医院的环境微生物采样的方法及的注意事项共30页文档

环境微生物监测标准操作规程一、监测指征1．感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。

2．监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被成功清除。

3．当某项感染控制措施改变时，评估其效果；或者根据规范要求，仪器设备或系统启用时监测。

4．目标性监测的需要。

5．循证医学证据支持。

二、空气监测(沉降法)(一)采样时间：消毒处理后与进行医疗活动之前。

(二)采样高度：距地面垂直高度80～150 cm。

(三)采样点设置1．非洁净房间：室内面积≤30 ㎡，在对角线上设里、中、外3点。

里、外两点位置各距墙1 m；室内面积>30 ㎡，设东、西、南、北、中5点。

其中东、西、南、北4点均距墙1 m。

9 cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5 min后送检培养。

2．洁净房间：清洁房间在空态或静态条件下，根据房间的不同清洁级别进行布点，操作按照GB 50333—2002。

9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露30 min后送检培养。

(四)采样注意事项1．采样人员做好手部卫生，佩戴口罩、帽子等个人防护装备。

进入清洁房间采样须穿洁服。

2．皿盖打开顺序应先内后外；手臂及头不可越过培养皿上方；行走及放置动作要轻，尽量减少对空气流动状态的影响；皿盖应扣放，以防污染。

3．采样结束后，由外向内合上皿盖。

4．采样完毕的培养皿应在6 h内培养。

(五)实验室检验1．培养皿在37℃培养48 h后，进行菌落计数和致病菌检验。

普通营养琼脂培养基的配制按照GB／T 4789．28—2003；菌落计数方法按照GB\T 7918．2—1987；致病菌检验：溶血性链球菌检验按照GB／T 4789．11—2003，沙门菌检验按照CB\T 4789．4—2003，铜绿假单胞菌检验按照GB／T7918．4—1987，金黄色葡萄球菌检验按照CB\T 7918．5—1987,，2．计算结果：非洁净房间以100 c㎡的平皿在空气中暴露5 min即相当于10 L 空气中的细菌数，计算公式为：细菌数(cfu／m3)=1 000÷(A／100×t×10／5)×N=50 000N／At式中：t——平皿暴露于空气中的时间(min)；N—一培养后平皿上的菌落数(cfu／平皿)；A——所用平皿的面积(c㎡)。

微生物检验标本的正确采集及注意事项正确采集临床微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定结果。

可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一步。

为此应正确采集各种细菌学标本。

一、血液标本的采集1、采集方法（1）75%酒精清洁局部皮肤。

（2）待皮肤干后，再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒，范围不应小于5cm（直径），且不能用手指触摸消毒后的皮肤。

（3）皮肤碘酒干后（约1min），穿刺采集血液，采血量成人5-10ml，婴幼儿1-5ml。

（4）采血后立即在床旁接种培养瓶，并迅速轻摇，充分混匀防止凝固，但又不可剧震以防溶血。

2、注意事项（1）怀疑菌血症应尽早采血，体温上升（38.5℃）采血可提高阳性率，但也要防止因等待而延误时机。

（2）对已经使用抗菌药物，而又不能停药者，也应在下次用药前采血。

切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本，也不能从静脉导管及动脉插管中取血。

（3）培养基与血液之比以10:1为宜，以稀释血液中的抗生素，抗体等杀菌物质；有人主张对接受抗菌药物治疗的病人，培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。

（4）近年研究表明，将血液注入血培养基前，更换针头反而易导致污染。

（5）每例至少采血两次，间隔0.5-1h，以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。

（6）疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人，以肘动脉或股动脉采血为宜，除在发热期采血外，并要多次采血（24h 3-4次）和增加采血量（可增加10ml）。

（7）采血后立即送检，如不能立即送检可置室温，而不能放置冰箱。

（8）如临床表现很似败血症，而血培养多次阴性者，提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。

二、骨髓的采集1、采集方法在病灶部位或髂前（后）上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml，注入血培养瓶内。

2、注意事项（1）骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞，因而骨髓培养对伤寒病人的诊断较血培养优越。

《医院感染消毒灭菌效果监测取样指导》根据《消毒技术规范》的要求，现将我院消毒灭菌效果监测、环境微生学监测的采样方法、结果判定、质控标准等规范如下：第一章环境卫生学监测包括空气、物体表面、医务人员手的监测采样及检查原则。

采样应具有一定数量和代表性，采样后必须尽快对样品按要求指标进行检测，送检时间不得﹥6小时，若样品保存在冰箱内送检时间不得﹥24小时。

一、空气监测：1、采样时间：消毒处理后，操作前2、采样方法：平板沉降法（1）布点方法。

室内面积≤30ｍ²，设内、中、外对角线3点，两端距墙1米；室内面积＞30ｍ²，设东、西、南、北4角及中央5点，其中东、西、南、北均距墙1米。

（2）采样方法。

将直径为9cm普通营养琼脂平板在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5米，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。

（3）计算公式：空气细菌菌落总数（cfu/m³）=50000n/（a×t）式中a为平板面积（cm2）；t为平板暴露时间（min）；n为平均菌落数（cfu）。

（4）注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止110min进行采样。

（5）质控标准。

Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3（或0.2cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；Ⅱ类区域：细菌总数≤200cfu/m3（或4cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；Ⅲ类区域。

细菌总数≤500cfu/m3（或10cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。

二、医务人员手的监测：1、采样时间。

在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。

2、采样面积及方法：手的采样：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

医院环境微生物采样方法及注意事项概要一、采样方法：1.选择采样位置：根据医院的不同区域，选择采样位置。

通常包括手术室、病房、走廊、洗手间等。

2.准备采样工具：准备好采样所需的工具，如支持培养基、无菌刷子、无菌容器等。

3.采样方式：根据采样位置的不同，采用不同的采样方式。

(1)空气采样：通常使用空气采样器采集空气中的微生物。

将空气采样器放置在所需采样的位置，进行一定时间的采样，然后将采样器送往实验室进行分析。

(2)表面采样：借助无菌刷子或无菌棉签，在需要采样的表面轻轻擦拭，将采样物放入无菌容器中。

(3)液体采样：如水样、洗手液等，将液体放入无菌容器中。

4.样品处理：将采集到的样品送往实验室进行分析。

二、注意事项：1.严格遵循无菌操作规范：采样时要注意无菌操作，避免污染样品。

2.选择合适的采样工具：采样工具要选择合适，能够有效采集到微生物。

每次采样时要更换新的刷子或棉签。

3.采样时间和距离：采样时间不宜过短或过长，通常为15-30分钟。

空气采样器与采样位置之间的距离不宜过远或过近，一般为1-2米。

4.避免交叉污染：采样时应注意避免与周围环境接触，避免交叉污染。

5.采样点位选择：采样点位的选择要代表该区域的整体情况。

通常选择在易污染、难清洁的区域进行采样。

6.标注样品信息：每个样品都应有详细的标注，包括采样位置、时间、采样者等信息，方便后续分析和比对。

7.采样频率：根据需要确定采样频率。

不同区域的采样频率可以有所不同，一般为每1-3个月进行一次。

总之，医院环境微生物采样是一项重要的工作，可以为医院提供科学依据，制定有效的污染控制策略。

采样时要严格遵守操作规范，选择合适的采样工具和采样方法，并注意采样时间、距离、点位选择等因素。

采样后要及时送往实验室进行分析，并进行详细的标注信息，确保采样结果的准确性和可靠性。

医院环境卫生学监测制度每月感染管理科进行环境卫生学监测，包括对空气、物体表面和医护人员手的监测，对手术室、重症监护室、产房、母婴室、新生儿病房、新生儿重症监护病房、血透室、供应室、导管室、治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。

一、医院消毒卫生标准的采样及检查方法采样及检查必须遵循的原则是采样后尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过2h，若样品保存于1—4℃条件时，送检时间不得超过24h。

（一）空气采样及检查方法1.采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。

2.采样高度与地面垂直高度80 cm。

3.布点方法室内面积≤30 ㎡，设一条对角线上取3点，即中心一点，两端各距墙1m 处各取一点；室内面积＞30 ㎡，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。

4.采样方法将9cm 直径普通营养琼脂平板放在采样点，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖后及时送检。

（二）物体表面采样及采样方法1.采样时间：选择消毒处理后4h 内进行采样。

2.采样面积：被采样面积＜100cm2，取全部表面；被采样面积≥100 cm2，取100 cm2。

3.采样方法用 5cm×5cm 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装10ml 采样液的试管中送检。

门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。

（三）医护人员手采样及检查方法1.采样时间：采取手卫生后，在接触病人、从事医疗活动前进行采样。

2.采样面积及方法被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积 30 cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml 采样液的试管内送检。

采样面积按平方厘米(cm2)计算。

医院环境微生物采样方法及注意事项一、采样方法：1.采样工具选择：采样工具要具备良好的生物相容性和无菌性，通常使用无菌的试管、无菌吸棉签、无菌棉签和无菌采样袋等。

2.采样部位选择：医院环境中的潜在污染源主要包括空气、表面和液体，需根据具体需求选择合适的采样部位。

比较常见的部位有空气中的悬浮微粒、表面物体如门把手、工作台、地板、墙壁等以及液体如水、消毒液等。

3.采样时机选择：采样时机要根据实际情况选择，通常建议在人员活动最频繁的时候进行采样，如在工作日的上午和下午。

4.采样方法：根据不同的采样部位选择适当的采样方法。

-空气中微生物采样：常用的方法有空气质量测定仪、肉眼判定及移液法等。

可将培养基注入无菌风尘采样器，在采样过程中，将采样器连续运转一段时间，在培养基上形成可计数的菌落。

-表面微生物采样：可使用无菌的湿润棉签或无菌的涂片进行采样，擦拭表面，将其置于培养基上培养。

-液体微生物采样：采用无菌试管或瓶口放线菌采样器在表面取样，直接靠近水源进行采样。

5.采样数量和频率：根据需要选择采样数量和频率。

通常在特殊情况下，如新冠疫情期间，采样量和频率较高。

二、注意事项：1.无菌操作：在进行微生物采样前，必须进行无菌操作，包括对采样工具和采样人员的无菌处理。

2.防止交叉污染：在采样过程中，应避免采样工具和采样人员接触其他物体，以防止交叉污染。

3.避免潜在的干扰源：在进行微生物采样时，要尽量避免潜在的干扰源，如大风、空调通风口、各类动植物等。

4.保持培养基质量：培养基是进行微生物分析的重要因素之一，要确保培养基的质量，避免受到其他微生物的污染。

5.填写详细记录：采样时要详细记录采样部位、时间和采样方法等信息，以便后期数据分析和比对。

6.采样后的处理：采样完成后，要注意将样品妥善处理，保证其无菌状态，并及时送至实验室进行分析。

7.风险评估：采样前要对采样现场进行风险评估，确保采样过程的安全性和可行性。

总之，医院环境微生物采样是评价医院环境卫生状况的重要手段之一，正确选择采样方法和遵循相应的注意事项能够获得可靠的数据结果，为医院的环境卫生管理提供科学依据。

院感采样说明引言概述：院感采样是指医院内对环境、设备和人员进行采样，以检测和控制院内感染的传播。

本文将详细介绍院感采样的目的、方法、样品处理、采样频率和结果分析。

一、院感采样的目的1.1 了解院内感染的传播途径1.2 掌握院内感染的流行病学特征1.3 评估感染控制措施的有效性二、院感采样的方法2.1 空气采样2.1.1 使用空气采样器采集空气中的微生物2.1.2 采样点位的选择和布置2.1.3 采样时间和频率的确定2.2 表面采样2.2.1 使用无菌拭子或刷子采集表面微生物2.2.2 采样点位的选择和布置2.2.3 采样方法的标准化2.3 水质采样2.3.1 采集水样进行微生物和化学指标的分析2.3.2 采样容器和保存条件的选择2.3.3 采样点位和频率的确定三、样品处理3.1 空气样品处理3.1.1 空气样品的过滤和培养3.1.2 微生物菌落的计数和鉴定3.1.3 数据记录和分析3.2 表面样品处理3.2.1 表面样品的划取和培养3.2.2 微生物菌落的计数和鉴定3.2.3 数据记录和分析3.3 水样处理3.3.1 水样的过滤和培养3.3.2 微生物菌落的计数和鉴定3.3.3 化学指标的分析和数据记录四、采样频率4.1 根据感染控制需求确定采样频率4.2 不同区域和设备的采样频率差异4.3 采样频率的动态调整和监控五、结果分析5.1 对采样结果进行统计和分析5.2 与标准值进行比较和评估5.3 结果的解读和建议结论：通过院感采样，可以全面了解医院内感染的传播途径和流行病学特征，评估感染控制措施的有效性，并及时采取相应的措施进行调整和改进。

采样方法和频率的选择、样品处理的标准化以及结果的准确分析是保证院感采样有效性的关键。

院感监测采样方法一、引言院感（医院感染）是指在医疗机构内患者因治疗、护理或其他原因而感染的疾病。

为了及时发现和控制院感，采样是必不可少的环节。

本文将详细介绍院感监测采样的方法。

二、采样对象院感监测的采样对象通常包括患者、医务人员和环境。

患者采样包括血液、呼吸道、尿液等样本；医务人员采样包括鼻咽拭子、手部拭子等样本；环境采样包括空气、表面和水等样本。

三、采样方法1. 患者采样方法（1）血液采样：在消毒后的皮肤上穿刺静脉，用无菌注射器采集血液样本，放入无菌试管中，并标注好患者信息和采样时间。

（2）呼吸道采样：使用无菌棉签或吸痰管采集患者的咽喉或鼻腔分泌物，放入无菌试管中，并标注好患者信息和采样时间。

（3）尿液采样：患者在无菌容器中收集早晨第一次排尿的尿液样本，尽量避免污染，并标注好患者信息和采样时间。

2. 医务人员采样方法（1）鼻咽拭子采样：医务人员自行取下口罩，用无菌棉签轻轻刮取鼻咽部分泌物，放入无菌试管中，并标注好医务人员信息和采样时间。

（2）手部拭子采样：医务人员在消毒后的手部用无菌拭子擦拭，尤其是指缝和指甲周围部位，放入无菌试管中，并标注好医务人员信息和采样时间。

3. 环境采样方法（1）空气采样：使用空气采样器将空气中的微生物采集到培养基中，采样时间和地点需记录，并标注好采样人员信息。

（2）表面采样：使用无菌拭子或刷子在表面擦拭，将擦拭物放入无菌试管中，并标注好采样时间和地点。

（3）水样采样：使用无菌容器收集水样，尽量避免污染，将水样放入无菌试管中，并标注好采样时间和地点。

四、采样注意事项1. 采样前，采样人员应进行充分的手卫生，佩戴好个人防护装备，确保采样过程的无菌性。

2. 采样时，应遵循无菌操作原则，避免污染样本。

3. 采样完成后，及时将样本送往实验室进行分析，避免样本变质。

4. 采样器具应经过消毒处理，避免交叉感染。

5. 采样记录应详细、准确，包括采样时间、地点、采样人员信息等。

五、数据分析与报告采样完成后，实验室将对样本进行分析，根据分析结果生成数据报告。

微生物标本采集操作规程基本原则1.发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，三级医院微生物标本送检率不应低于60%。

2.尽量在抗菌药物使用之前采集标本。

3.标本采集时应严格无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染。

4.标本采集后应立即送至细菌室。

床旁接种可提高病原菌检出率。

5.以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭或伤口拭子，宜插入运送培养基送检。

6.送检标本应注明姓名、床号、标本来源、检验目的和标本采集具体时间，使细菌室能准确及时接种相应的培养基和适宜的培养环境，提高阳性检出率。

一、血液与骨髓的送检方法1.一般原则:在出现临床症状后应尽快抽血样作培养，最好在发热初期、高热或寒战时，原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已应用药物而病情不允许停药的患者应在下一次用药前采血。

2.采血部位：肘静脉。

疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。

3.采血最佳时间与频率：急性败血症应在治疗前24小时内抽血3次或者更多次，并在不同部位，如左右手臂或颈部，分别做厌氧、需氧培养以及内毒素、降钙素原检测；急性心内膜炎在治疗前1-2小时内分别在3个不同部位抽血样；怀疑伤寒病人，在病程第1-2周内采静脉血液；肺炎链球菌在寒战、高热或者休克时；布鲁杆菌感染除在发热期采血，还要多次采血，一般是24小时抽3-4次；分枝杆菌感染早期采血样阳性率高。

怀疑菌血症因尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机，对已用抗菌药物而不能停药者，可在下次用药前采血。

对疑为伤寒病人，在第1-3周内采集骨髓是最佳时间，在病灶或髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml 作细菌培养。

4.采血部位的局部皮肤应严格消毒。

将采集的血液注入血培养瓶前，认真识别相应颜色的瓶，并仔细检查培养瓶有无变色或混浊。

过火消毒针头，血培养瓶撕掉塑料盖后，瓶口不是无菌部位必须消毒。

消毒不能用碘酒消毒而是75%酒精消毒。

医院环境卫生学监测环境卫生学监测一、物体表面卫生学监测医院物体表面的微生物污染为不均匀性污染，因此在检测时需要采取合适的采样方法来确保结果的准确性。

1、采样时间根据采样目的选择采样时间。

如果是进行常规物体表面监测，则应选择消毒处理后进行采样；如果是针对暴发流行时的环境微生物学检测，则应尽可能对未处理的现场进行采样。

2、采样面积在常规检测时，被采样面积小于100平方厘米时，应取全部表面；大于等于100平方厘米时，应取100平方厘米。

而在暴发流行时，则可以根据需要采样，不受此限制。

3、采样方法棉拭子法1）对于平面的物体，使用5cm×5cm大小的标准灭菌规格板，在被检物体表面放置规格板后，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液（吐温-80 1g、蛋白胨10g、氯化钠8.5g、蒸馏水1,000mL配置而成，pH7.2~7.4，121摄氏度压力蒸汽灭菌20分钟）的棉拭子，在规格板内横竖往返均匀涂抹各五次，并随之转动棉拭子，连续采样1~4个规格板面积。

将XXX折去手接触部分，放入装有10mL含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

2）对于门把手、金属、玻璃等曲面的小型物体，则采用XXX直接在物体表面按一定顺序涂抹采样。

2.压印法使用直径为5.6cm（面积约为25平方厘米）的平皿，倒入营养琼脂培养基，使培养基高出平皿口1~2mm，凝固后置于4摄氏度冰箱保存待用。

检测时将平板上的培养基表面压贴在物体上10~20秒，然后送检。

4、注意事项1、采取的标本要有足够的样本数量且具有代表性。

例如，在层流洁净手术室中，应选择具有代表性的采样地点，每个房间每种（如手术台、桌、灯等）表面不少于2点。

2、采样时，XXX应处于湿润状态。

如果处于饱和状态，应将多余的采样液在采样管壁上挤压去除。

禁止使用干棉拭子采样。

3、棉拭子采样时，应在接种前将培养皿于37摄氏度温箱中烤30分钟。

4、层流洁净手术室的采样时间应在消毒后10分钟之内（各类洁净用房作为静态实测数据），手术室手术结束后和各类洁净用房的上午10时。

院感监测采样方法一、背景介绍院感（医院感染）是指在医疗机构内发生的与医疗活动有关的感染，是医疗安全管理的重要内容之一。

为了及时发现和控制院感，采样是一项关键的工作。

本文将详细介绍院感监测采样方法，以确保采样的准确性和可靠性。

二、采样目的院感监测采样的目的是采集医疗机构内可能存在的病原微生物，以评估感染风险和制定相应的控制措施。

通过采样，可以检测空气、表面、水源和医疗器械等环境因素，以及医务人员和患者的生物样本，从而及时发现院感病例和感染源。

三、采样方法1. 空气采样空气中的微生物是院感传播的重要途径之一。

常用的空气采样方法包括：（1）表面菌落计数器（Surface Air System，SAS）：通过吸入空气中的微生物并沉积在培养基上，计算菌落形成单位（CFU）。

（2）空气采样器：通过吸入空气中的微生物并沉积在培养基上，定量分析微生物的数量。

2. 表面采样医疗机构的表面是院感传播的重要环节，常用的表面采样方法包括：（1）刷子采样法：使用消毒棉签或者刷子在表面擦拭，将擦拭物转移到培养基上进行培养和分析。

（2）拭子采样法：使用消毒拭子在表面来回擦拭，将拭子转移到培养基上进行培养和分析。

3. 水源采样医疗机构的水源可能存在病原微生物，常用的水源采样方法包括：（1）自来水龙头采样：在自来水龙头出水口处采集水样，将水样转移到培养基上进行培养和分析。

（2）水箱采样：在医疗机构的水箱中采集水样，将水样转移到培养基上进行培养和分析。

4. 生物样本采样医务人员和患者的生物样本是判断院感感染源的重要依据，常用的生物样本采样方法包括：（1）喉拭子采样法：使用喉拭子采集医务人员和患者的喉部份泌物，将拭子转移到培养基上进行培养和分析。

（2）血液样本采样法：采集医务人员和患者的血液样本，通过血培养等方法检测是否存在病原微生物。

四、采样注意事项1. 采样前消毒：在进行采样前，应对采样工具和采样部位进行消毒，以避免外源性污染。