医学分子生物学复习提纲
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分子生物学需要掌握的重点一、DNA、RNA、蛋白质、质粒、基因、端粒、聚合酶、密码子、突变、变性的概念或结构、性质及特点;二、复制、转录、逆转录、翻译、加工修饰、靶向输送的主要过程及特点;三、癌基因的概念、原癌基因产物的类型及细胞定位、癌基因活化致癌的主要机制;四、常用分子生物学技术的原理、主要步骤、酶学及特点;五、基因表及其调控的原理、主要过程或步骤,乳糖操纵子的正、负调节机制;六、常用的基因诊断及基因治疗技术;七、基因克隆、基因诊断、基因治疗、管家基因、抑癌基因、Klenow片段、核蛋白体、限制性内切核酸酶、人类基因组计划、原位杂交的概念;八、双脱氧末端终止法DNA测序、重组DNA技术的主要步骤;九、结构基因、顺式作用元件、启动子、遗传密码、反式作用因子、氨基酰-tRNA、基因组文库、DNA多态性、转位因子、探针、Tm值、DNA微阵列、DNA甲基化的概念、性质;十、核酸分子杂交的主要类型、PCR的主要步骤及引物设计;十一、DNA、RNA及多肽链的合成方向;十二、真核细胞转染的基本方法;十三、细胞周期的主要调控点;十四、DNA损伤及修复的主要类型和机制;十五、基因文库筛选的主要方法及原理。
名词解释●质粒——是细菌细胞内携带的染色体外的DNA分子,是共价闭合的环状DNA分子,能独立进行复制。
质粒只有在宿主细胞内才能够完成自己的复制。
●基因——指贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列及表达这些信息所需的全部核苷酸序列,是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位。
●癌基因——是细胞内控制细胞生长和分化的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性,它的结构异常或表达异常,可以引起细胞癌变。
●基因克隆——是指把一个生物体的遗传信息(基因片段)转入另一个生物体内进行无性繁殖,得到一群完全相同的基因片段,又称DNA克隆。
●抑癌基因——是指存在于正常细胞内的一大类可抑制细胞生长并具有潜在抑癌作用的基因,当这类基因在发生突变、缺失或失活时可引起细胞恶性转化而导致肿瘤发生。
临床分子生物学检验复习提纲临床分子生物学是现代医学中非常重要的一个领域,它涉及到了分子生物学和临床医学的结合,以及各种分子生物学技术在临床诊断和治疗中的应用。
以下是一个临床分子生物学检验的复习提纲,希望能够帮助你更好地准备考试。
一、分子生物学基础知识复习1.DNA结构和功能-核苷酸的组成和结构-DNA链的方向性-DNA的雙螺旋结构-DNA复制的过程2.RNA结构和功能-mRNA、tRNA和rRNA的结构和功能-转录和翻译的过程3.基因组和染色体-基因组的组成和结构-染色体结构和功能-遗传密码子表4.基因表达调控-转录调控的机制-翻译调控的机制-转录后调控的机制5.基因突变和遗传变异-突变的类型和机制-染色体缺失、重复和易位等遗传变异二、临床分子生物学技术复习1.PCR技术-PCR的原理和步骤-PCR引物设计和优化-PCR产物的检测和分析2.DNA测序技术- Sanger测序法的原理和步骤-高通量测序技术的原理和应用3.基因组学研究技术-基因芯片技术的原理和应用-下一代测序技术在基因组学研究中的应用4.基因突变检测技术-PCR-RFLP分析-聚合酶链反应单链构象多态性分析-测序检测技术在基因突变检测中的应用5.基因表达分析技术-实时荧光定量PCR- Northern blotting-基因芯片技术在基因表达分析中的应用三、临床分子诊断和治疗复习1.临床遗传病的分子诊断-基因突变检测在临床遗传病诊断中的应用-基因芯片技术在临床遗传病诊断中的应用-高通量测序技术在临床遗传病诊断中的应用2.分子病理学的应用-分子病理学技术在肿瘤诊断中的应用-微卫星不稳定性的检测和分析-液体活检技术在肿瘤诊断中的应用3.分子靶向治疗技术-靶向药物的分子设计原理-靶向药物的应用和限制-基因突变检测在靶向治疗中的应用4.群体遗传学和个体化医疗-群体遗传学研究的意义和方法-个体化医疗的概念和发展-药物基因组学在个体化医疗中的应用。
分子生物学复习提纲免责声明:本资料仅供临床医学10级学习交流使用,基本覆盖上课重点。
由于课程的特殊性,特列成专题形式,个专题中重复部分在相应专题中都会覆盖。
凡应只使用本资料应试而造成的一切不良后果,均由使用者承担,本人不承担任何责任。
第一讲基因表达调控(转录水平的调节是基因表达调控的关键)分子生物学:是以生物大分子为研究对象,从分子水平去研究并解释一切生物学现象并在分子水平上改造和利用生物的一门新兴科学。
基因:编码RNA或蛋白质的全部核苷酸序列,包括结构基因和调控基因。
基因组:一个单倍体生物所含有的全部DNA,即DNA上所有的基因。
结构基因:编码RNA或蛋白质的核苷酸序列。
(原核:多顺反子、无内含子;真核:单顺反子、有内含子)转录单位:从启动子到转录终止子之间的DNA节段。
基因表达:是指DNA携带的遗传信息通过转录传递给RNA,mRNA通过翻译将基因的遗传信息在细胞内合成具有生物功能的各种蛋白质的过程。
基因表达调控:是指对基因组中某一基因或一些功能相近的基因表达开启、关闭和表达强度的直接调节。
遗传密码:mRNA上按5’到3’方向排列的每三个核苷酸称遗传密码。
内含子:DNA或RNA中的非编码序列。
外显子:DNA或RNA中的编码序列。
多顺反子:一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码几条功能相关的多肽链。
单顺反子:一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码一条多肽链的生成。
启动子:是转录开始时RNA聚合酶识别、结合并开始转录起始所需的一段DNA序列。
终止子:提供转录终止信号的一段DNA序列。
增强子:能加强其上游或下游基因转录的DNA序列。
SD序列:mRNA5’端在起始密码子AUG 上游3~11bP处,含A-G 短序列,容易与16S r RNA3’-端含U-C 序列互补配对的序列称为SD 序列,它对mRNA与核糖体的有效结合并翻译至关重要。
开放阅读框ORF:始于起始密码子并终于终止密码子的一串密码子所组成的核苷酸序列。
分子生物学复习提纲(附考试原题)一、了解基因工程的主要研究成就。
(一)植物基因工程当前已鉴定和克隆化的植物基因有数百种,重组植物的野外试验已达千余宗。
与农业中的除草剂、抗昆虫、抗病(抗真菌、抗病毒)、抗不良环境因素、提高产量的光合作用、以及提高蛋白质有关。
(二)动物基因工程最突出——转基因动物及其发展。
1983年美国将生长激素基因注入小鼠受精卵——超级鼠。
缺点在于其盲目性。
外源性DNA引入受体细胞后可随机地插入受体细胞基因组中的任意位置,容易导致内源性有利基因的破坏和识货或激活有害基因。
表达水平难以预料。
目标:提高基因正常转化的效率,实现基因的定位整合。
(三)基因工程多肽药物与疫苗多肽药物:人胰岛素、人生长激素、干扰素、白细胞介素、组织血纤维蛋白溶酶原激活剂、肿瘤坏死因子、集落刺激因子……疫苗:细菌疫苗:麻风杆菌、百日咳杆菌、淋球菌……病毒疫苗:乙肝、甲肝、带疱、巨细胞病毒……寄生虫疫苗:疟原虫、利什曼虫、血吸虫……(四)基因诊断与基因治疗原指遗传性疾病的诊断,主要利用DNA探针(单链DNA小片段用核素、酶、荧光分子或化学催化剂等标记,之后同被检测的DNA中的同源互补杂交,从而检出所要查明的DNA)技术。
如诊断镰贫、地贫,也可诊断传染性疾病如结核。
多聚酶链反应PCR是一种体外扩增特异性DNA片段的技术。
基因治疗一般指将正常外源基因导入生物体靶细胞内以弥补所缺失的基因、关闭或降低异常表达的基因,以达到治疗遗传性疾病的目的。
方法普片采用逆转录病毒作为载体的基因导入法。
作为载体的逆转录病毒已缺失功能蛋白基因。
目前研究多属于单基因缺陷引起的遗传疾病基因治疗,如血友病,贫血等。
肿瘤和传染病也在研究。
(五)环境检测与净化环境监测:可用基因探针或PCR技术检测水中微生物。
环境净化:重组质粒导入细菌,降解有机物、农药等——超级菌;促进酶工业进步,提升经济效益等。
*二、掌握分子生物学的中心法则。
*三、掌握核酸的基本组成成分、基本性质。
分子生物学一、名词解释1. 中心法则是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。
也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。
2. 半保留复制是亲代的两条链解开,每条链作为新链的模板,从而形成两个子代DNA分子,每一个子代DNA分子包含一条亲代链和一条新合成的链。
3. 重组除了被复制之外,细胞DNA还能发生重排,产生具有不同架设甚至新基因的新分子。
这一性质被泛称为重组。
4. 突变DNA序列中可遗传的改变称为突变。
5. 等位基因同源染色体含有以相同顺序出现的相同基因,这些基因不一定完全相同,他们在序列和功能上可能有少许差异,这些基因被称为等位基因6. 同源染色体在二倍体生物中对等的染色体叫做同源体或同源染色体。
二、选择题1. RNA聚合酶核心酶α、β和β’ 亚基一起构成了RNA聚合酶核心。
2. 碱基比例计算①双链DNA分子中,两互补碱基相等;任意两个不互补碱基之和恒等,各占碱基总数的50%,且不互补碱基之和的比值等于1.②双链DNA分子中A+T/G+C等于其中任何一条链的A+T/G+C③双链DNA分子中,互补的两条链中A+G/T+C互为倒数.即两不互补碱基之和的比值等于另一互补链中这一比值的倒数.④双链的DNA分子中,A+T占整个DNA分子碱基总数的百分比等于其中任何一条链中A+T 占该链碱基总数的比例3. PCR程序设定长的引物,非常容易引起发夹结构,或者其他互补情况,最后形成二聚体,引物CG含量到55%会稳定很多。
PCR聚合酶链式反应,用于体外扩增所需要的目的片段。
①DNA一般为双链。
首先,我们需要把它进行解链,从而产生两条单链,让引物结合上去。
达到复制的目的。
一开始我们设置的高温,刚好能够使得DNA双链解体。
约94~98℃,用3到5min即可。
此反应中我们用的TAQ酶,嗜热杆菌中提取的DNA聚合酶,也是高温启动的,初始的高温适合其开始在体系中的活性,但是约15分钟的高温会导致其半衰期,从而失去活性,使得反应效率降低,所以高温的时间不宜过长。
分子生物学复习资料全1. 概述- 分子生物学是研究生物体分子层面结构和功能的科学领域。
- 分子生物学主要关注DNA、RNA、蛋白质等生物分子的合成、结构和功能。
2. DNA- DNA是遗传物质,储存了生物体的遗传信息。
- DNA由核苷酸组成,包括脱氧核糖核苷酸和四种碱基:腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳕嘧啶。
- DNA的双螺旋结构由两条互补链以螺旋形式相互缠绕而成。
3. RNA- RNA在细胞中起着重要的生物学功能。
- RNA由核苷酸组成,包括核糖核苷酸和四种碱基:腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶和胞嘧啶。
- RNA分为多种类型,包括mRNA、tRNA和rRNA等。
4. 蛋白质合成- 蛋白质合成是通过转录和翻译两个过程完成的。
- 转录是将DNA转录成mRNA的过程。
- 翻译是将mRNA翻译成蛋白质的过程。
5. 基因调控- 基因调控是控制基因表达水平的过程。
- 基因调控包括转录因子的结合、DNA甲基化和染色质重塑等。
6. 克隆技术- 克隆技术是复制生物体基因或DNA序列的方法。
- 主要克隆技术包括限制性内切酶切割、聚合酶链式反应和DNA串联。
7. PCR- PCR是一种通过体外扩增DNA片段的技术。
- PCR包括三个步骤:变性、退火和延伸。
8. 分子遗传学- 分子遗传学研究基因在遗传传递中的分子机制。
- 分子遗传学主要研究基因突变、基因重组和基因表达等。
9. DNA测序- DNA测序是确定DNA序列的方法。
- DNA测序技术包括Sanger测序和高通量测序等。
10. 基因工程- 基因工程是利用DNA技术修改或转移基因的技术。
- 基因工程在农业、医药和生物学研究等领域有着广泛的应用。
以上是关于分子生物学的简要复习资料,希望能对你的学习有所帮助。
第一章分子生物学发展简史一.名词解释分子生物学:分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐述蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控的机理的学科。
基因组:是某个特定物种细胞内全部DNA分子的总和二.论述题1写出分子生物学事件简表并简单叙述3个重要事件2。
简述现代分子生物学的建立和发展阶段①遗传信息传递中心法则的建立②对蛋白质结构与功能的进一步认识③DNA双螺旋发现三.填空题1。
DNA重组技术的具体内容就是采用人工手段将不同来源的含某种特定基因的DNA片段进行重组,以达到改变生物基因类型和获得特定基因产物的目的的一种高科学技术。
2. Buchner兄弟19世纪末提出酶,脲酶的提纯和结晶证明酶的本质是蛋白质3。
Watson和Crick提出了DNA双螺旋模型4。
Morgan发现了连锁遗传规律5.Avery证明了DNA是遗传学信息的载体6。
Oswald Avery确定DNA是遗传物质7。
Thomas Roderick在1986年提出基因组学8.Cohen和Berg开创了基因工程9 基因组学是指对所有基因进行基因组作图(包括遗传图谱、物理图谱、转录本图谱 ) ,核苷酸序列分析,基因定位和基因功能分析的一门科学.10 生物信息学是指应用信息科学的理论、方法和技术,管理、分析和利用生物分子数据的学科。
四.缩略词DNFB 二硝基氟苯 PCD 细胞程序性死亡 RT 逆转录酶RE 限制性内切酶 DNA 脱氧核糖核酸第二章遗传物质的分子本质一:名词解释核酸的变性:是指核酸受到加热、极端的pH或离子强度的降低等因素或特殊的化学试剂的作用,其双螺旋区的氢键断裂,变成单链的过程,其中并不涉及共价键断裂.复性:当去除变性因素是,解开的互补单链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象称为复性。
二:论述题1.化学断裂法基本原理是什么?碱基的修饰,碱基的脱落,戊糖—磷酸骨架被特异性切割,从而产生一组长度不同的DNA链降解产物,经聚丙烯凝胶电泳分离和放射自显影之后,可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列.2.James Watson和Francis Crick于1953年提出的B型双螺旋,其主要内容是?(1)DNA由两条呈反平行的多聚核苷酸链组成,两条链相互缠绕形成右手双螺旋;(2)组成右手双螺旋的两条链是互补的,它们通过特殊的碱基对结合在一起,碱基配对规则是一条链上的A总是与另一条链的T,G总是和C以氢键配对.其中AT碱基对有二个氢键,GC碱基对有3个氢键;(3)碱基对位于双螺旋的内部,并垂直于暴露在外的脱氧核糖磷酸骨架。
分子生物学复习资料(第一版)一名词解释1 Southern blot / Northern blot—DNA斑迹法 / RNA转移吸印技术。
是为了检测待检基因或其表达产物的性质和数量(基因拷贝数)常用的核酸分子杂交技术。
二者均属于印迹转移杂交术,所不同的是前者用于检测DNA样品;后者用于检测RNA样品。
2 cis-acting element / trans-acting factor—顺式作用元件 / 反式作用因子。
均为真核生物基因中的转录调控序列。
顺式作用元件是与结构基因表达调控相关、能被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定DNA序列,包括启动子和上游启动子元件、增强子、反应元件和poly(A)加尾信号。
反式作用因子是能与顺式作用元件特异性结合、对基因表达的转录起始过程有调控作用的蛋白质因子,如RNA 聚合酶、转录因子、转录激活因子、抑制因子。
3VNTR / STR—可变数目串联重复序列 / 短串联重复。
均为非编码区的串联重复序列。
前者也叫高度可变的小卫星DNA,重复单位约9~24bp,重复次数变化大,变化高度多态性;后者也叫微卫星DNA,重复单位约2~6 bp,重复次数约10~60次,总长度通常小于150bp 。
(参考第7题)4 viral oncogene / cellular oncogene—病毒癌基因 / 细胞癌基因。
病毒癌基因指存在于逆转录病毒中、体外能使细胞转化、体内能导致肿瘤发生的基因;细胞癌基因也叫原癌基因,指存在于细胞内,与病毒癌基因同源的基因序列。
正常情况下不激活,与细胞增殖相关,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。
当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。
第1 页/共16 页5 ORF / UTR—展开阅读框 / 非翻译区。
均指在mRNA中的核苷酸序列。
前者是特定蛋白质多肽链的序列信息,从起始密码子开始到终止密码子结束,决定蛋白质分子的一级功能;后者是位于前者的5'端上游和3'端下游的、没有编码功能的序列,主要参加翻译起始调控,为前者的多肽链序列信息改变为多肽链所必须。
基因:具有特定生物遗传信息的DNA序列,在一定条件下能够表达这种遗传信息,产生特定的生理功能。
基因是遗传的基本单位。
移动基因(movable gene) :又叫转位因子(transposable elements),由于它可以在染色体基因组上移动,甚至可在不同染色体间跃迁,故又称跳跃基因(jumping gene),后来称这种DNA片段为插人序列(insertion sequences,IS),现在一般叫做IS因子(1S elements),其长度介于数百个到数千个碱基对之间。
断裂基因(split gene) :在真核细胞的核苷酸序列中间插入与氨基酸编码无关的DNA间隔区段,使一个有功能的结构基因分隔成不连续的若干区段,将含有该间隔区段的DNA片段称为断裂基因(split gene)。
重叠基因(overlapping gene) :不同基因的核苷酸序列有时为相邻两个基因共用,将核苷酸彼此重叠的两个基因称为重叠基因。
假基因(Pseudogenesi):在珠蛋白基因簇(gene cluster)各片段核苷酸序列分析时发现,除了有正常的功能基因之外,还有功能失活的特殊序列片段,它不能行使表达功能。
该类无表达功能的畸变核苷酸序列片段,称为假基因。
常用ψ表示。
重复序列及重复基因: 指序列的重复性。
可分为四种类型:
1单拷贝序列 (unique sequence)(不重复序列):2低重复序列: 3中度重复序列 (moderatedly repetitive sequence):
4高度重复序列(highly repetitive sequence):卫星DNA (satellite DNA)及微卫星DNA微卫星:
同一物种的基因组DNA含量总是恒定的,一个单倍体基因组中的全部DNA量称为该物种DNA的C 值(C value)。
与进化复杂性不一致的C值反常现象称为C值矛盾
启动子是启动基因转录所必需的一段DNA顺式调控元件。
多顺反子(poly-cistron):原核基因是多顺反子(poly-cistron),通常是几个相关的结构基因(编码的)同时转录得到多个mRNA。
SD序列(Shine-Dalgarno sequence, SD sequence)是mRNA能在细菌核糖体上产生有效结合和转译所需要的序列。
SD序列与16S rRNA的3’末端碱基互补,以控制翻译的起始
反式作用因子是指能与顺式作用元件结合,调节基因转录效率的一组蛋白质,其编码基因与作用的靶DNA不在同一DNA分子上。
顺式作用元件:DNA中与转录启动和调控有关的核苷酸序列。
按功能特性分为
启动子(terminacer)等
II型限制性内切酶:一般识别由4-6核苷酸组成的特定序列,这些核苷酸对呈回文对称结构;其切割作用是使磷酸二酯键断裂,产生两种类型的末端:平端和黏性末端;5´端一定带有-P基团,3´端一定带有-OH基团。
同尾酶:识别序列不同,但酶切后产生同样的黏性末端的两种酶。
同裂酶:来源不同,但能识别和切割同一位点,但在切点位置上对甲基化碱基的敏感性不同。
DNA连接酶(ligase):能够催化在2条DNA链之间形成磷酸二脂键的酶。
(相邻的3 ´-OH和5 ´ -P之间形成磷酸二酯键)。
两种类型
大肠杆菌,分子量7.5KD;
T4噬菌体,分子量为6.0KD
辅基不一样,T4DNA连接酶反应时需要ATP,而大肠杆菌DNA连接酶需要NAD。
为了能够在寄主细胞中进行繁殖,必须将DNA片段连接到一种特定的、具有自我复制能力的DNA分子上。
这种DNA分子就是基因工程载体(vector)载体的本质是DNA(少数为RNA)
在DNA复性过程中,把不同的DNA单链分子放在同一溶液中,或把DNA与RNA放在一起,只要在DNA或RNA的单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,就可以在不同的分子间形成杂化双链,这种现象称为核酸分子杂交(hybridization)。
常用的印迹技术
DNA印迹(Southern blotting)
RNA印迹(Northern blotting)
蛋白印迹(Western blotting)
原位杂交(in situ hybridization)
斑点印渍(dot blotting)
DNA点阵(DNA array)
DNA芯片(DNA chip)
核酸分子杂交是分子生物学领域应用最广泛的技术之一。
⏹特点:
灵敏度高、特异性强;
用于DNA和RNA的定性、定量检测。
⏹用途:
检测特异DNA序列的拷贝数、特定DNA区域的限制性内切酶图谱,判定基因的缺失、插入、重排现象;
特异基因克隆的筛选;
核酸序列的初略分析;
PCR技术的分子基础。
⏹带有放射性元素、生物素或其他活性物质标记的某种特定的DNA或RNA片段称为探针(probe)
基因组DNA探针(尽量选外显子);
cDNA探针(不含内含子,特异性高);
RNA探针;
寡聚核苷酸探针。
探针选择的最基本原则:高度特异性
template(模板)
primers(引物)
Taq enzyme(酶)
10×PCR buffer(缓冲)
Mg2+
dNTP
pre-denaturation(预变性)
denaturation(变性)
annealing(退火)
elongation(延伸)
cycles:25-30
原理类似DNA的体内复制
在模板DNA、dNTP、Mg2+、合适Buffer等条件下,用耐热的Taq聚合酶代替DNA聚合酶,
用合成的DNA引物代替RNA引物,经过DNA变性、引物与模板结合(复性)和延伸3个步骤的反复循环(25 30次),使目的DNA呈指数扩增。
基因克隆(又称分子克隆,molecular cloning)----通过体外重组技术,将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体,并导入受体细胞,扩增形成大量子代分子的过程。
目的基因的获得
载体和目的基因的重组
重组DNA导入宿主细胞
重组DNA的筛选和鉴定
功能蛋白的表达
用DNA重组技术把某种生物细胞的所有基因分区组装到载体(质粒或噬菌体)上,并将载体导入宿主细胞(如大肠杆菌)中进行克隆培养和保存,这种克隆群体就象图书馆(library)的书库一样,称为文库。
☐基因组DNA文库
☐cDNA文库(complementary DNA Library )
Southern 法筛选
内切酶消化重组子经凝胶电泳分离后,将DNA片段转印到硝酸纤维膜上,再用探针进行分子杂交,鉴定重组子中的插入片段是否是所需的靶基因片段
基因突变(gene mutation)是基因组DNA分子在结构上发生碱基对组成或排列顺序的改变(通常它只涉及基因中部分序列的变化),并引起个体表型的改变, 而使生物体发生遗传性变异。
基因突变的类型:碱基替换突变,碱基插入突变,碱基缺失突变。
■ 移码突变(Frame-shift mutation)
DNA链上插入或丢失1个、2个甚至多个(但不包括三个或其倍数)碱基,导致在插入或丢失碱基部位以后的编码都发生了相应改变。
■ 整码突变(Codon mutation)
如插入或丢失部位的前后氨基酸顺序不变。
癌基因(oncogeny,onc)
是指能导致细胞恶性转化的核酸片段。
主要包括病毒癌基因、细胞癌基因以及与细胞生长因子及其受体、蛋白激酶、转录因子及其信息加工、传递等有关的基因。
抑癌基因(tumorsuppressor gene,TSG)
又称抗癌基因(anti-oncogene)、隐性癌基因(recessive oncogene),是正常细胞中存在的对原癌基因表达功能进行调节的基因,可抑制细胞生长并能潜在抑制癌变。
它的失活或突变具有促进肿瘤生长的潜势。
抑癌基因活性的下降(功能缺失突变)也可引起癌症的发生。
Rb (视网膜母细胞瘤) p53APC (腺瘤样结肠息肉
基因诊断的概念:利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法,直接检测基因结构(DNA水平)及其表达水平(RNA水平)是否正常,从而对疾病做出诊断的方法。
基因诊断的常用方法:
核酸分子杂交技术
⏹限制性内切酶图谱分析法
⏹DNA限制性片段长度多态性(RFLP)
⏹等位基因特异寡核苷酸探针(ASO)杂交法
PCR
基因测序
基因芯片技术
基因治疗(Gene Therapy):将有功能的基因转移到病人的细胞中以纠正或置换致病基因的一种治疗方法,特指将有功能的目的基因导入靶细胞后与宿主细胞内的基因发生整合,成为宿主细胞遗传物质的一部分,目的基因的表达产物起到对疾病的治疗作用。
基因治疗的措施
☐基因治疗(Gene Therapy)
☐基因置换(gene reptacement)
☐基因修正
☐基因修饰(gene augmentation)
☐基因失活(gene inactivation)
受体细胞:生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎
分子生物学在畜禽诊断中的应用。