网织红细胞参数在不同类型贫血中的临床意义

网织红细胞的检测及临床应用网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，是晚幼红细胞在脱核后到完全成熟之间产生的过渡性细胞。

基于其胞质中尚有核糖体、核糖核酸等嗜碱性物质残存,经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后,可见蓝或蓝绿色枝点状甚至网织状结构，所以我们通常称其为网织红细胞。

网织红细胞可以直接对骨髓红系造血功能进行反映，主要是应用于评价骨髓增生能力、判断贫血类型，评价贫血疗效，骨髓移植前后监测，放疗和化疗的监测等方面。

随着高端检测仪器的普遍使用，网织红细胞相关参数的检测为疾病提供了大量的信息，临床应用价值越来越高。

1网织红细胞的检测网织红细胞的检测方法有活体染色手工镜检法、血细胞分析仪法、流式细胞仪法和专用网织红细胞分析仪法。

活体染色手工镜检法分为玻片法和试管法。

由于玻片法在实际应用中很可能造成混合血液中水分的蒸发，染色时间不足，所以检测的结果可能会出现偏低的情况。

而试管法则更容易掌握，具备较为显著的重复性优势，在必要的情况下还可以进行复查，最大程度上降低了被检查者的痛苦，是手工法网织红细胞计数的参考方法。

由于传统的显微镜计数方法操作比较繁琐，影响因素比较多，近年来，我国主要采用米勒窥盘的方式进行计数统计，不仅有效规范了计算区域，同时还明显降低了实验中出现的误差，对于结果的准确性提升有着重要帮助和影响。

目前血细胞分析仪的应用，给网织红细胞的计数提供了更为有效的帮助。

此种仪器不仅能更为精准的计数网织红细胞，同时还能检测出网织红细胞的绝对值、网织红细胞的平均体积、网织红细胞的成熟指数等许多参数，这些参数为疾病的诊断、鉴别诊断及治疗等提供更为显著的帮助作用。

流式细胞仪法是一种多用途的精密分析仪器，应用特殊的荧光染料对网织红细胞染色后进行技术分析，从而得出网织红细胞的百分比和绝对值等参数，它还可对网织红细胞的成熟程度进行分群，将其划分为低荧光强度网织红细胞、中荧光强度网织红细胞、高荧光强度网织红细胞、。

仪器法在应用过程中的主要优势就是能对大量红细胞进行测量，同时又能避免主观因素对工作产生的影响，方法的标准性更强。

【 摘要 】 目的 ： 研究 网织红细胞参数在 白血病化疗前后 的变 化及急性 白血病 的患者 ， 对
其在化疗过 程中的血小 板 、白细胞数 以及 网织红 细胞数动态变 化进行观察 。结果 ：化疗后 白细胞、网织红细胞及 血小板均 急剧 降低 ，Ａ Ｎ Ｃ 和Ｒ Ｅ Ｔ ＃ 会分 别降至 ０ ． ２ × １ ０ ９ ／ Ｌ和 １ ０ Ｘ １ ０ ９ ／ Ｌ以下 ，Ｈ Ｆ Ｒ加 Ｍ Ｆ Ｒ降至最低或是 Ｏ ，对患者进行 骨髓 细胞 学检测结果为 ：有核细胞发生增生 降
低或是极度降低现象 ，Ｌ Ｆ Ｒ对患者造血功能产 生抑制影响 。结论 ：对 白血病患 者的 Ｒ Ｅ Ｔ ＃（ 网织红 细胞 参数 ）进行动态监测观察 ，为判定 患
者 自身的造 血功能情况提供更为丰 富的临床信息 ，在 临床治疗 上具 有重要 参考价值和意义。
【 关键词 】 网织红细胞 ； 白血病 ； 化疗 ； 前后变 化 ； 临床意义
Ｚ ＨＵ Ｘｉ ａ ｏ — ｙ ａ ｎ ． ／ ／ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｉ ｎ ｎ ｏ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｃｈ ｉ ｎ ａ 。２ ０ １ ３ 。１ ０（ ３ ２） ： ０ ８ ７ — ０ ８ ８
【 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】 Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｅ ａ ｎ ｄ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ ｒ ｅ ｔ ｉ ｃ ｕ ｌ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｍ ｅ ｔ ｅ ｒ ｂ ｅ ｆ ｏ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｌ ｅ ｕ ｋ ｅ ｍ ｉ ａ ｃ ｈ ｅ ｍ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｐ ｙ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ：

网织红细胞（Ret）检测的重要性血常规检测是基础的临床化验检查之一，但通过化验血常规可以检查出很多问题。

网织红细胞(Ret)是没有完全成熟的红細胞，其胞质内含有嗜碱性的RNA物质，经化学染色剂染色后呈浅蓝色或深蓝色网状结构，并因此得名。

网织红细胞的检测，其结果可用于监测骨髓新生红细胞内血红蛋白的生成情况，从而为临床诊断提供更有价值的诊断依据。

本文重点从网织红细胞(Ret)检测对诊断贫血、应用于临床化疗以及反映骨髓造血功能等三个方面展开阐述，旨在为网织红细胞(Ret)检测对提高临床应用价值提供参考。

1.开展网织红细胞(Ret)检测的临床意义网织红细胞(Ret)及其相关参数是反映骨髓造血功能的重要指标，在临床诊断价值方面，其灵敏度、特异性要优于传统的红细胞与白细胞计数，有较高的研究价值。

具体来说（1）网织红细胞(Ret)增高：提示骨髓造血功能旺盛。

见于各类增生性贫血，溶血性贫血尤为显著；（2）网织红细胞(Ret)减少：见于非增生性贫血（如铁、铜、维生素B6、维生素B12缺乏），慢性病性贫血（如慢性炎症、恶性肿瘤、慢性肾衰竭、再生障碍性贫血），急性白血病和纯红细胞再生障碍；（3）鉴别贫血；如缺铁引起的小细胞性贫血，缺维生素B12和叶酸引起的大细胞性贫血等。

2.网织红细胞(Ret)检测反映骨髓造血功能的应用网织红细胞(Ret)作为反映人体骨髓造血功能与红细胞生成活力敏感指标，自该技术诞生以来，随着计数手段的持续改进，其临床应用价值日益凸显。

实践检测中，激光技术能够在不同测量通道内同时检测数十项参数。

网织红细胞(Ret)经碱性槐黄染色后，通过流式细胞技术加以检测分析，明确网织红细胞(Ret)数目、比率、分类。

网织红细胞(Ret)最初应用于对血液系统肿瘤患者的外周血细胞监测，提出幼稚网织红细胞(Ret)变化是骨髓受抑与逐渐恢复敏感指标；近二十年前，我国开始应用自动化检测仪对外周血动态监测。

实践中，意识监测病人的骨髓功能，重点是监测其各血细胞值是否降低正常值或上升到正常值。

法 收 集 患 者 临 床 资料 ， 中 筛 选 出 缺 铁性 贫血 组 ３８例 和 溶 血 性 贫 血 组 ３ 例 ， 收 集健 康 对 照组 ３ 其 ４ ３ 另 Ｏ例 。并 对 网 织 红 细 胞 百 分 比
（ Ｔ ）绝 对 数 （ Ｅ ＲＥ 、 Ｒ Ｔ＃） 未 成 熟 网织 红 细 胞 指 数 （Ｒ ） 行 分 析 。结 果 小 细 胞 性 贫 血 患 者 Ｒ Ｔ 、 Ｅ 及 ＩＦ 进 Ｅ Ｒ Ｔ＃较 对 照 组 高 ， 且 以溶 血性 贫血 更 为 明显 （ ￣Ｏ０ ）缺 铁 性 贫 血 患 者 的 Ｉ Ｆ与 对 照 组 相 比无 明 显 升 高 （ Ｐ－ ． ５ ， Ｒ Ｐ＞ ０ ０ ） 而 小 细 胞 性 溶 血 性 贫 血 患 者 ．５ ，
・
３２ ・ ８
国际检验 医学杂志 ２１ 年 ４月第 ３ ００ １卷第 ４ 期
Ｉｔ ａ ｄＡ ｒ ００Ｖ １ ０Ｎ ． ｎ Ｌ ｂＭｅ， ｐｉ２１，ｏ． ，ｏ４ Ｊ ｌ ３
・
检 验 与 临 床
・
网织红 细胞 参 数在 缺铁 性 贫血 与 小细 胞 性 溶血 性贫 血鉴 别 诊 断 中的 临床 意 义
张 芹 ， 阳红梅 ， 自金 ， 欧 甸 蒋雅 先 ， 宋建 新 ， 朱红艳
（ 南省 第一人 民 医院 ， 明 ６ ０３ ） 云 昆 ５ ０ ２
【 要 】 目的血 与 小 细 胞性 溶 血 性贫 血鉴 别 诊 断 中 的价 值 。 方法 采 用 回顾 性 分 析 的 方
血细胞分析仪及厂家配套试剂 。
３ 统 计 学 处 理 ．
较， ｑ检 验 。
结 果
指幼稚的或未 成熟 的 网织 红细 胞 （ 含高 Ｒ 即 ＮＡ 的 网 织 红 细
胞） 与总 的 网织 红 细 胞 的 比值 ｝ 在 骨 髓 红 系 增 生 旺 盛 时 ，Ｒ ， ＩＦ

网织红细胞参数在不同类型贫血中的临床意义摘要】目的通过Sysmex XE-2100型全自动血细胞分析仪对几种不同类型贫血的检测，探讨网织红细胞参数在评价骨髓造血功能中的临床价值。

方法应用全自动血细胞分析仪测定贫血患者网织红细胞参数，包括：网织红细胞百分率（RET%）、网织红细胞绝对值（RET#）、高荧光强度网织红细胞百分率（HFR%）、未成熟网织红细胞比率（IRF），将结果与正常对照组进行比较分析。

结果溶血性贫血和失血性贫血RET% 、RET#、HFR%、 IRF 明显高于正常对照组（p<0.01）；缺铁性贫血患者的RET# 增高（p<0.05），但HFR%、IRF与正常对照组比较差异无统计学意义；肾性贫血患者除RET低于正常对照组外， RET#、HFR%、 IRF与正常对照比较差异无统计学意义；再障患者 RET%、RET#、HFR%、IRF都明显低与正常对照组，差异有统计学意义（p<0.01）。

结论网织红细胞多参数可以更准确、更全面地反映网织红细胞成熟状态，从而更好地评价骨髓造血功能，对不同类型贫血的早期诊断有重要的临床价值。

【关键词】 Sysmex XE-2100型全自动血细胞分析仪贫血网织红细胞参数网织红细胞是介于晚幼红细胞与成熟红细胞之间的过渡细胞，胞浆中含嗜碱的RNA颗粒,经煌焦油兰染色，形成网状结构。

Sysmex XE-2100型全自动血细胞分析仪采用流式细胞技术和荧光染色技术，根据网织红细胞内RNA含量的多少，与荧光结合的程度，将网织红细胞分为高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）。

HFR和MFR含RNA的量较多，是幼稚的网织红细胞，二者之和称为未成熟网织红细胞指数（IRF），是反映骨髓造血功能的敏感指标。

近年来，随着血液分析仪在临床中的应用，使网织红细胞的检测进入了新的阶段。

与过去的手工法相比，血细胞分析仪具有科学性、客观性、检测数量大等优点。

3.网织红细胞相关参数的意义：
(1)RETL和RETH可作为贫血鉴别诊断的初筛实验， 如溶血性贫血时，Ret、RETL和RETH明显升高；肾性 贫血患者，RETH曾高，RETL降低，Ret不增高。
(2)RMI:①增高见于溶血性贫血、原发性血小板减少 性紫癜、急性白血病、慢性淋巴细胞白血病、真性红 细胞增多症、再生障碍性贫血和多发性骨髓瘤。②降 低通常与骨髓衰竭或无效造血有关，如巨幼细胞贫血。
(1)增高：①骨髓红细胞增生旺盛时，主要见于各种增生性 贫血，如溶血性贫血、缺铁性贫血、巨幼细胞贫血等，溶 血性贫血患者显著增高。急性失血后网织红细胞一过性增
多，1周左右达高峰，2周后恢复正常；②贫血(如缺铁 性贫血、巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血等)有效治疗后， 网织红细胞的增加先于红细胞和血红蛋白；③骨髓移植和
(3)RETM+ RETH RETIM- RETH称为未成熟网织红细胞比 率(IRF)，IRF增高是估计骨髓移植后造血恢复的早 期指标。
EOFT
红细胞渗透
脆性试验
开始溶血：75.2〜
82.1mmol/LNaCI溶液； 完全溶血：47.9〜54.7mmoI/LNaCI溶液
脆性增加：见于遗传性球形红细胞增多症、椭圆形红 细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血伴继发球形细胞 增多、慢性淋巴细胞白血病等。
脆性降低：见于珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血、 血红白病(HbC HbD HbE等)、低色素性贫血、真性 红细胞增多症、肝脏疾病、脾功能亢进、阻塞性黄疸、 叶酸及维生素B6缺乏症等。
ACT
自身溶血及
纠正试验
正常人红细胞经孵育
48h后溶血率＜3.5%,加 葡萄糖的溶血率＜3.5%，或加ATP纠正 物的溶血率＜3.5%。

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检 验 与临床 ・
２１ ０ ０年 ３月第 ４ ８卷第 ９期
网 细 织红 胞及其荧 度检 临 义 光强 测的 床意
董晓玉 丁后 明
（ 巢湖市第一人民医院检验科 ， 安徽巢湖 ２ ８０ ） ３ ０ ０ ｆ 摘要】目的 探讨流式细胞检测结合核酸荧光染色技术在网织红细胞 （ ｅ） Ｒ ｔ及其荧光强度分析中的临床应用价值 。方法 应 用 Ｓ ｓ ｅ ｙｍ ｘｘ卜—－Ｏ ｏ 全 自动血 液分析仪分析不 同类型贫血患者的网织红细胞和荧光强度 的变化。结果 １０例贫血患者 ２ｏｉ ３
【 关键词】 贫血 ； 网织红细胞计数 ； 荧光强度 ； ∈ 临扇应用
【 图分 类 号】Ｒ ４ ．１ 【 献标 识码 】Ａ 【 章 编 号】１７ — ７ １２ １ ）９ ６ — ２ 中 ４６１３ 文 文 ６ ３ ９ ０ （０ ０ ０ — ６ ０
网织红细胞（ ｅ） Ｒ ｔ是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间 尚未
光染 色方法测量 网织红 细胞 内的 Ｒ Ａ含量 ，其 中前向散射光 Ｎ
（Ｓ ） Ｆ Ｃ 测量细胞体积 ， 向散射光 （Ｓ ） 侧 Ｓ Ｃ 测量细胞 内含物 ， 向荧 侧
光 测 细胞 内 Ｒ Ａ含 量 【 Ｎ ｌ Ｊ 。根据 网织 红 细胞 内 Ｒ Ａ与 试 剂 中 的荧 Ｎ
光染 料（ 多聚亚 甲基 ） 结合后发 出的荧光强度将 网织红细胞分为
院健康体检合格者 ， 中男 １ 例 ， １ ， 其 ５ 女 ５例 年龄 ２ ５ 。 ０ ５岁
低荧 光 Ｒ ｔＬ Ｒ） 中荧光 Ｒ ｔＭＦ 、 ｅ（ Ｆ 、 ｅ（ Ｒ） 高荧光 Ｒ ｔＨ Ｒ）同时计 ｅ（ Ｆ ，
表 １ 不同类型贫血患者 Ｒ ｔ ｏ 六项参数测定结果ｆ ±ｓ ）
注： 与健康对照组相 比较 ，Ｐ ．１ Ｐ ． ｝ ＜Ｏ ； ＜００ ０ ５

网织红细胞极其相关参数的临床应用网织红细胞参数缩写及参考范围RET%：网织红细胞比率0.57--2.07% RET#：网织红细胞绝对值22.4--93.5 109/LLFR：低荧光网织红细胞87.8--98.6% MFR：中荧光网织红细胞1.8--12.5%HFR：高荧光网织红细胞 1.8--12.5% IRF：未成熟网织红细胞0--2.4%网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，是反映骨髓造血功能的重要指标。

采用血液分析仪，流式细胞法对RET 进行分类计数，可将RET分成LFR、MFR、和HFR，荧光越高，表示网织红细胞含核酸越多，细胞也就越幼稚；IRF为MFR和HFR之和，表示幼稚细胞占总RET的百分比。

RET及其各参数的临床意义可大致归纳如下：一、新生儿相关疾病的网织红水平RET被视为EPO（促红细胞生成素）功能活跃的反应，新生儿RET 增多被作为溶血性疾病、出血和缺氧的指针；对早产儿贫血恢复进程的预测和输血血型不合的评估都是一个有价值的指标。

HFR对EPO功能而言比网织红细胞计数更实用二、再生障碍性贫血时网织红细胞急性再障：Hb下降较快，RET <1%，RET绝对值< 15x109 /L，WBC 中性粒细胞绝对值< 0.5 x109 /L，PLT常< 10 x109/L。

慢性再障：骨髓造血障碍所致，Hb下降较缓慢，RET、WBC与WBC 中性粒细胞绝对值和PLT较急性再障时高。

再生障碍危象时：Hb、RBC、HCT明显减少，Hb常低至20-30g/L，网织红细胞急剧下降或为“0”。

纯红细胞再障碍：贫血呈正细胞性，网织红细胞显著减少（＜0.1％）或缺如。

白细胞和血小板正常。

三、缺铁性贫血时网织红细胞RET大多正常或轻度增高，，服用铁剂后一周左右RET可迅速增高（2--8％）。

四、巨幼细胞贫血时网织红细胞RET#减少，相对值正常或轻度增高，服用维生素B12、叶酸后可明显增高。

网织红细胞血红蛋白含量在β-地中海贫血和缺铁性贫血病人中的变化研究曾华;张智贤;倪李佳;朱玉琴;鲍蕴文【摘要】目的探讨网织红细胞血红蛋白含量(RET-He)在β-地中海贫血和缺铁性贫血中的分布差异.方法 Sysmex XE-5000检测贫血患者的血常规结果.比较正常人、缺铁性贫血与β-地中海贫血之间RBC、MCV、RET#、Ret-He等参数分布的差异性.结果 Ret-He在正常人、缺铁性贫血与β-地中海贫血之间的差异有统计学意义.结论 Ret-He可辅助鉴别轻度β-地中海贫血和轻度缺铁性贫血,并且在缺铁性贫血患者中随着贫血程度的加重而降低.【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2013(031)003【总页数】3页(P205-207)【关键词】网织红细胞血红蛋白含量;缺铁性贫血;β-地中海贫血【作者】曾华;张智贤;倪李佳;朱玉琴;鲍蕴文【作者单位】中山大学孙逸仙纪念医院检验科,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院检验科,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院检验科,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院生殖中心,广东广州510120;中山大学孙逸仙纪念医院检验科,广东广州510120【正文语种】中文【中图分类】R446.11+1;R556+.3;R556.6+1网织红细胞是骨髓释放的尚未完全成熟的红细胞，半衰期仅为1～2d，可以及时反映骨髓红细胞生成状态，网织红细胞血红蛋白含量(reticulocyte hemoglobin content,Ret-He)是网织红细胞相关参数之一，直接反应新生红细胞血红蛋白的合成水平。

缺铁性贫血(IDA)和β-地中海贫血(β-地贫)是临床上最常见的小细胞低色素性贫血，目前临床上通常用全血细胞计数(complete blood counts,简称CBC)、血清铁生化及血红蛋白电泳单一或联合来鉴别这两种疾病，但这些指标存在缺陷，HbA2在重度IDA、铁幼粒贫血及铅中毒时会减低，而巨幼贫、甲亢及风湿病时会增高；血清铁蛋白(SF)敏感性高，但受机体生物变异影响很大；血浆游离锌原卟啉(ZPP)敏感性低，受铅中毒、溶血性疾病和慢性感染等的影响[1]。

网织红细胞的临床意义与实验室检测技术进展网织红细胞（Ret）是红细胞成熟过程中的一个重要阶段，是判断贫血状况，反映机体骨髓红系造血功能及评估其他相关性疾病治疗效果的重要参考指标，Ret的实验室检测方法已进入自动化分析阶段，现对网织红细胞实验室检测技术的进展及其临床应用作一综述。

标签：网织红细胞；检测技术；临床应用网织红细胞（Ret）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，是有核红细胞刚刚失去核的阶段，仍属未完全成熟的红细胞，胞质尚有核糖体、核糖核酸等嗜碱性物质残存，经煌焦油蓝或新亚甲蓝染色后，胞质中常可见蓝色或蓝绿色枝点状甚至网状结构，故名网织红细胞。

网织红细胞内含核糖核酸，使用新亚甲蓝或煌焦油对其进行染色后呈网状结构。

网织红细胞总数（retic）、网织红细胞平均体积（MCVr）、网织红细胞百分比（retic%）、单个网织红细胞平均血红蛋白浓度（CHCMr）、单个网织红细胞血红蛋白含量（CHr）和成熟度（LFR、MFR、HFR）是临床上检测该细胞时主要的检测参。

总数及百分比可以有效诊断贫血类型和观察治疗效果。

CHr可以准确判断溶血性贫血及增生性贫血等。

随着医学检测技术的发展，逐渐取代人工显微镜检测的传统方式并进入全自动分析的全新阶段。

笔者就网织红细胞的临床应用及实验室检测技术的进展综述如下。

l 网织红细胞的临床意义目前在肿瘤放、化疗过程中，常用白细胞（WBC）和血小板（PLT）来监测骨髓造血功能状况，但放、化疗患者易受到感染、输血应激等因素影响，WBC 不能准确及时反映患者情况；同时当发现WBC、PLT下降时骨髓已明显受到抑制。

因此，及早得到骨髓造血功能变化的提示，对于指导临床科学、合理用药，预防感染、出血有重要临床意义。

有学者报道，接受放、化疗的肿瘤患者Ret 降低总是早于WBC、PLT的降低；在骨髓恢复时，患者未成熟Ret迅速升高，IRF升高明显早于WBC、PLT等参数。

李文楷报道肿瘤患者放、化疗后第3天，MFR、HFR、Ret显著减低，而WBC、PLT变化不明显，直到第6天才显著减低，当造血功能恢复时MFR、HFR、Ret于放、化疗后第12天开始增高，而WBC、PLT仍持续下降，放、化疗后第15天MFR、HFR显著升高，而WBC、PLT直到第20天才出现明显升高。

Clinical Application of RET Analysis and Its Fluorescence Intensityin Anaemic PatientsXIAO Ping(Hunan Tumor Hospital,Changsha 410013，China ）[Abstract]Objec tive To explore the clinical application value of the flow cytometry and fluorescein staining technique in the analysis of RET and it s fluorescence intensity.Methods To analyzethe variation of RET in the anaemia patients with different type and fluorescence intensity with Sysmex XE-5000automatic blood analyzer(P <0.05or P <0.01).Results Compared anaemia patients with normal people ,both of the modulus and percentage of RET increased to some different level ,dropped slightly or obviously ;LFR dropped ,IRF ,MFR and HFR increased significantly.Conclusion The automatic blood analyzer measures and analyzes so many cells that we can avoid the error induced by subjective factors and also it is fast,sensitive,repeatable,easy to mampulated and set standard withfewer error and accurate result .The analysis of RET and fluorescence intensity can be the preliminary screening target of differential diagnosis of some anaemia and the sensitive target of rest raining and recovering of marrow hematopoietic system.It can be of great clinically significance in judging and monitoring the degree of marrow injury and its prognosis.[Key words]anemia ;flow cytometry ;fluorescein staining technique ;fluorescence intensity贫血患者网织红细胞参数及其荧光强度检测临床意义肖平（湖南省肿瘤医院检验科，湖南长沙410013）【摘要】目的：探讨流式细胞术加核酸荧光染色技术在网织红细胞(Ret)及其荧光强度分析中的临床应用价值。

ｒ ｍｅ ｅ ｓ ｉ ０ ｈ ａ ｔ ｙ ａ ｕ ｔ ｎ ｎ ５ ａ ｉｎ ｓ ｗｉ ｈ ｌｓ ｅ ａ ｍｉ ｏ ｓ ｍｅ ｓ ｒ ｄ ｂ ｅ ｋ ｎ ａ ｔ ｒ ） ｎ ６ ｅ ｌｈ ｄ ｌｓ ａ ｄ ｉ ０ ｐ ｔ ｔ ｔ ｔ ａ ａ ｓ ｍｉ ｎ ｒ ｗａ ａ ｕ ｅ ｙ Ｂ ｃ ｍａ — ｅ ｈ
ｎ ｏｒ．
［ ｙｗｏ ｄｌ Ｔｈ ｌｓ ｅ ａ Ｒｅ ｉｕｏ ｙｅ ； Ｅｒｔ ｒ ｃ ｔ ｄｃ ｓ Ｋｅ ｒｓ ａａ ｓ ｍｉ； ｔ ｌｃ ｔｓ ｃ ｙ ｈｏ ｙｅｉ ｉｅ ｎ
Ｂｎ ｉｇ．Ｄ ｐ ｒｍ ｎ ｆ Ｃ ｉｉ ｌ Ｌ ｂ ｒ ｔｒ ｔ ｅ Ｆ ｒｔ Ｐ ｏ ｌ Ｓ Ｈｏｐ ｔｌ ｏ ｈ ｏ ｉｇ，Ｚ ａ ｑｎ ｅ ａ ｔ ｅ ｔ ｌ ｃ ａ ｏ ａｏ ｙ， ｈ ｉｓ ｅｐ ｅ ｓ ｉ ｆ Ｚ ａ ｑｎ ｏ ｎ ａ ａ ｈ ｏ ｉｇ
Ｓｇ ｉ ｃ ｎ ｅｏ ｎ ｌｓｓｏ ｅｉｕｏ ｙｅ ｍｕｔｐｅｐ ｒ ｍｅｅｓｉ ｈ ｅｅ ｔ ｎ ｏ ｈ ｌｓｅ ａ ｍｉｏ ＪＩ ｉｎ ｆ ａ ｃ ｆａ ａｙ ｉ ｆｒｔ ｌｃ ｔ ｌ ｌ ａ ａ ｔｒ ｎ ｔｅｄ ｔｃｉ ｆｔ ａａ ｓｍｉ ｎ ｒ ｉ ｃ ｉ ｏ Ａ
变 化 不 大 。结 论 网 织 红 细 胞 多 参 数 分 析 对 轻 型 地 中海 贫 血 患 者 有 重 要 的 参 考 价 值 ， 以更 细 微 、 可 全
面地评价骨髓造血功能 。 【 关键 词 】 地 中 ： ４ ６ ６ Ｒ ４．３ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ６ ３４ ３ （ ０ ７ ０ — ０ —２ １７ —１０ ２０ ）３２９０
Ｃｏｕ ｔ ｒ ＩＨ ７ Ｏ Ａ ｕ ｏｍ ａ ｅ ｏ ｌ Ｃｏ ｌｅ ５ ｔ ｔ ｄ Ｂｌｏｄ Ｃｅ １ ｕｎｔ ｒ Ｒｅ ｕｌｓ Ｔｈｅ ｅ ｉ ｉ ｉｉａ ｄｆｅｒ ｎ ｅ ｏｆＲＥＴ ｅ ． ｓ ｔ ｒ ｓ ｓｇｎ ｆｃ ｎｔ ｉｆ ｅ ｃ ＲＥＴ ａ ｎｄ

网织红细胞及其荧光强度检测的临床意义目的探讨流式细胞检测结合核酸荧光染色技术在网织红细胞(Ret)及其荧光强度分析中的临床应用价值。

方法应用Sysmex XT——2000i全自动血液分析仪分析不同类型贫血患者的网织红细胞和荧光强度的变化。

结果130例贫血患者与30例正常人群比较,其Ret 绝对值及其Ret百分比有不同程度的升高、轻度降低或显著降低;荧光强度的变化差异较大,表现为低荧光强度网织红细胞比率(IFR)降低,幼稚网织红细胞比率(IRF)、中荧光强度网织红细胞比率(MFR)和高荧光强度网织红细胞比率(HFR)升高,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。

结论网织红细胞荧光强度分析是骨髓造血系统抑制和恢复较敏感的指标,可作为某些贫血诊断和鉴别诊断的初筛指标及对判断和监测骨髓的损伤程度和预后具有重要的临床意义。

标签：贫血; 网织红细胞计数; 荧光强度; 临床应用网织红细胞(Ret)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未成熟的红细胞,其胞质内存留多少不等的嗜碱物质RNA,其RNA含量越多,Ret越不成熟,反之亦然。

通过使用核酸荧光染料多聚亚甲基可对细胞胞浆中的核酸物质(RNA)进行染色,越不成熟的Ret其荧光越强,反之,成熟Ret荧光极少或最弱,故将Ret分成高荧光强度网织红细胞(HFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、低荧光强度网织红细胞(LFR)三部分。

IRF定义为中、高荧光强度区域内Ret百分数之和(MFR+HFR),为不成熟Ret比例,可更灵敏的反映骨髓造血系统的状况。

我院使用的具有全自动网织红细胞计数、荧光强度自动化分析及成熟度分类功能的Sysmex X T-2000i 血细胞分析仪,广泛用于临床血液常规标本的检测,为临床提供了大量的分析参数和研究参数,现将网织红细胞及其光强度分析的临床应用情况报道如下。

1 材料与方法1.1 研究对象2009年1～11月本院住院患者均为首诊并未做过输血及抗贫血治疗。

网织红细胞检查的临床意义
网织红细胞介绍
网织红细胞（Reticulocyte，Rtc）是红细胞的 未成熟阶段，是反映骨髓红系造血功能及判断贫 血和相关疾病疗效的重要指标。
骨髓中红细胞系统的增生发育过程是：多能以干 细胞→单能干细胞→原始红细胞→早幼红细胞→ 中幼红细胞→晚幼红细胞→网织红细胞→成熟红 细胞。从原始红细胞增殖到晚幼红细胞阶段共分 裂3－4次，约需72小时，红细胞数由一个变为8 一16个，细胞核由大变小而浓缩，胞浆中含血红 蛋白逐渐增多。
各型网织红细胞（煌焦油蓝活体染色）丝 球型（a）、网型（b）、破网型（c）、 点粒型（d）网织红细胞
手工计数和流式细胞仪计数区别
网织红细胞计数的传统方法是使用新亚甲基蓝染 料，染色涂片后，光镜下计数。但此方法费时， 且由于只计数1000个细胞，因而存在固有的取样 误差。
使用流式细胞术方法进行网织红细胞计数，与传 统的新亚甲基蓝方法相比，存在很多优势。使用 流式细胞术，可以检测上万个细胞，具有很好的 取样精确性。由于使用的是细胞悬液，可以消除 涂片时的分布误差。同时，它还具有省时、操作 简便等优点。
网织红细胞计数校正
网织红细胞计数一般以占外周血红细胞（RBC） 百分数表示，因此易受贫血程度的影响。矫正方 法有两种：网织红细胞百分数与红细胞绝对数乘 积即绝对网织红细胞计数（正常范围 :24000~84000/立方毫米）。
另一消除贫血程度影响的方法是，网织红细胞百 分数与实际红细胞压积的积再除以正常红细胞压 积（45）。值得注意的是，上述矫正方法往往会 使网织红细胞计数低于实际值，因此如果观察值 已较低，则矫正值无意义。矫正仅用于网织红细 胞百分数增高时。
通过流式细胞仪的网织红细胞分析，可准 确评价自体和异体骨髓移植后红细胞成长 的恢复情况。在骨髓移植第21天，网织红 细胞数大于15×109／L,表明移植获得成功 。感染和输血对网织红细胞的生长趋势都 没有明显的影响。

预后有重要的临床意义 。 １材 料 与方 法
１ ． １标本来 源
Ｌ Ｒ Ｆ 、ＭＲ Ｆ 及Ｈ Ｒ Ｆ 。其 中ＭＲ Ｆ 和Ｈ Ｒ Ｆ 二类为较幼 稚阶段 ，两者 之和为
Ｉ Ｒ Ｆ 。在 正常 睛况下，Ｉ Ｒ Ｆ 水平较低 ，外周血中未成熟网织红细胞数量较
选择 ４ ５ 例 Ｍｇ Ａ，全部 病例 均经 临床和 实验 室血常 规 、叶酸及 维 生 素Ｂ． 、骨髓 象 检查 后 符合 相 应 的诊 断标 准 ，标本 均 抽取 ２ ｍＬ 置 Ｅ Ｄ Ｔ Ａ — Ｋ ２ 真空抗凝管 ，混匀 ，室温放 置，且所有检测均在４ ｈ 内完成 。
法 ，研 究表 明 ，网织红 细胞能反应Ｍｇ Ａ 患者 红细胞的增生状 况…，为
网织 红细胞是成熟 红细胞 的前体 红细胞 ，由骨髓 最新释 放到外周 血 ，同成熟红细胞相 比 ，网织红细胞 内仍 残存少量的Ｒ Ｎ Ａ（ 嗜碱性物
质 ）。临床上根据 网织红细胞中的Ｒ Ｎ Ａ 水平，将 网织红细胞分 为三类 ：
１ ． ２仪器 与试剂
少。由于造血原料缺乏 ，骨髓造血受到刺激 ，网织红细胞由骨髓大量释 放人外周血，导致Ｉ Ｒ Ｆ 水平明显升高。 因此监测 网织红细胞参数及分类 指标能反映骨髓真实的造血水平 ，也可作为反映骨髓造血功能和疗效观 察的重要指标 ，且统计学方面无性别差异 。尤其是 Ｉ Ｒ Ｆ 及Ｌ Ｆ Ｒ 的动态观
１ ． ４ 方法
按照血 液分析仪 操作规程 ，对 标本治疗前 及治疗后进行 检测 ，记 录Ｒ Ｅ Ｔ 、低荧光度 网织 红细胞 （ ￣ Ｉ Ｊ Ｌ Ｆ Ｒ ） 、中荧 光度网织 红细胞 （ 即 ＭＦ Ｒ ） 、高荧光 度网织红 细胞 （ 即Ｈ Ｆ Ｒ）、网织红细胞Ｒ Ｅ Ｔ ，未成熟
网织 红细胞指数Ｉ Ｒ Ｆ ＝ （ ＭＦ Ｒ ＋ Ｈ Ｆ Ｒ ） ／ （ ＭＲ Ｆ ＋ Ｈ Ｆ Ｒ ＋ Ｌ Ｆ Ｒ ） 。 １ ． ５ 统计学分析

网织红细胞检查的临床意义
网织红细胞介绍
网织红细胞（Reticulocyte，Rtc）是红细胞的 未成熟阶段，是反映骨髓红系造血功能及判断贫 血和相关疾病疗效的重要指标。
骨髓中红细胞系统的增生发育过程是：多能以干 细胞→单能干细胞→原始红细胞→早幼红细胞→ 中幼红细胞→晚幼红细胞→网织红细胞→成熟红 细胞。从原始红细胞增殖到晚幼红细胞阶段共分 裂3－4次，约需72小时，红细胞数由一个变为8 一16个，细胞核由大变小而浓缩，胞浆中含血红 蛋白逐渐增多。
晚幼红细胞以后细胞即不再分裂，发育过程中核 被排出而成为网织红细胞。网织红细胞含有少量 核糖核酸RNA)，用煌焦油蓝染色时成网状故名网 织红细胞。
网织红细胞进一步成熟，RNA消失而为成熟红细 胞。从晚幼红细胞发育到成熟红细胞约需48小时 ，成熟红细胞的寿命约为120天。在正常情况下骨 髓中有核红细胞并不释放至血循环，只有网织红 细胞和成熟红细胞才释入血中。因此，检查末梢 血中网织红细胞数，可以推知骨髓生红细胞的情 况。
根据病理学可将贫血分为骨髓中红细胞成 长下降、红细胞破坏过多、或失血。网织 红细胞计数与骨髓中红细胞成长活性有关。
网织红细胞降细胞 成长有关。网织红细胞减少的原因为：
1．骨髓幼红细胞和造血细胞由脂肪细胞取代。 2．骨髓中正常造血由肿瘤细胞或成纤维细胞取
正常人外周血中甚少，如增加，表示红系统增生 （如急性溶血，多数溶血性贫血和其他增生性贫 血），如贫血仍不见增生，可能是重型再障。抗 贫血治疗后明显上升，表示治疗有效，反之效果 欠佳。故网红的总数或百分比对贫血的临床诊断 及疗效观察非常有价值。是血液最常做的项目之 一。
网织红细胞计数的方法
目前检测网织红的方法有传统的显微镜目测法、网织红 细胞计数仪、流式细胞仪、多参数血细胞分析仪四种方法 。

网织红细胞参数在贫血性疾病鉴别诊断中的应用分析目的对网织红细胞参数在贫血性疾病鉴别诊断中的应用分析。

方法资料随机选自2013年7月~2014年1月在本院诊治的各种贫血患者280例，作为研究组，同期在本院体检的健康患者55例，作为对照组，对患者的高荧光强度网织红细胞的百分率(HFR％)、中荧光强度网织红细胞百分率(MFR％)、低荧光强度网织红细胞的百分率(LFR％)、未成熟的网织红细胞比率(IRF%)、网织红细胞的百分率(RET％)和计数绝对值(RET#)检测进行分析。

结果研究组中溶血性贫血的LFR％显著降低，其余五项参数均高于对照组，且高于其他贫血类型，有统计学意义（P＜0.05）；失血性贫血RET#与对照组无明显差异（P＞0.05），其余五项参数比较，差异明显，具有统计学意义（P＜0.05）；缺铁性的贫血、肾病性贫血、肝脏性贫血患者与对照组进行比较，RET#无明显差异（P＞0.05）；缺铁性的贫血患者与对照组相比，HFR％、MFR％、LFR％和IRF%，差异明显，具有统计学意义（P＜0.05）；再生障碍性患者的RET％和RET#，低于对照组，且低于其他贫血类型，差异明显，具有统计学意义（P＜0.05）。

结论网织红细胞参数，能够反映出网织红细胞成熟的程度，且利于对红细胞活动度进行判断，对不同的贫血疾病诊断和鉴别诊断，具有非常重要的临床实用意义。

标签：网织红细胞参数;贫血性疾病;鉴别诊断;应用网织红细胞指晚幼的红细胞经脱核至完全成熟间过渡的细胞，能够对骨髓的造血功能进行有效的指示反应，对与患者的贫血疾病诊断、鉴别诊断、疗效及预后的评估分析，具有非常重要临床意义[1]。

但是，传统网织红细胞的检测参数比较单一，不能够对网织红细胞成熟的程度进行有效反应，且仪器的操作使用耗费时间长、人力多，非常容易受到主观因素的影响。

随着全自动的血细胞分析仪使用，使得相关检测逐渐变得标准化、智能化，并且多个相关参数被引入[2]。