药理学实验一

实验1 附子炮制前后致小白鼠中毒表现得影响(6学时)【目得】观察生附子与制附子致小白鼠得死亡数量,评价炮制对附子毒性得作用。

【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。

【药品】生附子水煎醇沉液(上清液)0、5g/ml、制附子水煎醇沉液(上清液)0、5g/ml。

【动物】小鼠,雌雄各半,体重18 ～22 g。

【方法】小鼠20只,雌雄各半,随机分为2组。

按0、2ml/10g腹腔注射给药,第1组给予生附子水煎醇沉液,第2组给予制附子水煎醇沉液。

观察并记录30min内各组小鼠死亡情况。

【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数,比较两者毒性得大小。

【注意事项】生附子与制附子水煎液制备时均应煎煮4小时以上。

【思考题】根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异得原因。

实验2 生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动得影响(炭末法)(4学时)[目得]了解生大黄、制大黄对肠蠕动得影响以及大黄与芒硝配伍得药理意义。

[原理]利用黑色炭末作为指示剂,观察炭末在肠道得推进距离。

口服生大黄可刺激肠蠕动加速,有泻下作用,故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。

大黄久煎或炮制之后,致泻成份分解,作用减弱,而芒硝在肠内不易被吸收,使肠内渗透压升高,大量水分保留在肠腔,机械性刺激肠壁而致泻。

故生大黄与芒硝配伍有“增水行舟,润燥软坚”之功效,致泻作用增强。

[器材]手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平,烧杯,搪瓷盘或蛙板。

[药品] 炭末生理盐水混悬液0、1g/m(炭末为活性炭),生大黄水煎液1g/ml(含炭末0、1g/m1), 制大黄水煎液1g/ml(含炭末0、1g/ml,生大黄水煎液加芒硝(生大黄1g/ml+芒硝0、5g/ml+炭末0、1g/m1),苦味酸。

[动物]小白鼠。

[方法] 取禁食20~24h成年、体重相近得12只小白鼠,随机分为4组,每组3只,用苦味酸标记。

分别用上述4种炭末液0、3ml/10g体重灌胃。

给药30min后脱颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲部得肠管,置于托盘上。

药理学实验指导（供自学助考班用）实验一药理学实验基础知识与常用动物捉拿、给药【目的】1、学习药理学实验基础知识；2、掌握药理学实验常用动物捉拿、给药方法。

【器材】1ml、5ml、20ml注射器，大、小鼠灌胃针头，4号、6号注射针头，250ml烧杯、鼠笼(或铁丝笼)，天平秤、砝码。

【药品】0.9%生理盐水。

【动物】小白鼠、大鼠、家兔。

【内容】一、实验动物的捉拿方法1、蛙和蟾蜍左手握持蛙或蟾蜍，食指和中指夹住左前肢，拇指压住右前肢；右手将双下肢拉直，左手无名指及小指将其压住而固定。

此法用于淋巴囊注射。

毁脑和毁脊髓则用左手食指和中指夹持蛙或蟾蜍的头部，拇指和无名指小指握持双下肢，右手持刺针进行操作。

2、小白鼠可采取双手法和单手法两种形式。

双手法：右手提起鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻拉，小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。

此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤，并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部，固定于手中。

单手法：小白鼠置于笼盖上，先用左手食指与拇指抓住鼠尾，手掌尺侧及小指夹住尾根部，然后用左手拇指与食指捏住颈部皮肤。

3、大白鼠大白鼠容易激怒咬人，捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠，先用右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住头部，其余手指与手掌握住背部和腹部。

不要用力过大，切勿捏其颈部，以免窒息致死。

4、家兔用左手抓住颈背部皮肤(抓的面积越大，其吃重点越分散)。

将兔提起，以左手托住其臀部，使兔呈坐位。

二、实验动物的给药途径与方法1、小白鼠给药途径与方法灌胃(ig)：左手固定小鼠，右手持灌胃器，灌胃针头自口角进入口腔，紧贴上腭插入食道。

如遇阻力，将灌胃针头抽回重插，以防损伤。

常用灌胃量为0.1～0.2ml/10g。

皮下注射(ih)：可用腹部、背部、腹股沟的皮下，此处皮肤比较松弛，也可由助手协助。

注药量一般为0.1～0.2ml/10g。

肌肉注射(im)：一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴，另一人持连4号针头的注射器，将针头刺入后腿外侧肌肉。

药理学实验一药理学实验基础及基本技能训练【实验目的】熟悉注射器、灌胃针头的构造、规格和主要用途。

学会正确使用注射器及灌胃针头；学常用实验动物的捉持和给药方法；学会实验动物给药量的计算。

【实验对象】小白鼠【实验器材】注射器、灌胃针头、鼠笼、棉签。

【实验药品】生理盐水、碘伏。

【实验步骤】1．多媒体示教实验动物的捉持及给药方法：（实验原理1）（1）捉持法用右手提起鼠尾，将其放于粗糙面（如鼠笼）上。

右手向后拉鼠尾，使其固定在粗糙面上。

此时应趁其不备迅速用左手拇指和食指捏住小鼠双耳及头颈部皮肤。

然后，翻转小鼠使其腹部向上平卧于掌心中，用无名指和小指压住鼠尾并固定于手中（2）给药法①灌胃法（ig）：左手捉持小鼠，头部向上，颈部拉直。

右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，与食管成一直线，然后沿上颚轻轻插入食管，如插入无阻力、小鼠无挣扎、呼吸无异常、口唇无发绀等现象，即可注入药液。

若遇阻力，应退回重插，以免插入气管引起小鼠死亡。

药液量一般为0.1～0.3ml/10g体重，每只不超过0.5ml （图1）。

②腹腔注射法（ip）：左手捉持小鼠，右手持注射器（选用5或6号注射针头），与腹壁呈45°角，自下腹部一侧向头端刺入腹腔。

进针时角度不宜太小，部位不能太高，刺入不能太深，否则会损伤内脏。

药液量一般为0.1～0.2ml/10g体重，每只不超过0.5ml（图2）。

③皮下注射法（sc）：可两人合作，一人用左手捏住小鼠头部皮肤、右手拉住鼠尾固定小鼠；另一人左手捏起小鼠背部皮肤，右手持注射器，将针头刺入背部皮下注入药液。

也可单人操作，按前法捉持小鼠，右手持注射器，针头沿右侧肋缘上穿入皮下，向前推至右前肢腋下部位，推入药液即可。

药液量一般为0.05～0.2ml/10g体重，每只不超过0.3ml。

④肌内注射法（im）：两人合作，一人固定小鼠，另一人将注射器针头刺入小鼠后肢外侧肌肉内注入药液。

药液量每腿不超过0.1ml。

针对药理学有关知识容与实验课的要求，拟开设以下几个方面的实验：实验一:药理学实验的基本知识及基本技能训练（4学时）实验目的与要求：通过实验使学生掌握药理实验有关的动物选择、应用、捉拿、给药、采血等基本知识及基本技能的训练。

要点：一、常用动物捉持方法⑴小鼠捉持⑵家兔捉持二、常用动物给药方法⑴小鼠灌胃——；皮下注射——；腹腔注射——；肌肉注射——；尾静脉注射——；⑵家兔灌胃——；耳缘静脉给药——；三、常用动物取血方法⑴小鼠后眼眶静脉丛取血——用拇指和食,中指捏住鼠颈部,利用捏紧的压力,使静脉丛淤血.将一特制硬玻璃吸管(约长15cm,前端拉成管壁略厚的毛细管),从眼角插入眼睑和眼球之间,轻轻香眼底方向移动，并略加捻转，血即自然顺便玻璃管流出。

⑵眼眶动脉、静脉取血——左手抓住小鼠，拇指和食指尽量将头部皮肤捏紧，使眼球突出，用无钩弯镊将眼球摘除，将鼠倒置，血即流出1. 小鼠捉持法以右手捉小鼠尾，将小鼠放于粗糙面上，向后轻拉小鼠尾部，使小鼠固定于粗糙面上。

用左手的拇指、食指和中指捏住小鼠两耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹住背部皮肤和尾部，使头部朝上，颈部拉直但不宜过紧，以免窒息（见图1—1）。

另一种捉持方法是只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾巴，后用手掌及小指和无名指夹住其尾部，再以拇指及食指抓住两耳和头部皮肤（见图1—2）。

前者易学，后者便与快速捉拿给药。

图1—1 小鼠的捉拿方法1 图1—2 小鼠的捉拿方法22. 小鼠灌胃以左手捉持小鼠，头部朝上，使其头颈充分拉直。

右手拿起装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，再从舌面紧沿上腭进入食道（见图1—3）如插入正确，灌胃针头容易进入，如遇阻力，可能插入气管，应退出再插。

灌胃液最多不超过0.1ml。

图1—3小鼠的灌胃法图1—4小鼠的皮下注射法3. 小鼠皮下注射将小鼠至于铁丝网上，左手抓住小鼠，以拇指扣食指捏起背部皮肤，右手持注射器刺入背部皮下注射药液。

（见图1—4）。

实验1 附子炮制前后致小白鼠中毒表现的影响(6学时）【目的】观察生附子和制附子致小白鼠的死亡数量，评价炮制对附子毒性的作用.【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。

【药品】生附子水煎醇沉液(上清液）0。

5g/ml、制附子水煎醇沉液（上清液)0。

5g/ml.【动物】小鼠，雌雄各半，体重18 ～ 22 g.【方法】小鼠20只，雌雄各半，随机分为2组。

按0。

2ml/10g腹腔注射给药，第1组给予生附子水煎醇沉液，第2组给予制附子水煎醇沉液.观察并记录30min 内各组小鼠死亡情况。

【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数,比较两者毒性的大小。

【注意事项】生附子和制附子水煎液制备时均应煎煮4小时以上.【思考题】根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异的原因。

实验2 生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动的影响(炭末法)（4学时）［目的］了解生大黄、制大黄对肠蠕动的影响以及大黄与芒硝配伍的药理意义。

[原理］利用黑色炭末作为指示剂，观察炭末在肠道的推进距离。

口服生大黄可刺激肠蠕动加速,有泻下作用，故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功.大黄久煎或炮制之后，致泻成份分解,作用减弱，而芒硝在肠内不易被吸收，使肠内渗透压升高，大量水分保留在肠腔，机械性刺激肠壁而致泻。

故生大黄与芒硝配伍有“增水行舟，润燥软坚”之功效，致泻作用增强。

［器材]手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平，烧杯，搪瓷盘或蛙板.［药品] 炭末生理盐水混悬液0.1g/m（炭末为活性炭），生大黄水煎液1g/ml（含炭末0.1g/m1)，制大黄水煎液1g/ml（含炭末0。

1g/ml，生大黄水煎液加芒硝(生大黄1g/ml+芒硝0.5g/ml+炭末0.1g/m1)，苦味酸。

[动物]小白鼠。

[方法] 取禁食20～24h成年、体重相近的12只小白鼠，随机分为4组，每组3只，用苦味酸标记。

分别用上述4种炭末液0。

3ml/10g体重灌胃.给药30min 后脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上。

实验一常用实验动物的实验基本操作实验目的：掌握动物实验的基本操作一、实验动物的选择及捉拿固定（一）实验动物的选择1．小白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？小白鼠性情温顺，易于捕捉，胆小怕惊，对外来刺激敏感。

它胃容量小，不耐饥渴，随时采食。

在机能学实验中常选用该动物。

故适用于大量的实验动物，如：某些药物的筛选实验、半数致死量（LD50）测定、药效比较、毒性实验、妊娠期 20 天左右，常用于避孕药实验及抗癌药实验。

2．大白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？大白鼠性情温顺，行动迟缓，易于捕捉，但受惊吓或粗暴操作时，会紧张不安甚至攻击人。

大鼠嗅觉发达，对外界刺激敏感，抵抗力较强。

大鼠无胆囊，肾单位表浅，肝再生能力强。

大鼠的血压反应比兔稳定，可用它作血压实验，也可用于慢性实验、抗炎、降脂、利胆、子宫实验及心血管系统的实验。

药典规定该动物为催产素效价测定及药品指控中升压物质检查指定动物。

3．家兔生物学特征是什么？主要用于哪些实验？家兔属于草食性动物，性情温顺但群居性差，听觉、嗅觉十分灵敏，胆小易惊，具夜行性和嗜睡性。

它主要利用呼吸散热维持体温平衡，耐冷不耐热，厌湿喜干。

家兔广泛应用于医学研究中。

由于兔耳血管丰富，耳静脉表浅，易暴露，是静脉给药及采血的最佳部位。

兔的减压神经在颈部与迷走交感神经分开走行而自成一束，常用于研究减压神经与心血管活动的关系。

家兔的体温调节较稳定，反应灵敏，常用于发热研究和热源试验，是药品质控中热源检查的指定动物。

家兔对组织胺不敏感，不发生呕吐，因此不适用于组织胺过敏性休克、催吐和镇吐药物的研究。

（二）实验动物的捉拿固定正确的捉拿固定动物是为了不损害动物健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，保证实验顺利进行。

1、如何正确捉拿及固定小白鼠？小鼠性情温顺，一般不会主动咬人，但取用时动作也要轻缓。

抓取时先用右手提起鼠尾，放在鼠笼盖上或易攀抓的粗糟面上，将鼠尾向后轻拉，此时小鼠前肢紧紧抓住粗糟面，迅速用左手拇指及食指沿其背向前捏住两耳和头颈部皮肤，将小鼠尾巴夹在无名指、小指和手掌之间。

实验一药理学实验的基本技能一、实验动物的基本技能和实验技术基础1.实验动物的标记大、小鼠和白色家兔的标记常用3～5％黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。

常用的方法：1号 ---左前腿2号 ---左腰部3号 ---左后腿4号 ---头部5号 ---正中6号 ---尾根部7号 ---右前腿8号 ---右腰部9号 ---右后腿10号 ---不标记2.实验动物的捉持（大、小鼠）(1)小鼠的捉持用右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼盖）上面，向后轻拉鼠尾；用左手拇指和食指捏住其两耳颈背部皮肤，将小鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以无名指和小指夹住鼠尾或小鼠的左后肢。

（2）大鼠的捉持捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔。

用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。

图 1 小白鼠捉持法3、实验动物的给药方法（大、小鼠）（1）小鼠的给药方法灌胃（ig）：将小鼠固定后，使颈部拉直，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，压其头部，使口腔与食道成一直线，沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。

如遇阻力，可将针头抽出再插，以免刺破食管或误入气管。

一般给药量为0.1～0.3ml/10g（体重）。

图 2 小白鼠灌胃法实验图 3 小白鼠腹腔注射法皮下注射（H或sc）：常在背部皮下。

轻轻捏起背部皮肤，将注射针头刺入皮下，稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖位于皮下。

然后注入药液。

一般给药量为0.1～0.20ml/10g （体重）。

图 4 小白鼠皮下注射法腹腔注射（ip）：左手固定动物，右手持注射器，从下腹部外侧，呈45度角刺入腹腔，进针约3～5mm，一般给药量为0.1～0.3ml/10g（体重）。

肌内注射(im)：多注射于后肢股部肌肉，一般每侧不超过0.1ml。

尾静脉注射（iv）：将小鼠置于固定筒内，使尾部露在外面，用70％～75％的乙醇棉球擦尾部，或将鼠尾浸入45～59ºC温水中，待尾部左右侧静脉扩张后，左手拉尾，右手进针。