高效液相色谱法测定人血浆中丁螺环酮浓度

２００８年第１７卷第６期　高效液相色谱法测定人血浆中腺苷钴胺质量浓度　药物研究　

申桂英　，崔凤云　，赖力　（１．天津药业焦作有限公司，河南焦作４５４９５０；　２．中国药科大学，江苏南京　２１０００９）　摘要：目的探讨测定人血浆中腺苷钴胺质量浓度的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法。方法血浆样品加三氯乙酸处理后离心，采用ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳ２　分析柱，以乙腈一０．０５　ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液为流动相（１５：８５，用磷酸调节ｐＨ：３．２），流速为１．０　ｍＬ／ｍｉｎ，紫外检测波长为２６０　ｎｍ。　结果腺苷钴胺质量浓度的线性范围为５～１００　Ｉ，ｚｇ／ｍＬ，血浆最低检出质量浓度为５￣ｇ／ｍＬ。结论用ＨＰＬＣ法测质量浓度用测人血浆的腺　苷钴胺，重现性好，结果准确。　关键词：腺苷钴胺；高效液相色谱法；血浆；质量浓度　中图分类号：Ｒ９６９．１；Ｒ９７３　．３　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６—４９３１（２００８）０６—００２１—０２　人血浆中腺苷钴胺很不稳定，在窒温、冷藏、冷冻和冻融等条　件下均易降解。在此探讨了利用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定人血　浆中腺苷钴胺质量浓度的方法。　１　仪器与试药　ＬＣ一１０Ａ型高效液相色谱仪（日本岛津公司）。腺苷钴胺（批号　为０４０９０１，河北华荣制药有限公司）；乙腈（美国ＴＥＤＩＡ公司）；磷　酸二氢钾（批号为０２０４１３２６，南京化学试剂一厂）；三氯乙酸（分析　纯，如皋市化学试剂厂）；空白人血浆（南京红十字协会血液中心）。　２　方法与结果　２　１　色谱条件　色谱柱：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　ＯＤＳ２分析柱（２００　Ｂｉｎ×４．６　ｍｍ，５　ｍ）；流　动相：乙腈一０．０５　ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液（１５：８５，用磷酸调节　ｐＨ＝３．２）：流速：１．０　ｍＬ／ｍｉｎ；紫外检测波长：２６０　ｎｍ。　２．２　样品处理与测定方法　取空白血浆，加入不同质量浓度的腺苷钴胺溶液，总体积为　１００　Ｉ，ｚＬ，混匀后立即加入５０　质量分数为１０％的三氯乙酸溶液，　涡旋振荡２　ｍｉｎ后，于８　０００　ｒ／ｍｉｎ条件下离心处理５　ｍｉｎ，取上清　液２０　Ｌ，立即进样测定。由于药物容易光解，所有样品均应避光处　理。　２．３方法学考察　专属性试验：取空白血浆，依法处理并进行ＨＰＬＣ测定，在样　品峰位置无杂质干扰峰。在拟订色谱条件下的色谱图见图１。　Ｕ／ｍＶ　４５０　３００　１５Ｏ　Ｏ　Ｏ　３　６　９　０　３　６　９　０　３　６　９　Ａ　Ｂ　Ｃ　１，腺苷钴胺　Ａ．空白人血浆　Ｂ．腺苷钴胺溶液　Ｃ．人空白血浆＋腺苷钴胺溶液　图１　高效液相色谱图　灵敏度试验：取空白血浆数份，按浓度等倍递减法分别加入腺　苷钴胺溶液，混匀后依法测定。将信噪比大于或等于３且符合其他　考核项目要求的最低质量浓度作为本测定法的最低检测质量浓　度。结果腺苷钴胺在血浆中的最低检测质量浓度为５　Ｉ，ｚｇ／ｍＬ。　血浆标准曲线绘制：取空白血浆５份，分别加入腺苷钴胺溶　＇ｍｍ　＇＇ｍｍ＇　＇＇＇ｍ＇＇＇ｍ＇＇ｍ＇＇＇＇＇ｍ＇＇ｍ＇ｍ＇＇＇＇＇ｍ＇ｍ＇＇ｍ＇＇＇＇＇＇＇＇＇＇＇＇ｍ＇＇＇＇＇ｍ＇＇＇　ｍｍ＇＇＇　ｍ＇　［４］Ｙａｎｘｉａ　Ｃａｏ，Ｃ　Ｚｈａｎｇ，Ｗ　Ｓｈｅｎ，ｅｔ　ａ１．Ｐｏｂ（Ｎ—ｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｃｒｙｌａｍｉｄｅ）一　ｃｈｉｔｏｓａｎ　ａｓ　ｔｈｅｒｍ０ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｇｅｌ—ｆｏｒｍｉｎｇ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　ｏｃｕｌａｒ　ｄｒｕｇ　ｄｅｌｉｖ－　ｃｒｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅｌｅａｓｅ，２００７，１２０：１８６—１９４．　［５］Ｃｏｈｅｎ　Ｓ，Ｌｏｂｅｌ　Ｅ，Ｔｒｅｖｇｏｄａ　Ａ、ｅｔ　ａ１．Ａ　ｎｏｖｅｌ　ｉｎｓｉｔｕ—ｆｏｒｍｉｎｇ　ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ　ｄｒｕｇ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｒｏｍ　ａｌｇｉｎａｔｅｓ　ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ　ｇｅｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｙｅｐ［Ｊ］．　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＲｅｌｅａｓｅ，１９９７，４４（２—３）：２０１—２０８　［６］Ｒｏｚｉｅｒ　Ａ，Ｍａｚｕｅｌ　Ｃ，Ｇｒｏｖｅ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｇｅｌｒｉｔｅ　０：Ａ　ｎｏｖｅｌ，ｉｏｎ—ａｃｔｉｖａｔｅｄ，　ｉｎ—ｓｉｔｕ　ｇｅｌｌｉｎｇ　ｐｏｌｙｍｅｒ　ｆｏｒ　ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ　ｖｅｈｉｃｌｅｓ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｉｍｏｌｏｌ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，１９８９，５７（２）：１６３—　１６８．　［７　Ｊ　Ｌｉｎｄｃｌｌ　Ｋ，Ｅｎｇｓｔｒｏｍ　Ｓ．Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｏｆ．ｔｉｍｏｌｏｌ　ｍａｌｅａｔｅ　ｆｒｏｍ　ａｎ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｇｅｌｌｉｎｇ　ｐｏｌｙｍｅｒ．ｓｙｓｔｅｍ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，１９９３，９５　（１—３）：２１９—２２８．　［８］Ｇｕｒｎｙ　Ｒ，Ｂｏｇｅ　Ｔ，ｌｂｒａｈｉｍ　Ｈ．Ｏｃｕｌａｒ　ｔｈｅｒａｐｈｙ　ｗｉｔｈ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ　ｓｙｓｔｅｍｓ　ｆｏｒ　ｅｏｔｒｏｌｌｃｄ　ｄｒｕｇ　ｄｅｌｉｖｅｒｓ＂．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅｌｅａｓｅ．１９８５．２：３５３—　３６１．　［９］Ｋｕｍａｒ　Ｓ，Ｈｉｍｍｅｌｓｔｅｉｎ　ＫＪ．Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｇｅｌｌｉｎｇ　ｂｅｈａｖｉｏｒ　ｏｆ　ｃａｂｏｐｏｌ　ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ　ｂｙ　ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ　ｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９５，８４【３）：３４４．　【１０］Ｌｉｎ　ＨＲ，Ｓｕｎｇ　ＫＣ．Ｃａｒｂｏｐｏｌ／ｐｌｕｒｏｎｉｅ　ｐｈａｓｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｏｐｈ－　ｔｈａｌｍｉｃ　ｄｒｕｇ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅｌｅａｓｅ，２０００，６９（３）：　３７９—３８８．　［Ｉ１］Ｚｈａｎｇ　ＹＸ，Ｗａ　ＦＰ，Ｌｉ　ＭＺ，ｅｔ　ａ１．ｐＨ　ｓｗｉｔｃｈｉｎｇ　ｏｎ—ｏｆｆ　ｓｅｍｉ—ＩＰＮ　ｈｙｄｒｏ－　ｇｅｌ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｃｒｏｓｓ—ｌｉｎｋｅｄ　ｐｏｌｙ（ａｅｒｙｌａｍｉｄｅ—ｅｏ—ａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ１　ａｎｄ　ｌｉｎｅａｒ　中国药业Ｃｈｉｎａ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ　ｐｏｌｙａｌｌｙａｍｉｎｅ［Ｊ］．Ｐｏｌｙｍｅｒ，２００５，４６（１８）：７　６９５—７　７００．　［１　２］Ｂｅｒｎｋｏｐ—Ｓｅｈｎｕｒｃｈ　Ａ，Ｂｒａｎｄｔ　ＵＭ，Ｃｌａｕｓｅｎ　ＡＥ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｅ－　ｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｉｔｏｓａｎ—ｃｙｓｔｅｉｎｅ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ［Ｊ］．Ｓｃｉ　Ｐｈａｒｍ，１９９９，６７：　１９６—２０８．　［１　３］Ｂｅｒｎｋｏｐ—Ｓｃｈｎｕｍｈ，Ｈｏｒｎｏｆ　Ｍ，Ｚｏｉｄｌ　Ｔ．Ｔｈｉｏｌａｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒｓ—ｔｈｉｏｍｅｒｓ：　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｉｔｏｓａｎ—－２—－ｉｍｉｎｏｔｈｉｏｌａｎｅ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ　［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＰｌｍｒｍａｃｅｕｔｌｃｓ，２００３，２６０（２）：２２９—２３７．　［１４］Ｋａｓｔ　ＣＥ，Ｂｅｒｎｋｏｐ—Ｓｃｈｎｕｒｅｈ　Ａ，Ｔｈｉｏｌａｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒｓ—ｔｈｉｏｍｅｒｓ：ｄｅｖｅｌｏｐ－　ｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｉｔｏｓａｎ—ｔｈｉｏｇｌｙｃｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ［Ｊ］．　Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，２００１，２２（１７）：２　３４５—２　３５２．　［１　５　Ｊ　Ｈｏｒｎｏｆ　ＭＤ，Ｋａｓｔ　ＣＥ，Ｂｅｒｎｋｏｐ—Ｓｃｈｎｔｉｒｃｈ　Ａ．Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｖｉｓｃｏｅｌａｓｔｉｃ　ｂｅｈａｖｉｏｒ　ｏｆ　ｃｈｉｔｏｓａｎ—ｔｈｉｏｇｌｙｃｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ［Ｊ］．Ｅｕｒｏ－　ｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００３，５５【２）：１８５—１９０．　［１６］Ｈｏｎｇ—Ｒｕ　Ｌｉｎ，ＫＣ　Ｓｕｎｇ，Ｗｅｎ—Ｊｏｎｇ　Ｖｏｎｇ．Ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｇｅｌｌｉｎｇ　ｏｆ　ａｌｇｉｎａｔｅ／　ｐｌｕｍｎｉｃ　ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｏｆ　Ｐｌｌｏｃａｒｐｉｎｅ［Ｊ］．Ｂｉｏｍａｃｒｏ－　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．２００４。５６：２　３５８—２　３６５．　［１７］Ｈｏｎｇｙｉ　Ｑｉ，Ｃｈｅｎ　Ｗ，Ｃｈｕｎｙａｎ　Ｈｕａｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ａ　ｐｏｌｏｘａｍｅｒ　ａｎａｌ。ｇｓ／ｃａｒｈ。ｐ０ｌ　ｂａｓｅｄ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｇｅｌｌｉｎｇ　ａｎｄ　ｍｕｃｏａｄｈｅｓｉｖｅ　ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ　ｄｅｌｉｖ－　ｃｒｙ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　ｐｕｅｒｍ＇ｉｎｐ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，２００７，　１７８—１８７．　［１　８］Ｚｈｉｄｏｎｇ　Ｌｉｕ，Ｊ．Ｌｉ．Ｓｈｕｆａｎｇ　Ｎｉｅ，ｅｔ　ａ１．Ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ａｎ　ａｌｇｉｎａｔｅ／ＨＰＭＣ—ｂａｓｅｄ　ｉｎ　ｓｉｔｕ　ｇｅｌｌｉｎｇ　ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　ｇａｔｉｆｌｏｘａｃｉｎｐ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａ・　ｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，２００６，３１５（１—２）：１２—１７．　（收稿日期：２００７—０８—１１）

高效液相色谱法测定人血浆中异丙酚的浓度

牟林;孙江;潘鑫

【期刊名称】《解放军医学院学报》

【年(卷),期】2008(029)001

【摘 要】@@ 1 材料和方法rn1.1 仪器 Watets高效液相色谱系统(2695 型输液泵系统,2487紫外检测器系统,Millennium32工作站);旋涡混合器;离心机.

【总页数】2页(P55-55,60)

【作 者】牟林;孙江;潘鑫

【作者单位】武警新疆公安边防总队医院,乌鲁木齐,830006;武警新疆公安边防总队医院,乌鲁木齐,830006;武警新疆公安边防总队医院,乌鲁木齐,830006

【正文语种】中 文

【中图分类】R457.14

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中日友好医院学报２００９年第２３卷第１期Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＣｈｉｎａ－ＪａｐａｎＦｒｉｅｎｄｓｈｉｐＨｏｓｐｉｔａｌ，２００９Ｆｅｂ。Ｖｏ１．２３，Ｎｏ．Ｊ　

入血浆中兰索拉唑浓度的反相高效液相色谱法测定　

张镭，李凯鹏，李朋梅，刘　晓，张相林　

（中日友好医院药学部，北京１０００２９）　

兰索拉唑（１ａｎｓｏｐｒａｚｏｌｅ）是继奥美拉唑后的又一种质　子泵抑制剂，由日本武田制药公司开发，１９９２年１２月首　

次在日本上市，主要用于胃溃疡、十二指肠溃疡、吻合口溃　

疡及反流性食管炎、卓一艾综合征的治疗【ｌｊ。兰索拉唑由血　

液进入壁细胞内后，在酸性条件下被活化并与质子泵的　

（ＨｑＫ　）一ＡＴＰ酶的巯基结合，抑制酶的活性从而抑制酸分　

泌囱。有关测定血浆中兰索拉唑浓度的反相高效液相色谱　

法文献报道较多刚，但有些方法样品预处理操作较烦琐、　

耗时。有些方法内标选择又不甚合理。本文在已有研究的　

基础上建立了一种简便、快速的反相高效液相色谱法，并　将其应用于兰索拉唑注射液的健康人体药动学研究。　

１仪器与试剂　

１．１仪器　

ＡＧＩＬＥＮＴ　１１００系列高效液相色谱仪．ＪＡＳＣＯ　ＵＶ一　

９７５检测器，ＡＧＩＬＥＮＴ色谱工作站。ＴＤＸ高速离心机　

（１００００ｒ／ｍｉｎ），涡旋振荡仪，岛津ＬＩＢＲＯＲ　Ｌ一２００ＳＭ十万　

分之一天平，ＰＨＳ一３Ｃ　ＰＨ仪，超声振荡仪。　

１．２试剂　兰索拉唑对照品（１ａｎｓｏｐｒａｚｏｌｅ，含量１００．６３％；批号：　

０７０３２６；万全阳光临床研究服务公司）；兰索拉唑注射液　

（３０　ｍｓ／支；批号：０６１１１２；山东罗欣药业股份有限公司）；　

非那西丁对照品（ｐｈｅｎａｃｅｔｉｎ，批号１０００９５—１９８９０４，中国药　

品生物制品检定所）；甲醇、乙腈和乙醚为色谱纯，水为重　蒸水。其他试剂均为分析纯；空白血浆由中日友好医院检　

验科提供。　

２方法与结果　

２．１标准溶液的配制　

兰索拉唑对照品溶液：精确称取兰索拉唑４．９０ｍｇ，置　

高效液相色谱法测定人血浆中的维生素 D3及25-OH-D3

张洁;张欣烨;马青青;张利锋;张伟

【期刊名称】《理化检验-化学分册》

【年(卷),期】2016(052)001

【摘 要】采用高效液相色谱法测定血浆中维生素 D3和25-OH-D3的含量。样品经乙醇-乙腈（60＋40）混合溶液提取后，提取液用氮气吹干，残渣用正己烷溶解后，过 Waters silica 固相萃取柱净化，净化液用氮气吹干后，将残余物溶于 pH

6．5的5 mmol·L－1磷酸盐溶液-乙腈-甲醇（30＋15＋55）缓冲溶液中。待测物在 Symmetry C18色谱柱上分离，以 pH 6．5的乙腈-5 mmol·L－1磷酸盐（20＋80）混合液为流动相 A，以甲醇-乙腈-四氢呋喃（65＋20＋15）混合液为流动相 B，进行梯度洗脱；采用光电二极管阵列检测器，检测波长为265 nm。维生素 D3和25-OH-D3的线性范围均为3．0～72μg·L－1，检出限均为2．0μg·L－1。加标回收率在88．5％～94．1％之间，测定值的相对标准偏差（n＝6）小于4％。

【总页数】3页(P41-43)

【作 者】张洁;张欣烨;马青青;张利锋;张伟

【作者单位】河南省疾病预防控制中心，郑州 450016;河南省疾病预防控制中心，郑州 450016;河南省疾病预防控制中心，郑州 450016;河南省疾病预防控制中心，郑州 450016;河南省疾病预防控制中心，郑州 450016

【正文语种】中 文 【中图分类】O657.7

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