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动物免疫与动物采血一、动物保定在进行动物免疫和动物采血之前，进行动物保定是非常必要的。
正确的抓取固定动物是为了不损害动物健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，保证试验顺利进行。
下面介绍几种常见实验动物的保定方法。
1 小鼠的抓取固定方法小鼠性情温顺，一般不会主动咬人，但取用时动作也要轻缓。
抓取时先用右手抓取鼠尾提起，放在其前，爪能抓牢的物体表面稍后提，或放在实验台上，在其向前爬行时，用左手拇食指迅速提住其后颈部皮肤，把鼠体置于左手心中，将鼠尾用无名指和小指压在手掌上。
右手即可进行各种操作，如注射、灌胃及其他实验操作。
如进行解剖、手术、心脏及尾部采血和尾静脉注射时，则需将小鼠做一定形式的固定，解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧式（必要时先进行麻醉），再用大头针或线绳将鼠前后肢依次固定在支持物上。
尾静脉采血或尾静脉注射时，可用小鼠尾静脉注射架固定；或倒放适当大小和重量的容器，把小鼠放在里面只露尾巴，这种容器能够压住尾部不让活动，同时起，到驱赶血液的作用；或把小鼠放在一黑布口袋里小鼠趋黑，向前爬动，在尾部将小口袋缩口，固定小布口袋后，可进行尾静脉采血或尾静脉注射等操作。
如只想移动小鼠，可用两手把它捧起或用右手拇指和食指的指腹抓住尾部中央将小鼠倒提起来。
2 大鼠的抓取固定方法4-5周龄以内的大鼠和小鼠一样抓住尾部提起来，周龄较大的大鼠尾部皮肤因为容易被剥脱，所以用左手从背部中央到胸部捏起来抓住。
由于大鼠比小鼠牙尖性猛，不易用袭击方式抓取，以防大鼠在惊恐或击怒时咬伤手指，提拿时最好戴上防护手套，轻轻抓住尾巴后提起，置于试验台上，固定方法随操作目的而定。
如需尾静脉取血或注射，可将大鼠固定盒内或用小黑布口袋装大鼠，使其只露尾部；如需腹腔注射或肌肉注射或灌胃，可用右手提住鼠尾，将鼠放在鼠爪能抓牢的物体表面，如铁丝笼子，稍向后拉鼠尾、鼠身被拉长，用左手贴在鼠背，捏紧头顶部和背部皮肤，即可将大鼠固定在左手中，右手可进行其他操作；如需长时间固定操作，可将大鼠四肢固定在木板上，用一根棉绳拉住两只门齿固定在头部后木板上。
42 ·2018.2１血清学检测概述１．１内涵血清学检测过程要借助体外抗原抗体反应对相关参数进行分析，主要是利用了抗原和相应抗体特异性结合的基本特征，利用已知抗原检测猪肉产品中是否也含有相应的抗体，从而有效检测动物的免疫效果，真正践行预防疫病的要求。
１．２血清样品的制备在血清学检测工作开展的过程中，要制备血清标本，要对猪耳静脉或者是前腔静脉进行采血，将血容器放置３０°倾角，室温静置２～４ｈ之间，待其血液全面凝固后，就能保证血清的自然析出［１］。
２血清学检测在动物疫病防控中的应用２０１７年，广西南宁市农业部门依托基层力量，对全市范围内养殖情况进行了摸底排查，期间，对养殖户养殖实际数量、动物疫病发病等具体情况进行了系统化分析。
本文以南宁市动物疫病预防控制中心２０１７年对病猪疫情防控的具体工作为例，介绍了具体的应用措施：２．１试验方法为了进一步落实血清学检测机制，南宁市动物疫病预防控制中心落实常规化抗体监测工作，按照不同情况建立健全系统化监督管控机制，确保相关操作模型和操作效果最优化。
目前，中心主要采取的检测方法就是血凝试验和 试验，能在落实具体问题具体分析的基础上，确保检测项目的完整程度和实效性。
第一，血凝试验，这种应用方式较为简单，且结果能保证准确性，利用平板或者是试管就能进行凝集试验。
例如，猪瘟或者是猪口蹄疫都能使用间接血凝试验进行血清分析，从而得出相应结论。
第二， 试验，这种方式能有效对数据进行对比分析，且试验结果更加具有公信力。
在２０１７年，中心就利用 试验对猪瘟以及猪口蹄疫等疾病的检测结果进行实验室之间的对比分析，真正实现定性分析、半定量检测工序。
另外， 试验的应用技术具有敏感性以及特异性强等特征，能在维护重复性的同时，确保稳定性能符合实际标准。
在工作过程中，控制中心工作人员发现，不同因素会对 试验产生影响，其中，温度、湿度以及时间等都是较为关键的项目。
部分养殖场会借助检测免疫抗体滴度对具体情况予以判定，提高操作简便性，真正优化抗体监测技术，为项目的可持续发展以及推广奠定坚实基础。
畜禽免疫抗体监测采血技术及注意事项作者：罗士仙，康修田，梁盛，等来源：《江西畜牧兽医杂志》 2013年第4期罗士仙1,康修田1,梁盛2,饶鸣鹏3,曾梅群1,张有美4（1.泰和县畜牧兽医局，江西吉安343700；2马市畜牧兽医站；3沙村畜牧兽医站；4澄江畜牧兽医站）畜禽采血是疫病监测、检测、诊断和评估免疫效果的一项前提性工作，采血质量的好坏，直接影响到监测结果，所以作为基层兽医人员，畜禽的采血技术是必须掌握的常规技术之一。
现介绍几种常用的采血方法及注意事项供同行参考。
1采血样前器具的准备根据检测项目准备一次性手套、真空采血管、防护服、口罩、防护帽、采血针、离心管、套猪器、铁链条、一次性注射器、75％酒精棉球、橡皮筋、剪毛剪、灭菌脱脂棉球、采样单、油性记号笔、冷藏包、采样登记表等采样工具。
检查真空采血管管盖是否松动，一次性注射器安装是否密封等。
2畜禽血样采集的常用方法2.1牛血样的采集一般多采用颈静脉采血方法或耳静脉采血方法采集血样。
2.1.1牛颈静脉采血。
牛颈静脉分为颈内静脉和颈外静脉，颈内静脉较小，颈外静脉较粗，位于颈部肩骨乳突肌与胸头肌间的凹窝内。
采血前助手要用铁链栓树桩或电线杆保定好牛颈部，使其头向一侧上仰，让牛侧颈静脉充分暴露出来，采血者站立于牛颈部颈静脉暴露一侧，取真空采血针头，以拇指、食指和中指夹住，依靠腕力阴劲，沿颈静脉线走向垂直扎进颈静脉上的皮肤，然后调整位置，针头一旦进入血管，血液马上会喷射而出。
待血量达到要求后，拔出针头，用消毒过的干棉球按压针眼，轻压止血。
采血完毕后，及时做好血样的编号和采样表的填写工作。
2.1.2牛耳静脉采血。
①真空采血管牛耳静脉采血。
采血地点选择要平整、松软、干燥、有栓桩的场地，防止牛挣扎导致悬挂被勒死而出意外。
采血前助手用绳子把牛鼻栓两侧同时绑牢，先用铁链条栓树桩或电线杆保定好牛颈部，铁链条要调紧点，固定时先松后紧，避免采血时牛挣扎，同时用绳子把牛的双角固定在树桩或电线杆上，接着用一手压迫耳静脉近心端，或用皮筋绑紧耳根，另一手用75％酒精棉球涂擦牛耳静脉，使其耳静脉充盈。
常用血清学检测方法介绍一、酶联免疫吸附试验诊断技术目前，该项技术已在兽医学上得到广泛的应用，大多数动物传染病都已经研制成ELISA检测方法。
1、酶联免疫吸附试验的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。
2、ELISA的类型根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
用于动物疫病检测的ELISA主要有以下几种类型：①.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法。
在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质、微生物病原体第二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。
例如猪瘟病毒检测ELISA、禽流感病毒抗原捕获ELISA，就是根据这种原理设计的。
②.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。
用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。
与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。
乙肝HBs的检测常采用本法。
本法关键在于酶标抗原的制备，需要根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。
此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于于间接法。
此外，该方法不受被检动物种属差异的限制。
③.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。
其原理为利用酶标记的抗体（抗免疫球蛋白抗体），检测与固相抗原结合的受检抗体（见图1）。
畜禽免疫抗体监测血样采集与血清分离保存技术畜禽血样的采取是动物免疫抗体监测和疫病监测工作中的重要内容。
在畜禽血样的采取过程中，其做好采前准备、采血方法、采集时机、血样运送、保存和处理等环节，都直接关系到免疫抗体检测结果的准确性及可靠性，笔者通过多年的实际操作，积累了一定的方法和经验，供同行参考。
1采血前的准备采血前应穿好工作服，备好保定器械，v形管、v形管架，一次性注射器(采血针)、记号笔、酒精棉球、干棉球、相关表格等。
16号针头、9号和7号头皮针若干，镊子、剪刀、酒精(75％)、药棉若干、保定棍和绳2副、一次性5ml真空管若干。
2血样的采集根据畜禽种类、所需血样或血清的数量确定采血部位、器械及采血量。
禽类采翅静脉、猪采前腔静脉或耳静脉、牛采颈静脉或耳静脉、羊采颈静脉：禽类用5ml一次性医用注射器，猪、牛、羊用10～20ml 一次性医用注射器：禽类采血量不少于2ml，猪、牛、羊不少于5ml。
2．1猪血样采集2．1．1猪的保定 (1)徒手保定法：适用于中、小猪，可根据具体情况采用正提、倒提或横卧方法保定。
保定人抓住猪的双耳向上提起，两腿夹住猪背。
也可用双手抓住猪的两后肢，向上倒提后，两腿夹住其肩胸部。
保定中猪时，保定者应背靠圈栏增加稳定性。
横卧保定由一人或二人操作。
保定者从背侧将猪后肢及前肢或耳抓住后，用力提起横卧放倒，并紧压其头部及后躯。
(2)器械保定法：适用于成年公猪、母猪或野性较强的猪。
一种为鼻绳保定，即用直径1cm、长3～4m的一根绳子，一端结成直径为20cm的活套，将其套于猪的上颌犬齿后方后，收紧环套，另一端拉紧或缠绕于栏杆上。
另一种为鼻捻棒保定，即用1m长木棒，一端栓一直径20cm的绳套，同上法套用于猪上颌犬齿后方后，捻转收紧绳套将猪保定。
2．1．2采血猪血样采集耳静脉或前腔静脉，猪的采血最好是空腹，在早上或午后进行。
采血场所有充足的光线；室温夏季最好在25～2 8℃，冬季15～20℃为宜。
兔抗牛血清白蛋白免疫血清的制备及鉴定【摘要】目的：制备兔抗牛血清白蛋白血清，并对其进行效价的鉴定。
方法：由牛血清和石蜡油、羊毛脂、卡介苗等进行研磨制成弗氏完全佐剂，对兔子不同部位进行一周一次连续四周的抗原免疫，采取颈动脉放血收集并分离血清，再通过双向免疫扩散实验进行血清效价的鉴定。
结果：：双向琼脂扩散在BSA0．5g/mL 的浓度时，测得抗血清效价为1：8结论：BSA免疫家兔可获取效价较高的抗血清。
【关键词】牛血清白蛋白（BSA）、效价、免疫Preparation and identification of rabbit anti-BSA serum Abstract: Objective The antisera of BSA (bovine serum albumin) was prepared and the titer was identified. Methods The Freund’s adjuvant was grinded with the BSA, paraffin oil, lanolin and bacille Calmette-Guerin (BCG）. Then the rabbit was immunized for four times in a month. After a week carotid bloodletting had been done to get the antisera from the rabbit. At last the titer was identified by double immunodiffusion test. The titer of antiserum was 1:8 in double immunodiffusion .Conclusion:The higher titer of antiserum is obtained by immunizing rabbits with BSAKEY WORDS Bovine serum albumin(BSA),Titer,lmmunity可溶性抗原（入血清、细胞浸出液、外毒素等）和相应抗体结合，在食量电解质存在下，经过一定时间，在二者比例适当时形成肉眼可见的沉淀物。
