心穿一个洞，将杵棒套入洞口进行研磨。

※为什么要加入少许少许二氧化硅和碳酸钙？加入二氧化硅是为了研磨的更充分；加入少许碳酸钙是为了保护叶绿体中的色素，为是由于碳酸钙可以中和液泡破裂后释放出的有机酸，调节液体的PH，防止或避免色素被破坏。

※为什么要加入丙酮？丙酮是有机溶剂可以使色素溶解其中，作为色素的溶剂。

3、将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤（漏斗基部放一小团脱脂棉）。

将滤液收集到一个小试管中，及时用塞将试管口塞紧。

（以防止滤液中的丙酮挥发）※是否可以用滤纸来代替脱脂棉？不可以，滤纸对光合色素具有较强的吸附能力，使滤液的色素分子减少。

（二）制备滤纸条：取一块预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长6cm、宽1cm的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。

※在剪裁定性滤纸时，尽量注意双手不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸，影响色素在纸条上的扩散。