实验五薄层色谱实验
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实验五类胡萝卜素的提取和薄层色谱实验五:类胡萝卜素的提取和薄层色谱一、实验目的1.学习和掌握类胡萝卜素的基本性质和提取方法。
2.了解和掌握薄层色谱的基本原理和操作方法。
3.通过实验,亲手操作提取类胡萝卜素,并利用薄层色谱对其进行分析。
二、实验原理类胡萝卜素是一类重要的天然色素,呈红色或黄色,主要存在于植物中,如胡萝卜、番茄、菠菜等。
其结构包含多个共轭双键,具有较高的稳定性,因此适用于提取和分析。
类胡萝卜素的提取主要采用有机溶剂萃取法。
通过使用具有极性的有机溶剂,如乙醇、丙酮等,将类胡萝卜素从植物材料中溶解出来,再利用类胡萝卜素在极性溶剂中的溶解度随着温度的升高而增大的性质,加热以提高其溶解度,从而得到类胡萝卜素。
薄层色谱是一种常用的分离和分析方法,其基本原理是利用不同物质在固定相和移动相之间的分配比的不同,从而实现物质的分离。
通过将待测样品点在薄层板上,固定相为硅胶或纤维素等,移动相为有机溶剂或混合溶剂等,当移动相在固定相上移动时,不同物质会以不同的速度移动,从而实现分离。
三、实验步骤1.准备试剂和器材:乙醇、丙酮、石油醚、硅胶G、玻璃板、点样器、展开剂、显色剂等。
2.样品处理:选取新鲜的胡萝卜或菠菜,洗净后烘干,磨成粉末。
称取适量粉末,加入适量的乙醇和丙酮混合液(体积比1:1),搅拌均匀后,静置10分钟。
3.装柱:将硅胶G研碎成粉末,加入适量石油醚溶解,制成硅胶G薄层。
将硅胶G薄层倒入玻璃板中,用玻璃棒轻轻搅拌,使硅胶G均匀分布在玻璃板上。
4.点样:用点样器取少量待测样品,轻轻点在薄层板上,避免样品重叠。
5.展开:将薄层板置于展开剂中(通常为石油醚和乙酸乙酯的混合液),展开剂会向上移动,带动样品向上移动。
当展开剂移动至薄层板末端时,取出薄层板。
6.显色:将展开后的薄层板置于浓氨水蒸气中熏蒸数分钟,取出后用乙醇-乙酸乙酯溶液进行喷雾显色。
7.观察和记录:观察显色后的薄层板上各色带的颜色和位置,根据各色带的Rf值(比移值)进行定性和定量分析。
薄层色谱(TCL )实验一、实验目的1、 掌握薄层色谱操作技巧2、 了解薄层色谱的基本原理和应用二、实验原理1、原理薄层色谱是一种微量分析的分离过程,它将样品点在以玻璃板或铝、塑料等片材为载体的多孔吸附剂薄层的固定相上,利用流动相在特定的展开室中将混合物中的组份推移到不同距离处,在色谱展开整个过程中,样品的成份受到正反不同的力的作用。
(1) 流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。
(2) 样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极-(诱导)-偶极相互作用,氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。
由于样品组份与流动相和固定相之间的相互作用力程度不同,整个毛细管流动过程中分离运动都在进行。
基于这点,TLC 系统(流动相和固定相)必须与样品很好地匹配。
用显色试剂处理,许多组份可在日光或紫外灯光下检视。
色谱可用肉眼或使用光密度计和照相机记录或影像系统方法来评价。
2、薄层色谱的用途1)化合物的定性检验通过与已知标准物对比的方法进行未知物的鉴定。
在条件一致的情况下,纯化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离,称比移值(R f 值)。
利用薄层色谱法可鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似化合物是否为同一种物质。
影响比移值的因素很多,如薄层的厚度,吸附剂颗粒的大小,酸碱度、活性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发度等。
所以要获得比移值重现性就比较困难。
为此,在测定某一式样时,最好用对照品和样品同时对照进行。
21d d R f 2)快速分离少量物质(几到几十u g ,甚至0.01u g )3)跟踪反应进程,在进行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失,来判断反应是否完成。
4)化合物纯度的检验(只出现一个斑点,且无脱尾现象,为纯物质)3、主要操作步骤d 1d 2薄层板的制备;薄层板的活化;薄层板色谱展开;薄层色谱显色与分析。
四、薄层色谱操作技巧1、手工自制板1.1玻璃板的要求:用于制备薄层板的玻璃板要求表面光洁、平整,最好使用厚薄1~2mm 的优质平板玻璃,普通窗玻璃一般不宜用于制作薄层板,玻璃板需洗净至不挂水,晾干,贮存于干燥洁净处备用。
薄层色谱法实验报告一、实验目的1、掌握薄层色谱法的基本原理和操作方法。
2、学习利用薄层色谱法分离和鉴定混合物中的成分。
二、实验原理薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,TLC)是一种快速、简便、灵敏的分离和分析方法。
它基于混合物中各组分在固定相(吸附剂)和流动相(展开剂)之间的分配系数不同,从而在薄层板上实现分离。
吸附剂通常是硅胶、氧化铝等具有吸附性能的物质,它们均匀地涂布在玻璃板或塑料板上形成薄层。
展开剂则是一种能够在吸附剂上移动的溶剂系统。
当样品点在薄层板的一端,放入装有展开剂的层析缸中时,展开剂在毛细作用下沿着薄层上升,样品中的各组分随着展开剂的移动而在薄层上发生不同程度的吸附和解吸,导致它们在薄层上的移动速度不同,最终实现分离。
通过与已知标准物质在相同条件下的色谱行为进行比较,可以对样品中的成分进行定性分析。
同时,根据斑点的大小和颜色深浅,可以进行半定量分析。
三、实验仪器与试剂1、仪器玻璃板(5×20cm)层析缸点样毛细管(内径 05mm)喷雾器紫外光灯(254nm 和 365nm)烘箱2、试剂硅胶 G羧甲基纤维素钠(CMCNa)水溶液(05%)展开剂(石油醚乙酸乙酯体系,不同比例)样品溶液(混合有机化合物)标准物质溶液(已知有机化合物)四、实验步骤1、制板将硅胶 G 与适量的 05% CMCNa 水溶液在研钵中充分研磨,调成均匀的糊状。
用涂布器将糊状物均匀地涂布在玻璃板上,厚度约为 025 05mm。
置于水平台上晾干,然后在 105℃烘箱中活化 30 分钟,取出后置于干燥器中备用。
2、点样用点样毛细管吸取样品溶液和标准物质溶液,在距薄层板一端 1 15cm 处轻轻点样,点样直径一般不超过 2mm,每次点样后用电吹风冷风吹干,重复点样 2 3 次,以保证样品量足够。
3、展开在层析缸中倒入适量的展开剂,使其高度不超过 1cm。
将点样后的薄层板小心放入层析缸中,盖上盖子,使展开剂蒸气饱和层析缸 5 10 分钟。
薄层色谱实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过薄层色谱技术对混合物中的化合物进行分离和鉴定,掌握薄层色谱法的基本原理和操作技能,以及对色谱结果的分析和解释。
二、实验仪器与试剂。
1. 实验仪器,薄层色谱仪、注射器、展开皿等。
2. 实验试剂,甲醇、乙酸乙酯、硅胶G薄层板、色谱柱。
三、实验原理。
薄层色谱是一种以吸附作用为基础的色谱分离技术,其原理是利用固定在薄层板上的吸附剂对混合物中的化合物进行分离。
当混合物在薄层板上进行展开时,不同成分会因为与吸附剂的亲和力不同而在薄层板上形成不同的斑点,从而实现分离。
四、实验步骤。
1. 准备薄层板,在薄层板上均匀涂抹一层薄层吸附剂。
2. 样品制备,将待分离的混合物溶解在适量的溶剂中,得到样品溶液。
3. 样品上板,用吸附剂涂抹的薄层板吸取一定量的样品溶液,滴于薄层板的起点处。
4. 色谱条件,将上板后的薄层板放入色谱槽中,加入适量的色谱溶剂,待色谱溶剂上升至薄层板顶端后取出晾干。
5. 显色观察,将晾干后的薄层板放入显色槽中,观察化合物的斑点情况。
五、实验结果与分析。
根据实验结果,我们成功地将混合物中的化合物分离出来,并通过对斑点的形状、颜色和位置进行分析,确定了各个化合物的Rf值。
进一步对比标准品的Rf值,我们成功地鉴定了混合物中的化合物。
六、实验总结。
通过本次实验,我们深入了解了薄层色谱技术的原理和操作方法,掌握了薄层色谱法对化合物进行分离和鉴定的基本技能。
同时,也对色谱结果的分析和解释有了更深入的理解和掌握。
七、实验心得。
薄层色谱技术作为一种简便、快速、准确的分析方法,具有广泛的应用前景。
在今后的学习和科研中,我们将继续深入探索色谱技术,不断提高自己的实验操作能力和科研水平。
以上就是本次薄层色谱实验的报告,希望对大家有所帮助。
实验二十薄层色谱一、实验目的1、学习薄层色谱法的原理和方法;2、掌握比移值的计算方法;3、了解比移值的影响因素。
二、实验原理薄层色谱(thin layer chromatography)常用TLC表示,依其所采用的薄层材料性质和物理、化学原理的不同,可分为吸附薄层色谱、分配薄层色谱、离子交换薄层色谱和排阻薄层色谱等。
吸附薄层色谱采用硅胶、氧化铝等吸附剂铺成薄层,将样品以毛细管点在原点处,用移动的展开剂将溶质解吸,解吸出来的溶质随着展开剂向前移动,遇到新的吸附剂,溶质又会被吸附,新到的展开剂又会将其解吸,经过多次的解吸-吸附-解吸的过程,溶质就会随着展开剂移动。
吸附力强的溶质随展开剂移动慢,吸附力弱的溶质随展开剂移动快,这样不同的组分在薄层板上就得以分离。
一个化合物在吸附剂上移动的距离与展开剂在吸附剂上移动的距离的比值称为该化合物比移值R f展开剂是影响色谱分离度的重要因素。
一般来说,展开剂的极性越大,对特定化合物的洗脱能力也越大,一般常用展开剂按照极性从小到大的顺序排列大概为:石油醚<己烷<甲苯<苯<氯仿<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<水<乙酸。
三、主要试剂和材料邻硝基苯胺对硝基苯胺薄层层析硅胶G 薄玻璃板乙酸乙酯石油醚 0.5%羧甲基纤维钠(CMC-Na)水溶液毛细管(内径小于1mm)四、实验装置五、实验步骤【操作要点及注意事项】1、调浆时要将硅胶加到CMC-Na中,以免生成太多的团块,浆液要有一定的流动性,稠度以能沿玻棒成细线性下滴为宜。
2、铺板时一定要铺匀,特别是边、角部分,晾干时要放在平整的地方。
3、点样时点要细,直径不要大于2mm,间隔0.5cm以上,浓度不可过大,以免出现拖尾、混杂现象。
4、展开用的烧杯要洗净烘干,放入板之前,要先加展开剂,盖上表面皿,让烧杯内形成一定的蒸气压。
点样的一端要浸入展开剂0.5cm以上,但展开剂不可没过样品原点。
[参考实用]薄层色谱法实验报告实验报告:薄层色谱法的原理和应用一、实验目的:1.了解薄层色谱法的原理和应用。
2.掌握薄层色谱法的操作方法。
3.通过实验实践,了解如何通过薄层色谱法鉴定和分离混合物中的成分。
二、实验原理:薄层色谱法是一种分离和鉴定化合物的有效方法,其原理基于化合物在固定相和流动相之间的不同相互作用。
薄层色谱法的基本原理可以总结如下:1.固定相:将固体材料均匀地涂在薄层色谱板上,固定相可以是硅胶、氧化铝等。
固定相的选择要考虑待测物质与之的相互作用。
2.流动相:通常是有机溶剂或溶剂混合物,用于带动化合物在固定相上的运移。
3.样品的加载:将待测物质溶解于溶剂中,直接在固定相的起点处或者利用载体(例如玻璃纤维纸)上进行负载。
4.运移:将色谱板插入含有流动相的色谱槽中,通过毛细现象使得溶剂沿着板缘上升,溶质随着溶剂一起上升,与固定相发生相互作用。
5.鉴定和检测:用合适的方法在运移完成后,对色谱板上的斑点进行检测和鉴定。
三、实验操作步骤:1.准备工作:将薄层色谱板切割成所需尺寸,用铅笔在起点处标记出一个细线,用玻璃纤维纸负载样品。
2.准备固定相:将固定相在玻璃片或铝箔上均匀涂布,并将其插入薄层色谱槽中。
3.准备流动相:根据待测物质的性质和需求,选择合适的有机溶剂或溶剂混合物,并将其倒入薄层色谱槽中,使其淹没固定相。
4.进行色谱分离:将负载有样品的玻璃纤维纸插入薄层色谱槽中,让溶剂自下而上地进行运移。
5.取出色谱板:当溶剂前端接近色谱板的上端时,取出色谱板并迅速将其干燥。
6.鉴定和检测:将干燥的色谱板放入紫外灯下,观察样品斑点的颜色和位置,并记录下来。
四、实验结果和分析:根据实验操作步骤,完成了一次薄层色谱分离实验。
观察样品在薄层色谱板上的斑点后,我们可以得到样品中的不同成分在固定相和流动相之间的相互作用性质。
通过与已知标准物质的比对,可以对未知物质进行鉴定分析。
五、实验总结:通过本次实验,我对薄层色谱法有了更深入的认识和理解。
1. 掌握薄层色谱的基本原理。
2. 熟悉薄层色谱的操作步骤。
3. 学会利用薄层色谱法分离和鉴定有机化合物。
二、实验原理薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,简称TLC)是一种用于分离和鉴定混合物中各组分的层析技术。
其原理基于混合物中各组分在固定相(吸附剂)和流动相(展开剂)中的分配系数不同。
当混合物在薄层板上展开时,各组分会在板上形成不同的斑点,从而实现分离。
在薄层色谱中,固定相通常为吸附剂,如硅胶、氧化铝或纤维素。
展开剂则是一种液体或气体,用于携带混合物在固定相上移动。
当展开剂流过固定相时,混合物中的各组分会发生吸附、解吸和再分配的过程,导致不同组分在固定相上的移动速度不同,从而实现分离。
三、实验仪器与药品1. 仪器:- 薄层板(硅胶板)- 展开剂(正己烷、乙酸乙酯、甲醇)- 层析缸- 毛细管- 点样器- 显色剂(如紫外灯、碘蒸气)2. 药品:- 有机混合物样品(如苯、甲苯、乙苯等)- 吸附剂(硅胶)- 溶剂(正己烷、乙酸乙酯、甲醇)1. 薄层板的制备:- 称取适量的硅胶,加入适量的水,搅拌均匀。
- 将混合物均匀涂布在玻璃板上,厚度约为0.2-0.3mm。
- 将涂布好的玻璃板在105℃下烘烤1小时,取出备用。
2. 点样:- 用毛细管吸取少量样品,在薄层板下端约2cm处轻轻点样。
- 点样后,用铅笔在点样位置画一个圈作为原点。
3. 展开剂的选择与制备:- 根据待分离混合物的极性,选择合适的展开剂。
- 将展开剂倒入层析缸中,液面高度约为1-2cm。
4. 展开与显色:- 将薄层板放入层析缸中,盖好盖子。
- 待展开剂上升到薄层板顶部时,取出薄层板,晾干。
- 用紫外灯或碘蒸气对薄层板进行显色,观察各组分在薄层板上的位置。
5. 结果分析:- 计算各组分在薄层板上的比移值(Rf值)。
- 比较不同样品的Rf值,鉴定各组分。
五、实验结果与分析1. 薄层色谱图:- 从薄层色谱图上可以看出,混合物中的各组分在薄层板上形成了不同的斑点,实现了分离。
一、实验目的1. 掌握薄层色谱法的基本原理及其在有机物分离中的应用。
2. 学习薄层色谱法操作步骤,提高实验技能。
3. 通过实验,学会使用薄层色谱法对混合物进行分离、鉴定。
二、实验原理薄层色谱法(TLC)是一种常用的分离和鉴定有机化合物的方法。
它是基于混合物中各组分在固定相和流动相之间分配系数的差异,在固定相上发生吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程,从而实现分离。
实验中,常用的固定相为薄层板,通常采用硅胶或氧化铝作为吸附剂。
流动相为有机溶剂,如正己烷、乙酸乙酯、氯仿等。
当流动相流过固定相时,混合物中的各组分会根据其在固定相和流动相之间的分配系数不同,在薄层板上形成不同的斑点。
三、实验仪器与药品1. 仪器:薄层色谱仪、紫外灯、层析缸、点样毛细管、剪刀、镊子、剪刀、电子天平、烧杯、移液管、试管等。
2. 药品:硅胶薄层板、正己烷、乙酸乙酯、氯仿、碘化钾、混合样品(如苯、甲苯、乙苯、丙苯等)。
四、实验步骤1. 薄层板的制备:称取适量硅胶,加入少量水,调成糊状。
将糊状硅胶均匀涂布在玻璃板上,待固化后,放入烘箱中烘烤活化。
2. 点样:用点样毛细管蘸取混合样品,在薄层板下端2.0cm处点样。
重复点样,使样品斑点直径约为1.0mm。
3. 展开剂的选择:根据样品的性质,选择合适的展开剂。
本实验选择正己烷为展开剂。
4. 展开操作:将点样的薄层板放入层析缸中,加入适量展开剂,使展开剂液面略低于薄层板下端。
待展开剂上升至薄层板上端后,取出薄层板,晾干。
5. 显色:将晾干的薄层板置于紫外灯下观察,或用碘化钾喷洒薄层板,观察斑点。
6. 结果分析:记录各组分在薄层板上的位置,计算比移值Rf。
五、实验结果与分析1. 实验结果:根据实验结果,得到各组分在薄层板上的位置和比移值Rf。
2. 结果分析:根据比移值Rf,对混合物中的各组分进行鉴定。
通过查阅相关文献,确定各组分的名称。
六、实验讨论1. 薄层色谱法在有机物分离中的应用非常广泛,具有操作简便、快速、灵敏等优点。
薄层色谱的实验报告一、实验目的1、掌握薄层色谱的基本原理和操作方法。
2、学会利用薄层色谱进行物质的分离和鉴定。
二、实验原理薄层色谱(Thin Layer Chromatography,TLC)是一种快速、简便、灵敏的分离分析技术。
其原理是基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,从而在薄层板上实现分离。
固定相通常是涂敷在玻璃板或塑料板上的吸附剂,如硅胶、氧化铝等。
流动相则是一种或多种溶剂的混合物。
当样品溶液点在薄层板的一端,并置于装有流动相的层析缸中时,流动相通过毛细作用沿板上升,样品中的各组分在固定相和流动相之间不断进行吸附和解吸,导致它们在板上以不同的速度移动,最终实现分离。
通过与已知标准物质在同一条件下进行色谱分析,并比较它们的 Rf 值(比移值),可以对样品中的组分进行定性鉴定。
三、实验仪器与试剂1、仪器薄层板(硅胶 G 板或氧化铝板)层析缸点样毛细管紫外灯喷雾显色剂装置2、试剂样品溶液(待分离和鉴定的混合物)标准物质溶液展开剂(根据样品性质选择合适的溶剂系统,如石油醚乙酸乙酯、氯仿甲醇等)显色剂(如碘蒸气、硫酸乙醇溶液等)四、实验步骤1、制备薄层板选择合适的玻璃板或塑料板,洗净并干燥。
称取适量的吸附剂(如硅胶 G 或氧化铝),加入一定量的蒸馏水或粘合剂(如羧甲基纤维素钠溶液),搅拌均匀成糊状。
将糊状物均匀地涂布在玻璃板或塑料板上,厚度一般为 025 05mm。
放置在水平台上,自然晾干后,在适当温度下活化一定时间,备用。
2、点样用点样毛细管吸取少量样品溶液,在距薄层板一端 1 15cm 处轻轻接触板面,形成一个直径约 2 3mm 的圆点。
点样时应注意控制样品量,避免斑点过大或过小。
同时点上标准物质溶液作为对照。
3、展开在层析缸中加入适量的展开剂,深度约 05 1cm。
将点样后的薄层板小心放入层析缸中,使点样端朝下,确保展开剂液面低于点样线。
盖上盖子,让展开剂通过毛细作用沿板上升,直到展开剂前沿接近板的顶端(一般上升高度为 8 10cm)。
实验五薄层色谱实验引言:薄层色谱是一种常用的分离和分析方法,其原理是将待分离物质溶解在溶剂中后,在薄层厚度为0.1-0.25mm的固体载体上,通过毛细管效应将溶液涂布在载体上。
再将载体放置在一个合适的溶剂系统中,待分离物质在溶剂的迁移作用下,以不同的速率向上迁移,从而实现对混合物的分离。
本实验旨在通过薄层色谱的方法,对香蕉中的颜色素进行分离和鉴定。
一、实验概述:1.实验目的:通过薄层色谱技术对香蕉中的色素进行分离和鉴定。
2.实验原理:薄层色谱是一种基于分区原理的分离方法。
在薄层色谱中,用作固定相的是一层吸附性固体粉末,称为薄层板。
待检样品溶于适当的溶剂中,在薄层板上均匀地涂布应检样品,使之成为一薄层,然后静置至溶剂上升达到适当高度时即可停止,此时发现薄层中一些组分会分散到不同距离的高度,这些高度为色谱层的前移距离。
3.实验流程:准备薄层色谱管、样品溶液、色谱板;在洁净的台面上,涂布样品液;将涂布后的色谱板放入稳定的溶液中,并封闭色谱管;观察色谱层的迁移并记录数据;取出色谱板,用紫外灯照射,根据荧光的强弱进行色谱斑点的标记,然后标明Rf值和颜色;将标记的色谱板剪去要检测的那一部分,用70%乙醇溶液溶解,将溶液取出用高效液相色谱仪进行检测。
二、实验器材和试剂:1.器材:薄层色谱管、样品溶液、色谱板、封闭薄层色谱管的胶漆、紫外灯、高效液相色谱仪;2.试剂:香蕉样品、无色溶剂等。
三、实验步骤:1.提取香蕉中的色素:将香蕉皮剥离并混合研磨,用无色溶剂提取其中的色素。
2.准备薄层色谱管:将薄层色谱管固定在台面上,在薄层管的两侧涂上一层胶漆,使之封闭。
3.涂布色谱板:在色谱板上均匀地涂布样品溶液,使之成为一薄层。
4.将涂布后的色谱板放入薄层色谱管中:将涂布后的色谱板轻轻滑入固定的薄层色谱管中,然后用胶漆封闭管口。
5.观察色谱层的迁移并记录数据:将封闭的薄层色谱管放置悬挂在一个含适量溶剂的烧杯中,观察色谱层的迁移情况并记录。
实验五菠菜叶色素的提取与薄层析分离鉴定
一、教学目的与要求:
1. 了解色谱分离的原理及其应用。
2. 初步掌握薄层色谱的操作技能。
3. 分液漏斗的使用(栓橡皮筋、试漏、凡士林涂法、振荡方法、清洗、磨口处塞纸片等)
二、教学重点,难点:
TLC意义;本次实验要求无水,除了分液漏斗(因要加水萃取)外,所有仪器都应干燥。
菠菜不要洗,
干燥瓶应具塞,干燥剂的选择、用量和干燥好的标志;
提取液颜色若较浅, 可适当蒸发浓缩( 至 1~2 mL)
点样时的注意事项
点样溶剂挥发后, 将该薄层板以点样端向下置入层析缸中 ( 薄层板的下沿浸入展开剂液面下约 0.5cm)
三、教学内容:
明确概念;薄层板上的硅胶(硅胶 GF254)是固定相(吸附剂),展开剂(本次实验用石油醚:乙酸乙酯= 5:4,分清提取液和展开剂,别混了)是流动相。
讲解薄层色谱的原理、意义、展开剂的选择、显色方法、
薄层色谱用的吸附剂有硅胶和氧化铝;介绍硅胶板的种类
详细讲解分液漏斗的使用(栓线、磨口用纸隔开、烘干、铁圈大小、试漏、缠橡皮筋、振摇、放气、静置。
实验步骤讲解:
1. 色素提取:水洗的目的,干燥瓶应具塞,干燥剂的选择、用量和干燥好的标志;提取液颜色若较浅, 可适当蒸发浓缩( 至 1~2 mL);
2. 点样(不能把硅胶层划破,点样线上轻轻触点 ( 点样), 如一次点样的斑点颜色较淡, 待溶剂挥发后, 可重复点样, 但斑点尽量要小。
3. 展开 (样点干燥后、薄层板的下沿浸入展开剂液面下约 0.5cm) ,当几个点分得很清楚时,立即取出,马上在展开剂上升到的高度处画一横线
4. 鉴定:分别计算菠菜叶色素中各组分的Rf值,并与参考数据相比较。
薄层色谱实验Document number:NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT薄层色谱(TCL)实验一、实验目的1、掌握薄层色谱操作技巧2、了解薄层色谱的基本原理和应用二、实验原理1、原理薄层色谱是一种微量分析的分离过程,它将样品点在以玻璃板或铝、塑料等片材为载体的多孔吸附剂薄层的固定相上,利用流动相在特定的展开室中将混合物中的组份推移到不同距离处,在色谱展开整个过程中,样品的成份受到正反不同的力的作用。
(1)流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。
(2)样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极-(诱导)-偶极相互作用,氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。
由于样品组份与流动相和固定相之间的相互作用力程度不同,整个毛细管流动过程中分离运动都在进行。
基于这点,TLC系统(流动相和固定相)必须与样品很好地匹配。
用显色试剂处理,许多组份可在日光或紫外灯光下检视。
色谱可用肉眼或使用光密度计和照相机记录或影像系统方法来评价。
2、薄层色谱的用途1)化合物的定性检验通过与已知标准物对比的方法进行未知物的鉴定。
在条件一致的情况下,纯化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离,称比移值(R f值)。
利用薄层色谱法可鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似化合物是否为同一种物质。
影响比移值的因素很多,如薄层的厚度,吸附剂颗粒的大小,酸碱度、活性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发度等。
所以要获得比移值重现性就比较困难。
为此,在测定某一式样时,最好用对照品和样品同时对照进行。
d2d12)快速分离少量物质(几到几十u g,甚至)3)跟踪反应进程,在进行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失,来判断反应是否完成。
4)化合物纯度的检验(只出现一个斑点,且无脱尾现象,为纯物质)3、主要操作步骤薄层板的制备;薄层板的活化;薄层板色谱展开;薄层色谱显色与分析。
实验五薄层色谱实验
一、实验原理
薄层色谱(Thin-Layer Chromatography,TLC)是一种分离分析技术,
它将混合物分离并加以分析,以测定化学物质在混合物中的含量,并对其
结构进行分析。
薄层色谱实验的一般步骤为:用菲林纸或其他实验材料,
在玻璃板上均匀铺设一层纸片,在纸片中加入一定量溶剂,并将要分析的
物质涂在纸片上,然后放入含有一定量溶剂的气相色谱仪中,溶剂从纸片
上上升,复杂的物质分子会随着溶剂上升而沿着纸片的方向分离,当溶剂
沿着纸片方向移动时,部分物质分子会停留在纸片移动轨迹上,从而可以
以物质分子逐渐沿着纸片的轨迹分布的方式对复杂的物质进行分离和检测。
二、实验准备
1.实验仪器
(1)薄层色谱仪:用于给纸片滴加溶剂,把溶剂按一定速度从纸片
上升起,滴加溶剂的速度可以用薄层色谱仪调节。
(2)紫外可见光检测仪:它能够测量沿着纸片的轨迹上出现的物质
吸收紫外线的能力,以来检测混合物中物质的比例和浓度总量。
2.实验材料
(1)纸片:一般使用硅胶薄层色谱纸片,其薄厚约为0.25mm,它的
表面非常细腻,不吸附变性物质,表面有良好的润湿性,可以形成一层薄层。