XBP1调控胶质瘤细胞氧化应激的实验研究(参考课件)

收稿日期：2010-01-16修回日期：2010-01-30通讯作者：赵世光Correspondence to:Shi -guang ZhaoTel:86-451-53629254E -mail:guangsz@此文为第六届中国肿瘤学术大会优秀论文X 盒结合蛋白1调控胶质瘤细胞氧化应激的研究刘耀华,杨光,张旭,陈晓丰,于洪伟,郑天虎,汪立刚,赵世光（哈尔滨医科大学附属第一医院神经外科，黑龙江哈尔滨150001）【摘要】背景与目的：活性氧（ROS ）可以通过诱导细胞氧化应激而诱导凋亡，肿瘤包括胶质瘤在体内的生长均处于高活性氧的状态，提高胶质瘤细胞对活性氧-氧化应激的敏感性可抑制肿瘤在体内的生长侵袭，而且还可以增强一些诱导活性氧的化疗药物的疗效。

本研究通过干预XBP1基因的表达，观察XBP1是否可调控胶质瘤细胞对氧化应激的敏感性，并探讨其机制。

方法：用siRNA 转染技术抑制U251MG 细胞XBP1基因的表达后对比细胞对H 2O 2诱导的细胞死亡、线粒体膜电位下降、活性氧堆积、以及P38磷酸化，以此来反映细胞内氧化应激的水平；并比较细胞内抗氧化分子的表达情况；将XBP1基因过表达后观察能否起到相反的效果；最后应用启动子突变技术分析XBP1对Catalase 表达的影响。

结果：U251MG 细胞XBP1表达抑制后可以显著提高H 2O 2诱导的细胞死亡、线粒体膜电位下降、活性氧堆积以及延长P38的磷酸化，并降低细胞内一些抗氧化分子包括过氧化氢酶表达，XBP1过表达可以增强Catalase 表达并且降低ROS 堆积；启动子序列突变分析结果显示XBP1增强Catalase 表达的效应完全依赖于启动子序列的CCAAT 框。

结论：XBP1对氧化应激引起的细胞损伤具有保护作用；其可能机制至少是通过上调Catalase 的表达实现。

抑制XBP1的表达可能作为一种分子靶向，对胶质瘤治疗有积极意义。

关键词：胶质瘤；XBP1；氧化应激；活性氧中图分类号:R739.41文献标识码:A文章编号:1726-8192（2010）01-0001-08Role of XBP1in the Regulation of Sensitivity of Glioma toOxidative StressYao -hua Liu,Guang Yang,Xu Zhang,Xiao -feng Chen,Hong -wei Yu,Tian -hu Zhen,Li -gang Wang,Shi -guang ZhaoDepartment of Neurosurgery,1st Clinical College of Harbin Medical university,Harbin 150001,P.R.China【ABSTRACT 】BACKGROUND &OBJECTIVE:High level of reactive oxygen species (ROS)can activateoxidative stress,which may lead to apoptosis.Cancer cells,including glioma cells,have to survive under conditions of high ROS level in vivo.Tumor invasion or development may be suppressed and the anti-cancer effects of some ROS -inducing agents may be augmented by increased sensitivity to oxidative stress in cancer cells.In this study,we investigated whether XBP1has an antioxidant role in glioma cells and what is the mechanism of this role.METHOD:Glioma cell line U251was used in this experiment.XBP1expression level in glioma cells was knocked down by SiRNA transfection.After exposure to hydrogen peroxide (H 2O 2),cell death,MMP loss,ROS level and P38phosphorylation were examined to show the oxidative stress level and expression of a variety of antioxidant molecules was compared in those cells.Overexpression of XBP1was performed to observe the converse effects.Promoter mutation analysis was taken to explore the mechanism of varied catalase expression level by XBP1.RESULT:Afterexposure to H 2O 2,more extensive loss ofmitochondrial membrane potential (MMP)and subsequent cell death,ROS generation and prolonged P38phosphorylation were observed in XBP1-KO cells.Lower expression of several antioxidant molecule s including catalase was also found.In addition,similar results were·论著·《中国神经肿瘤杂志》2010，8（1）：1-81胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤。

XBP1在氯化钴诱导骨肉瘤细胞缺氧环境下抗凋亡作用实验研究杨接来;程冬冬;朱斌;闫明霞;姚明;杨庆诚【摘要】目的探讨在氯化钴诱导骨肉瘤细胞缺氧情况下，X 盒结合蛋白1（XBP1）在骨肉瘤细胞中表达量的变化、其对细胞凋亡的影响及与低氧诱导因子（HIF）-1α信号转导通路的关系。

方法通过氯化钴诱导骨肉瘤 MNNG、MG-63细胞达到模拟缺氧状态，通过实时聚合酶链式反应（PCR）检测不同时间、不同氯化钴浓度下 HIF-1α和 XBP1的表达情况；采用流式细胞仪检测骨肉瘤细胞凋亡率；采用siRNA 干扰技术，下调 XBP1。

实验将骨肉瘤细胞分为干扰组（经 XBP1 siRNA转染骨肉瘤细胞）和空白对照组（未经 XBP1 siRNA 转染骨肉瘤细胞）。

结果XBP1表达具有氯化钴浓度和时间依赖性：一定范围内，随着氯化钴浓度增高和时间延长，XBP1表达升高；敲除 XBP1后，干扰组骨肉瘤细胞凋亡率明显高于对照组（P ＞0．05）；PCR 检测 HIF-1α及下游靶基因 mRNA 表达无明显变化（P＜0．05）。

结论XBP1在氯化钴诱导缺氧的骨肉瘤细胞中表达明显增高，其对骨肉瘤细胞在缺氧环境下抗凋亡有明显作用，其抗凋亡作用与 HIF-1α信号转导通路无直接关联，具体机制有待进一步研究。

%Objective To investigate the expression level,anti-apoptotic effect and association with hypoxia inducible factor-1α(HIF-1α) signaling of X-box binding protein 1 (XBP1s)in osteosarcoma cells under CoCl2-induced hypoxic condition.MethodsCoCl2 was used to simulate hypoxic environment for MNNG and MG-63 cells.The expression of XBP1s and HIF-1αmRNA of osteosarcoma cells were detected by real-time polymerase chain reaction (PCR)for treatment of different CoCl2 concentration and time span.Flow cytometry was utilizedto measure the apoptotic rate of osteosarcoma cells.The siRNA interfering technique was used to reduce the expression of XBP1s.The osteosarcoma cells were divided into the XBP1s-siRNA transfected group and the un-transfected group.Results XBP1s expression was CoCl2-concentration and time-dependent,which increased with the raised CoCl2 concentration and prolonged time in a certain range.After knockdown of XBP1s,the cell apoptotic rate of osteosarcoma cells in the hypoxic group was significantly higher than that in the control group (P >0.05).However,the PCR results showed that there was no significant changes of HIF-1α and its downstream targeted genes after knockdown of XBP1s (P <0.05 ). Conclusion XBP1s could be increased remarkably in osteosarcoma cells after CoCl2-induced hypoxic treatment.It has anti-apoptotic effects on osteosarcoma cells under hypoxic condition.However,there is little relationship between XBP1s and HIF-1αsignaling pathway.The specific mechanism for XBP1s acting as an anti-apoptotic gene in osteosarcoma is needed further deeper investigation.【期刊名称】《国际骨科学杂志》【年(卷),期】2016(037)002【总页数】6页(P123-128)【关键词】骨肉瘤;X 盒结合蛋白 1;低氧诱导因子-1α信号转导通路;氯化钴;缺氧【作者】杨接来;程冬冬;朱斌;闫明霞;姚明;杨庆诚【作者单位】200233，上海交通大学附属第六人民医院骨科;200233，上海交通大学附属第六人民医院骨科;200233，上海交通大学附属第六人民医院骨科;200032，上海市肿瘤研究所;200032，上海市肿瘤研究所;200233，上海交通大学附属第六人民医院骨科【正文语种】中文恶性肿瘤的形成原因为肿瘤细胞无限增殖，细胞增殖过快必将导致局部组织营养不足。

脑胶质瘤中凋亡抑制生存基因和细胞周期蛋白 b1的表达及临床意义文志华;宋小兵;江普查;袁先厚【摘要】Objective To investigate the expression of survivin gene in human gliomas and its correlation with cyclin b1 .Methods The expression of survivin and cyclin b1 in 41 cases of glioma tissue and 10 cases of normal brain tissue were assessed by immunohistochemistry staining (SABC) method .Results The survivin gene expression pro-tein had no expressionin the normal brain tissue ,among 41 cases of glioma ,25 cases had the surviving positive ex-pression ,accounting for 61 .0% (25/41) .The expression had statistical difference between the grade Ⅰ - Ⅱ and gradeⅢ - Ⅳ (P< 0 .05) .There also was close correlation between surviving protein expression and cyclin b1 protein expression (rs = 0 .836 ,P <0 .01) .Conclusion The abnormal expression of survivin plays an important role in the development of glioma ,which together with cyclin b1 may play a promotion role in the stage G2 /M of glioma cell mi-tosis .%目的：探讨凋亡抑制生存基因（survivin）在人脑胶质瘤中的表达及其与细胞周期蛋白（cyclin）b1蛋白表达的相关性。

P53P21通过抑制TIMP-2表达促进人胶质瘤干细胞侵袭的机制研究的开题报告一、研究背景胶质瘤是一种高度侵袭性的肿瘤，具有很高的死亡率。

近年来，研究表明胶质瘤干细胞起着重要的作用，是胶质瘤治疗中难以克服的难题。

因此，对胶质瘤干细胞分子调控机制的研究具有重要的意义。

P53是一种肿瘤抑制因子，与肿瘤的发生和发展密切相关。

P21是P53介导的抑癌基因。

研究表明，P53P21可以通过抑制细胞周期的进程，起到抑制肿瘤细胞增殖的作用。

而TIMP-2是一种金属蛋白酶抑制剂，具有抑制肿瘤细胞侵袭和转移的作用。

因此，本研究旨在探究P53P21通过抑制TIMP-2表达促进胶质瘤干细胞侵袭的机制，为胶质瘤的治疗提供新的思路和方法。

二、研究内容和方法1.研究内容通过建立胶质瘤干细胞模型，验证P53P21的抑癌作用和TIMP-2的抑制作用。

进一步研究P53P21是否能够通过抑制TIMP-2表达来促进胶质瘤干细胞的侵袭和转移。

2.研究方法2.1 建立胶质瘤干细胞模型选择人胶质瘤干细胞进行研究。

利用细胞培养技术和肿瘤球体培养技术，建立胶质瘤干细胞模型。

2.2 验证P53P21的抑癌作用和TIMP-2的抑制作用采用Western blotting技术检测胶质瘤干细胞中P53、P21和TIMP-2的表达水平，并采用MTT实验检测不同浓度P53P21和TIMP-2的抗增殖作用。

2.3 研究P53P21是否能够通过抑制TIMP-2表达来促进胶质瘤干细胞的侵袭和转移采用Transwell实验和Wound healing实验检测胶质瘤干细胞的侵袭和转移能力，观察P53P21和TIMP-2对胶质瘤干细胞侵袭和转移能力的影响。

三、研究意义和预期结果本研究可以对胶质瘤干细胞的分子调控机制有更深入的认识，为胶质瘤的治疗提供新的思路和方法。

预期结果是通过研究P53P21和TIMP-2的调控机制，探究P53P21是否能通过抑制TIMP-2表达来促进胶质瘤干细胞的侵袭和转移，为胶质瘤的治疗提供新的方向和方法。

抗胶质瘤Ⅰ号方对脑胶质瘤细胞侵袭性的影响目的：探讨抗胶质瘤Ⅰ号对胶质瘤细胞侵袭性降低的作用及其与PI3K/PKB信号传导通路之间的关系。

方法：MTT法检测抗胶质瘤Ⅰ号处理培养的C6胶质瘤细胞的抑制率，免疫印迹法检测肿瘤细胞内PI3K和PKB表达水平，最后，利用结晶紫染色法检测Transwell下室面的胶质瘤细胞数。

结果：抗胶质瘤Ⅰ号可以抑制PI3K和PKB蛋白表达水平，抗胶质瘤Ⅰ号作用0.5 h时PI3K蛋白表达水平最低为（25.1±3.1），作用1 h时PKB蛋白表达水平最低为（25.1±3.8），与对照组的（99.1±1.6）、（91.2±3.5）比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。

而抗胶质瘤Ⅰ号作用3 h时对胶质瘤细胞的抑制程度最大，抑制率为（91.2±5.7）%，与对照组的（68.0±5.2）%比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。

且此时Transwell 下室面的细胞数最少，为（1.4±0.4）×106个，与对照组的（35.6±2.7）×106个比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论：抗胶质瘤Ⅰ号可能是通过抑制PI3K/PKB而抑制胶质瘤细胞的增殖，从而引起胶质瘤细胞侵袭性的降低。

在中枢神经系统肿瘤中，胶质瘤是最为常见的[1-3]。

而对于胶质瘤的治疗，除了大家广为熟悉的手术治疗以外，还往往在术后进行相应的放、化疗等辅助治疗[4-5]。

这是由于胶质瘤侵袭性高，而手术只能切除成型的病灶，已经侵袭到远处的膠质瘤细胞不易发现也做不到全部清除，因此术后胶质瘤患者往往复发率极高。

抗胶质瘤Ⅰ号方中的部分成分已经应用于临床其他肿瘤的治疗并取得了一定的效果，文献[6]研究发现，抗胶质瘤Ⅰ号具有抗胶质瘤作用，但其确切的分子生物学作用机制尚不十分清楚。

1 材料与方法1.1 材料与试剂（1）C6大鼠脑胶质瘤细胞株由中国医学科学院基础医学研究所基础医学细胞中心提供。

以XBP1为靶向调控胶质瘤细胞对氧化应激敏感性的实验研究的开题报告背景介绍：胶质瘤是一种神经胶质细胞来源的恶性肿瘤，目前已经成为成年人最为常见的原发性脑肿瘤，且生存期较短。

氧化应激作为一种通常情况下细胞内外产生的生物化学反应，在胶质瘤的发生和发展过程中也扮演了重要角色。

XBP1（X-box binding protein 1）是一种转录因子，主要参与内质网反应，并且被认为在细胞的存活和死亡中发挥着重要作用。

在胶质瘤中，XBP1的异常表达也与肿瘤细胞的氧化应激敏感性有关。

因此，研究针对XBP1的靶向调控对胶质瘤细胞的氧化应激敏感性进行调控，有望拓宽胶质瘤治疗的思路。

研究目的：通过探究对XBP1的靶向调控，提高胶质瘤细胞的氧化应激敏感性，为胶质瘤治疗提供新思路和方法。

研究内容：1. 确定胶质瘤细胞氧化应激敏感性的最适实验条件。

根据文献报道和实验室条件，选取一种适合的氧化应激试剂，确定最佳的氧化应激试验时间和剂量。

2. 确认XBP1与氧化应激敏感性的关系。

通过文献调查和实验发现，XBP1在胶质瘤的发生和发展中发挥着关键作用。

在XBP1的基因表达水平上进行干扰实验，观察氧化应激试验中细胞存活率的变化，进一步考证XBP1对氧化应激敏感性的调控作用。

3. 探究XBP1调控氧化应激的分子机制。

通过Western blot、实时荧光定量PCR等技术，研究XBP1对氧化应激相关分子的调控作用，包括Nrf2（核因子相关因子2）、HO-1（血红素氧合酶-1）等。

从分子水平上揭示XBP1调控氧化应激敏感性的机制。

预期结果：本实验将从分子水平上探究XBP1对胶质瘤细胞氧化应激敏感性的调控机制，预计能够阐明XBP1在氧化应激与胶质瘤发展中的关系，为新药物和治疗胶质瘤提供新的思路和方法。

三氧化二砷联合γ分泌酶抑制剂抑制胶质瘤干样细胞增殖的机制研究的开题报告1.研究背景胶质瘤是一种非常常见的中枢神经系统恶性肿瘤，尤其是恶性胶质瘤的治疗难度非常大。

虽然现有的治疗手段如手术、放疗和化疗等有一定疗效，但常常会带来一系列的副作用，并且存在复发和转移的风险。

因此，急需寻找新的治疗方法来提高治疗效果。

三氧化二砷是一种来源于中药的自然产物，具有广泛的生物学活性，被广泛应用于肿瘤、炎症及自身免疫等疾病的治疗工作中。

在前期研究中，三氧化二砷被证明具有一定抗癌作用，可以抑制胶质瘤干样细胞的增殖，但其具体作用机制尚未完全明确。

γ分泌酶是一种普遍存在于哺乳动物中的酶类，广泛参与多种细胞生物学过程，并与多种肿瘤的发生和发展密切相关。

因此，联合γ分泌酶抑制剂的治疗策略也成为目前肿瘤治疗的一个研究热点。

本研究意在探究三氧化二砷联合γ分泌酶抑制剂抑制胶质瘤干样细胞增殖的具体机制，为胶质瘤的治疗提供新的思路和依据。

2.研究内容和方法本研究将采用人类胶质瘤干样细胞U251的体外培养模型，以三氧化二砷联合γ分泌酶抑制剂的方式进行干预，探究其对胶质瘤干样细胞增殖的影响及其相关机制。

具体研究内容与方法：1）构建胶质瘤干样细胞体外培养模型，利用MTT法、克隆形成实验等方法评价三氧化二砷和γ分泌酶抑制剂对胶质瘤干样细胞增殖的影响。

2）利用流式细胞术和ANN、RT-PCR等方法考察三氧化二砷和γ分泌酶抑制剂对胶质瘤干样细胞凋亡及相关因子表达的调控作用。

3）利用Western印迹法和荧光共振能量转移法(FRET)对三氧化二砷和γ分泌酶抑制剂的作用机制进行澄清和探究。

4）实验结果将采用统计学方法进行分析和总结。

3.研究意义本研究将从分子水平探究三氧化二砷联合γ分泌酶抑制剂抑制胶质瘤干样细胞增殖的具体机制，探索新的治疗路径，丰富对胶质瘤治疗的认识，为改善肿瘤治疗效果和减少不良反应提供新的策略。

WISP1基因对脑胶质瘤细胞生物学行为影响的初步
研究的开题报告
一、研究目的
脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，其预后不佳，治疗难
度大，具有很高的死亡率。

WISP1基因是Wnt信号通路的一个调控因子，在许多肿瘤中表达上调，与肿瘤的生长、转移和预后密切相关。

本研究
旨在探究WISP1基因对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响，为深入认识脑
胶质瘤发生机制提供理论基础。

二、研究方法
1.细胞培养：选取U251和U87细胞系作为研究对象，在含
10%FBS的DMEM中进行培养。

2.包括片段构建，病毒感染，转染，RNA干扰等方法对WISP1基因进行调控，定量PCR和Western blot方法检测WISP1的表达水平，棕榈酸注射和荧光素酶报告系统检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。

3.文献综述：对WISP1基因在肿瘤中的研究进行文献回顾和梳理，
为本实验提供理论支持。

三、预期结果
1.成功构建WISP1过表达和RNA干涉模型，有效地调控细胞内WISP1的表达。

2.实验将分别探究WISP1对细胞增殖、迁移和侵袭的影响，以及其
作用机制的研究。

3.预计实验结果能进一步阐明WISP1对脑胶质瘤进行调控的机制，
为进一步研究脑胶质瘤的发病机制提供参考。

四、研究意义
1.本研究将有助于拓展我们对WISP1基因的了解，为其在肿瘤中的作用机制提供新的研究思路。

2.为深入阐述脑胶质瘤的发生机制提供新的理论基础，对于脑胶质瘤的治疗提供新的方式和方向。

3.将为WISP1作为治疗靶点的临床研究提供更全面和深入的实验支持。

芹黄素对氧化应激诱导的HaCat细胞XBP1表达的影响张德利;刁庆春;涂彩霞;林茂【摘要】目的研究芹黄素对过氧化氢诱导的HaCat细胞氧化应激及XBP1表达的影响.方法采用MTT法测定芹黄素对HaCat细胞的活力的影响,DCFH-DA法流式细胞术检测HaCat细胞活性氧(ROS)含量,实时定量PCR检测HaCat细胞XBP1的mRNA表达.结果500 μmol/L的过氧化氢可显著诱导HaCat细胞ROS含量及XBP1smRNA表达升高(P＜0.01);10 μmol/L及25μmol/L的芹黄素可显著抑制过氧化氢引起的HaCat细胞ROS含量及XBP1s mRNA表达升高,差异有统计学意义(P＜0.01).而过氧化氢或芹黄素对HaCat细胞未剪切的XBP1 (XBP1u)的mRNA水平无明显影响.结论芹黄素可能通过抗氧化,对过氧化氢引起的XBP1s表达升高具有抑制作用,因而可能具有开发成为治疗白癜风的新药的前景.【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》【年(卷),期】2018(017)006【总页数】4页(P485-488)【关键词】芹黄素;XBP1;氧化应激;HaCat细胞;白癜风【作者】张德利;刁庆春;涂彩霞;林茂【作者单位】西南医科大学,四川泸州646000;重庆市中医院,重庆400011;大连医科大学第二附属医院,辽宁大连116027;重庆市中医院,重庆400011【正文语种】中文【中图分类】R285.5白癜风是一种常见的获得性的色素脱失性皮肤病，发病机制不清，治疗困难。

近年来，有学者提出白癜风的综合发病机制学说：在遗传学背景基础上，氧化应激造成局部黑素细胞损伤及凋亡，诱导自身免疫反应攻击更多的黑素细胞，造成进行性的皮肤色素脱失[1]，但氧化应激如何启动自身免疫反应尚不清楚。

遗传学研究显示，白癜风X-box结合蛋白1（X-box binding protein 1，XBP1）启动子区域的遗传变异与白癜风发病密切相关，且皮损中XBP1表达明显增加[2]。

XBP1在氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡中机制研究张丹丹;张光亚;何茳萍;朱静;陈凤玲【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2017(023)013【摘要】Objective To study the role of X box-binding protein 1(XBP1) in oxidized low-density lipoprotein (OX-LDL)-induced macrophage apoptosis.Methods Using Western blot analysis,we first analyzed the XBP1 expression in THP-1 under different concentrations of ox-LDL for different durations(6,12,and 24 h).Subsequently,we treated the lentiviral short hairpin RNA(shRNA)-mediated XBP1-knockdown and XBP1-overexpressing cell lines with 100 mg/Lox-LDL for 24 h to determine the role of XBP1 in oxidized low-density lipoprotein-induced macrophage apoptosis.Results Total protein were extracted from the macrophages under different concentrations of ox-LDL treatment.The results of the Western blot analysis showed a significant increase in the protein expression ofXBP1,and the expression intensity increased with an increase in ox-LDL concentration.However,cell apoptosis rate increased significantly when the concentration of ox-LDL was more than 100 mg/L.Treatment with 100mg/L ox-LDL for different durations(6,12, and 24 h) significantly increased the protein expression of XBP1 and the expression intensity increased with the duration of ox-LDL treatment.XBP1 knockdown increased ox-LDL-indu ced macrophage apoptosis(control group CHOP:31.93±0.21,C-Caspase-3:24.16±1.18;knock down group CHOP:48.30±0.53,C-Caspase-3:39.12±2.75;P<0.01) and that apoptosis was attenuated after XBP1 overexpression(control group CHOP:31.53±0.47,C-Caspase-3:22.23±0.63;Over expression group CHOP:14.79±0.51,C-Caspase-3:10.69±0.29;P<0.01).Conclusion XBP1 protects macrophages from ox-LDL-induced apoptosis.It suggests that XBP1 should be considered as potential therapeutic targets for patients with atherosclerosis.%目的探讨X 盒结合蛋白1(XBP1)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞凋亡中的机制.方法不同浓度的ox-LDL刺激人巨噬细胞THP-1后,利用Western bolt法检测XBP1表达的变化.ox-LDL刺激THP-1细胞不同时间(6 h、12 h和24 h)后,用Western bolt法检测XBP1表达的变化.利用慢病毒介导的shRNA干扰技术及基因过表达技术,分别构建XBP1基因干扰与过表达的THP-1细胞系后,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹检测干扰或过表达XBP1基因后对ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡的影响.结果用不同浓度ox-LDL处理THP-1细胞,XBP1表达强度随着ox-LDL诱导浓度的增加而增强.用100 mg/L ox-LDL处理THP-1细胞不同的时间,XBP1表达强度出现时间依赖性的增强.用100 mg/L ox-LDL处理THP-1细胞24 h出现细胞凋亡.ox-LDL诱导巨噬细胞,与对照组CHOP mRNA和C-Caspase-3 mRNA相比,THP-1细胞干扰XBP1基因表达后,CHOP mRNA 和C-Caspase-3 mRNA表达水平明显增强(对照组CHOP 31.93±0.21,C-Caspase-3 24.16±1.18;干扰组CHOP 48.30±0.53,C-Caspase-3 39.12±2.75;P<0.01).ox-LDL诱导巨噬细胞,与对照组CHOP mRNA和C-Caspase-3 mRNA相比,当THP-1细胞过表达XBP1基因后,CHOP mRNA和C-Caspase-3 mRNA表达水平明显减少(对照组CHOP 31.53±0.47,C-Caspase-3 22.23±0.63;过表达组:CHOP 14.79±0.51,C-Caspase-3 10.69±0.29;P<0.01).结论 XBP1在ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡中起保护性作用,并可能成为治疗动脉粥样硬化的新靶点.【总页数】6页(P2671-2675,2680)【作者】张丹丹;张光亚;何茳萍;朱静;陈凤玲【作者单位】上海交通大学医学院,上海 200000;上海交通大学医学院,上海200000;上海交通大学医学院,上海 200000;上海交通大学医学院,上海 200000;上海交通大学医学院附属第九人民医院内分泌科,上海 201900【正文语种】中文【中图分类】R34【相关文献】1.自噬通过抑制C／EBP同源蛋白表达减轻氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡[J], 田华;马守原;康攀攀;郝奇;焦鹏;邵夏炎;徐晓燕;秦树存;姚树桐2.载脂蛋白 A－I 模拟肽 D4 F 通过抑制 caspase－12减轻氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡 [J], 田华;李严严;丁明德;杨娜娜;焦鹏;桑慧;方永奇;姚树桐;秦树存3.蜂胶醇提物通过抑制caspase－12减轻氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡[J], 李严严;徐晓燕;张家君;方永奇;田华;焦鹏;桑慧;秦树存;姚树桐4.结直肠肿瘤差别表达基因对氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡的影响及机制 [J], 胡姗姗;杨贵丽;胡菁;田凡青;彭雯5.氧化型低密度脂蛋白的不同组分在诱导巨噬细胞凋亡中的作用 [J], 刘尚喜;周玫;陈瑗因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

抑制IRE1-XBP1通路增强帕比司他的抗食管鳞癌活性研究的
开题报告
背景：食管鳞癌是一种常见的恶性肿瘤，目前缺乏有效的治疗方法。

近年来的研究发现，IRE1-XBP1通路在食管癌的发生和发展中起重要作用，因此抑制该通路可能是一种有效的治疗策略。

目的：本研究旨在探讨抑制IRE1-XBP1通路对帕比司他在抗食管鳞癌中的作用以及其机制。

方法：采用体外细胞实验和体内实验相结合的方法，利用RNA干扰等技术抑制IRE1-XBP1通路，同时观察帕比司他在食管鳞癌细胞中的抗癌作用。

并通过Western blotting等方法检测IRE1-XBP1通路相关蛋白的变化情况，以探讨其作用机制。

预期结果：本研究预计通过抑制IRE1-XBP1通路增强帕比司他的抗食管鳞癌活性，为临床治疗提供新的治疗策略和药物。

意义：本研究探索了抑制IRE1-XBP1通路在食管鳞癌治疗中的作用，为进一步深入研究其作用机制提供了参考和启示，同时也为食管鳞癌的临床治疗提供了新的思路。

沉默IRE1α-XBP1信号通路对HASMC增殖及CyclinD1表达的影响郑学忠;陈裕浩;王恩阳;郭德镔;高婧;万怡轩;王红【摘要】目的探究IRE1α-XBP1信号通路对人主动脉平滑肌细胞(HASMC)增殖及CyclinD1表达的影响.方法使用lipo2000将siERN1(siERN1-a、siERN 1-b、siERN1-c)和siXBP1干扰序列转染HASMC作为干扰组(siRNA),以不作任何处理的HASMC作为空白对照组(BC),转染无关序列的HASMC为阴性对照组(NC).转染24 h后,倒置荧光显微镜下观察细胞转染情况,并检测转染效率及ERN1和XBP1基因的干扰效应.HASMC进一步转染siERN1-c和siXBP1后,检测HASMC转染前0h及转染后24、48、72 h的增殖能力;转染后48 h,检测CyclinD1表达量和HASMC的细胞周期变化.结果转染后,siERN1-c和siXBP1组的ERN1和XBP1表达量明显下调(P＜0.05);转染24、48、72 h后,siERN1-c、siXBP1组增殖水平明显低于NC组、BC组(P＜0.05);siERN1-c、siXBP1组处于G1期细胞比率有所增加,处于S期细胞比率减少(P＜0.05),并且siERN1-c、siXBP1组细胞周期蛋白cyclinD1表达也下降(P＜0.05).结论沉默IRE1α-XBP1信号通路能抑制HASMC 增殖,其机制与降低cyclinD1表达有关.【期刊名称】《西南国防医药》【年(卷),期】2019(029)001【总页数】5页(P1-5)【关键词】平滑肌细胞;IRE1α-XBP1;信号通路;细胞增殖;细胞周期蛋白D1【作者】郑学忠;陈裕浩;王恩阳;郭德镔;高婧;万怡轩;王红【作者单位】650032昆明,解放军920医院干部病房、昆明医科大学解放军920医院临床学院;贵州医科大学儿科教研室;650032昆明,解放军920医院干部病房、昆明医科大学解放军920医院临床学院;陆军军医大学;昆明医科大学附属口腔医院正畸科;650032昆明,解放军920医院干部病房、昆明医科大学解放军920医院临床学院;650032昆明,解放军920医院干部病房、昆明医科大学解放军920医院临床学院【正文语种】中文【中图分类】R543血管平滑肌的增殖一直是防治动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）形成的关键所在。