切胶回收的步骤
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天根切胶回收说明书
天根切胶回收试剂盒说明书
一、产品简介
天根切胶回收试剂盒是一种高效的DNA片段回收试剂盒,能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段。
该试剂盒采用独特的吸附技术,能够有效地去除凝胶中的杂质,纯化DNA片段。
回收的DNA片段可用于后续的克隆、测序、PCR等实验。
二、产品特点
1. 高效回收:能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段,回收率高达90%以上。
2. 纯度高:能够有效去除凝胶中的杂质,纯化DNA片段,提高后续实验的准确性和可靠性。
3. 操作简便:采用独特的吸附技术,无需使用有机溶剂,简化了操作步骤。
4. 稳定性好:试剂盒中的成分稳定,便于长期保存和使用。
三、使用方法
1. 准备凝胶和电泳缓冲液:将凝胶和电泳缓冲液按照要求准备妥当。
2. 切胶:按照实验要求将凝胶切成适当大小的胶块。
3. 洗涤:将切好的胶块放入离心管中,加入适量的洗涤液,充分混匀,洗涤去除凝胶中的杂质。
4. 吸附:将洗涤后的胶块放入吸附柱中,按照说明书要求进行吸附操作。
5. 洗脱:将吸附后的DNA片段进行洗脱,收集洗脱液。
6. 检测:对回收的DNA片段进行检测,如琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测。
四、注意事项
1. 使用前请仔细阅读本说明书,确保按照说明书要求正确操作。
2. 本试剂盒仅供实验室使用,请勿用于食品、药品等领域。
3. 使用过程中请注意安全,避免直接接触眼睛、皮肤和衣物等。
如不慎接触到皮肤或眼睛,请立即用清水冲洗,并及时就医。
4. 本试剂盒中的试剂和耗材均为一次性使用,用后请及时处理废弃物。
讨论1.假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量,④PCR循环条件。
寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。
模板:①模板中含有Taq酶抑制剂,②在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。
③模板核酸变性不彻底。
在酶和引物质量好时,不出现扩增带,有可能是模板核酸提取过程出了毛病,可使用阳性对照的DNA模板配合检查模板质量。
酶失活:需更换新酶,或新旧两种酶同时使用,以分析是否因酶的活性丧失或不够而导致假阴性。
引物:引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称,是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。
有些批号的引物合成质量有问题,两条引物一条浓度高,一条浓度低,造成低效率的不对称扩增,对策为:①选定一个好的引物合成单位。
②引物的浓度不仅要看OD值,更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳,一定要有引物条带出现,而且两引物带的亮度应大体一致,如一条引物有条带,一条引物无条带,此时做PCR有可能失败,应和引物合成单位协商解决。
如一条引物亮度高,一条亮度低,在稀释引物时要平衡其浓度。
③引物应高浓度小量分装保存,防止多次冻融或长期放冰箱冷藏,导致引物变质降解失效。
④引物设计不合理,如引物长度不够,引物之间形成二聚体等。
Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。
反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul、或100ul,应用多大体积进行PCR扩增,是根据科研和临床检测不同目的而设定,在做小体积如20ul 后,再做大体积时,一定要模索条件,否则容易失败。
物理原因:变性对PCR扩增来说相当重要,如变性温度低,变性时间短,极有可能出现假阴性;退火温度过低,可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率,退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。
1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶,然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面的液体。
此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶,尽量减小凝胶体积,提高DNA回收率。
注)切胶时请注意不要将DNA长时间暴露于紫外灯下,以防止DNA损伤。
3. 切碎胶块。
胶块切碎后可以加快操作步骤6的胶块融化时间,提高DNA的回收率。
4. 称量胶块重量,计算胶块体积。
计算胶块体积时,以1 mg=1 ul进行计算。
5. 向胶块中加入胶块融化液DR-I Buffer。
DR-I Buffer的加量如下表: 6. 均匀混合后75℃加热融化胶块(低熔点琼脂糖凝胶只需在45℃加热)。
此时应间断振荡混合,使胶块充分融化(约6~10分钟)。
注)胶块一定要充分融化,否则将会严重影响DNA的回收率。
7. 向上述胶块融化液中加入DR-I Buffer量的1/2体积量的DR-II Buffer,均匀混合。
当分离小于400 bp的DNA片段时,应在此溶液中再加入终浓度为20%的异丙醇。
8. 将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。
9. 将上述操作7的溶液转移至Spin Column中,12,000 rpm离心1分钟,弃滤液。
注)如将滤液再加入Spin Column中离心一次,可以提高DNA的回收率。
10. 将500 ul的Rinse A加入Spin Column中,12,000 rpm离心30秒,弃滤液。
11. 将700 ul的Rinse B加入Spin Column中,12,000 rpm离心30秒,弃滤液。
12. 重复操作步骤11。
13. 将Spin Column安置于新的1.5 ml的离心管上,在Spin Column 膜的中央处加入25 ul 的灭菌蒸馏水或Elution Buffer,室温静置1分钟。
注)把灭菌蒸馏水或Elution Buffer加热至60℃使用时有利于提高洗脱效率。
pcr切胶回收的步骤
PCR切胶回收呀,这可是个很有趣的小实验呢。
先说说准备工作吧。
你得有已经跑过PCR并且经过琼脂糖凝胶电泳的胶块哦。
然后呢,把要用的工具都准备好,像干净的刀片啦,还有专门的切胶回收试剂盒。
开始切胶啦。
在紫外灯下看胶块的时候,就像寻宝一样呢。
找到你要的那条DNA 条带,然后用刀片小心翼翼地把它周围的胶切下来。
可别切太大块啦,不然会有好多杂质的。
切的时候就像在给小宝贝做精细的手术一样,要很小心哦。
切好胶之后,就按照试剂盒的说明来操作啦。
一般是把切下来的胶放到一个离心管里,然后加入一些溶液,让胶融化。
这时候你就看着胶慢慢变成液体,感觉就像魔法一样呢。
接着呢,要把融化后的液体加到吸附柱里。
这个吸附柱就像一个小卫士,专门把DNA吸附住,而那些杂质就被留在外面啦。
把液体加进去之后,离心一下,就像坐小过山车一样,让液体在离心力的作用下快速通过吸附柱。
然后呢,要清洗一下吸附柱。
这一步就像是给小卫士洗个澡,把它身上可能残留的杂质都洗干净。
再离心一下,把清洗的液体甩掉。
最后就是把我们想要的DNA从吸附柱上洗脱下来啦。
加入洗脱液,再离心,这个时候我们的DNA就乖乖地跑到洗脱液里啦。
就像把小宝贝从保护它的小房子里接出来一样。
这样,PCR切胶回收就完成啦。
虽然过程有点小复杂,但是只要按照步骤来,就可以得到我们想要的纯净的DNA啦。
每次做这个实验都感觉像是在和小小的DNA分子玩一场有趣的游戏呢。
DNA胶回收实验技术的方法和步骤一. 提高胶回收量的办法1) 增加电泳时的上样量。
2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。
3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。
4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。
5) 溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有利于DNA与膜的结合,不过一般不要多余750ul。
6) 胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性(电荷)和疏水性使DNA与柱子结合,因此,若电泳缓冲液的PH偏高,可在溶胶液中加入10ul(PH 5.0,3mol/L的NaAC);为了使DNA分子更好的拦截在膜上,可以添加30%异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7) 加洗脱液之前,将柱子在室温放置几分钟(大约需10分钟),以使乙醇充分挥发。
8) 最后少加些洗脱液,尽量减少回收体积,一般用30-50μl洗脱液洗脱(不能太少,否则无法浸湿膜反而不利于洗脱);洗脱液滴在膜中央,以充分洗脱结合在膜上的DNA。
9) 可以在加入洗脱液之后,可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴10分钟以上再洗脱,或用封口膜密封4度过夜,第二天再离心回收,效果不错。
10) 将离心后的洗脱液加回吸附柱,再次离心。
二. 几种PCR产物回收的详方法和步骤1) 普通胶回收如果要胶回收,最好还是用试剂盒,方便,回收率也略高,实在要手工回收,可以切胶后加入3倍体积TE,水浴熔化后,酚、酚/氯仿抽提干净,乙醇沉淀即可。
另外好像还有冷冻法,没作过,不是很清楚。
2) 从低熔点凝胶回收DNA纯化DNA片段加与凝胶体积相等的TE(10mmol/l Tris-HCl pH8.0,0.1mmol/l EDTA),置65℃水浴5分钟保温,使凝胶完全溶解。
待放至室温,加等量酚(TE饱和,TE封在上层,取下层酚),轻轻混匀(不用混匀),12000rpm,3分钟离心。
反复1-2次。
取上层液,加0.1体积3mol/L醋酸钠(pH5.2)和2.5倍体积无水乙醇,进行乙醇沉淀。
切胶回收DNA(博迈德琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒DR01)
**WB液使用前加入指定量的无水乙醇;
**尽量使胶中的缓冲液减少。
当PH值《7.5时,吸附回收DNA效率最高,正常情况小,溶胶液依旧保持黄色时,说明PH值正常,如果变成橘红或淡紫色说明PH值偏高,可在胶充分溶解时,加入3M醋酸钠5-10ul
实验步骤:
1.40ulPCR反应液琼脂糖凝胶电泳。
在紫外光下切目的片段。
尽量减少胶的体积;
2.将切下的胶放入1.5ml离心管中,称重;
3.加入3倍体积的溶胶液,如果胶的浓度大于2%,则应加入6倍溶胶液DD;
4.56度水浴10分钟至胶完全溶解,2-3分钟涡旋震荡一次加速溶解;
5.将溶解液EC吸附柱中,吸附柱放入收集管中,室温放置1min,12000rpm离心30-60sec,弃收集管中离心液;
6.加入500ul漂洗液WB,12000rpm离心30sec,弃离心液;
7.重复6
8.将吸附柱EC放入空离心管中,12000rpm离心2min,尽量出去漂洗液,以免残留乙醇抑制下游反应;
9.将EC吸附柱放入一个干净的离心管中,在吸附柱中间部位加入50ul洗脱缓冲液EB,(使用前在65-70度水浴中加热效果更好),室温放置2min,12000rpm离心1min,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心1min;
10.取2ul离心液电泳,估计DNA量(250bp marker:5ul,1000bp的相当于150ng,余相当于50ng)。
切胶回收的步骤
YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
切胶回收的步骤
1.琼脂糖凝胶电泳目的基因,紫外灯下切除含有目的基因的琼脂糖,用纸巾吸尽凝胶表面的液体,尽量减少不含目的基因的凝胶量,称重(1mg=1ul)
2.尽量切碎凝胶
3.向离心管中加入3倍体积的NAL溶液, 55(视具体胶定)度加热,使凝胶完全融化,
4.按每20ul硅胶树脂结合(树脂使用前要充分混匀)约3ugDNA加入适量比例的硅胶树脂,充分混合,室温放置20min,
5.10000rpm离心1分钟,去上清(上清液暂保存,如回收率不过可重复4)
6.加入800ul清洗液(清洗液加入56ml100%的无水乙醇),振荡混匀后,室温静置10min,10000rpm离心1分钟,去上清
7.重复步骤6,尽量去除上清,完全风干至不残留乙醇味道;
8.加入和硅胶树脂等体积的TEbuffer或灭菌蒸馏水混匀,55度水浴20min 9.10000rpm离心1分钟,吸上清为DNA回收液,
10.重复8,9。
切胶回收一代测序全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:切胶回收一代测序是一种高效的DNA测序技术,它可以帮助科研人员快速准确地获取DNA序列信息。
这种技术在生命科学研究中发挥着重要的作用,为研究人员提供了丰富的研究数据,促进了科学研究的进展。
切胶回收一代测序的原理是通过将DNA样本分解成小片段,然后通过高通量测序技术对这些小片段进行测序。
这种技术的优势在于可以同时测序多个DNA片段,高效地获取DNA序列信息。
在实际应用中,科研人员通常会使用切胶回收一代测序技术来对某一特定区域的DNA进行测序,以获取该区域的详细序列信息。
切胶回收一代测序技术的工作流程一般包括以下几个步骤:DNA 样本提取、DNA片段化、测序文库构建、高通量测序和数据分析。
科研人员需要从细胞或组织中提取DNA样本,然后将DNA样本分解成小片段。
接着,他们会将这些DNA片段连接到测序文库中,然后通过高通量测序技术对文库中的DNA片段进行测序。
科研人员需要对测序得到的数据进行分析,以获取DNA序列信息。
切胶回收一代测序技术在生命科学研究中有着广泛的应用,可以用于基因组学、转录组学、表观基因组学等研究领域。
在基因组学研究中,科研人员常常使用切胶回收一代测序技术来对生物的整个基因组进行测序,以解析基因组的结构和功能。
在转录组学研究中,科研人员可以利用切胶回收一代测序技术来对生物的mRNA进行测序,以了解其基因表达的特点。
在表观基因组学研究中,科研人员可以利用切胶回收一代测序技术来对生物的表观修饰信息进行测序,以研究表观遗传学的调控机制。
切胶回收一代测序技术的应用还不仅限于基础研究领域,它也在临床医学中得到了广泛的应用。
临床医学研究人员可以利用切胶回收一代测序技术来对患者的基因组进行测序,以帮助医生做出准确的诊断和治疗方案。
通过对患者基因组的测序,医生可以了解患者的遗传病风险,指导临床诊断和治疗。
第二篇示例:随着科技的不断发展,基因测序技术已经成为现代生物学领域中的重要工具。
KCL染色切胶回收
1.蛋白粗提掖进行SDS-PAGE;
2.预冷(预先放在4℃冰箱中)0.25M KCl染色,检测蛋白条带(这种染色方法灵敏度比考马斯亮蓝染色低很多);
3.用一干净刀片切下蛋白所在凝胶条带,将凝胶条在蒸馏水中浸泡,使KCl离开胶条,直至无色透明(5-10min,条带变为无色);
4.将无色透明的胶条从蒸馏水中取出,装入已准备好的1.5ml离心管中,用镊子夹碎(或用刀片切碎),然后在管里加入所需溶解蛋白的溶液,比如蒸馏水、生理盐水或PBS;
5.将离心管放入4℃冰箱中过夜,第二天吸出管中的液体(吸之前振荡一下),至少50%的蛋白可以从凝胶中析出,再加入蒸馏水抽提两次,就可以将胶条中绝大部分蛋白提出;
6.抽提蛋白冻干浓缩后,可用考马斯亮蓝染色法测蛋白浓度,可以用SDS-PAGE 验证纯度,看是否有杂带;提取蛋白样品≥5mg,可供免疫一只兔子用。
切胶回收的步骤
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切胶回收的步骤
1.琼脂糖凝胶电泳目的基因,紫外灯下切除含有目的基因的琼脂糖,用纸巾吸尽凝胶表面的液体,尽量减少不含目的基因的凝胶量,称重(1mg=1ul)
2.尽量切碎凝胶
3.向离心管中加入3倍体积的NAL溶液, 55(视具体胶定)度加热,使凝胶完全融化,
4.按每20ul硅胶树脂结合(树脂使用前要充分混匀)约3ugDNA加入适量比例的硅胶树脂,充分混合,室温放置20min,
5.10000rpm离心1分钟,去上清(上清液暂保存,如回收率不过可重复4)
6.加入800ul清洗液(清洗液加入56ml100%的无水乙醇),振荡混匀后,室温静置10min,10000rpm离心1分钟,去上清
7.重复步骤6,尽量去除上清,完全风干至不残留乙醇味道;
8.加入和硅胶树脂等体积的TEbuffer或灭菌蒸馏水混匀,55度水浴20min 9.10000rpm离心1分钟,吸上清为DNA回收液,
10.重复8,9
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胶回收和PCR产物回收技巧1 提高胶回收量的技巧1) 增加电泳时的上样量。
2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。
3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。
4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。
5) 溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有利于DNA与膜的结合,不过一般不要多余750ul。
6) 胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性(电荷)和疏水性使DNA与柱子结合。
因此,若电泳缓冲液的PH偏高,可在溶胶液中加入10ul(PH 5.0,3mol/L的 NaAC);为了使DNA分子更好的拦截在膜上,可以添加30%异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7) 加洗脱液之前,将柱子在室温放置几分钟(大约需10分钟),以使乙醇充分挥发。
8) 最后少加些洗脱液,尽量减少回收体积,一般用30-50μl洗脱液洗脱(不能太少,否则无法浸湿膜反而不利于洗脱);洗脱液滴在膜中央,以充分洗脱结合在膜上的DNA。
9) 可以在加入洗脱液之后,可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴10分钟以上再洗脱,或用封口膜密封4度过夜,第二天再离心回收,效果不错。
10) 将离心后的洗脱液加回吸附柱,再次离心。
2 PCR 产物回收的详细方法和步骤1) 普通胶回收如果要胶回收,最好还是用试剂盒,方便,回收率也略高,实在要手工回收,可以切胶后加入3倍体积TE,水浴熔化后,酚、酚/氯仿抽提干净,乙醇沉淀即可。
2) 从低熔点凝胶回收DNA纯化DNA片段加与凝胶体积相等的TE(10mmol/l Tris-HCl pH8.0,0.1mmol/l EDTA ),置65℃水浴5分钟保温,使凝胶完全溶解。
待放至室温,加等量酚(TE饱和,TE封在上层,取下层酚),轻轻混匀(不用混匀),12000rpm,3分钟离心。
反复1-2次。
取上层液,加0.1体积3mol/L醋酸钠(pH5.2)和2.5倍体积无水乙醇,进行乙醇沉淀。
溶液配制固定液:乙醇90ml,冰醋酸4.5ml,定容至900ml(各组分含量:10%乙醇,0.5%冰醋酸)注:如果显影完后不进行终止显影,那么固定液可以回收使用。
染色液:AgNO3 1.4g,甲醛600μl,加入去离子水700ml,振荡混匀,甲醛在使用前加入。
每次使用需新鲜配制,在固定步骤快结束时配制即可。
显色液:NaOH 9g,甲醛1200μl,加去离子水600ml。
显影液的配制可以先配成NaOH溶液放入4℃冰箱贮存,待要用时取出再加入甲醛并混匀。
预冷的显影液可以让条带显影更漂亮清晰,但是显影速度会变慢一些。
银染步骤1.固定将胶放入固定液中,摇床振荡15min。
摇床速度无需很快,小档即可。
2.银染固定液中取出胶,去离子水快速清洗两次,固定液此时可回收。
将胶放入配制好的染色液中,摇床振荡20min。
尽量在通风橱中进行并避光。
有时候胶会飘在水面导致染色结果不好,可调整摇床速度使染色液没过胶。
3.显影染色液中将胶取出,去离子水快速清洗一到两次,尽量迅速!放入预冷过的显影液中显影,并马上迅速振荡容器,使胶周围的银离子扩散均匀,待溶液颜色均匀不变,摇床开小档振荡直至条带显色完全。
4.终止显影将胶取出清洗两次,放入固定液中,即可终止显影,但固定液不可回收了。
如果不需要保存胶的话,这一步可以省略。
5.拍照将胶放在白光透射仪上,轻轻抚去底下的气泡,铺平摆正胶,数码相机拍照。
注意:银染全程,手指不可碰到胶,尤其是染色~显影这一段步骤,摸一下胶就会留下手印。
切胶回收步骤在白光透射仪上用干净的手术刀片切胶,放入灭菌的0.5ml离心管中,加入灭菌水50μl后,用黄枪头捣碎,离心后60~65℃水浴3~6h,取出离心后可以进行PCR实验,如果时间不能安排马上做PCR也可放4℃过夜,第二天做PCR。
蛋白切胶回收步骤
嘿,咱今儿就来说说蛋白切胶回收这档子事儿哈!
你想想看,这蛋白就像是一个个藏着宝贝的小盒子,咱得把它们从那一大块胶里给挑出来,这可不是个简单活儿呢!
首先啊,得把那含着蛋白的胶给找出来,这就好比在一堆杂物里找你心爱的小物件儿,得仔细着点儿呢!然后,给胶来个“美容”,把它切得整整齐齐的,可别毛毛躁躁的切坏了呀。
接着呢,就像挖宝藏一样,把带着蛋白的那一小块胶给挖出来,这可得小心,别把宝贝给弄丢咯。
把挖出来的胶放进小管子里,加点神奇的溶液,这就开始让蛋白从胶里慢慢跑出来啦。
这过程就好像是蛋白在胶里待久了,想出来透透气,咱就给它们创造个机会。
等它们跑出来一些了,就把管子放那儿,让它们好好地待着。
过了一会儿,再把管子拿出来晃晃,让蛋白和其他东西分离开来。
这就好像是把混在一起的糖果和石子儿给分开一样。
然后啊,把上面的液体吸出来,这里可得注意啦,别吸到不该吸的东西哦!吸出来的液体里可就有咱想要的蛋白啦。
哎呀,你说这蛋白切胶回收是不是挺有意思的。
就像一场小小的冒险,得细心、耐心,还得有点小技巧呢!
想想看,要是没做好这一步,那后面的实验不就都受影响啦?就好比盖房子,基础没打好,那房子能结实吗?所以啊,咱可得把这蛋白切胶回收给做好咯。
这就是蛋白切胶回收的步骤啦,虽然说起来简单,做起来可不容易呢!但只要咱认真对待,就一定能把蛋白好好地回收回来,为后面的实验打下坚实的基础呀!是不是很神奇呢?嘿嘿!。
割胶回收实验报告【割胶回收实验报告】一、实验目的1. 了解割胶回收的原理及方法;2. 探究割胶回收对胶水质量的影响;3. 讨论割胶回收的应用价值。
二、实验原理胶水在固化后会形成固态胶块,割胶回收利用物理方法将固态胶块切割成小颗粒或粉末状,以便于再利用。
主要包括以下步骤:1. 将固态胶块放置在切割设备中,通过切割刀进行切割;2. 切割后的碎片经过筛网筛选出所需颗粒大小;3. 经过处理的胶粒可以进行再利用或进行再加工制成其他产品。
三、实验步骤1. 准备实验材料和设备:割胶刀、固态胶块、切割设备、筛网等;2. 将固态胶块放置在切割设备中,启动设备进行切割;3. 调整切割设备的刀片角度和速度,以获得所需颗粒大小;4. 将切割后的胶粒经过筛网进行筛选;5. 收集筛选后的胶粒,并进行相关分析和测试。
四、实验结果与分析通过实验得到的割胶回收的胶粒质量较好,具有较高的粒度均匀性和颗粒度适宜性。
在调整切割设备的刀片角度和速度时,发现角度过小会导致切割过程困难,角度过大则可能影响切割后的颗粒形状。
速度过快会导致切割不充分,速度过慢则可能导致切割割度不匀。
通过筛网筛选后的胶粒具有较好的颗粒分布和筛选效果。
五、实验讨论割胶回收可以将废弃胶水固态块进行有效利用,减少资源浪费和环境污染。
通过合理调整切割设备的刀片角度和速度,可以获得理想的胶粒颗粒度和颗粒形状。
割胶回收的胶粒可以用于再利用或再加工制成其他产品,具有较高的应用价值。
六、实验总结割胶回收是一种有效的胶水再利用方法,可以将废弃胶水固态块变为可再加工的胶粒。
实验结果表明,合理调整切割设备的刀片角度和速度对割胶回收的胶粒质量有较大影响。
割胶回收具有较高的应用价值,可减少资源浪费和环境污染,值得进一步推广和应用。
七、实验改进1. 考虑引入自动化设备,提高割胶回收的效率和精准度;2. 进一步研究和优化割胶设备的切割参数,使得割胶回收的胶粒更加均匀和适宜;3. 割胶回收后的胶粒可以进行再利用或再加工,可以进一步研究开发具有特殊功能的胶粒产品。
橡胶收胶方案
以下是一种橡胶收胶方案:
1.准备工作:将需要收胶的橡胶物品(如轮胎、密封条等)先清洗干净,确保表面无油污和杂质。
2.切割橡胶:使用切割机或刀具将橡胶切割成大小均匀的块状或条状。
3.浸泡橡胶:将切割好的橡胶块或条浸泡在去胶剂中,浸泡时间根据
橡胶材料和厚度而定,一般为几小时到一晚上。
4.剥离橡胶:取出浸泡好的橡胶,用刮刀或刮板将橡胶表面的老化层
和粘结物剥离干净。
5.冲洗橡胶:用清水将剥离干净的橡胶冲洗干净,去除残留的去胶剂
和污垢。
6.晾干橡胶:将冲洗干净的橡胶块或条挂起晾干,确保完全干燥后即
可再次使用。
注意事项:
1.收胶过程中应戴手套、护眼镜等防护用具,避免接触去胶剂和橡胶
粘结物对身体造成损伤。
2.所选用的去胶剂应是和橡胶材料相容的,如果不确定请咨询相关厂
家或技术人员。
3.切割橡胶时要注意安全,避免刀具滑动或伤及手指。
4.浸泡橡胶的容器和工具应干净,以免杂质污染橡胶。
5.橡胶晾干时应避免阳光直射和高温,以免使橡胶老化或变形。
[转载]胶回收注意事项已有735 次阅读2010-7-7 20:37|个人分类:从零开始学技术|系统分类:科研笔记胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
所以为了减少胶的体积,我们就可以用相对比较薄的胶来跑电泳,通常只要够点样即可,或是采用薄而宽的梳子来跑胶。
这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦。
②主要还是DNA的浓度, 如果DNA浓度不够, 想胶小点也不可能。
③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时,要衬以干净的塑料薄膜,使用无DNA污染的新刀片,其目的在于防止外源DNA的污染。
④利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段可能有以下几个原因:胶块未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数辅助溶解;胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收;电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH结合DNA,如pH太高,应作适当调整;漂洗液中未加入无水乙醇。
⑤可以改用去离子水洗脱。
但是实验室所用纯水一般pH偏低,可利用NaOH适当调高其pH 值,以增加洗脱得率。
⑥洗脱产物含有残留的乙醇会影响后续酶切实验,请确保彻底去除漂洗缓冲液,具体方法参见回收效率低的解决方案。
⑦不可以使用更小洗脱体积(小于说明书提供的最小洗脱体积)进行洗脱以提高浓度,因为说明书提供的最少洗脱体积是能完全覆盖吸附膜的最小体积,若减少体积则不能将DNA完全洗脱下来。
⑧电泳检测只有一条目的带,可以选用凝胶回收试剂盒。
如果后续实验对片段纯度要求较高,建议即使只有一条带,也可以切胶纯化,其回收得到片段的纯度可能要比直接回收高一些。
⑨琼脂糖凝胶胶块不溶可能是下述原因:琼脂糖质量不好;含目的片段的凝胶再空气中放置过久,使胶块失水、干燥,建议切胶后立即进行回收或将胶块保存在4℃或-20℃;制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。
关于胶回收切胶的一点注意事项1. 电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。
切胶回收的步骤
1.琼脂糖凝胶电泳目的基因,紫外灯下切除含有目的基因的琼脂糖,用纸巾吸尽凝胶表面的液体,尽量减少不含目的基因的凝胶量,称重(1mg=1ul)
2.尽量切碎凝胶
3.向离心管中加入3倍体积的NAL溶液,55(视具体胶定)度加热,使凝胶完全融化,
4.按每20ul硅胶树脂结合(树脂使用前要充分混匀)约3ugDNA加入适量比例的硅胶树脂,充分混合,室温放置20min,
5.10000rpm离心1分钟,去上清(上清液暂保存,如回收率不过可重复4)
6.加入800ul清洗液(清洗液加入56ml100%的无水乙醇),振荡混匀后,室温静置10min,10000rpm离心1分钟,去上清
7.重复步骤6,尽量去除上清,完全风干至不残留乙醇味道;
8.加入和硅胶树脂等体积的TEbuffer或灭菌蒸馏水混匀,55度水浴20min 9.10000rpm离心1分钟,吸上清为DNA回收液,
10.重复8,9。