推荐技术进步奖3项

一、推荐技术进步奖（3项）（一）产细菌素、叶酸等优质乳酸菌筛选鉴定及应用1、项目名称：产细菌素、叶酸等优质乳酸菌筛选鉴定及应用2、推荐单位：浙江教育厅3、项目简介我国发酵乳制品产业发展迅速，目前大型乳制品企业单个产品的年销售已达10亿以上，而优质的乳酸菌菌种是核心技术。

目前，大多数乳制品发酵生产企业所采用的发酵剂菌种和益生菌基本上依赖国外进口，我国缺乏具有自主知识产权的优质的发酵乳制品产品。

项目建立了我国乳酸菌特色菌种资源库，挖掘和保护了我国特色微生物资源，获得产细菌素、叶酸、VB12、降胆固醇等益生乳酸菌和耐氧双歧杆菌等优质菌种，益生乳酸菌发酵剂高效制备和活力保持关键技术得到创新，应用于产品创新开发。

(1) 项目组在我国自然资源中筛选获得来源多样的乳酸菌菌株，建立了我国特色的益生乳酸菌资源库。

运用高通量微生物定向筛选技术筛选产新型细菌素、B族维生素、降胆固醇乳酸菌、选育耐氧高活性的双歧杆菌，获得一系列功能性优良菌株。

(2)建立优质乳酸菌功能因子分离纯化和功能解析体系，揭示细菌素抗菌活性机制及叶酸等B族维生素的稳定机理，为功能型乳酸菌的应用打下良好基础。

(3)建立一整套高密度发酵工艺和直投式发酵菌剂制备工艺，并应用于生牛奶发酵，产品质地、风味良好，贮藏性好。

打破了国外公司技术与产品的长期垄断，降低了企业生产成本，为我国益生菌及相关产业的持续发展奠定了基础。

4、主要科技创新：（1）建立基于全基因组解密和功能活性因子解析的功能性乳酸菌筛选鉴定新体系，获得产细菌素、叶酸等优质乳酸菌菌种。

针对国内外具有自主知识产权功能性乳酸菌菌种资源缺乏这一问题，运用多重微孔高通量定向筛选技术筛选新型细菌素、高产B族维生素、降胆固醇的乳酸菌及具高耐氧活性的双歧杆菌等。

建立了基于全基因组及功能基因解析为基础、功能活性因子分子特性为依据的筛选鉴定体系，创建以全基因组及功能基因解析为基础的分子筛选体系，明确乳酸菌的遗传背景，揭示功能活性因子生物合成和调控关键基因簇，从分子水平确定乳酸菌功能特性；并确立以功能活性因子分子特性为依据的鉴定体系。

（2）乳酸菌产活性因子的功能解析。

筛选获得的新型乳酸菌菌株对肠道致病菌金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌具有显著抑菌效果，活性功能成分为新型抗菌肽（细菌素）小分子，揭示其抗菌作用模式和机制，可为植物乳杆菌作为调节肠道微生态健康食品提供有利支持。

Plantaricin ZJ008的抑菌谱广，离子泄露试验表明Plantaricin ZJ008使金黄色葡萄球菌细胞内钾离子外泄；细胞膜去极化试验表明，Plantaricin ZJ008能破坏葡萄球菌细胞膜而导致细胞内溶物的渗漏；电镜试验证实了靶细胞收缩和内溶物流失的现象。

首次发现新型双肽细菌素Plantaricin NC8对肠炎沙门氏菌抑菌作用显著，Plantaricin NC8 诱导指示菌细胞膜通透性增加，胞内离子泄露，致使细胞膜破损，内容物外泄，最终导致其死亡。

结合试验表明，与Nisin不同，Plantaricin NC8的结合靶点不是脂质体II，而是特定的膜蛋白。

明确植物乳杆菌产叶酸在发酵乳中适用性及机理。

发现乳制品重要组成蛋白β-乳球蛋白和α-乳白蛋白可与还原型5-甲基四氢叶酸结合，抑制5-甲基四氢叶酸在光照或温度影响下的降解。

本研究为高产B族维生素乳酸菌的发酵乳适用性及后期发酵乳制品开发提供理论依据。

（3）系统构建乳酸菌高效培养、高活力保持及制备新工艺。

建立乳酸菌高密度培养与发酵工艺，发酵20h活菌数达1013 ~ 1014 CFU/mL，远高于国内当前水平（1109~ 1012 CFU/mL）；确定植乳酸菌冻干工艺和复合冻干保护剂配方，建立乳酸菌直投式发酵菌剂制备工艺，乳酸菌的冻干存活率大于70 %，冻干菌粉的活菌数达到1012 CFU/g，活菌数高于国内多数直投式发酵菌剂。

直投式发酵菌剂制在常压4℃下保藏3个月，活菌数和发酵活力均无明显变化，贮藏性能稳定。

5、主要完成人及技术贡献：（1）顾青，男，1969年11月，正高，博士，浙江工商大学，项目总负责人；（2）李言郡，男，1969年09月，正高，硕士，杭州娃哈哈集团有限公司，菌种制备和工艺研究；（3）何国庆，男，1957年10月，正高，博士，浙江大学，菌种选育和优化；（4）郦萍，女，1981 年02月，中级，博士，浙江工商大学，优质益生菌筛选及功能因子研究；（5）欧凯，男，1973年12月，高级工程师，硕士，杭州娃哈哈集团有限公司，菌种制备和工艺研究；（6）侯保朝，男，1977年01月，高级工程师，博士，杭州娃哈哈集团有限公司，菌种制备和工艺研究；（7）李宝磊，男，1984年11月，工程师，硕士，杭州娃哈哈集团有限公司，菌种制备和工艺研究；（8）赵乙桢，女，未定，1989年06月，硕士，浙江工商大学, 菌种库建立及优质益生菌筛选；（9）孙亚链，女，未定，1990年01月，硕士，浙江工商大学, 菌种库建立及优质益生菌筛选；（10）宋达峰，男，1979年07月，中级，博士，浙江工商大学, 优质益生菌筛选及功能因子研究；（11）朱炫，男，1982年03月，副高，博士，浙江工商大学, 优质益生菌功能因子研究；（12）于跃，女，未定，1990年08月，硕士，浙江工商大学, 菌种库建立及优质益生菌筛选。

6、主要完成单位及技术贡献：（1）浙江工商大学，浙江省杭州市下沙高教园区学正街18号，菌种库建立、优质益生菌筛选及功能因子研究；（2）杭州娃哈哈集团有限公司，杭州市清泰街160号，菌种制备和工艺研究；（3）浙江大学，浙江省杭州市西湖区翠苑街道余杭塘路866号，菌种选育和优化。

7、推广应用前景与效益本项目依托浙江省食品微生物技术研究重点实验室，围绕国内缺乏具有自主知识产权的优质乳酸菌的问题，定向筛选具有强抗菌作用、益生作用的新菌株。

进行菌株的生理生化、分子等特性研究，获得了对新分离的菌株全面的知识。

建立基于全基因组解密和功能活性因子解析的功能性乳酸菌筛选鉴定新体系，获得产细菌素、叶酸等优质乳酸菌菌种。

同时，建立一整套高密度发酵工艺和直投式发酵菌剂制备工艺，并应用于生牛奶发酵，产品质地、风味良好，贮藏性好。

打破了国外公司技术与产品的长期垄断，降低了企业生产成本，为我国益生菌及相关产业的持续发展奠定了基础。

本项目基于产业化应用的研究，对乳制品产品质量提升有较大的推动效应，研究成果已在娃哈哈等国内知名企业推广应用。

菌种可向全省乳制品行业推广，且具有在其他食品行业、饲料行业等领域推广的潜力，应用前景广阔。

8、主要论文目录：（1）Zhu X, Zhao Y, Sun Y, Gu Q*. Purification and characterisation of plantaricin ZJ008, a novel bacteriocin against Staphylococcus spp. from Lactobacillus plantarum ZJ008. Food Chem. 2014,165: 216-23.（2）Ping Li, Qingqing Zhou, Qing Gu*. Complete genome sequence of Lactobacillus plantarum LZ227, a potential probiotic strain producing B-group vitamins. Journal of Biotechnology, 2016, 234:66-70.（3）Ping Li, Qing Gu*. Complete genome sequence of Lactobacillus plantarum LZ95, a potential probiotic strain producing bacteriocins and B-group vitamin riboflavin. Journal of Biotechnology, 2016, 10;229:1-2.（4）Qing Gu, Chen Zhang, Dafeng Song,Ping Li, Xuan Zhu*.Enhancing vitamin B12 content in soy-yogurt by Lactobacillus reuteri. International Journal of Food Microbiology, 2015, 206:56-59.（5）Jiang H, Li P, Gu Q. Heterologous expression and purification of plantaricin NC8, a two-peptide bacteriocin against Salmonella spp. from Lactobacillus plantarum ZJ316. Protein Expr Purif., 2016, 127:28-34.（6）Song DF, Zhu MY, Gu Q*. Purification and Characterization of Plantaricin ZJ5, a New Bacteriocin Produced by Lactobacillus plantarum ZJ5. PLoS One. 2014 Aug 22;9(8):e105549.（7）张小美，楼秀玉，顾青(*)，1 株产细菌素乳酸菌的鉴定和细菌素的分离纯化，中国食品学报, 2013, 13(12):181-187.（8）Li P, Li X, Gu Q, Lou XY, Zhang XM, Song DF, Zhang C. Comparative genomic analysis of Lactobacillus plantarum ZJ316 reveals its genetic adaptation and potentialprobiotic profiles.J Zhejiang Univ Sci B. 2016 Aug;17(8):569-79.（9）QQ Li, Q Chen, R Hui, DS Zhu, GQ He. Isolation and characterisation of an oxygen, acid and bile resistant Bifidobacterium animalis subsp. l actis Qq08. 2010, 90(8):1340-1346.（10）Qing Gu, Ping Li. Probiotics and prebiotics in human nutrition and health，Chapter7，Biosynthesis of vitamins by probiotic Bacteria, 2016, 135-148.（二）网络互动媒体计算关键技术及应用1、项目名称：网络互动媒体计算关键技术及应用2、推荐单位：浙江省教育厅3、项目简介项目组面向网络互动媒体所涉及的三维游戏、动画及3D电影等产业，在二维及三维模型的编辑、传输与绘制等关键技术上取得如下成果：针对卡通动画序列生成难度大，提出了基于用户启发的智能化形状渐变方法；为了更加形象地呈现卡通角色动画效果，提出了模拟多种材质的二维卡通角色形变方法；针对无线网络窄带宽缺陷，提出了基于视觉显著性的纹理化模型压缩和全局分步等划分分组算法；针对有损网络丢包问题，提出了基于客户端预测的几何与属性数据重构机制，以及拓扑数据的鲁棒传输编码与重构方法。