洁净手术室空气采样方法Revised as of 23 November 2020洁净手术室空气采样方法1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。
2、采样方法：（1）布点：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m；室内面积 >30 m2，设四角及中央5点，四角点距墙1m。
（2）平板暴露法平板直径9cm、采样高度，暴露5min。
3、检验方法平板37℃培养48h。
计数菌落数并分离致病菌。
4、平板暴露法结果计算50000N细菌总数（cfu/m3）=A×TA为平板面积（cm2）； T 为暴露时间（min）；N 为平均菌落数（cfu）5、结果判定（1）I、II类区域，细菌总数≤10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
（2）III类区域，细菌总数≤200cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。
（3）IV类区域，细菌总数≤500cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样层流手术室空气日常监测方法：要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。
（1）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。
每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。
标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。
单皿最大值不应超过平均值3倍。
（2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。
标准：I级<30cfu/m3 ；II级<150 cfu/m3；III级<450 cfu/m3；IV级<500cfu/m3。
（3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降后在37℃下培养24h。
空气培养采样方法 Jenny was compiled in January 2021医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
二、采样高度与地面垂直高度80-150厘米。
三、布点方法1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1）图12．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2）图2四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，打开后盖面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。
五、结果分析I类区域：<10 cfu/m3II类区域：<200 cfu/m3III类区域：<500 cfu/m3六、附录Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。
Ⅳ类区域：传染病科及病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与标准一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。
采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级：共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。
采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级：共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。
21.2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟；3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养24小时；4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。
5.放置培养皿示意图：盖面朝下斜扣到底盘A边上培养底盘A六、洁净室空气细菌菌落总数标准。
医院惯例空气细菌培养（自然沉降法）采样方法一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
二、采样高度与地面垂直高度80-150厘米。
三、布点方法 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1）2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2）四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确流露5分钟后，送检培养。
五、结果分析I类区域：<10 cfu/m3II类区域：<200 cfu/m3III类区域：<500 cfu/m3六、附录Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与尺度）。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通呵护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。
Ⅳ类区域：传染病科及病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与尺度一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。
采样安插点示意图：二、局部千级，周围万级：共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。
采样安插点示意图：三、局部万级，周围十万级：共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。
采样安插点示意图：四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。
五、要求： 1.送风口集中安插时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散安插时，全室统一检测，测点可均布，不该安插在送风门正下方；2.采样点可安插在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边沿0.12m，培养皿放置30分钟；3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时；4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。
医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法一、采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。
二、采样高度与地面垂直高度0.8-1.5m。
三、布点方法1．面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1m处各取一点（图1）图12．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1m（图2）图2四、采样方法用9厘米直径普通琼脂平皿，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。
五、结果分析I类区域：空气中的细菌菌落总数要求应遵循GB50333II类区域：≤4cfu／（15min·直径9cm平皿）III类区域：≤4cfu／（5min·直径9cm平皿）六、附录Ⅰ类区域：洁净手术部（室）和其他洁净场所（参照洁净室空气培养方法与标准）。
Ⅱ类区域：非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房重症监护病房、血液病病区。
Ⅲ类区域：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与标准一、局部百级，周围千级：共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。
采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级：共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。
采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级：共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。
面积>30m2面积≤30 m2五、要求：1．送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方；2．采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟；3．采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养24小时；4．然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。
