亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂实训

实验六表面活性剂的鉴别
一、测定原理
亚甲基蓝是水溶性染料，但阴离子表面活性剂与亚甲基蓝可形成溶于氯仿的蓝色络合物，从而使蓝色从水相转移到氯仿相。

二、原料
1、亚甲基蓝溶液
2、阴离子表面活性剂溶液
3、氯仿
三、测定步骤
移取5ml试样于在带玻璃塞的试管中，加入10ml亚甲基蓝溶液和5ml氯仿，塞上塞子充分振荡后静置分层，观察两层颜色。

如氯仿层呈蓝色，表示有阴离子表面活性剂存在。

因为试剂是碱性的，如果存在肥皂的话，已经分解成脂肪酸，所以肥皂不能被检出。

如果水层颜色较深，则表明存在阳离子表面活性剂，因为试剂是酸性的，两性表面活性剂通常呈（微弱的）阳性结果。

如果水层呈乳状，或两层基本呈同一颜色则表明有非离子表面活性剂存在。

四、结果记录
五、结果讨论
1、实验配制过程中，氯仿属于有毒气体，需在通风处量取及加入
2、样品四在冷却状态下会结块，需加热之后趁热量取。

水和废水中阴离子表面活性剂的测定作业指导书水和废水中阴离子表面活性剂的测定作业指导书(连续流动分析仪法) 1 主题含义主题含义阴离子表面活性剂是普通合成洗涤剂的主要活性成分，这里主要指直链烷基苯磺酸钠（LAS ）和烷基磺酸钠类物质。

本方法规定了测定水溶液中阴离子表面活性剂的亚甲蓝分光光度法。

2 分析方法分析方法2.1 方法出处方法出处《水质阴离子表面活性剂(MBAS)的测定-连续流动分析法（CFA)》ISO16265:2009 2.2 适用范围适用范围适用于测定饮用水、地表水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质（MBAS ），即阴离子表面活性物质。

在实验条件下，主要被测物是LAS 、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠。

、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠。

本方法的最低检出浓度为0.05mg/L LAS ，检测上限为0.40mg/L LAS 。

2.3 原理原理阳离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色盐类，统称亚甲蓝活性物质（MBAS ）。

该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长650nm 处测量氯仿层的吸光度。

的吸光度。

2.4 试剂和材料试剂和材料实验时仅使用公认的分析纯试剂和蒸馏水，或同等纯度的水。

实验时仅使用公认的分析纯试剂和蒸馏水，或同等纯度的水。

2.4.1氯仿（CHCl3）：使用前需超声波除气30min 。

2.4.2直链烷基苯磺酸钠标准溶液直链烷基苯磺酸钠标准溶液准确吸取5.00mL 十二烷基苯磺酸钠贮备溶液（直接购买，浓度为500mg/L ），用水稀释至250mL ，每毫升含10.0μg LAS 。

当天配制。

当天配制。

2.4.3亚甲基蓝溶液亚甲基蓝溶液先称取105mg 三水亚甲基蓝（指示剂级），用50mL 水溶解，用水定容至100mL ，摇匀。

此溶液贮存于棕色试剂瓶中，4℃下保存一周。

℃下保存一周。

2.4.4 四硼酸钠溶液四硼酸钠溶液称取1.9g 四硼酸钠溶于50mL 水中，加入0.4gNaOH ，加水至80mL ，加入6.8 mL 97％硫酸，定容至100mL 。

2020年第1期新疆有色金属1试剂（1）硫酸（优级纯）（2）氢氧化钠（优级纯）（3）无水乙醇（4）三氯甲烷（CHCl 3）：使用前超声波仪脱气30分钟。

（5）碱性硼酸钠储备液：称3.17g 十水四硼酸钠（Na 2B 4O 7·10H 2O ）,加0.66g 氢氧化钠溶于200mL 去离子水中，储存于棕色瓶中，放冰箱可保存3个月。

（6）亚甲基蓝储备液：称取0.2g 亚甲基蓝溶解于50mL 无水乙醇中，再加入去离子水定容至100mL ，用0.22微米膜过滤后储存于棕色瓶中，放冰箱可保存3个月。

（7）碱性亚甲基蓝溶液：分取36mL 亚甲基蓝储备液（1.6）于1000mL 烧杯中，加入100mL 碱性硼酸钠储备液（1.5），再加入100mL 无水乙醇，用去离子水定容至1000mL ，储存于棕色瓶中，放冰箱可保存1个月，使用前脱气30分钟或过膜。

（8）载流：去离子水，使用前脱气30分钟或过膜。

（9）酸性亚甲基蓝溶液:称取56g 二水合磷酸二氢钠（NaH 2PO 4·2H 2O ）于1000mL 烧杯中，加入约800mL 去离子水溶解，再加入50mL 无水乙醇，搅拌，待溶解后加入6.8mL 硫酸，搅拌，加入7.6mL 亚甲基蓝储备液（1.6），用去离子水定容至1000mL ，储存于棕色瓶中，使用前脱气30分钟或过膜。

（10）流通池清洗液：无水乙醇。

（11）自动进样器载流槽清洗液：去离子水。

（12）十二烷基苯磺酸钠标准储备液1000mg/L （国家标准物质中心购买）：分取10mL 十二烷基苯磺酸钠标准储备液1000mg/L 于100mL 容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀，其浓度为100mg/L 。

分取10mL 十二烷基苯磺酸钠储备液100mg/L 于100mL 容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀，其浓度为10mg/L 。

2仪器和器皿（1）iFIA7全自动流动注射仪（2）分析天平：精度为0.1mg.（3）超声波仪：频率40kHz （4）100mL 容量瓶（5）10mL 比色管3样品采集好的样品保存于清洁的玻璃瓶中，加入甲醛，使甲醛体积浓度为1%，4℃下保存，可保存一周。

实验室对水中阴离子表面活性剂的三种测定方法对比作者：陈玉方来源：《环境与发展》2018年第06期摘要：目的：对比分析实验室对水中阴离子表面活性剂的三种测定方法（水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法（GB7494-1987）、亚甲蓝分光光度法一次萃取简化法（GB7494-1987附录B）和流动注射-亚甲蓝分光光度法（HJ826-2017））。

方法：选取13个地表水断面，分别适用上述三种方法进行含量测定。

结果：测定结果进行比较分析。

结论：用三种方法测定标样所的质控样测定结果都合格，三种方法测定地表水和地下水数据基本一致。

关键词：阴离子表面活性剂；亚甲蓝分光光度法；亚甲蓝分光光度法一次萃取简化法；流动注射-亚甲蓝分光光度法中图分类号：X131.2 文献标识码：A 文章编号：2095-672X（2018）06-0115-02DOI：10.16647/15-1369/X.2018.06.066Abstract： Objective： To compare and analyze three methods for the determination of anionic surfactants in water （water quality anionic surfactants， methylene blue spectrophotometry（GB7494-1987）， methylene blue spectrophotometric one extraction simplification （GB7494-1987 appendix B） and flow injection methylene blue spectrophotometry （HJ826-） 2017）method： 13 surface water sections were selected， and the above three methods were applied respectively for content determination. Results： the results were compared and analyzed. Conclusion： the results of quality control samples determined by the three methods are all qualified， and the three methods are basically consistent with the data of surface water and groundwater.Key words： Anionic surfactants； Methylene blue spectrophotometry； Methylene blue spectrophotometric method of first extraction； Flow injection methylene blue spectrophotometric method阴离子表面活性剂是指直链烷基苯磺酸钠和烷基磺酸钠类物质（1）。

亚甲蓝分光光度法测阴离子表面活性剂的不确定度分析根据实际工作中所测饮用水中LAS含量较低,而LAS为常规必检项目, 本文通过亚甲蓝分光光度法测阴离子表面活性剂的方法，得出本方法的不确定度以定量表达本方法的可信程度，数值只有包含了不确定度才真正有意义。

1.实验部分1.1 原理阴离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长652nm处测量氯仿层的吸光度。

1.2试剂与仪器在测定过程中，使用分析纯试剂和蒸馏水，7230G可见光分光光度计, 配有10 mm光程的比色皿。

氯仿(CHCl3),分析纯,十二烷基苯磺酸钠标准溶液(1000mg/L)。

当天配制10.0mg L的标准贮备液。

亚甲蓝溶液和洗涤液按GB5750-85.16.1配制。

1.3 实验方案及过程按照《生活饮用水标准检验法》GB5750-85-16.1的步骤进行实验，于250mL 容量瓶中分别加入适量的水，再移取系列直链烷基苯磺酸钠标准溶液于250mL分液漏斗中，加水刚好100mL，以酚酞为指示剂，滴加NaOH溶液至刚好呈桃红色，再滴加0.5mol/L硫酸至桃红色刚好消失。

加入25mL亚甲蓝溶液，用氯仿萃取三次，萃取液用洗涤液洗涤，定容50mL，用分光光度计于波长652nm处测吸光度。

1.4测量的数学模型1）回归曲线：y=a+bx2）浓度计算公式：c=m/v3）根据样品测定计算公式的独立分量，根据不确定度的传播规律，亚甲蓝分光光度法测定水中直链烷基苯磺酸钠标准溶液测量的合成相对标准不确定度公式表达为：式中：u rel (C)—水中LAS 浓度的相对标准不确定度；u rel (C LAS )—LAS 标准贮备液中引入的相对标准不确定度；u rel (f)—将贮备液稀释至使用液引入的相对标准不确定度；u rel (m)—标准网线拟合求得LAS 含量时引入的相对标准不确定度；u rel (A)—重复测定时引入的相对标准不确定度；u rel (R)—回收率引入的相对标准不确定度；2. 不确定度的评定2.1 LAS 标准溶液引入的不确定度u 1标液浓度：1.000±0.020mg/mL其不确定度为:U 11=0.020/3=0.011547mg/mL 、灵敏度系数c 11=0.02。

海水中阴离子表面活性剂的测定作业指导书1 主题含义及有关质量或排放标准1.1 主题含义规定了测定海水中阴离子表面活性剂的方法。

2 分析方法2.1 方法出处亚甲基蓝分光光度法海洋监测规范第4部分海水分析GB17378.4-2007(23)2.2适用范围本法适用于海水。

对有较深颜色的水样本法受干扰。

有机的硫酸盐、磺酸盐、羧酸盐、酚类以及无机的氰酸盐、硝酸盐和硫氰酸盐等引起正干拢，有机胺类则引起负干扰。

本方法为仲裁方法。

2.3 原理阴离子洗涤剂与亚甲基蓝反应，生成蓝色的离子对化合物，用氯仿萃取后，在650 nm波长处测定吸光值。

测定结果以直链烷基苯磺酸钠((LAS,烷基平均碳原子数为12)的表观浓度表示，实际上是测定了亚甲基蓝活性物质(MBAS)。

2.4 试剂和材料2.4.1直链烷基苯磺酸钠标准贮备溶液(1. 00 mg/mL)：称取100. 0 mgLAS溶于50 mL水中，全量转人100 mL量瓶，加水至标线，混匀。

在冰箱内保存.至少可稳定6个月。

2.4.2 直链烷基苯磺酸钠标准使用溶液(10. 0ug/mL):量取10. 0 mL标准贮备溶液于100 mL量瓶中，加水至标线，混匀。

再量取10. 0 mL此溶液于100 mL量瓶中，加水至标线，混匀。

此标准使用溶液1. 00 mL含LAS 10.0ug。

在冰箱中保存，可稳定7 d。

2.4.3 氯化钠(NaCl)溶液:300 g/L。

2.4.4 亚甲基蓝溶液：于1 000 mL烧杯中加500 mL水，加50 g磷酸二氢钠(NH2P()4·H2 ())，搅拌下缓缓加入6. 8 mL硫酸(H2SO，p=1. 84 g/mL)，加入50 mg亚甲基蓝(C16H18N3C1S·3H20)指示剂，搅拌溶解，加水至1 000 mL,混匀。

转入棕色试剂瓶保存。

2. 4. 5 洗涤液：于1 000 mL烧杯中加入500 mL水，加人50 g磷酸二氢钠，搅拌下缓缓加入6. 8 mL硫酸，搅拌溶解。