分离纯化与鉴 定
分离 采样:取适量花园5-10cm深度 的土壤用无菌纸包好,带回实 验室。 土壤溶液:将取回的土壤 严格按照无菌操作,称量1g土 壤加入到10mL无菌水,震荡 5min,配成土壤溶液。 接种:用无菌涂布器蘸取土壤 悬浮液涂布到培养基,置于28 ℃温箱2-3d。在平板
褐球固氮菌
上会出现粘液状的菌落,选取粘度较大并为褐色的菌 落,在阿须贝培养基板上进行划线纯化直到出现单菌 落。 染色:用衬托染色法对褐球固氮菌的荚膜进行染色。 在载玻片一端滴一滴无菌生理盐水,取少许培养了72h 的褐球固氮菌在水中制成悬液,取一滴碳素墨水与菌 液混合,另取一载玻片,将其平整的边缘与菌悬液以 30°接触,推片使其成为均匀的薄层,风干,在薄层 上滴一滴纯甲醇固定1min,加番红染液(番红0.25g,体积 分数为95%的乙醇溶液10mL,蒸馏水80mL)数滴于涂片 上,冲去甲醇,染色1min,以细流水冲洗,晾干或吹 干,置于显微镜下观察。
褐球固氮菌
褐球固氮菌
制作人:月落
周口师范学院
褐bacter chroococcum) 为假单胞菌目、假单胞菌科、褐球固氮菌属。主要 用于细菌肥料。
使用器材及仪器
培养皿、500mL三角瓶、接种环、电子天平、涂布 器、高温蒸汽灭菌锅、超净工作台、摇床、盖玻片、 显微镜
应用
生物固氮 当做菌肥(多为联合固氮),提高农作物产量,改 善品质,提高抗逆性,降低对化学肥料的依赖性 测定固氮酶活性
特征 特性
采集 土样
配制 土壤 溶液
接种 纯化
鉴定 观察
应用
特征特性
细胞较大,球杆状或杆状,2.0~3.0×3.0~6.0微米, 常成对或八叠状排列;有荚膜,周生鞭毛,能运动, 革兰氏阴性。在无氮培养基上生长良好,菌苔粘稠、 糊状,幼培养菌苔透明转乳白色,老培养常呈褐色。