下载文档原格式
56 | 2014年第34卷第12期 总215期 |试验研究随着我国养禽业集约化的快速发展，禽类疾病也越来越频发。
细菌性疾病呈现上升趋势[1-2]，大肠杆菌病已成为困扰养禽业主要的疾病之一。
禽大肠杆菌病是由大肠杆菌的某些致病性菌株所引起的多种禽病的总称，其特征是引起鸡的心包炎、腹膜炎、关节炎、输卵管炎、大肠杆菌性肠炎、肉芽肿、败血症等症状[3]。
例如鸡胚感染大肠杆菌后可导致鸡胚的死亡率升高、孵化率下降以及增加雏鸡发病死亡率。
成年鸡感染大肠杆菌可增加死亡率，导致生长缓慢、饲料报酬率降低。
由于禽大肠杆菌抗原性比较复杂、临床病变表现复杂，所以当禽大肠杆菌病常与病毒性疾病和其他细菌性疾病并发或继发时，容易给养禽业带来十分大的危害。
目前禽大肠杆菌病临床上一般已药物治疗为主[4-5]。
但是，由于养殖过程中用药不科学、盲目的滥用抗菌类药物，使得细菌的耐药性问题逐渐的显现出来，由此造成的危害十分严重，不仅降低了抗菌药的疗效、延长治疗周期，而且增加了死亡率，给养禽业带来了巨大的经济损失。
1 试验材料1.1 主要仪器与设备托盘天平、电热恒温干燥箱、隔水式恒温培养箱、打孔器、无菌操作台、微量移液枪、试管、烧杯、锥形烧瓶、平皿、接种环、定性滤纸、打孔器。
1.2 试剂琼脂、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、0.1 mol/L 氢氧化钠溶液、纯化水、灭菌生理盐水。
1.3 药品硫酸多黏菌素可溶性粉，批号20140301，规格：100 g/袋。
由上海宏牧动物药业有限公司生产。
盐酸土霉素可溶性粉，批号140702，规格：100 g/袋；由华北制药集团动物保健有限公司生产。
硫酸新霉素可溶性粉，批号：140201，规格：100 g/袋；由华北制药集团动物保健有限公司生产。
乳酸诺氟沙星可溶性粉，批号20140816，规格：100 g/袋；由北京华盛堂生物科技有限公司生产。
硫酸庆大霉素可溶性粉，批号140102，规格：100 g/袋；由华北制药集团动物保健有限公司生产。
头孢喹诺对鸡大肠杆菌病的疗效作者：李俊燕来源：《畜牧兽医科学》 2021年第10期作者简介：李俊燕（1991-），女，河南汝州人，本科，兽医师，研究方向：兽医相关。
李俊燕（河南省安阳市动物卫生监督所，安阳 455000）摘要：市场上对于鸡蛋及鸡肉产品的需求量不断提升，我国鸡养殖规模正处于不断扩大阶段，然而在一定程度上也增加了鸡出现疫病的概率。
鸡大肠杆菌病是由于致病性大肠埃希氏杆菌导致的传染性疾病，会使鸡出现炎症反应，如果没有及时干预会使鸡群内部出现疾病扩散的现象，给养殖农户带来严重的经济损失。
头孢喹诺是专门治疗动物疾病的第4代头孢菌素药物，属于抗生素药物之一，杀菌作用和抗菌作用较好，在鸡大肠杆菌病的治疗过程中能取得较好的治疗效果。
为了明确头孢喹诺在鸡大肠杆菌疾病中的治疗效果，该文选择共120只鸡作为研究对象，分成6组进行对照试验。
关键词：头孢喹诺；鸡；大肠杆菌病；治疗效果；对比中图分类号：S858.31 文献标识码：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2021.10.001Efficacy of Cefquinome in the Treatment of Avian ColibacillosisLi Junyan（Animal Health Inspectorate of Anyang City，Henan Province，Anyang 455000，China）Abstract：With the increasing demand for eggs and chicken products in the market，the scale of chicken breeding in China isexpanding，but to a certain extent，it also increases the probability of epidemic disease．Avian colibacillosis is an inflammatoryreaction in chickens caused by pathogenic escherichia coli infectious disease that can spread the disease within the flock if leftuntreated，it brings serious economic losses to the breeding farmers．Cefquinome is the 4th generation cephalosporin which is usedto treat animal diseases．It is one of theantibiotics．It has good bactericidal and antibacterial effect and can get good therapeuticeffect in the treatment of chicken colibacillosis．In order to evaluate the efficacy of cefquinome in the treatment of colibacillosis inchickens，120 chickens were selected and divided into 6 groups．Key words：cefquinome，chicken，colibacillosis，therapeutic effect，comparison0 引言头孢喹诺在临床上又被称为头孢喹咪，是一种利用竞争细菌的肽合成酶，也是青霉素结合蛋白，对细胞壁的粘肽合成反应起到一定的抑制作用。
目录中文摘要（关键词） (2)外文摘要（关键词） (2)前言 (3)1 材料与方法 (6)1.1 材料 (6)1.1.1 菌株 (6)1.1.2 药物 (6)1.1.3 培养基及试剂 (7)1.1.4 器材 (7)1.2 方法 (7)1.2.1 培养基的制备 (8)1.2.2 大肠杆菌的扩大培养 (6)1.2.3 药敏纸片琼脂扩散试验 (8)1.2.4 微量稀释法试验 (10)1.2.5 棋盘稀释法测定联合抑菌浓度指数（FIC） (13)2 结果与分析 (13)2.1 药敏纸片琼脂扩散试验 (13)2.2 微量稀释法试验 (14)2.3 FIC指数 (16)3 结论与讨论 (17)3.1 讨论 (17)3.1.1 关于试验 (17)3.1.2药敏试验在兽医临床疫病防治中的意义 (18)3.1.3 药敏试验的注意事项 (19)3.1.4 关于耐药性 (19)3.2 结论 (20)参考文献 (22)致谢······················································································································错误！未定义书签。
畜禽大肠杆菌对七种常见抗菌药的敏感性试验董卫超（2010届动医专升本08-2）摘要：为了的了解河南地区的大肠杆菌耐药情况，更好的对大肠杆菌病进行有效防治，近期从河南省内数家养殖场的带病或死亡的猪、鸡、鸭分离、鉴定大肠杆菌17株，采用微量肉汤稀释法测定它们对几种常用抗菌药物的敏感性。
结果显示：不同源地的大肠杆菌,对单用氟苯尼考、强力霉素的耐药率高达94.1%~100%；单用克林沙星的抗菌活性最强，仅5.9%的菌株产生耐药；SMM/TMP（5/1）联用对大多数菌株的MIC值几乎都是≥640 μg/mL；以上结果表明：在河南地区大量存在着耐药大肠杆菌菌株，而且磺胺类药物与叶酸代谢途径抑制剂联用仍表现出较高的耐药率，而单用克林沙星能收到较好的效果。
关键词：药物敏感性实验；最小抑菌浓度；大肠杆菌；耐药性；猪；禽The Antibiotics susceptibility test of several commonly used antibioticsagainst Animal E. coliDONG Wei-chao(Class 2 of Animal Veterinary, Graduated in 2010)Abstract:In order to understand the resistance of E. coli in Henan and to carry out effective prevention and treatment of E. coli illness, recently we isolated and identifide 17 strains of E. coli from several farms of pigs, chickens, ducks in Henan Province. Microdilution was used to measure their sensitivity to several common antibiotics.The results showed that the rate is as high as 94.1% to 100% when we single use of florfenicol, doxycycline resistance to different sources of E. coli.The antibacterial activity is strongest when we single use Clinafloxacin,the drug resistance and the drug resistance is just 5.9%. Combined SMM with TMP,the MIC is almost ≥640 μg/mL.These results suggest that lots of resistant E. coli is presenced in Henan.And high resistance rates were show when sulfonamides combined folic acid metabolic pathway inhibitors combined.And clinafloxacin receive good resultsKey words:Drug sensitivity test;Minimum inhibitory concentration;E. coli;Resistance; Swine;Poultry近期随着畜禽养殖业的快速发展，大肠杆菌病已成为危害养殖业的主要传染病之一。
禽大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌的某些致病性菌株引起的多种疾病总称，包括大肠杆菌性败血症、肠炎、脐带炎、肝周炎、心包炎、腹膜炎、全眼球炎、卵黄性腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、关节炎、肉芽肿等，并能导致胚胎和幼雏死亡。
由于大肠杆菌血清型复杂，1 / 20下载文档可编辑给免疫防治带来一定的困难，药物防治仍是控制禽大肠杆菌病的主要手段。
yz.ag365yz.ag365本文就防治禽大肠杆菌病的常用药物作一简述。
yz.ag365yz.ag365一、β-内酰胺类抗生素yz.ag365yz.ag3652 / 20下载文档可编辑β-内酰胺类抗生素为化学结构中含有β-内酰胺环一类抗生素，主要包括青霉素类、头孢菌素类、β－内酰胺酶抑制剂。
抗病作用机理均为抑制细胞壁的合成。
yz.ag365yz.ag3651、青霉素类。
防治禽大肠杆菌病的青霉素类抗生素主要为半合成广谱抗生素氨苄西林、阿莫西林。
氨苄西林、阿莫西林均耐酸、不耐酶，内服或肌注易吸收。
阿莫西林耐酸较氨苄西林强，该药抗菌谱广，杀菌力强，作用迅速，阿莫西林的血清浓度比氨苄西林高 1.5-3倍。
阿莫西林对大肠杆菌有较强的抗菌作用，其体外抗菌谱等同于氨苄西林，但体内效果则增强2-3倍。
3 / 20下载文档可编辑yz.ag365yz.ag365用法与用量：⑴氨苄西林：内服一次量为每千克体重10毫升或肌注为一次量每千克体重10毫升，1日2-3次。
⑵阿莫西林：内服一次量为每千克体重10-15毫升，1日2次。
yz.ag365yz.ag3652、头孢菌素类。
为广谱半合成抗生素，具杀菌力强、抗菌谱广、毒性小、对酸和β-内酰胺酶比青霉素类稳定等优点，第三、四代头孢菌素对大肠杆菌具有较强的抗菌作用，因较贵而多用于4 / 20下载文档可编辑宠物、种畜禽及贵重动物。
临床上应用的有头孢噻呋、头孢噻肟、头孢唑肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶、头孢吡肟。
yz.ag365yz.ag365头孢噻呋是美国普强于80年代开发成功的兽医专用第三代头孢菌素，该药1998年在美国首次上市。
猪大肠杆菌病怎么治效果好？治疗猪大肠杆菌病用什么药好得快？畜牧堂倪老师为你,讲解该疾病的治疗预防:猪大肠杆菌病用什么药?把止痢、抗菌以及消炎作为基本原则，在猪仔发病的初期，可以肌注卡那霉素或是庆大霉素，一天注射两次。
在发病中期可以口服硫酸新霉素，同时可以注射阿托品、恩诺沙星以及诺氟沙星治疗。
治疗猪大肠杆菌病的药物有哪些?1.仔猪黄痢对患病仔猪,口服或肌肉注射赐美键、恩诺沙星、庆大霉素、痢菌净和葡萄糖盐水等,能有效治疗该病。
2.仔猪白痢按每公斤仔猪体重取利福平7毫克，磺胺二甲基嘧啶0.01克，胃蛋白酶0.5克，次硝酸铋0.5克，干姜粉1.0克，共研末，与适量炒香的玉米粉充分拌匀，加少许开水调成糊状，喂给发病仔猪，一天两次，一般喂两次即停泻，喂2~3天排粪正常。
3.仔猪水肿病断奶后一个月内,每100公斤饮水或饲料中加1公斤～2公斤食醋或柠檬酸,以提高胃内酸度。
定期给予金霉素、土霉素、喹乙醇、亚硒酸钠、维生素B粉等药物,对防治仔猪腹泻和水肿病有明显效果。
猪大肠杆菌病控制策略减少大肠杆菌的传播以及感染的储存是至关重要的。
提高仔猪和母猪的免疫力也很关键。
了解风险因素会使生产商修改管理技术以便减少大肠杆菌，如广泛应用足浴，控制害虫，疫病暴发时停止猪群间的移动等。
分娩的卫生显得尤为重要。
猪舍应彻底清洗和消毒，母猪引入圈舍前清洗母猪。
室外猪群中，不同批次间的生产设施要移除，圈舍也需要进行处理。
为了减少大肠杆菌病爆发的可能性，其它病原体也需要考虑。
通过降低畜群内整个的感染压力，疾病发病率也会减少。
确保母猪尽可能的健康意味着母猪能够将**的免疫力传递给仔猪。
提高母猪的免疫力也应与反饲程序(使用感染仔猪的粪便)同时进行。
哺乳仔猪一般都在良好的条件下饲养。
不过断奶后，一切都改变了：环境，温度，分组和日粮。
采食量和日粮配方会影响到动物的易感性。
如果发生疫情，必须根据环境条件进行审查。
仔猪应该可以获得少量的教槽料以便断乳后的采食量并不会太大。
几种药物对大肠杆菌的敏感性测定
结果报告
组员：*** *** ***
报告人：***
学号：***
几种药物对大肠杆菌的敏感性测定
摘要：大肠杆菌的抗原性复杂，毒力因子多种多样，不同血清型、不同毒力因子菌株的宿主范围和致病性大不相同，可在不同的动物或在同种不同年龄的动物中引起多种多样的疾病。
通过采用不同的抗菌药物对鸡大肠杆菌病进行治疗，结果表明，该菌对头孢噻肟、庆大霉素、阿米卡星、氧氟沙星和卡那霉素敏感。
【实验目的】
通过检测抑菌圈大小测定大肠杆菌对氟苯尼考、头孢噻呋呐、硫酸新霉素可溶粉、氧氟沙星和卡那霉素几种药物的敏感程度。
【实验原理】
纸片法药敏试验是将抗菌药物吸收到特定的纸片中，然后置于已接种待测定菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏感细菌的生长，从而出现抑菌环（带）。
由于药物扩散的距离越远，达到该距离的药物浓度越低，故可以根据抑菌环的大小，判断细菌对药物的敏感度。
通过药物敏感试验，我们可以找出针对于某些致病菌的敏感药物，从而对临床中的细菌性疾病的治疗提供指导。
【实验材料】
1、药品及细菌——氟苯尼考、头孢噻呋呐、硫酸新霉素（杆菌净）、氧氟沙星和卡那霉素等抗菌药物，生理盐水，磷酸盐缓冲溶液，MH 营养肉汤，MH培养基，麦康凯培养基，蒸馏水，大肠杆菌
2、器材——纸片，试管，移液器，酒精灯，高压蒸汽锅，无菌操作
台，镊子，剪刀，锥形瓶，烘箱，培养箱，天平，玻璃棒，干净毛巾（报纸），炭笔，接种环，小广口瓶
【实验方法及内容】
1．药敏纸片的制作
1.1制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。
取圆纸片50片放入清洁干燥的小广口瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。
经15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。
1.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的小广口瓶内加入药液0.25毫升（因不好取材，故扩大十倍配药。
），并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。
同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。
切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
2．药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。
此稀释液即为用于做药敏试验的药液。
3.培养基的制备
3.1普通肉汤的制备
蛋白胨2g 杭州微生物试剂有限公司
牛肉膏0.6g 成都长寿生物利剂有限公司
Nacl 1g 成都市科龙化工试剂厂
水200ml
PH 7.4
按上述要求称取各种成分于三角瓶中，混合均匀，用NaOH调PH至7.4，调好PH后其瓶口用报纸封好，至于高压蒸汽灭菌中灭菌30min。
待冷却后，倒于无菌平板中。
冷凝后放置在无菌操作台上备用。
3.2普通琼脂平板的制备
水解酪蛋白琼脂（M-H琼脂）杭州微生物试剂有限公司
用法称取本品36g于1000ml蒸馏水中，加热溶解，经121℃15min 高压灭菌，待冷至50℃左右，倾注无菌平板。
此次实验只需要配置200ml,称取水解酪蛋白琼脂7.2g于三角瓶中，往三角瓶中加入200ml蒸馏水即可。
放入高压蒸汽灭菌锅里灭菌30min。
待冷却50℃左右，倾注无菌平板。
4．细菌的转种、纯化、活化培养
（1）在麦康凯培养基上用无菌接种环接种大肠杆菌
（2）用无菌接种环将细菌接种到MH培养基中（6个），保证细菌均匀的涂布在培养基中。
注意无菌操作。
（3）将培养基置于37℃的恒温箱中培养24h。
4.药敏片法操作方法
4.1在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。
具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划
线涂菌至平皿的1/2。
然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。
（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。
要求涂布均匀致密）
4.2将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。
为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。
为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴四片），每种药敏片的名称要记住。
4.3将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
附：
1.结果判断依据
2. 所用药品：
A 杆菌净泰硫酸新霉素可溶粉
主要成分：硫酸新霉素
生产商：四川莱邦药业有限公司
用法及用量：200g兑水600kg
B 头孢噻呋钠批号061202 生产商：浙江海正药业浓度：89.6%
C 卡那霉素用法及用量：禽类10g可混饮水500-1500kg
D 氧氟沙星可溶粉
生产商：广东大华农动物保健品有限公司动物保健厂
用法及用量：禽类每1L水混饮2.5g，每日2次，连用3-5日
E 氟苯尼考可溶粉
生产商：广东养宝生物制药有限公司
用法及用量：鸡每1L水混饮100mg
3.【注意事项】
3.1培养基：应根据试验菌的营养需要进行配制。
倾注平板时，厚度合适（约5-6mm），不可太薄，一般90mm直径的培养皿，倾注培养基18-20ml为宜。
培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺药和TMP的活性。
3.2细菌接种量：细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性。
3.3药物浓度：药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制。
商品药应严格按照其推荐治疗量配制。
3.4培养时间：一般培养温度和时间为37℃8-18小时，有些抗菌药扩散慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4℃冰箱内2~4小时，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养，可以推
迟细菌的生长。
【实验进度】
6.23 上午：称量和制备药液，药敏片打孔、装瓶、灭菌、干燥，称
量制备肉汤、普通、麦康凯、MH培养基并灭菌，实验用品
和器具的灭菌处理。
下午：将药液加入已干燥的药敏小瓶，制备药敏片。
倒平板、接种细菌进行复活扩大培养。
6.24 倒MH平板、准备大肠杆菌的纯化培养。
6.25 上午：大肠杆菌接种到MH培养基中，贴药敏片。
晚上：观察药敏片抑菌情况，测量并记录抑菌圈大小。
【实验结果】
抑菌环大小（mm）\药名硫酸锌霉素头孢噻呋呐卡那霉素氧氟沙星氟苯尼考
1 16.38 24.00 22.40 34.80 22.90
2 17.56 25.10 20.40 35.34 28.64
3 23.65 27.26 21.48 36.72 24.82
4 22.60 19.40 20.02 18.00 26.80
5 22.18 24.00 20.50 35.80 19.50
6 23.74 23.30 29.82 24.12 25.90
0.005.00
10.00
15.00
20.00
25.00
30.00
35.00
40.00
123456
平均值硫酸新霉素头孢噻呋钠卡那霉素氧氟沙星氟苯尼考。
