高考生物一轮限时规范训练第1讲微生物的培养和利用(含解析)选修1

生物技术实践第1讲微生物的利用1．下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程，请回答下列问题。

A.配制培养基→B.灭菌→C.扩大培养液体培养基→D.划线分离和培养固体培养基→E.菌种保存(1)A过程配制的是通用细菌培养基，称为________培养基。

配制时除了加入特定的营养物质以外，还要加入一定量的氯化钠，以维持________。

对培养基酸碱度的调节，应该在B过程的________(前面或后面)。

(2)D过程与C过程相比，培养基中增加的物质是________。

E过程所需的温度是________。

(3)D过程后，一个菌体便会形成一个________，这种分离方法是________的通用方法，也是筛选特定菌株的最简便方法之一。

(4)植物组织培养时，先配制MS培养基，再加入一定比例的植物激素，当生长素相对较多时，可促进________。

(5)植物组织培养和微生物培养都需要无菌操作，下列不适宜用高压蒸汽灭菌的是________。

A．接种环和镊子B．三角瓶和广口瓶C．发芽培养基和生根培养基D．用于培养的幼茎和幼芽解析LB液体培养基是通用的细菌培养基，LB固体平面培养基则用于划线分离，氯化钠充当溶质的作用是维持培养基的渗透压，调整好酸碱度后才能进行灭菌，若灭菌后再进行调整酸碱度的话，又会产生新的污染。

在液体培养基的基础上加入一定量的琼脂就成了固体培养基，培养好后的菌种置于4 ℃冰箱中保存。

通过划线分离后一个菌体就会繁殖出一个菌落。

植物组织培养中生长素多，有助于生根，而细胞分裂素多，则利于生芽。

高压蒸汽灭菌常用于培养基、培养器材等的灭菌，而用于培养的幼茎和幼芽则不能进行任何的灭菌操作，否则会导致细胞死亡。

答案(1)LB 渗透压前面(2)琼脂 4 ℃(3)(单)菌落消除污染杂菌(纯化菌种)(4)生根(5)D2．急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的。

因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水有关的问题。

藏躲市安详阳光实验学校选修一生物技术实践第1讲微生物的培养和利用1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①②B．③④C．①③ D．②④解析平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。

答案C2．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是( ) A．植物组织培养常用的是固体培养基B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。

答案D3．通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不．正确的是( )A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105倍的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上C．将培养皿倒置，37℃恒温培养24～48小时D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数解析检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行计数。

答案D4．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是( ) A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233解析在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B不正确。

高三生物一轮复习指导活页作业35 微生物的培养与应用（含解析）新人教版选修1一、选择题因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，而样品稀释度无论多高都很难使其中的细菌都单个分布于培养基上，故计数结果比实际值低。

答案：B2．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①②B．③④C．①③ D．②④解析：平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。

答案：C3．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌、酒精消毒、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( )A．接种环、手、培养基B．高压锅、手、接种环C．培养基、手、接种环D．接种环、手、高压锅答案：C4．通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不．正确的是( ) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105倍的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上C．将培养皿倒置，37℃恒温培养24～48小时D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数解析：检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行计数。

答案：D5．(2013·赤峰质检)下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是( )成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊红美蓝青霉素琼脂蒸馏水含量10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1万单位适量 1 000 mLA.能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因B．此培养基是天然鉴别培养基C．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准D．此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中解析：此表表示鉴定大肠杆菌的合成培养基。

选修1 专题1(时间：45分钟分值：100分)一、选择题(每小题4分，共44分)1．下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是 ( )A．参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体B．果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋C．在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白酶的微生物参与D．在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量答案：C解析：酵母菌是真核生物，含有线粒体；醋酸菌是原核生物，无线粒体；果酒发酵过程中温度为18～25 ℃左右，而醋酸发酵温度为30～35 ℃，且醋酸菌是需氧型，在果醋发酵过程中，还需充足的氧气；在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白酶的微生物参与，因为豆腐的主要成分为蛋白质；为防止杂菌污染，在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加应增加盐量。

2．果酒变酸、酸奶的制作、腐乳外部致密的一层“皮”，与其相关的微生物分别是( ) A．醋酸菌、乳酸菌、毛霉B.乳酸菌、毛霉、醋酸菌C．醋酸菌、酵母菌、毛霉D．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌答案：A解析：果酒变酸是由于醋酸菌发酵产生醋酸的原因；酸奶的制作是通过乳酸菌无氧呼吸产生乳酸来完成的；腐乳外部致密的一层“皮”是毛霉生长所形成的菌丝，经腌制之后形成的。

3．下列关于果醋制作的叙述中，错误的是( )A．制作果醋需用醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需通入氧气B．醋酸菌是一种嗜温菌，对温度要求较高，一般在50 ℃左右C．醋酸菌能将果酒变成果醋D．当氧气、糖充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸答案：B解析：醋酸菌是好氧菌，所以在发酵过程中需要适时通入氧气；醋酸菌的最适生长温度为30～35 ℃；当氧气、糖都充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

4．下列关于果酒制作过程的叙述正确的是( )A．应先除去葡萄枝梗，然后反复冲洗，直至彻底干净B．应控制发酵温度维持在20 ℃左右，变化不能太大C．发酵过程中应该不断从充气孔进行通气，以维持发酵的需氧环境D．酵母菌存在广泛、生命力强，因此果酒制作时不需对所用器具消毒灭菌答案：B解析：在精选葡萄后应先冲洗1～2次，然后除去枝梗，原因是要除去污垢，但不能洗去附着在表面的酵母菌，先去枝梗会造成汁液流失和污染；酒精发酵过程是一个厌氧过程；在有氧的条件下，醋酸菌可将酒精氧化为乙醛，进而氧化为乙酸；在酒精发酵时，一定要对器具消毒，以免杂菌污染和危害酵母菌的作用，影响酒的品质；酵母菌发酵的适宜温度是18 ℃～25 ℃。

微生物的培养和利用考点一微生物的实验室培养(国考5年8考)(全国卷：2020全国卷Ⅰ；2019全国卷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ；2018全国卷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ；2016全国卷Ⅲ)【任务驱动探究突破】任务1 据某微生物培养基的配方表回答如下问题(1)于______培养基，因为没有碳源，只有______微生物才能生长(利用空气中的CO2)。

(2)此培养基含有微生物所需的营养成分包括水、______和______三类，假如参加氨基酸，如此它可充当的营养成分包括______、______和生长因子。

(3)假如要观察微生物的菌落特征，培养基中应添加的成分是凝固剂(琼脂)。

(4)假如用该培养基来别离尿素分解菌，应除去表中______成分(填表中序号)，参加______和不含氮元素的有机物。

任务2 据两种接种方法产生的培养效果图完成如下问题(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是______________、____________。

(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，其最可能的原因是什么？应当怎样操作才可防止此种现象？任务3 大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤计算→→溶化→→②倒平板的操作方法与须知事项a．写出上图正确的倒平板操作流程：____________________________________。

b．甲、乙、丙中的灭菌方法是________。

c．丁中的操作需要等待________________后才能进展。

(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。

②纯化大肠杆菌的关键步骤是________。

③常用的微生物接种方法有两种a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基外表________的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的外表。

b．稀释涂布平板法：是将菌液进展一系列的________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的外表，进展培养。

选修1 生物技术实践学案39 微生物的培养与应用一、单项选择题1．关于灭菌和消毒的理解中不正确的是( )A．灭菌是指杀灭物体内外的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是相同的C．常用灭菌法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌D．常用消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法答案：B2．下图是微生物平板划线示意图。

划线的顺序为1、2、3、4、5。

下列操作方法正确的是( )A．操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B．划线操作须在火焰上进行C．在5区域中才有可能得到所需菌落D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌解析：接种环灭菌时应放在火焰上，而不是火焰旁，A错误；划线操作应在火焰旁，而不是火焰上，否则接种微生物会全部死亡，B错误；如果菌种密度低，则在5区域前面就有可能得到所需菌落，C错误。

答案：D3．在10、102、103倍稀释液中的平均菌落数为2 760、295和46，则菌落总数(个/mL)为( )A．2.76×105 B．2.95×105C．4.6×105 D．3.775×105解析：首先选择平均菌落数在30～300之间的，当只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数除以涂布平板时所用稀释液体积(0.1 mL)，再乘以稀释倍数作为该样品的细菌总数；若有两个稀释倍数的平均菌落数均在30～300之间，则按两者菌落总数的比值来决定，若比值小于2，应取两者的平均数，若大于2，则取其中较小的菌落总数。

本题295和46在30～300之间，46×103与295×102比值为1.6，应取二者的平均数进行计算。

答案：D4．下列关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中错误的是( )A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48 hD．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数答案：D5．下列说法正确的是( )A．从落叶丰富的土壤中筛选能分解纤维素的细菌B．家庭利用酵母菌制作腐乳C．用红色西瓜汁作还原糖鉴定的替代材料D．观察线粒体时，利用甲基绿染液将线粒体染成绿色，再用显微镜观察解析：落叶中含有大量纤维素，落叶丰富的土壤中能分解纤维素的细菌较多，A正确；制作腐乳主要利用毛霉，B错误；还原糖是用斐林试剂来鉴定，通过形成砖红色沉淀来判断是否含有还原糖，故要求材料为白色或无色最好，如果材料为红色，则会干扰实验结果，C 错误；观察线粒体应用健那绿染色，D错误。

专题二微生物的培养和利用［限时检测］［满分100分；限时45分钟］1. （14分）（2015?定西模拟）急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。

请回答下列与检验饮用水有关的问题:（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释, 然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为__________________________ O在下图所示的四种菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是（2）图中用该方法得到的菌落分布图中，最符合计数要求的是图中的_________________________⑶用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？____________________________________________________________ o为什么？___________________________A B C D⑷分别取O.lmL.已稀释IO?倍的水样分别涂布到3个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落平均数为50o则每升原水样中大肠杆菌数为_____________________________解析（1）据图可知，D图所示的菌落分布为平板划线法接种获得的。

（2）利用稀释涂布平板法进行微生物计数时，需要得到30?300个菌落的平板进行计数。

（3）为了增强实验的说服力，通常要设置对照实验，本实验可设置空白对照排除培养基污染产生的影响。

（4）根据公式计算每升原水样中大肠杆菌数为50X10M.1X1 000 = 5.0X10%答案（1）稀释涂布平板法 D （2）C （3）需要培养基制备不2. （14分）（2015-玉溪模拟）炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状，对①细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。

课时考点训练题组、微生物的应用1．(2021年高考江苏卷)某探讨小组从有机废水中别离微生物用于废水处理。

以下表达正确的选项是()A．培育基分装到培育皿后进展灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进展划线C．接种后的培育皿须放在光照培育箱中培育D．培育过程中每隔一周视察一次解析：此题考察了微生物试验室培育的相关学问。

培育基灭菌后再分装到培育皿中；转换划线角度前要灼烧接种环，冷却后再从上次划线的末端开场进展划线；接种后的培育皿需放在恒温箱中进展培育，一般每隔12 h或24 h视察一次。

答案：B2．(2021年高考北京卷)中学生物学试验中，在接种时不进展严格无菌操作对试验结果影响最大的一项为哪一项()A．将少许干酵母参与到簇新的葡萄汁中B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C．将转基因植物叶片接种到无菌培育基上D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培育基上解析：此题主要考察几种常见生物学试验对无菌操作的要求。

生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高，接种不须要进展严格的无菌操作；土壤浸出液中含有多种杂菌，所以利用选择培育基筛选土壤浸出液中特定微生物时，不进展严格无菌操作也不会影响试验结果；植物组织培育技术胜利的关键是无菌条件，假设接种时不进展严格无菌操作将可能导致试验失败，故C项符合题意。

答案：C3．(2021年高考新课标全国卷Ⅱ)临床运用抗生素前，有时须要做细菌耐药试验。

试验时，首先要从病人身上获得少量样本，然后依据肯定的试验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

答复以下问题：(1)为了从样本中获得致病菌单菌落，可用________法或________法将样本接种于固体培育基外表，经过选择培育、鉴别等步骤获得。

(2)取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培育基外表，在37 ℃培育箱中培育24 h，使其匀称生长，布满平板。

(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片匀称置于该平板上的不同位置，培育一段时间后，含A的滤纸片四周出现透亮圈，说明该致病菌对抗生素A________；含B的滤纸片四周没有出现透亮圈，说明该致病菌对抗生素B________；含C的滤纸片四周的透亮圈比含A的小，说明________；含D的滤纸片四周的透亮圈也比含A的小，且透亮圈中出现了一个菌落，在解除杂菌污染的状况下，此菌落很可能是抗生素D的________。

随堂跟踪训练1．醋酸菌和纤维素分解菌是工业中常用的微生物。

请分析回答下列问题。

(1)在________和糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇氧化为________，进而生成醋酸。

(2)为了从某细菌样品中筛选出纤维素分解菌，可采用________染色法进行筛选。

如果样品中细菌浓度较低，可以通过________培养来增加纤维素分解菌的浓度，该过程所用的培养基为________(固体/液体)培养基。

为了纯化纤维素分解菌，某同学采用平板划线法进行接种，在做第二次以及其后的划线操作时，应该从上一次划线的________开始划线。

为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

(3)将菌种进行临时保存时，可在低温下使用试管斜面保存，但该方法除保存时间短外，菌种还易______________；若需较长时间保存菌种，可用的方法是______________。

(解析)在氧气和糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇氧化为乙醛，进而生成醋酸。

筛选纤维素分解菌可采用刚果红染色法，如果样品中细菌浓度较低，可以通过选择培养来增加纤维素分解菌的浓度。

某同学采用平板划线法进行接种，在做第二次以及其后的划线操作时，应该从上一次划线的末端开始划线。

为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

试管斜面保存菌种，菌种易被污染或产生变异，若需较长时间保存菌种，可采用甘油管藏的方法。

(答案)(1)氧气乙醛(2)刚果红选择液体末端酒精灯火焰(3)被污染或产生变异甘油管藏2．微生物连续培养时，一部分旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。

研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。

请回答下列问题：(1)用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基从物理性质看属于____________。

【导学教程】2016届高考生物一轮总复习专题二微生物的培养和利用限时检测（选修1）[限时45分钟；满分100分]一、选择题(每小题5分，满分20分)1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中，不正确的是A．操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸C．灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂，并使其溶解D．将培养基冷却到约50 ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板解析琼脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中，溶化后再灭菌。

答案 C2．(2014·南通调研)下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行B．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养解析①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源干上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，C正确；划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确。

答案 B3．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。

某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。

下列相关叙述错误的是A．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B．如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C．若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源D．使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落解析若④为对照实验，则④中培养基应含除苯酚外的其他碳源，⑤中以苯酚作为唯一碳源。

【创新设计】2022届高考生物一轮复习 1-1 微生物的利用课时训练新人教版选修1一、选择题1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①② B．③④ C．①③ D．②④解析平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。

答案 C2．下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是A．细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B．噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖C．灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌D．稀释涂布法分散细菌得到单菌落的效果更好解析细菌繁殖方式是二分裂方式，噬菌体是没有细胞结构的病毒，需要在活细胞中才能生活，在蛋白胨培养基中不能增殖；灭菌目的是防止杂菌和培养菌发生竞争。

答案 B3．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析在细菌计数时，为保证实验结果的准确性，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数；然后求出平均数，再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。

答案 D4．下列对灭菌和消毒的理解不正确的是A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是完全相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法解析消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物不包括芽孢和孢子，灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。