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细菌生长繁殖与培养培训讲学

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细菌生长繁殖与培养共41页

细菌生长繁殖与培养共41页

皮肽
葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
尿道
白色葡萄球菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
肠道
大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌 绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细 菌 真菌、乳杆菌，双歧杆菌等
正常菌群
正常人体的体表及与外界相通的腔 道中，存在着不同种类、数量和比例的 微生物。这些微生物在正常情况下对人 体无害称正常微生物群又称正常菌群。
查细菌的动力
（3）细菌在固体培养基中的生长现象
菌落：把细菌接种到固体培养基表面，一般经 37℃， 18～24小时培养，单个细菌就可以生长繁殖成肉眼可见细 菌集团，称之。不同细菌形成的菌落大小、形状、颜色不同， 即菌落特征，有利于鉴别细菌种类
细菌在各种培养基上的生长现象
人工培养基在医学领域中的应用
鼻咽腔 外耳道 眼结膜 胃 肠道
尿道 阴道
葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌 葡萄球菌、干燥棒状杆菌、奈瑟菌
一般无菌 大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、粪链球菌、类 杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、真细菌、乳杆菌、白假丝酵 母菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌 乳杆菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、白假丝酵母菌
b)毒素 毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒 素和外毒素两种。
c)侵袭性酶 某些细菌产生的能增强侵袭力的胞外酶。
（2）与治疗疾病有关的合成代谢产物
a) 抗生素 由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物 的物质称为抗生素。 广泛应用于感染性疾病的治疗。
b)维生素 某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌 到细菌体外。如人体肠道的大肠埃希菌能合成B族维生素和 维生素K，供人体吸收利用。
微生物的纯培养生长曲线及繁殖ppt课件

微生物的纯培养生长曲线及繁殖ppt课件


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38
一、生长曲线
第二节 细菌的群体生长繁殖
由于采用活菌计数比较麻烦，并要求严格进行操作，否则不易得到
准确的结果，重复性也差，因此在实际工作中多采用分光光度计测
定OD值的方法绘制细菌的生长曲线。
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39
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获。
缺点：
不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
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13
一 以数量变化对微生物生长情况进行测定 4、显微镜直接计数法
2）其它方法： 过滤计数：
可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将 滤膜染色，再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数；
迅速、代时稳定，所以是研究微生物基本代谢的良好材料。它也常在生产上用作
种子，使微生物发酵的迟缓期缩短，提精高选经编辑济pp效t 益。
27
在细菌个体生长里，每个细菌分裂繁殖一代所 需的时间为代时(Generation time);
在群体生长里细菌数量增加一倍所需的时间称 为倍增时间（Doubling time);通常也称为代时， 代时以G表示。
通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌） 1、培养平板计数法
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6
第一节 微生物生长的测定
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7
采用培养平板计数法要求操作熟练， 否则难以得到正确的结果：
样品充分混匀；
每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液；
同一稀释度三个以上重复,取平均值；
细菌的繁殖、代谢、培养、消毒ppt课件

细菌的繁殖、代谢、培养、消毒ppt课件


细胞壁、膜有半透性 G+菌 20~25大气压 G-菌 5~6大气压
6
渗透压
2019
第二节 细菌的营养与生长繁殖
一、细菌的营养物质




水：营养的吸收与代谢均需水 碳源：合成菌体成分，提供能量 病原菌主要来源于糖类 氮源：合成菌体成分 病原菌主要来源于氨基酸、蛋白胨等 无机盐：常用元素（K\Na\Ca\Mg\P\S\Fe) 微量元素（Co\Mn|Mo\Zn) 生长因子：生长必需但自身不能合成的物质， 如维生素、氨基酸等。

有助于细菌鉴别
2019
-
20

抗生素(Antibiotics)：多粘菌素、杆菌肽
细菌素(Bacteriocins)


抗菌蛋白，只能杀伤有亲缘关系的细菌， 无治疗意义，用于细菌分型、流行病学调 查。
大肠杆菌产生大肠菌素(Colicin)


维生素

某些肠道菌合成，如B族维生素、VK。
21
2019
第一节 细菌的理化性状
一、细菌的化学组成
水 占细胞总重量75%-90%
有机物 碳、氢、氮、氧、磷、硫等
无机离子 钾、钠、铁、镁、钙、氯等 特有成分
2019
肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等
5
二、细菌的物理性状
光学性质 表面积 带电现象 半透性 半透明 体积小、表面积大 G+菌 pI 2~3 G-菌 pI 4~5 中性环境 带负电荷
2019
-
9
四、影响细菌生长的因素

营养物质充足 氢离子浓度(pH)
多数病原菌最适pH为7.2～7.6

温度
多数病原菌最适37℃
细菌学课件之第十一章 细菌生长繁殖与培养

细菌学课件之第十一章 细菌生长繁殖与培养


细菌在培养基中的生长情况
• 液体培养基：表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长
• 固体培养基：菌落，菌苔
• 半固体培养基：
无动力
有动力
培养基的用途
• 液体培养基：增菌
• 固体培养基：纯化，增菌
• 半固体培养基：动力检测，保种
第三节 细菌的代谢产物
• 热原质：细菌合成的一种注入人体或动物体内 能引起发热反应的物质。（LPS） 耐高温，去除方法：250℃干烤、蒸馏、吸 附剂等 制备和使用注射药品过程无菌操作 • 毒素与侵袭性酶 • 色素 • 抗生素 某些微生物代谢过程中产生的一类能 抑制或杀死某些微生物或肿瘤细胞的物质 • 细菌素 • 维生素
二、细菌的生长繁殖
个体繁殖： 二分裂方式
代时 多数为20~30 min
第二节 细菌的人工培养
• 培养基
由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的 混合营养物制品 • 培养基的分类：基础培养基（basic medium） 增菌培养基（enrichment medium） 选择培养基（selective medium） 鉴别培养基（differential medium） 厌氧培养基（anaerobic medium） 液体培养基 固体培养基 半固体培养基
第十一章 细菌生长繁殖与培养
第一节 细菌生长繁殖
一、细菌生长繁殖条件 （一）酸碱度： pH7.2~7.6 （三）适宜的温度：37℃ （四）必要的气体
氧
• 专性需氧菌—— 结核分枝杆菌 • 微需氧菌—— 空肠弯曲菌、幽门螺杆菌 • 兼性厌氧菌——大多数病原菌 • 专性厌氧菌—— 破伤风梭菌、肉毒梭菌
第二章 23节 细菌的生长与繁殖PPT课件

第二章 23节 细菌的生长与繁殖PPT课件

（二）细菌在正常人体的分布
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眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
• 减弱
胆汁、甘油、马铃薯培养基
结核分枝杆菌
卡介苗
13年230代
28
耐药性变异
• 细菌对某种抗菌药物由敏感变成耐药的变 异称为耐药性变异。
• 有些细菌还同时耐受多种抗菌药物，即多 重耐药性，甚至产生药物依赖性。
含链霉素培基
痢疾杆菌
长期培养
依链株
29
菌落变异
•
在陈旧培养基中长期培养
光滑型菌落
粗糙型菌落
18
二、细菌的代谢产物
1.与致病有关的： 热原质
特点： 引起发热反应，耐高温，121.3℃ 20min不破坏 除去方法： 250℃干烤；吸附剂，特殊石棉 滤板过滤；蒸馏
19
二、细菌的代谢产物
毒素和侵袭性酶 毒素包括内毒素和外毒素
内毒素：G-菌细胞壁的LPS 外毒素：G+菌产生的蛋白质
侵袭性酶：产气荚膜梭菌产生的卵磷脂酶 链球菌产生的透明质酸酶
第二节 细菌的生长与繁殖
学习目标
1、叙述细菌生长繁殖的条件、方式、速度 。
2、解释菌落的概念。
3、描述细菌在培养基中的生长现象。
4、分析细菌的合成代谢产物及意义。
5、简述细菌的变异现象及在医学上的意义
细菌的营养与生长繁殖演示课件

细菌的营养与生长繁殖演示课件

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4.生长因子： 菌体自身不能合成或合成量不足,需要外源
加入的、微量即可的营养物质。 如：维生素、 氨基酸等
营养缺陷型细菌 流感嗜血杆菌需 X（高铁血红素）, V因子（辅酶Ⅰ或Ⅱ） ，而金葡可产生， 两者共培养时出现卫星菌落现象
5.水：菌体重要成分 功能 细胞组分、溶媒、参与代谢、适宜反应温度的保
需氧菌 ：有完善的呼吸酶系统，仅在有氧时生长， 如：结核杆菌
微需氧菌：低氧分压时长势良好，过高则抑制， 如: 空肠弯曲菌
耐氧菌：一般不需要O2 ， O2 存在也影响不大 如：乳酸菌
17
兼性厌氧菌 ：
兼有需氧呼吸和无氧发酵两种功能，有无
O2 的环境下皆可生长，但以有氧时生长态 势较好，大多数病原菌都属此类
能量
＋ 离子、糖类、 氨基酸
基团转移 低→高 磷酸转 高能磷酸键 ＋ 糖类、脂肪酸、
移酶系
核苷 13
四、细菌的营养类型
按照碳源、能源及电子供体性质的差异分类
营养 类型
光能营养型 化能营养型
光能自养型 光能异养型 化能自养型 化能异养型
腐生型
寄生型
14
五、细菌的生长繁殖
（一）细菌生长繁殖的条件
主要环境因素：营养物质、温度、pH值、氧气等
7
二、细菌需要的营养物质
碳源 carbon source
营养物质 nutrient
氮源 nitrogen source 无机盐 inorganic salt
生长因子 growth factor 水 water
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1.碳源： 合成菌体的必需原料，获取能量的来源
无机碳源和有机碳源 各种有机碳源中，容易被细菌吸收的是糖类物质 如：葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖、甘露醇等
细菌生长繁殖和培养

细菌生长繁殖和培养


鼻咽腔 外耳道 眼结膜 胃 肠道
尿道 阴道
葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌 葡萄球菌、干燥棒状杆菌、奈瑟菌
一般无菌 大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、粪链球菌、类 杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、真细菌、乳杆菌、白假丝酵 母菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌 乳杆菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、白假丝酵母菌
眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
验细菌旳动力
（3）细菌在固体培养基中旳生长现象
菌落：把细菌接种到固体培养基表面，一般经 37℃， 18～二十四小时培养，单个细菌就能够生长繁殖成肉眼可 见细菌集团，称之。不同细菌形成旳菌落大小、形状、颜色 不同，即菌落特征，有利于鉴别细菌种类
细菌在多种培养基上旳生长现象
人工培养基在医学领域中旳应用
3. 注射液中出现哪种现象阐明被细菌污染？ ()
A．沉淀 B.絮状物 C.混浊 D.菌膜 E.以上都是
三、 简答题 细菌有哪些合成代谢产物？与致病性和医药有关旳各是哪
些？
第3节 细菌与外界环境
❖ 学习目旳 1、简述细菌在自然界和正常人体旳分布情况。 2、列出常用旳热力消毒灭菌法及合用范围。 3、分析紫外线旳杀菌原理、作用、特点及应用。 4、概述常用化学消毒剂旳浓度、作用机制、
微生物的生长繁殖ppt课件

微生物的生长繁殖ppt课件


3．抗生素
(1)概念
抗生素(Antibiotic) 是由某些生物合成或半合成的一 类次级代谢产物或衍生物，它们在很低浓度时就能抑 制或影响它种生物的生命活动，如杀死微生物或抑制 其生长。
自本世纪40年代以来，已找到上万种新抗生素，合成 了近10万种半合成抗生素，但其中在临床上常用的仅 几十种。
(2)作用机制 抑制细菌细胞壁合成 破坏细胞质膜 作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化 抑制蛋白质和核酸合成
微生物 最低PH 最适PH 最高PH
细菌
3-5
6.5-7.5
8-10
酵母菌
2-3
4.5-5.5
7-8
霉菌
1-3
4.5-5.5
7-8
(三) 氧 根据氧与微生物生长的关系可将微生物分为
好氧 微好氧 耐氧型 兼性厌氧 专性厌氧
微生物类型
好氧 微好氧 氧的忍耐型 兼性厌氧 专性厌氧
最适生长的O2体积分数
等于或大于20％ 2％一lO％ 2％以下 有氧或无氧 不需要氧、有氧时死亡
∴n=
= 3.322(㏒ x2 - ㏒ x1 )
㏒2
（2）生长速度常数（R）
n
㏒ x2 - ㏒ x1
R=
=
t2 – t1
log2( t2 – t1 )
（3）代时(G) 1
G= = R
t2 – t1 3.322(㏒ x2 - ㏒ x1)来自3.稳定期特点：
1 生长速率常数R等于0 2 菌体产量达到了最高值 3 合成次生代谢产物 4 细胞内出现储藏物质，芽孢菌内开始 产生芽孢
0以下 15 20 0 20-30 35；
15-20 20-45 45以上
45 55-65 80 65 80-90 100以上
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用途及影响因素。 5、了解医院感染的概念。
细菌的分布
❖细菌在自然界的分布
土壤中的细菌 水中的细菌 空气中的细菌
❖细菌在正常人体的分布
正常菌群的概念及意义
人体常见的正常菌群
部位 主要菌类
皮肤 口腔
葡萄球菌 、类白 喉杆菌 、铜绿 假单胞 菌、非 致病性分 枝杆菌、 丙酸杆菌 、白 假丝酵母菌
葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、乳杆菌、类白喉棒状 杆菌、梭菌、放线菌、螺旋体
查细菌的动力
（3）细菌在固体培养基中的生长现象
菌落：把细菌接种到固体培养基表面，一般经 37℃， 18～24小时培养，单个细菌就可以生长繁殖成肉眼可见细 菌集团，称之。不同细菌形成的菌落大小、形状、颜色不同， 即菌落特征，有利于鉴别细菌种类
细菌在各种培养基上的生长现象
人工培养基在医学领域中的应用
b)毒素 毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒 素和外毒素两种。
c)侵袭性酶 某些细菌产生的能增强侵袭力的胞外酶。
（2）与治疗疾病有关的合成代谢产物
a) 抗生素 由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物 的物质称为源自生素。 广泛应用于感染性疾病的治疗。
b)维生素 某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌 到细菌体外。如人体肠道的大肠埃希菌能合成B族维生素和 维生素K，供人体吸收利用。
鼻咽腔 外耳道 眼结膜 胃 肠道
尿道 阴道
葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎链球菌、奈瑟菌、类杆菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌、非致病性分枝杆菌 葡萄球菌、干燥棒状杆菌、奈瑟菌
一般无菌 大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、葡萄球菌、粪链球菌、类 杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、真细菌、乳杆菌、白假丝酵 母菌 葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌 乳杆菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、白假丝酵母菌
（1） 形态结构变异 ： 指细菌的形态结构在某些因素影响下发生的变异。
（2）菌落变异：S->R （3）毒力变异 ：
指细菌在一定条件下毒力的减弱或增强。 如卡介苗(BCG) （4） 耐药性变异 ： 指细菌对某一抗菌药物由敏感变为有抵抗力。
基因变异在医学实践上的意义
❖1 用来诊断疾病 ❖2 疾病治疗 ❖3 疾病预防 ❖4 基因工程方面
正常菌群的生理作用
❖1. 生物拮抗作用 ❖2. 营养作用 ❖3. 免疫作用 ❖4. 其他作用：抗衰老，抑制肿瘤
皮肽
葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌 丙酸杆菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
尿道
白色葡萄球菌、类白喉杆菌、 非致病性分枝杆菌
肠道
大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌 绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细 菌 真菌、乳杆菌，双歧杆菌等
正常菌群
正常人体的体表及与外界相通的腔 道中，存在着不同种类、数量和比例的 微生物。这些微生物在正常情况下对人 体无害称正常微生物群又称正常菌群。
目标检测
一、 名词解释
耐药性变异
二、 选择题
1．多数细菌生长繁殖的最适pH是（ ）
A．pH 7.2~7.6 C．pH 8.0~8.8
B．pH 6.5~6.8 D．pH 4.4~4.6
E．pH 5~6
2．细菌生长繁殖的条件不包括（ ）
A．丰富的营养物质 C．合适的温度 E．充足的光线
B．必要的气体环境 D．合适的酸碱度
3．细菌在培养基中的生长现象
（1）细菌在液体培养基中的生长现象
不同细菌在液体培养基中生长繁殖可出现均 匀混浊、沉淀和形成菌膜三种现象，临床应用 的澄清透明的注射液若发现上述任何一种现象， 均表明已被细菌污染，禁止使用。
（2） 细菌在半固体培 养基中的生长现象 经常用于做动力试验：
即将细菌穿刺接种于半 固体培养基中，经培养 后，无鞭毛的细菌沿穿 刺线生长，穿刺线清晰； 有鞭毛的细菌则沿穿刺 线向周围扩散生长，穿 刺线模糊不清，用于检
细菌生长繁殖与培养
（一）
2.
1
2
细菌的生长曲线
迟缓期 对数期 稳定期 衰退期
活 菌 数 的 对 数
培养时间
（二） 细菌的人工培养
1．人工培养的意义 （1）传染病的诊断与治疗 （2）生物制品的制备 （3）细菌的鉴定与研究 2．培养基
是由适合于细菌生存的各种营养物质配制而成的营养基质。 按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选 择培养基和厌氧培养基等。 按物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。在液体培 养基中加入一定量的凝固剂（多为琼脂）即成为固体或半固 体培养基。
❖ 1 感染性疾病的病原学诊断和治疗 ❖ 2 细菌学研究 ❖ 3 生物制品的制备 ❖ 4 基因工程
第3节 细菌新陈代谢 1. 细菌的分解代谢产物及其临床意义
（1）
（2）
2.细菌的合成代谢产物及其意义
（1）与致病有关的合成代谢产物
a)热原质 细菌在代谢过程中产生的一种多糖，注入人和动物体 内能引起发热反应，故名热原质。多由革兰阴性菌产生，热原 质耐高温，不被高压蒸气灭菌（121℃ 30min）所破坏，常 通过滤过或吸附除去液体中大部分热原质，蒸馏法效果最好。
3. 注射液中出现哪种现象说明被细菌污染？ ()
A．沉淀 B.絮状物 C.混浊 D.菌膜 E.以上都是
三、 简答题 细菌有哪些合成代谢产物？与致病性和医药有关的各是哪
些？
第3节 细菌与外界环境
❖ 学习目标 1、简述细菌在自然界和正常人体的分布状况。 2、列出常用的热力消毒灭菌法及适用范围。 3、分析紫外线的杀菌原理、作用、特点及应用。 4、概述常用化学消毒剂的浓度、作用机制、
眼结膜
白色葡萄球菌、干燥杆菌
人 体 内 正 常 菌 群 的 分 布
阴道
大肠杆菌、乳杆菌 白念珠菌、类白喉杆菌
非致病性分枝等
外耳道
葡萄球菌、类白喉杆菌 绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌
鼻咽腔
葡萄球菌、甲，丙型链球菌 肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等
表皮葡萄球菌 口腔
甲，丙型链球菌 类白喉杆菌、肺炎球菌 奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌 螺旋体、放线菌、白念珠菌
（3）与鉴别细菌有关的代谢产物
a)色素 是细菌产生的有色物质。如金黄色葡萄球菌产生非水 溶性金黄色色素如铜绿假单胞菌产生水溶性绿色色素，在细 菌鉴别上有一定的意义。
b)细菌素 某些细菌可产生仅对有亲缘关系的细菌具有抗菌作 用的蛋白质或蛋白质与脂多糖的复合物，成为细菌素。
第4节 细菌的遗传与变异
1.细菌的常见变异现象