eIF4E、survivin在儿童喉乳头状瘤组织中的表达及意义

eIF4E、survivin在儿童喉乳头状瘤组织中的表达及意义
摘要】目的通过检测真核起始因子4E（eukaryotic initiation factor 4E，eIF4E）、survivin蛋白在小儿喉乳头状瘤及声带息肉组织中的表达情况，探讨它们在喉乳头状瘤发生、发展过程中的作用。

方法采用免疫组织化学技术检测eIF4E、survivin蛋白在48例儿童喉乳头状瘤和15例声带息肉组织中的表达情况。

采用
半定量积分法，将阳性细胞百分率和染色强度相结合判定免疫组化染色结果，用spss13.0软件进行统计学分析。

结果eIF4E、survivin蛋白在喉乳头状瘤组织中的阳性表达率分别为85.42%、81.25%，均明显高于它们在声带息肉组织中的表达率26.67%、46.67%，两者差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论eIF4E、survivin蛋
白在儿童喉乳头状瘤组织中高表达，提示其与儿童喉乳头状瘤的发生、多发性可
能有密切关系。

【关键词】喉乳头状瘤 eIF4E survivin 免疫组化
喉乳头状瘤（Laryngeal papilloma）是喉部最常见的良性肿瘤，可发生于任何
年龄，尤其多见于10岁以下儿童[1]。

研究认为其发病与感染人乳头瘤病毒有关，最常见发病部位为喉部。

临床特征主要为生长迅速、多发性及治疗后易复发，目
前尚无有效的预防复发的方法。

eIF4E基因是一个重要的原癌基因，编码25KD的蛋白eIF4E，参与组成eIF4F
复合体(eIF4E、eIF4A、eIF4G)，可特异性地与真核细胞mRNA的5’末端帽结构结合，在翻译起始阶段起限制调控作用。

eIF4E的过度表达可导致细胞生物学行为
的异常改变，包括促进细胞的快速增殖，以及细胞的恶性转化。

有研究表明，
eIF4E在一些人类肿瘤组织和肿瘤细胞株中呈现高表达水平。

细胞凋亡是细胞在生理或病理条件下由基因调控的程序性死亡过程，主要功
能是清除机体衰老的、损伤的或基因突变的细胞。

凋亡功能受损使突变基因在细
胞内累积，通过延长细胞周期、逃避免疫监视等机制最终导致肿瘤形成。

Survivin
是Amborsinitll等[2]发现的凋亡抑制蛋白家族新成员，通过一个杆状病毒重复序
列抑制凋亡，在许多胚胎组织细胞及大多数人类恶性肿瘤组织中高表达，而在正
常的成熟组织中不表达或低表达。

本研究采用免疫组织化学技术检测儿童喉乳头
状瘤组织及声带息肉组织中eIF4E和survivin的表达情况，以探讨它们在喉乳头状瘤形成、发展中的作用，为今后开展喉乳头状瘤的靶向生物治疗提供理论支持。

1 材料与方法
1.1材料收集我院2000年6月至2012年11月手术切除并经病理证实的喉乳头状瘤标本50例，其中男性27例，女性23例，平均年龄4.37岁。

所有患者术
前未经过药物及放化疗治疗。

同时收集经病理证实为声带息肉的组织15例作为
对照组，其中男性9例，女性6例，平均年龄5.7岁。

所有标本经甲醛固定后做
石蜡包埋，4μm连续切片，苏木精—伊红染色及免疫组织化学染色。

1.2免疫组织化学试剂鼠抗人eIF4E多克隆抗体（美国Santa Cruz公司）；鼠抗人Survivin多克隆抗体（美国Santa Cruz公司）；免疫组化SP试剂盒（武汉博
士德工程有限公司）。

1.3免疫组织化学染色石蜡切片置烤箱内60℃120min利于切片粘附。

石蜡切片常规脱蜡至水，3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶，微波修复后参照SP试剂
盒说明书操作程序进行，用已知的eIF4E阳性表达的乳腺癌组织做阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照，DAB显色后，苏木素—伊红复染，中性树胶封片。

1.4免疫组化结果的判断及计数方法
eIF4E和survivin蛋白免疫组化阳性信号均呈棕黄色，定位于细胞质内。

高倍
镜下每张切片随机选取5个视野，按阳性细胞百分比及着色深浅进行结果判定。

评分标准：①阳性细胞数计分：<1%为0分；1%-25%为1分；26%-50%为2分；51%-75%为3分；>76%为4分。

②细胞着色强度计分：无显色为0分；淡黄色
为1分；棕黄色为2分；棕褐色为3分。

最后综合两部分得分进行综合评分，按
评分积分值进行统计学处理。

1.5统计学处理
所有数据均经SPSS 13.0进行统计分析，计量资料采用-x±S表示，两组均数的
比较用t检验(t-test)；两组以上均数的比较用方差分析（ANVOA）；以α=0.05为
显著性水准。

2 结果
2.1 eIF4E蛋白在喉乳头状瘤组织中的表达
48例喉乳头状瘤组织中，41例eIF4E表达呈阳性，阳性表达率为85.42%；而15例声带息肉组织中有4例呈eIF4E阳性表达，阳性表达率26.67%，两者相比差
异有显著性（P＜0.05）（见表1）。

2.2 survivin蛋白在喉乳头状瘤组织中的表达
48例喉乳头状瘤组织中，39例survivin表达呈阳性，阳性表达率为81.25%；
而15例声带息肉组织中有3例呈survivin阳性表达，阳性表达率20%，两者相比
差异有显著性（P＜0.05）（见表1）。

3 讨论
20世纪40年代，Chevalier Jackson首次提出了“儿童喉乳头状瘤”的概念，复
发性喉乳头状瘤在儿童的发病率约为4/10万，80%发生在7岁以前，且较成人型
喉乳头状瘤更易复发和更具侵袭性，无论何种治疗方案都不能完全治愈疾病。

因此，寻求新的基因治疗方法有望给儿童喉乳头状瘤患者带来福音。

eIF4E是一个分子量为25KD的翻译起始因子复合体的一部分，其基因位于
4q21-4q25，通过增强某些生长因子或重要的细胞生长调节因子的翻译而发挥作用。

eIF4E的过度表达不仅能促进细胞的增殖反应，更能促进细胞的恶性转化。

现有
研究表明，eIF4E在多种恶性肿瘤组织、细胞株中过度表达，并与肿瘤的侵袭转
移能力呈正相关[3]。

Zhou等[4]以122例乳腺癌患者为研究对象，免疫组织化学
结果显示，eIF4E表达水平与组织学分级(P<0.016)、VEGF表达(P=0.007)、IL-8表达(P=0.007)、MVD表达(P=0.006)显著相关。

赵艳霞等[5]研究发现eIF4E在NHL淋巴
组织的表达率明显高于反应性增生淋巴结，并且高、中度恶性淋巴瘤eIF4E的表
达明显高于低度恶性淋巴瘤。

目前关于eIF4E的研究大多集中在恶性肿瘤组织，
而关于喉乳头状瘤中eIF4E蛋白表达的研究鲜有报道。

Survivin是细胞凋亡抑制蛋白家族的新成员，基因定位于人类染色体17q25，
编码含有142个氨基酸的蛋白质，具有抑制细胞凋亡和调控细胞分裂的双重功能，在许多胚胎细胞组织和大多数人类恶性肿瘤中表达，然而在成熟的组织中不表达
或低表达。

相关研究表明，在喉癌组织中survivin呈现高表达，且与肿瘤的分化
程度有相关性，说明该基因与喉部恶性肿瘤的发生发展有密切关系。

本研究创新性地联合检测儿童喉乳头状瘤及声带息肉组织中eIF4E及survivin
蛋白的表达情况，结果证实，上述两种蛋白在儿童后乳头状瘤组织中均呈高表达，而在声带息肉组织中不表达或低表达，再次证明eIF4E及survivin在肿瘤性疾病的发生、发展过程中具有重要意义，为今后儿童乳头状瘤的临床早期诊断、基因治
疗及预后评价提供了理论基础。

表1 eIF4E和survivin蛋白在两组间表达情况的比较
与对照组比较，﹡P＜0.05
参考文献
[1] 孔维佳.耳鼻咽喉头颈外科学[M]. 人民卫生出版社, 2005,1:263.
[2] Ambrosini G, Adida C, Altieri DC. A novel anti-apoptosis gene,survivin,expressed in cancer and lymphoma[J]. Nat Med, 1997,3(8):917-921.
[3] De Benedetti A, Graff JR. eIF4E expression and its role in malignancies and metastases[J]. Oncogene.2004;23(18): 3189-3199.
[4] Zhou S, Wang GP, Liu C, et al. Eukaryotic initiation factor 4E (eIF4E) and angiogenesis: prognostic markers for breast cancer[J]. BMC Cancer.2006;6:231.
[5] 赵艳霞,刘文励,周晟等.真核细胞翻译起始因子4E在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达和意义[J]. 临床内科杂志.2006; 23(2): 115-117.。