电泳技术和常用电泳仪
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六章电泳技术和常用电泳仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1.电泳2.毛细管电泳的电场强度3.蛋白质的等电点4.电泳速度5.迁移率6.毛细管电泳技术7.电泳淌度8.迁移时间9.毛细管电泳电渗流10.焦耳热11.电渗12. 吸附作用二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。
1.瑞典科学家A.Tiselius首先利用U形管建立移界电泳法的时间是()A.1920年B.1930年C.1937年D.1940年E.1948年2.大多数蛋白质电泳用巴比妥或硼酸缓冲液的pH值是()A.7.2~7.4B.7.4~7.6C.7.6~8.0D.8.2~8.8E.8.8~9.23.下列有关电泳时溶液的离子强度的描述中,错误的是()A.溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响B.离子强度越高、电泳速度越快C.离子强度太低,缓冲液的电流下降D.离子强度太低,扩散现象严重,使分辨力明显降低E.离子强度太高,严重时可使琼脂板断裂而导致电泳中断4.电泳时pH值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系,下列描述中正确的是()A.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越慢B.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快C.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快D.pH值离等电点越近,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快E.pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快5.一般来说,颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是()A.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快B.颗粒带净电荷量越小或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快C.颗粒带净电荷量越大或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快D.颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越慢E.颗粒带净电荷量越小或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快6.电泳时对支持物的一般要求除不溶于溶液、结构均一而稳定外,还应具备()A.导电、不带电荷、没有电渗、热传导度小、B.不导电、不带电荷、没有电渗、热传导度大C.不导电、带电荷、有电渗、热传导度大D.导电、不带电荷、有电渗、热传导度大E.导电、带电荷、有电渗、热传导度小7.醋酸纤维素薄膜电泳的特点是()A.分离速度慢、电泳时间短、样品用量少B.分离速度快、电泳时间长、样品用量少C.分离速度快、电泳时间短、样品用量少D.分离速度快、电泳时间短、样品用量多E.分离速度慢、电泳时间长、样品用量少8.聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶,其优点是()A.机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高C.机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率低E.机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高9.20世纪60年代中期问世的等电聚焦电泳,是一种()A.分离组份与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳技术B.能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的电泳技术C.利用凝胶物质作支持物进行的电泳技术D.利用有pH值梯度的介质,分离等电点不同的蛋白质的电泳技术E.用滤纸作为支持载体的电泳技术10.毛细管等电聚焦电泳具有极高的分辨率,通常可以分离的两种蛋白质其等电点差异小于()A.0.01pH单位B.0.05pH单位C.0.10pH单位D.0.15pH单位E.0.20pH单位11.双向凝胶电泳(二维电泳),最多可以分辨出的斑点数量是()A.500~1000B.1000~2000C.2000~4000D.4000~5000E.5000~1000012.下述免疫电泳优点的描述中,错误的是()A.加快了沉淀反应的速度B.是将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开,再与抗体起反应C.本法微量化程度高D.多样化程度高E.应用范围小13.毛细管电泳技术最初发展的时期是()A.20世纪60年代B.20世纪70年代C.20世纪80年代初期D.20世纪80年代中后期E.20世纪90年代初期14.毛细管电泳时进样体积在nL级,样品浓度可低于的数量是()A.可低于10一2mo1/LB.可低于10一3mo1/LC.可低于10一4mo1/LD.可低于10一5mo1/LE.可低于10一6mo1/L15.毛细管电泳的特点()A.容易自动化,操作繁杂,环境污染小B.容易自动化,操作简便,环境污染大C.容易自动化,操作繁杂,环境污染大D.不易自动化,操作简便,环境污染小E.容易自动化,操作简便,环境污染小16.毛细管等速电泳常用于分离()A.小离子、小分子、肽类及蛋白质B.大离子、小分子、肽类及蛋白质C.小离子、大分子、肽类及蛋白质D.小离子、中分子、肽类及蛋白质E.大离子、中分子、肽类及蛋白质17.理想的毛细管柱除应具有一定的柔性、易于弯曲,还应是()A.化学和电惰性的、紫外光可以透过、耐用又便宜B.化学和电惰性的、红外光可以透过、耐用又便宜C.化学和电惰性的、可见光可以透过、耐用又便宜D.化学和电惰性的、紫外和可见光可以透过、耐用又便宜E.化学和电惰性的、紫外和红外光可以透过、耐用又便宜18.目前所使用的毛细管柱内径是()A.5μm~25μmB.15μm~35μmC.25μm~75μmD.30μm~80μmE.50μm~100μm19.最初出现的电泳毛细管直径为()A.1mm~2mmB.1mm~3mmC.2mm~4mmD.3mm~5mmE.3mm~6mm20.毛细管电泳紫外检测器质量检测极限为()A.10-10~10-12B.10-13~10-16C.10-14~10-17D.10-15~10-18E.10-16~10-1921.毛细管电泳紫外检测器浓度检测极限为()A.10-1~10-3B.10-2~10-6C.10-5~10-8D.10-7~10-9E.10-10~10-1222.稳压稳流电泳仪属于中压电泳仪。
第六章电泳技术和常用电泳仪习题参考答案一、名词解释1.电泳:指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。
2.毛细管电泳的电场强度:在给定长度的毛细管两端施加一个电压后所形成的电效应强度。
3.蛋白质的等电点:当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷(即净电荷为零),致使蛋白质分子在电场中不会移动,称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。
4.电泳速度:在单位时间内,带电粒子在毛细管中定向移动的距离。
5.迁移率:带电粒子在单位电场强度下的移动速度,常用μ来表示。
6.毛细管电泳技术:是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分之间迁移速度(淌度)和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
7.电泳淌度:带电粒子在毛细管中定向移动的速度与所在电场强度之比。
8.迁移时间:毛细管中,带电粒子在电场作用下作定向移动的时间。
9.毛细管电泳电渗流:在高电压下,溶液中的正电荷与毛细管壁表面的负电荷之间作用,引起流体朝负极方向运动的现象。
10.焦耳热:在高电场下,毛细管中的电解质会产生自热现象,称该热量为焦耳热。
11.电渗:电场中液体对于固体支持物的相对移动。
12.吸附作用:介质对样品的滞留作用。
二、选择题【A型题】1.C2.D3.B4.E5.A6.B7.C8.E9.D10.A11.E12.E13.D14.C15.E16.A17.D18.C19.E20.B21.C22.D23.E24.B25.D26.E27.D28.B29.C30.A31.B32.D33.C34.D35.B36.C37.D38D【X型题】1.ABCE2.ABCD3.ABCDE4.ABCE5.ABCD6.ABCE7.ABE8.ACE9.ABC10.ACDE11.ABCD12.ABCDE13.ABCE14.ABCD15.BCDE16.ABCDE17.BCDE18.ABCE19.ABDE20.ABCDE21.ABCD22.ABCD23.ABCE24.ABCD25.BCDE26.ABDE三、简答题1.简述电泳、电泳技术的概念。
电泳仪电泳仪于1937年研发,常用支持物体有滤纸、醋酸纤维薄膜等。
电泳技术是分子生物学讨论不可缺少的紧要分析手段。
电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。
目录注意事项使用方法仪器原理注意事项1.电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。
同时要求仪器必需有良好接地端,以防漏电。
2.仪器通电后,不要临时加添或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。
3.由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至尽头所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。
4.在总电流不超过仪器额定电流时(电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则简单影响仪器寿命。
5.某些特别情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必需先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,简单造成不必要的人为机器损坏。
6.使用过程中发觉异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立刻切断电源,进行检修,以免发生意外事故。
研发背景1937年,瑞典生化学家Tiselius集前人百余年探究电泳现象之大成,创造了Tiselius电泳仪,在此基础上建立了讨论蛋白质的自由界面电泳方法,利用该法首次证明人血清是由白蛋白(A)、α、β、γ球蛋白构成,并因此于1948年获得阿果奖。
随后电泳技术的进展突飞猛进,1949年,RicketlsMarrack等人证明人血清蛋白质经电泳分别可依次分为白蛋白,α1、α2、β、γ球蛋白五个组分,1957年Reiner对人血清五个组分蛋白进行了定量分析。
但自由界面电泳没有固定支持介质,扩散和对流作用较强,影响分别效果,于是在50时代相继显现了固相支持介质电泳。
生物化学实验常用仪器一、分光光度计分光光度计是生物化学实验中常用的仪器之一。
它利用可见光或紫外光的吸收特性来测量溶液中化合物的浓度。
分光光度计由光源、选择光波长的光栅、样品池和光电探测器等部分组成。
它可以用于测定溶液中物质的浓度、反应速率、酶活性等。
二、离心机离心机是生物化学实验中常用的一种设备,用于分离溶液中的固体颗粒或液体。
离心机利用离心力将样品强制沉淀,使其在离心管中沉积下来。
离心机可用于分离细胞、蛋白质、DNA等生物大分子,广泛应用于细胞生物学、分子生物学和医学研究等领域。
三、pH计pH计是生物化学实验中常用的测量溶液酸碱性的仪器。
pH计通过测量溶液中氢离子浓度来确定其酸碱性。
pH计通常由电极、电极放大器和显示器组成。
在生物化学实验中,pH计可以用于调节溶液的酸碱性,控制酶催化反应的速率,研究酸碱催化等。
四、电泳仪电泳仪是生物化学实验中常用的一种分离技术。
它利用电场将带电的生物大分子(如DNA、蛋白质)在凝胶或缓冲溶液中进行分离。
电泳仪通常由电源、电极、凝胶槽和检测系统等组成。
在生物化学实验中,电泳仪可用于分离和鉴定DNA片段、蛋白质等,用于分子生物学研究、基因工程和医学诊断等领域。
五、高效液相色谱仪高效液相色谱仪(HPLC)是一种常用的分离和分析技术。
它利用溶液在高压下通过填充在柱中的固定相,通过固定相与溶液中分离物之间的相互作用来分离和鉴定化合物。
HPLC通常由溶液输送系统、柱和检测器等组成。
在生物化学实验中,HPLC可用于分离和鉴定氨基酸、蛋白质、核苷酸等生物大分子,广泛应用于生物医药、食品安全和环境监测等领域。
六、质谱仪质谱仪是生物化学实验中常用的一种分析仪器。
它利用样品中化合物的质量与电荷比来进行分析和鉴定。
质谱仪通常由质谱分析部分、离子源和检测器等组成。
在生物化学实验中,质谱仪可用于鉴定未知物质、分析蛋白质结构和代谢产物等,广泛应用于药物研发、天然产物分析和环境监测等领域。
以上是生物化学实验中常用的一些仪器,它们在生物化学研究和应用中发挥着重要作用。