PFGE制胶原始记录

脉冲场凝胶电泳脉冲场凝胶电泳近年来，以脉冲场凝胶电泳(Pulsed field gel electrophoresis，PFGE)为代表的分子生物学分型方法日渐受到青睐，其原理为通过一定的方法，直接或间接反映病原体变异分化的本质即DNA序列的改变，从而做到微观变化的宏观显示。

电泳结果通常是条带图谱。

该方法的发展成熟为监测控制细菌的流行提供了广阔的前景。

通过分型可以鉴定比较菌株是否一致，对于细菌性传染病监测、传染源追踪、传播途径调查和识别等暴发调查有着非常重要的意义。

一、脉冲场凝胶电泳的原理PFGE与常规电泳的不同之处在于，常规的电泳采用的是单一的均匀电场，DNA分子经凝胶的分子筛作用负极移向正极。

而PFGE采用了两个交变电场，即两个电场交替地开启和关闭，使DNA分子的电泳方向随着电场的变化而改变。

正是因为电场方向的交替改变，才使大分子DNA得以分离。

图l是根据Carle和Olson最初设计的正交场电泳装置(orth-ogona1 field gel electrophoresis，OFA-GE)绘制的PFGE 示意图。

A、B代表两个交替开启和关闭的电场。

当A电场开启时，B电场关闭，DNA分子从A电场的负极(A-)向正设(A+ )移动；当B电场开启时，DNA分子改变原来的运行方向，随B电场负极向正极移动。

这样，随着电场方向的交替变化DNA分子图1 PGE的原理(OFAGE系统) A、B代表两电场即呈“Z” 字形向前移动。

目前的理论和实验研究表明，当某一电场开启时，DNA分子即顺着此电场的方向纵向拉长和伸展，以“蛇行”(reputation)的方式穿过凝胶孔。

如果电场方向改变DNA分子将必须先调转头来，才能沿着新的电场方向泳动。

这样，随着电场方向反复变化，伸展的DNA分子必须相应地变化移动方向。

可以想象，较小的分子能相当快速地适应这种变化，但大分子则需更多的时间来改变方向，而真正用于前移的时间相对减少，从而将不同大小的分子分开。

化妆品检验原始记录检验原始记录编号：产品名称：生产批号：生产日期：规格：取样日期：样品数量：检验依据：根据2015年版的化妆品安全技术规范进行检验。

检验时间：报告时间。

检测环境：温度（T）：℃；相对湿度（RH）：%检验仪器：单人操作净化台、电热恒温干燥箱、高压蒸汽灭菌锅、恒温器、恒温培养箱、天平。

1、取样与稀释：无菌称取检样10g（ml），加到装有玻璃珠的90ml灭菌生理盐水的三角瓶中，充分混匀，制成1:10的匀液。

吸取1:10的匀液1ml至9ml灭菌生理盐水中，制成1:100的匀液。

每个稀释度吸取2ml，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1ml。

将45℃-50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基加入平皿，每皿约15ml，混匀，待凝固后，翻转平皿于36℃±1℃培养48h±2h。

同时做空白对照。

2、无菌吸取检样10g(ml)，加入灭菌液体石蜡10ml混匀，振荡，在加10ml灭菌吐温80，溶解后，最后加入70ml灭菌生理盐水，在40℃-45℃水浴中充分混合。

制成1:10的匀液，吸取1:10的匀液1ml至9ml灭菌生理盐水中，制成1:100的匀液。

每个稀释度吸取2ml，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1ml。

将45℃-50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基加入平皿，每皿约15ml，混匀，待凝固后，翻转平皿于36℃±1℃培养48h±2h。

同时做空白对照。

菌落总数（卵磷脂吐温80营养琼脂，36℃±1℃，48h±2h）。

稀释度1：101：100空白对照。

检验结果标准值：CFU/ g。

单项判定：平皿1、平皿2≤1000（眼、唇部、儿童用品≤500）。

感官、理化指标：检验依据：根据相关标准进行检验。

检验时间：报告时间。

项目：外观、色泽、香气、耐热、耐寒。

指标：无异物、符合规定色泽、符合规定香型、（40±1）℃保持24h，恢复至室温后无分离现象，-5℃—-10℃保持24h，恢复至室温后无分离析水现象。

GMP质量体系外包装生产原始记录GMP（Good Manufacturing Practices）质量体系是一套严格监管药品、食品和医疗器械生产过程的国际标准。

在药品生产过程中，外包装也是非常重要的一环，因此需要进行详细的生产记录。

以下是一份GMP质量体系外包装生产原始记录的例子，供参考。

产品名称：XXX药品生产日期：YYYY年MM月DD日生产车间：XXX车间1.原材料准备1.1外包装材料原材料名称批号规格数量使用数量纸盒XXX XXX XXX XXX塑料瓶X XX XXX XXX XXX铝箔袋X XX XXX XXX XXX药品包装袋XXX XXX XXX XXX其他XXX XXX XXX XXX2.外包装材料检查记录2.1纸盒检查记录检查项目检查标准检查结果备注尺寸XXX 合格/不合格XXX印刷质量XXX 合格/不合格XXX 折叠情况XXX 合格/不合格XXX 其他XXX 合格/不合格XXX2.2塑料瓶检查记录检查项目检查标准检查结果备注尺寸XXX 合格/不合格XXX外观XXX 合格/不合格XXX颈部包封XXX 合格/不合格XXX 其他XXX 合格/不合格XXX2.3铝箔袋检查记录检查项目检查标准检查结果备注尺寸XXX 合格/不合格XXX印刷质量XXX 合格/不合格XXX 包封情况XXX 合格/不合格XXX 其他XXX 合格/不合格XXX2.4药品包装袋检查记录检查项目检查标准检查结果备注尺寸XXX 合格/不合格XXX印刷质量XXX 合格/不合格XXX包封情况XXX 合格/不合格XXX其他XXX 合格/不合格XXX3.外包装过程记录3.1外包装工艺流程步骤操作内容操作人员备注1 纸盒折叠XXX XXX2 纸盒印刷XXX XXX3 塑料瓶灌装XXX XXX4 铝箔袋封合XXX XXX5 药品包装袋封合XXX XXX6 外包装装箱XXX XXX3.2外包装操作记录步骤操作内容操作时间操作人员备注1 纸盒折叠XXX XXX XXX2 纸盒印刷XXX XXX XXX3 塑料瓶灌装XXX XXX XXX4 铝箔袋封合XXX XXX XXX5 药品包装袋封合XXX XXX XXX6 外包装装箱XXX XXX XXX4.外包装设备清洁记录设备名称清洁项目清洁时间清洁人员备注纸盒印刷机XXX XXX XXX XXX塑料瓶灌装机XXX XXX XXX XXX铝箔袋封合机XXX XXX XXX XXX药品包装袋封合机XXX XXX XXX XXX其他设备XXX XXX XXX XXX5.外包装质量抽检记录样品名称批号检验项目检验标准抽检数量合格数量不合格数量复检人员XXX药品XXX 外观质量XXX XXX XXX XXX XXXXXX药品XXX 尺寸检验XXX XXX XXX XXX XXXXXX药品XXX 印刷质量XXX XXX XXX XXX XXXXXX药品XXX 其他 XXX XXX XXX XXX XXX以上是一份GMP质量体系外包装生产原始记录的范例，对于确保药品生产过程中外包装的质量和安全非常重要。

参 考 Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｕｐ ｏｎ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍａｒｋｅｒｓ （ＥＳＧＥＭ） 指 出 的 评 价 流 行 病 学 分 型 系 统 时要考虑的几个标准， 对于分子流行病学分型方 法的选择， 我们认为应该以下列标准来衡量： １ 分 型 力 （ ｔｙｐｅａｂｌｉｔｙ） 指 对 被 分 析 的 每 一 菌 株 能够获得明确的、不似是而非的、阳性结果的能 力。不可分型菌株是指那些没有结果或者结果不 可解释的菌株。 ２ 可 重 复 性 （ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ） 指 用 一 种 技 术 对 同一菌株反复测试能够获得相同结果。技术因素 和生物因素都可以影响可重复性。技术因素是指 对同一菌株进行多次重复性实验而出现不同试验 间的差异。生物因素是指细菌的某种测试特性存 在生物学变异， 代表同一菌株的不同菌落的检测 结果会有不同。 ３ 分 辨 力 （ ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｏｒｙ ｐｏｗｅｒ） 指 区 分 不 相 关 菌株的能力。
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疾病监测 ２００６ 年 ５ 月 ３１ 日第 ２１ 卷第 ５ 期 Ｄｉｓｅａｓｅ Ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ， Ｍａｙ．３１，２００６， Ｖｏｌ．２１， Ｎｏ．５
·综 述·
脉冲场凝胶电泳技术（PFGE）在分子分型中的应用现状
王丽丽， 徐建国
关键词： 脉冲场凝胶电泳； 分子分源自； 应用【中 图 分 类 号 】Ｒ－ ３３１
一 ＰＦＧＥ 方法原理
ＰＦＧＥ 以 其 重 复 性 好 ， 分 辨 力 强 而 被 誉 为 细 菌 分子生物学分型技术的＂金标准＂。它可以用于大 分 子 ＤＮＡ 的 分 离 ， 其 分 辨 范 围 达 到 １０ Ｍｂ。 而 普 通 的 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 仅 能 分 离 小 于 ５０ ０ ｋｂ 的 ＤＮＡ 分 子 。ＰＦＧＥ 的 基 本 原 理 是 通 过 电 场 的 不 断 改 变 ， 使 包 埋 在 琼 脂 糖 凝 胶 中 的 ＤＮＡ 分 子 的 泳 动 方 向 做 相 应 改 变 ， 小 的 ＤＮＡ 分 子 比 大 的 变 化 快 ，