灵芝多糖的分离纯化及结构鉴定_黄静涵
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一、实验目的本研究旨在通过实验方法提取和鉴定灵芝中的多糖成分,探究灵芝多糖的提取工艺,并对提取得到的灵芝多糖进行初步的生物活性分析。
二、实验材料与仪器1. 实验材料:- 灵芝子实体(赤芝或紫芝)- 乙醇、水、硫酸、蒽酮等化学试剂- 蒸馏水、无水乙醇、丙酮等溶剂- 蛋白酶、DNase等酶类- 小鼠、细胞等实验动物和细胞系2. 实验仪器:- 电子天平- 超声波清洗器- 烘箱- 离心机- 恒温水浴锅- 分光光度计- 高效液相色谱仪- 荧光显微镜等三、实验方法1. 灵芝多糖的提取:- 将灵芝子实体洗净、晾干,粉碎成粉末。
- 采用乙醇提取法,将灵芝粉末与95%乙醇按一定比例混合,在超声波清洗器中提取2小时。
- 将提取液过滤,滤液在烘箱中浓缩至一定浓度。
- 将浓缩液用无水乙醇沉淀,离心分离,收集沉淀物。
2. 灵芝多糖的鉴定:- 采用硫酸-蒽酮法对提取得到的沉淀物进行含量测定。
- 采用高效液相色谱法对提取得到的灵芝多糖进行结构分析。
3. 灵芝多糖的生物活性分析:- 采用小鼠腹腔巨细胞吞噬实验,检测灵芝多糖的免疫调节活性。
- 采用细胞实验,检测灵芝多糖对肿瘤细胞的抑制作用。
四、实验结果1. 灵芝多糖的提取:- 采用乙醇提取法,从灵芝子实体中提取得到多糖含量为10%左右。
2. 灵芝多糖的鉴定:- 硫酸-蒽酮法检测结果显示,提取得到的灵芝多糖含量较高。
- 高效液相色谱法分析结果显示,提取得到的灵芝多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖等单糖组成。
3. 灵芝多糖的生物活性分析:- 小鼠腹腔巨细胞吞噬实验结果显示,灵芝多糖能够显著提高小鼠腹腔巨细胞的吞噬功能。
- 细胞实验结果显示,灵芝多糖对肿瘤细胞具有抑制作用。
五、实验讨论1. 灵芝多糖的提取工艺:- 本实验采用乙醇提取法,结果表明该方法能够有效地提取灵芝中的多糖成分。
- 在实验过程中,提取溶剂的浓度、提取时间、料液比等因素对提取率有显著影响,需要进一步优化。
灵芝子实体多糖的分离纯化、结构解析及免疫活性研究的开题报告一、研究背景灵芝是一种具有悠久历史和广泛应用价值的中草药,其子实体中含有丰富的多糖类物质,已被证明具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等多种生物活性。
然而,当前关于灵芝子实体多糖的分离纯化、结构解析及免疫活性研究仍存在一定的不足和难点,需要进一步深入研究。
二、研究目的本研究的主要目的是探究灵芝子实体多糖的分离纯化方法,以及对其进行结构解析和免疫活性评价,为进一步研究灵芝多糖的功能机制提供科学依据。
三、研究内容及方法1. 多糖分离纯化方法的研究利用超滤、离子交换层析、凝胶渗透层析等方法,对灵芝子实体多糖进行分离纯化,并考察不同条件下各种分离方法的分离效果和纯化效率。
同时,优选出分离纯化方法,为后续步骤的开展提供基础保障。
2. 结构解析利用现代色谱分离技术(如薄层色谱、高效液相色谱)、光谱学技术(如红外光谱、质谱、紫外光谱)等手段,对灵芝子实体多糖的分子结构进行解析,探究其化学组成、分子量、单糖组成等信息。
同时,对多糖的空间构型和分子排布等方面进行综合研究,为后续的免疫活性评价提供依据。
3. 免疫活性评价采用体外免疫细胞实验模型,评价灵芝子实体多糖的免疫活性。
主要从增强免疫功能、抗氧化、抗肿瘤等多个方面进行评价,以探究多糖的作用机制,并为未来发展具有更广泛应用价值的多糖药品提供理论依据。
四、研究意义和预期结果本研究的成果将有助于完善灵芝多糖的分离纯化、结构解析和免疫活性评价方法,提高多糖的效价和利用价值,为开发新型药物、食品等领域提供科学依据。
预期结果为:系统研究灵芝子实体多糖的分子结构、性质及其免疫活性,初步探索灵芝的作用机制。
灵芝多糖的研究摘要:灵芝多糖是灵芝中的主要有效成分。
本研究对灵芝多糖的分离和纯化方法作了阐述,对其化学结构作了初步分析,并且对工业发酵方法生产的三种灵芝菌粉与相应的野生或栽培的灵芝子实体进行了灵芝多糖含量方面的比较从而说明,利用现代发酵技术生产灵芝菌粉将很有希望成为以后生产灵芝的一种主要方法。
关键词:灵芝多糖;发酵灵芝菌粉;野生灵芝;栽培灵芝引言灵芝的概述灵芝隶属于真菌界,担子菌纲,无褶菌目,猴椅菌科,万年茸(灵芝)属。
学名为Ganoderma fucldlum(Fr.)Karst。
它是观赏、医药兼用的菌类。
由于整个菇体木化,可长久保存不腐败,故有”万年菌”之称。
1.灵芝的保健作用灵芝是我国传统的扶正固本,滋补强壮的中药,历代医书均将之列为中药上品。
早在2千多年前的春秋战国时期《列子,汤问》列御寇中云“朽壤之一,有菌之者”,并总结当时利于灵芝治病保健的经验:“煮百沸其味清芳,饮之明目,脑清,心静,肾坚,其宝物也”。
[1]最早的医学著作《神农草经》把灵芝列为上品,谓其“久味苦平,主治中结,益心气,补中,增智慧,不忘,久服轻身不老”。
李时珍的《本草纲目》中对灵芝药性和功效作了详尽的记述:赤芝,苦平无毒,主治中结,益心气,补中,增智慧,不忘;紫芝,甘温无毒,好颜色,治虚痨,治痔。
[2]现代药理和临床研究证明,灵芝中迄今已分离到150余种化合物,但多数药理活性与灵芝多糖有关。
活性多糖是一种具有某些特殊生理功能的多糖类高分子化合物,广泛存在于植物,动物和微生物组织中。
近年来,多糖结构与功能的关系以及多糖复合物疫苗等研究在国际上受到了较多关注。
灵芝多糖主要以下生理功能:(1)调节免疫功能(2)抗肿瘤作用(3)促进体内核酸与蛋白质的代谢(4)抗氧自由基作用(5)灵芝多糖有镇定作用,强心作用和提高实验动物耐受常压缺氧的能力等其他功能2.实验的材料和方法2.1材料泰山赤芝T-1,韩国灵芝K-1,日本灵芝J-1.三种灵芝菌种均为山东莱芜农科所保存品种。
多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定以多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定为题,本文将介绍多糖的分离纯化方法、纯度鉴别和分子量测定的原理和技术。
一、多糖的分离纯化方法多糖是一类由多个糖基组成的生物大分子,其结构复杂多样。
为了研究多糖的性质和功能,需要将多糖与其他杂质分离开来并纯化。
常用的多糖分离纯化方法包括离心沉淀、凝胶层析、离子交换层析、亲和层析等。
离心沉淀是一种简单有效的多糖分离纯化方法。
通过调节离心速度和时间,可以使多糖与其他杂质沉淀分离,然后将上清液取出,即可得到相对纯净的多糖溶液。
凝胶层析是一种常用的多糖分离纯化方法。
凝胶层析根据多糖分子的大小和形状,利用凝胶的孔隙大小选择性地分离多糖。
常用的凝胶材料有琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶等。
离子交换层析是一种利用多糖与离子交换树脂之间的电荷相互作用进行分离的方法。
树脂表面带有正负电荷,多糖分子根据其电荷性质与树脂发生吸附和解吸作用,从而实现分离纯化。
亲和层析是一种利用多糖与特定的亲和配体之间的特异性结合进行分离的方法。
常见的亲和配体有金属离子、抗体、受体等。
通过与亲和配体结合,多糖可以被选择性地吸附在亲和树脂上,其他杂质则被洗脱,从而实现纯化。
二、多糖的纯度鉴别多糖的纯度鉴别是判断多糖溶液中是否存在杂质的过程。
常用的纯度鉴别方法包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外-可见光谱、红外光谱等。
聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的多糖纯度鉴别方法。
通过在凝胶中施加电场,多糖分子根据其大小和电荷性质在凝胶中迁移,从而实现分离和鉴定。
紫外-可见光谱是一种常用的多糖纯度鉴别方法。
多糖溶液在紫外-可见光谱范围内有特征性的吸收峰,通过测量多糖溶液在不同波长下的吸光度,可以判断多糖溶液中是否存在杂质。
红外光谱是一种常用的多糖纯度鉴别方法。
不同多糖具有特征性的红外吸收峰,通过测量多糖溶液的红外光谱,可以判断多糖溶液中是否存在杂质。
三、多糖的分子量测定多糖的分子量是衡量多糖结构大小的重要指标。
超声波酶法提取灵芝多糖的研究吕京宁浙江大学材料与化学工程学院 高分子化工研究所摘要:灵芝古称瑞草,在我国作为药物有2000多年的历史。
临床和药理研究表明,灵芝具有多种生理活性与药理作用。
而灵芝多糖则是其最主要的有效成分,尤其它还具有抗肿瘤的活性功能。
灵芝多糖的常规提取方法已有报道,这些方法不仅费时,而且收率很低。
目前,超声技术已广泛应用于中药有效成分的提取,本文介绍了采用超声波酶法方法提取灵芝多糖的原理、工艺条件以及应用,与普 通方法相比,该法具有水解效率高,产品质量好等特点,同时还能缩短提取周期,并使反应条件更加温和。
关键词:灵芝多糖 提取 超声波酶法 纯化0 引言多糖因其具有多种生物活性已越来越硬起人们的重视,近年来,对真菌多糖的研究进展很快,灵芝多 糖作为一类非特异性免疫增强剂,具有抗血栓、抗肿瘤、抗辐射、抗氧化、免疫调节、保肝、降压等作用, 因此在医药领域中具有很高的开发应用前景。
目前分离到的灵芝多糖达200种之多,大部分为β型葡聚糖, 分子量从数千到数万不等,不溶于高浓度乙醇,可在热水中溶解。
但提取灵芝多糖的传统工艺,生产周期 长,工艺复杂,从而增大了生产成本,并受资源来源的影响,使生产和临床应用受到限制。
因此如何有效 提取和分离纯化灵芝多糖是目前工作的重点 [1] 。
现代生物技术已广泛应用于许多领域,迄今为之,一批发酵工程产物已由实验室走向工业化生产,此 过程中,分离提纯技术起到了关键作用。
随着科学技术的发展,超临界萃取、超声波、微波、超滤、凝胶 电泳分离、新型吸附剂层析分离、真空冷冻干燥提取分离等技术,已经应用到中药及其天然植物研究及生 产领域中。
天然植物药用成分大多为细胞内产物,提取时多需进行细胞破碎,而现有的机械和化学方法有 时难于取得理想的破碎效果。
本研究表明,利用超声波产生的强烈振动、超高的速度、强烈的空化效应、 搅拌作用等,可加速药物有效成分进入溶剂 [2,3] ,具有提高得率,缩短提取时间,节约溶剂,有利于保护 有效成分等优点,此技术在中药有效成分提取、分离与制备工艺中已广泛应用 [4,5] 。
多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定以多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定为题,本文将介绍多糖的分离纯化方法、纯度鉴别及分子量测定的原理和常用技术。
一、多糖的分离纯化方法多糖是指由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的聚合物,常见的多糖有淀粉、纤维素、壳聚糖等。
多糖的分离纯化是指将多糖与其他杂质分离开来,得到纯净的多糖样品。
常用的多糖分离纯化方法包括溶剂沉淀法、离子交换色谱法和凝胶过滤法等。
溶剂沉淀法是通过在特定溶剂条件下,使多糖在溶液中沉淀,然后通过离心等方式分离沉淀物和上清液。
离子交换色谱法是利用多糖与离子交换树脂之间的电荷相互作用,通过调节溶液pH 值和离子强度等条件,实现多糖与其他组分的分离。
凝胶过滤法则是利用多糖分子的大小和形状差异,在凝胶柱中进行分离,大分子多糖难以进入凝胶颗粒内部,从而被留在柱上,小分子杂质则能够顺利通过。
二、多糖纯度的鉴别方法多糖的纯度鉴别是指确定多糖样品中多糖的含量以及杂质的种类和含量。
常用的多糖纯度鉴别方法包括光谱法、色谱法和凝胶电泳法等。
光谱法是通过多糖在特定波长下吸光度的变化来确定多糖的含量,如紫外吸收光谱法和红外光谱法。
色谱法是利用多糖与其他组分在色谱柱中的分离行为,通过检测样品中多糖峰的峰面积或峰高来确定多糖的含量。
凝胶电泳法是利用多糖在电场中的迁移行为,通过在凝胶上观察多糖的迁移距离和带电量来确定多糖的含量和电荷性质。
三、多糖分子量测定方法多糖的分子量是指多糖分子中单糖个数的总和,是评价多糖结构和性质的重要指标。
常用的多糖分子量测定方法包括凝胶渗透色谱法、粘度法和质谱法等。
凝胶渗透色谱法是通过多糖在凝胶柱中的分离行为,利用不同分子量的多糖在凝胶柱上的停留时间来确定多糖的分子量。
粘度法是通过测量多糖溶液的粘度和浓度,利用Mark-Houwink公式计算多糖的分子量。
质谱法是通过测量多糖分子在质谱仪中的离子质量来确定多糖的分子量。
多糖的分离纯化、纯度鉴别和分子量测定是研究多糖性质和功能的重要步骤。
液体深层培养中灵芝多糖的提取和纯化
臧晋;黄开勋
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2004(030)004
【摘要】经单因素实验和正交实验,确定了深层培养的灵芝菌丝体胞内多糖提取的最佳工艺条件:80℃下提取2次,每次加入菌丝体30倍量的去离子水搅拌提取55 min.不同纯化方法的对比实验结果表明,经超滤去除小分子可溶性杂质,加活性炭抽滤脱色,CCl4-正丁醇萃取除杂蛋白,再经醇析和真空干燥即可制得纯多糖.
【总页数】3页(P135-137)
【作者】臧晋;黄开勋
【作者单位】华中科技大学化学系,武汉,470070;华中科技大学化学系,武
汉,470070
【正文语种】中文
【中图分类】TQ92
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灵芝多糖有效成分提取及纯化方法综述
鹿洪亮
【期刊名称】《科技信息》
【年(卷),期】2009(000)027
【摘要】灵芝的化学成分多种多样,多糖是灵芝中具有生物活性的主要有效组分之一.20世纪70年代,灵芝多糖的研究开发进入了一个崭新的发展时期.本文总结了近十年来灵芝多糖提取纯化的各种方法及研究进展.
【总页数】2页(P423-424)
【作者】鹿洪亮
【作者单位】福建中烟工业公司技术中心,福建,厦门,361022
【正文语种】中文
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灵芝多糖的提取、分离及分析方法的研究进展郑丹婷;蔡思敏;苑子涵;崔佳燕;韩伟【期刊名称】《机电信息》【年(卷),期】2016(000)011【摘要】灵芝多糖是灵芝的有效成分之一,具有多方面的药理活性,已成为目前中药研究的一大热点。
综述了目前在灵芝多糖的提取、分离、纯化以及分析方法方面的研究进展,以期为灵芝多糖的研究提供一些参考。
%Ganoderma polysaccharides(GP),which has a variety of pharmacological activities, is one of the effective components of ganodorma lucidum. The research of GP is of great significance and be paid more and more attention. This article summarized the recent progress on the method of the extraction, isolation and analysis of GP, which can offer the study of GP more references.【总页数】7页(P33-38,59)【作者】郑丹婷;蔡思敏;苑子涵;崔佳燕;韩伟【作者单位】华东理工大学中药现代化工程中心,上海200237;华东理工大学中药现代化工程中心,上海200237;华东理工大学中药现代化工程中心,上海200237;华东理工大学中药现代化工程中心,上海200237;华东理工大学中药现代化工程中心,上海200237【正文语种】中文【相关文献】1.海参皂苷的分离提取及分析方法研究进展 [J], 袁炜辉;李赫宇;李倩;杨中振;赵余庆2.熊果酸的提取、分离及分析方法的研究进展探析 [J], 孟煜嘉;王艳妮;徐逸凡;杨志空;韩伟3.植物多酚提取、分离纯化及其分析方法的研究进展 [J], 彭茹洁;汪佳丹;韩伟4.姜黄素提取分离及其体内外分析方法的研究进展 [J], 侯雯清;岑愉萍;范国荣;沈报春;李霁5.灵芝多糖的提取、分离及分析方法的研究进展 [J], 郑丹婷;蔡思敏;苑子涵;崔佳燕;韩伟因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。