补体C4测定标准操作程序SOP文件

补体C4测定试剂盒 (免疫比浊法)适用范围：用于体外定量测定人血清或血浆中补体C4的含量。

1.1 包装规格表1 包装规格1.2 主要组成成分表2 主要组成成分2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为乳白色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。

2.2 试剂的净含量应不少于表1中的标称量2.3 测定项目2.3.1试剂空白吸光度试剂空白：A340nm下测定空白吸光度应≤0.5000。

2.3.2 准确度用国际参考物质ERM-AD470k/IFCC，对试剂盒进行测试，准确性偏差应不超过±10%。

2.3.3 分析灵敏度样本浓度为30mg/dl时，其吸光度变化在0.1000～0.4000之间。

2.3.4 线性区间在[10，130]mg/dl区间内，相关系数r≥0.990，在[10，30]mg/dl区间内测定的绝对偏差应不超过±10mg/dl，在(30，130] mg/dl区间内测定的相对偏差应不超过±10%。

2.3.5 测量精密度a) 重复性对不同浓度的血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。

b) 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应≤10%。

2.3.6 质控品准确性使用质控物进行测定，准确性误差应≤10%。

2.4 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。

在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3.1、2.3.2、2.3.3、2.3.4、2.3.5a)的要求。

2.5 溯源性按《GB/T 21415-2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，试剂盒校准品的赋值能溯源至国际参考物质ERM-DA470k/IFCC。

补体C4测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中补体C4浓度。

1.1 包装规格试剂1：1×30ml；试剂2：1×10ml试剂1：2×30ml；试剂2：1×20ml试剂1：1×60ml；试剂2：1×20ml试剂1：3×80ml；试剂2：4×20ml试剂1：4×60ml；试剂2：4×20ml试剂1：2×60ml；试剂2：2×20ml试剂1：2×30ml；试剂2：2×10ml试剂1：6×60ml；试剂2：2×60ml2.1 外观试剂1、试剂2应澄清、无异物。

2.2 净含量试剂的净含量不少于标称装量。

2.3 试剂空白吸光度用生理盐水作为样本加入试剂测试时，试剂空白吸光度应<0.40A。

2.4 分析灵敏度C4含量为0.6g/L时，测定吸光度差值的绝对值应>0.005△A。

2.5 线性区间试剂（盒）线性在[0.05，1.2]g/L区间内：2.5.1 线性相关系数（r）应不小于0.990；2.5.2 [0.05,0.3]g/L区间内，线性绝对偏差不超过±0.1g/L；(0.3,1.2]g/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。

2.6 精密度2.6.1 重复性用相同批号试剂盒测试两个水平的样本，所得结果的变异系数（CV）应<10%。

2.6.2 批间差用3个不同批号试剂盒测试两个水平的样本，试剂（盒）批间相对极差应<10%。

2.7 准确度与已上市的同类产品比对，用40个在[0.05,1.2]g/L区间内不同浓度的人源样本，用线性回归方法计算两组结果的相关系数（r）不小于0.990；[0.05,0.3]g/L区间内，线性绝对偏差不超过±0.1g/L；(0.3,1.2]g/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。

医院检验中心Ⅳ型胶原放免测定标准操作规程
（1）产地：
上海海军医学研究生物技术中心。

（2）原理及用途：
Ⅳ型胶原是基底膜网状结构的主要组成成份。

其反映胶原的合成，与纤维化程度正相关。

本测定采用竞争放射免疫分析方法，固相第二搞体作分离剂，测定血清，体液及组织中的Ⅳ-C含量。

（3）试剂:
1）Ⅳ-C标准液:7瓶(0,20,40,80,160,320,640ng/ml) 2）125I-Ⅳ-C:1瓶，冻干品则加10.5ml缓冲液溶解。

3）抗Ⅳ-C血清：1瓶，冻干品则加10.5ml缓冲液溶解4）第二抗体：1瓶，用前充分混匀。

5）缓冲液：1瓶，加双蒸水10倍稀释后备用。

（4）操作步骤（单位：ul）
（5）参考值：
49.77±15.0ug/L。

（6）注意事项：
1．溶液操作宜10度以下，宜低温离心。

2．试剂盒有效期一个月。

补体结合试验操作规程试剂：稀释液（0.85%生理盐水）、补体、溶血素、抗原（由生物制品厂或所提供）、阴阳性血清、2.5%绵羊红细胞悬液、受检血清。

（共七种）材料准备：1、稀释液（0.85%生理盐水）的配制：8.5g氯化钠加蒸馏水至1000ml。

2、绵羊红细胞悬液的配制：由健康成年公绵羊颈静脉采血，流入灭菌含玻璃珠的玻璃瓶内，混摇15—20分钟，脱除纤维，使其失去凝固性。

将脱纤血移入离心沉淀管中，加2-3倍量的生理盐水混匀，以每分2000转的速度离心沉淀10分钟，使红血球下沉，吸弃上清液，再加生理盐水用玻棒搅匀再离心沉淀，反复三次，直至上清液透明为止，最后吸弃上清液，所剩沉淀即为红细胞。

按每2.5毫升的沉淀红血球加入到97.5毫升生理盐水中的比例制备，便为2.5%绵羊红细胞悬液。

此液配制后在5—100C下，24小时内可应用。

若发现有溶血时，需重新配制。

经常做补体结合试验，就迫切需要能将红血球保存。

方法是：将无菌的脱纤维蛋白的绵羊血与无菌的等量的改良的阿尔塞维尔氏液混合于三角瓶中（用三角瓶有利于扩大血球与空气的接触面积），置冰箱中冷藏可保存达两个月。

需用时将血球离心洗涤后即可应用。

改良的阿尔塞维尔氏液配法：葡萄糖24.60克，氯化钠5.04克，柠檬酸钠（含2分子的结晶水）9.6克，蒸馏水1200毫升，10磅10-15分钟高压消毒后保存。

抗原、标准阳性血清、阴性血清、溶血素、补体、由制标单位提供，按说明书使用。

受检血清的收集和处理：以常规方法采血和分离血清，若发现血清混浊或有血细胞混在时，离心沉淀，每分1000转后将上清液分离出来，然后用稀释液将血清作1∶10稀释，按下表规定的水浴灭能。

操作方法：1.将1∶10稀释经灭能的受检血清加入2支三分管内，每管0.5ml。

2.其中一管加工作量抗原0.5ml，另一管加稀释液0.5ml。

3.上述2管均加工作量补体，每管0.5ml，震荡摇匀。

4.置37℃~38℃水浴20分钟，取出放于室温（22℃~25℃）。

检验项目标准操作规程（SOP）- 1—检验标本的采集一、标本的正确采集标本采集必须符合2个条件，即必须满足检测结果正确性的各项要求和检测结果必须能真实地反映检验对象当前病情，避免干扰因素的存在.二、标本的贮存标本采集后尽快送至实验室，若不能及时送检，已采集的标本要按检验规定的贮存条件，如室温、冰浴、温浴或防腐贮存，将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中，避免振摇，以免标本遗洒或溶血影响检测结果.三、标本的运送必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结果一致。

四、标本的签收临床工作人员从口才采集标本并将标本从临床运送到实验室及实验室人员接收临床标本，均应按标准化要求进行，做到认真核对，包括标本来源、标本属性、检查项目、标本采集和运送是否合乎要求等,标本送出人员和标本接收人员都要做认真的记录并签字存档.五、标本的处理1、实验室接收标本后应及时正确地予以处理，否则会影响检测结果的准确性。

2、如果取血后未尽快转送或分离血清、血浆，血清与血块簪时间接触可发生变化。

3、实验室接收标本后处理应注意事项：（1）、时间：实验室接收标本后应尽快予以分类和离心.①、促凝标本应尽早处理,可在采血5-15分钟后离心；②抗凝标本可采血后立即离心；③非抗凝（无促凝)标本采血30—60分钟后离心；④抗凝全血标本（全血细胞分析、ESR等）不需要离心.（2）、温度：一般标本为室温(最好是22—25℃）放置；冷藏标本(对温度依赖性分析物）应保持在2—8℃直到温度控制离心。

（3)、采血管放置：应管口（盖管塞）向上,保持垂直立位放置。

（4）、采血管必须封口：管塞移去后会使血PH改变,影响检测结果，封口可以减少污染、蒸发、喷洒和溢出等。

六、分析前的可变因素1、生物因素：可引起所检测物质在体内的变化，此种变化与检测方法无关，分为可变的和固定的生物因素。

2、干扰因素：在收集和分析标本过程中，干扰因素常导致分析结果与被测物真实浓度不符.七、标本采集的基本原则遵照医嘱采集各种标本均应按医嘱执行。

项目三补体的检测——ELISA法【申请单】请完成申请单所要求项目×××市人民医院检验申请单姓名性别年龄门诊号住院号诊断或症状检验标本检验目的送检科室医师送检日期年月日【方法选择】表3-1 补体C3、C4的检测方法速率散射比浊法速率透射比浊法ELISA法单向环状免疫扩散法本次检查选择√【材料准备】1.C3、C4检测试剂盒（ELISA法）。

2.待检者空腹静脉血2ml，不抗凝。

3.半自动酶标仪、洗板机。

4.离心机【操作方法】1.标本处理，3 500rpm离心l0min，分离血清。

2.根据试剂盒说明书要求进行样品测定：①加样，温育；②洗涤，拍干；③加酶结合物，温育；④加酶底物，显色；⑤加终止液，终止反应。

⑥放入酶标仪中，参照说明书设定参数，编号，测读。

【观察结果】查看检测指标并打印结果。

正常参考值：C3：0. 8～1. 55g／L；C4：0. 12～0. 36g／L。

【注意事项】1.补体易失活、降解待测血清在室温（20～25o C）放置不得超过6小时，2～8o C不得超过24小时，故抽血后应及时分离血清并尽快测定。

否则于-20 o C保存标本，但因避免反复冻融标本。

2.试剂盒从冷藏环境中取出时应置室温环境中平衡。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

（4）不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

4.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

避免用手接触，有毒。

实验完成后应立即读取OD值。

8.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

补体C4测定【基本信息】[简要描述]·补体C4(complement C4, C4)是一种由肝脏、淋巴组织、骨髓、腹膜巨噬细胞、单核细胞等组织合成的多功能β1-球蛋白。

·补体C4测定可用于感染症、自身免疫性疾病、免疫复合物病、补体先天性缺乏症的诊断、辅助诊断和鉴别诊断。

[其他名称]C4【测定方法及参考值范围】·单向免疫扩散法：0.553±0.109g/L。

·免疫散射比浊法：0.20-0.54g/L。

【结果及临床意义】[增高]◇疾病因素·传染病·急性风湿热·结节性动脉周围炎·皮肌炎·其他急性炎症·组织损伤·肝癌·心肌梗死[降低]◇疾病因素·自身免疫性肝炎·狼疮性肾炎·系统性红斑狼疮注释：C4的降低常早于其他补体成分，且缓解时较其他成分回升迟。

·1型糖尿病·胰腺癌·多发性硬化症·类风湿关节炎(恶性类风湿关节炎等)·IgA性肾病·遗传性IgA缺乏症·多发性骨髓瘤·先天性或获得性血管神经性水肿注释：C1抑制物缺乏。

·遗传性C4缺乏症·慢性肝炎·重症肝炎·慢性感染·亚急性细菌性心内膜炎·弥散性血管内凝血·多器官障碍综合征·过敏性休克·急慢性低补体性肾炎·神经性厌食·脂肪营养不良·尿毒症·肾病综合征·失蛋白性胃肠症·其他蛋白丢失情况【样本准备与采集】[样本类型]血液[容器]红帽真空管、黄帽真空管[准备与采集]·静脉采血，在30分钟内分离血清，4℃放置不超过60分钟。

如不能立即测定，应-70℃·血清混浊对比浊测定法有影响。

补体C4测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：本试剂盒与ABBOTT ARCHITECT c4000/c8000/c16000全自动生化分析仪配套使用，用于体外定量测定人血清中补体C4的浓度。

1.1包装规格液体双剂型试剂1（R1）：60mL×1，试剂2（R2）：20mL×1；试剂1（R1）：84mL×2，试剂2（R2）：28mL×2。

1.2主要组成成分1.2.1 试剂1（R1）（液体）Tris/HCl 缓冲液（pH 7.5）10mmol/L1.2.2 试剂2（R2）（液体）羊抗人C4抗体浓度根据效价而定2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：2.1.1 试剂1(R1)应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

2.1.2 试剂2(R2)应为淡黄色至淡粉色溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白吸光度在波长600nm处（光径1cm），试剂空白吸光度（A）应≤0.100。

2.4 准确度测定ERM-DA470k,相对偏差应不超过±10%。

2.5 分析灵敏度对应于浓度为0.1g/L的C4所引起的吸光度差值（△A）的绝对值应在0.020～ 0.120的范围内。

2.6 重复性重复测定高、中、低浓度样本，变异系数（CV）应≤5%。

2.7 批间差测定同一样本，批间差（R）应≤5%。

2.8 线性范围在[0.03,0.70]g/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990，在(0.3,0.7]g/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%；在[0.03,0.3]g/L范围内，线性绝对偏差应不超过±0.03g/L。

2.9 稳定性2.9.1效期稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为24个月。

试剂有效期满后3个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

补体C4测定试剂盒（免疫比浊法）
适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中补体C4的含量。

1.1规格
具体产品规格见下表:
1.2组成成分
试剂1：
缓冲液50mmol/L
试剂2：
C4抗血清180ml/L
2.1 外观
2.1.1 外包装完整无破损；
2.1.2 试剂1：无色透明液体；
2.1.3 试剂2：无色或淡黄色澄清或微浊液体。

2.2 净含量
净含量不低于标示值。

2.3 试剂空白吸光度
在主波长340nm、副波长700nm、37℃条件下，试剂空白吸光度不大于0.3。

2.4 线性
2.4.1 线性范围
[5.0，80.0]mg/dl，相关系数r＞0.990。

2.4.2 线性偏差
(30.0，80.0]mg/dl线性范围内，相对偏差不超过±15%；
[5.0，30.0]mg/dl线性范围内，绝对偏差不超过±4.5mg/dl。

2.5 分析灵敏度
检测浓度为38.5mg/dl的样本时，吸光度变化不小于0.08。

2.6 重复性
测试高、中、低浓度的血清样本或质控品，重复测试10次，CV≤10%。

2.7 批间差
用三个不同批号的试剂测试同一样本，重复测试3次，相对极差R≤10%。

2.8 准确度
测定ERM-DA470K/IFCC标准物质，测定结果应不超过标示值的±15%。

2.9 稳定性
原包装试剂2～8℃避光储存，有效期12个月。

效期后1个月内产品应符合2.3、2.4和2.8的要求。

补体C4（C4）测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中补体C4的浓度。

1.1 产品规格1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）、试剂2（R2）、校准品（选配）和质控品（选配）组成。

1.2.1试剂组成试剂1：Tris缓冲液≥20.0mmol/LPEG6000 ≥2.5%试剂2：羊抗人补体C4抗体1.2.2 校准品组成牛血清补体C4抗原目标浓度：80mg/dL该校准品为牛血清基质液体校准品1.2.3 质控品组成水平1：牛血清补体C4抗原目标浓度：20mg/dL水平2：牛血清补体C4抗原目标浓度：40mg/dL该质控品为牛血清基质液体质控品2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。

b) R2应为无色至淡黄色溶液。

c) 校准品应为无色至淡黄色液体。

d）质控品应为无色至淡黄色液体。

2.2 净含量液体组分不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度应不大于0.500。

2.4 分析灵敏度C4试剂盒测定浓度40mg/dL的被测物时，吸光度差值（ΔA）应不小于0.100。

2.5 准确度测定参考物质，测定结果的相对偏差不超过±20%。

2.6 精密度2.6.1重复性变异系数应不大于5%。

2.6.2批间差批间相对极差（R）应不大于10%。

2.7 线性在[3,80]mg/dL范围内，C4试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900；在[3,20]范围内绝对偏差应不超过3mg/dL，在(20,80]范围内相对偏差应不超过±15%。

2.8 质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。

2.9 校准品溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供补体C4校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。

校准品溯源至国际参考物质ERM470K。

2.10稳定性原包装的C4试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为24个月。

鸡补体4（C4）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T15μg/ml -480μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中补体4（C4）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡补体4（C4）水平。

用纯化的鸡补体4（C4）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入补体4（C4），再与HRP标记的补体4（C4）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的补体4（C4）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡补体4（C4）浓度。

标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

血清补体C4含量测定血清补体C4含量测定介绍：C4是血中11种补体成分之一。

测定C4含量有助于系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的诊断和治疗。

血清补体C4含量测定正常值：0.12～0.36克／升（12～36毫克／分升）。

(注：具体参考值请根据各实验室而定。

)血清补体C4含量测定临床意义：增高：见于风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗死、肝癌及各种类型的多关节炎等。

降低：见于系统性红斑狼疮、慢性活动性肝炎、多发性硬化性全脑炎、IgA肾病、胰腺癌晚期。

血清补体C4含量测定注意事项：一、抽血前的注意事项1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。

血液中的酒精成分会直接影响检验结果。

2、体检前一天的晚八时以后，应禁食，以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。

3、抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。

有晕血史者请提前说明，另作特别安排。

二、抽血后应注意1、抽血后,需在针孔处进行局部按压3-5分钟，进行止血。

注意：不要揉，以免造成皮下血肿。

2、按压时间应充分。

各人的凝血时间有差异，有的人需要稍长的时间方可凝血。

所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫，可能会因未完全止血，而使血液渗至皮下造成青淤。

因此按压时间长些，才能完全止血。

如有出血倾向，更应延长按压时间。

3、抽血后出现晕血症状如：头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水，待症状缓解后再进行体检。

4、若局部出现淤血，24小时后用温热毛巾湿敷，可促进吸收。

三、静脉血2ml，不抗凝，分离血清尽快进行测定。

血清补体C4含量测定检查过程：暂无相关信息。

补体C4 含量测定C 4 是补体传统途径（CP）活化中的一个早期成分，由α、β、γ3条肽链经二硫键连接而成，分子量200kD，为β1 球蛋白，合成于肝细胞和巨噬细胞中，经两次细胞内蛋白酶解形成分泌型C4（C4s），分泌于细胞外，再次酶解后成为血浆型C4（C 4p），二者溶血活性相等。

在Mg 离子存在下，C1使C4的a链裂解成C4a 和C4b，C4a 为一弱过敏毒素，C4b 大部分游离于液相中，无活性，与免疫复合物（IC）或靶细胞膜结合的C4b则与C 2a形成了C4b2a（C3 转换酶）在C 4b2a作用下，C 3开始裂解，在激活补体，促进吞噬，防止IC 沉淀和中和病毒方面，C 4 起着一定作用。

常用方法有速率散射浊度法、单向免疫扩散法（SID）、ELISA 法检测患者血清或其他体液中C4含量。

参考值：血清：0．1～0．4g／L （速率散射浊度法）；0．553 ±0．109g／L （SID）临床意义传染病、组织损伤和急性炎症的早期，血清C4 含量可因合成增加而升高，可能是一种急性时相反应（参见补体C3含量测定），特别是多发性骨髓瘤C4 水平可高出正常人8 倍之多。

其降低原因亦同于C3，应当注意的是在补体成分的遗传性缺损中，以C1r、C1s、C4及C2的缺损为多见，已发现由于C4的两个基因座位：C4A、C4B表现出高度的多态性，而出现了30 余种同种异型，这对于医学研究某些相关疾病的发生和发展有重要意义。

临床上，C4的遗传缺损可引起全身性SLE、肾小球肾炎、反复感染以及自身免疫性慢活肝。

在病程活动期时，C4水平更呈显著降低，尤其是SL E ，降低早于其他补体成分，回升晚于其他成分。

对狼疮性肾炎和非狼疮性肾炎，前C 4 降低，后者多数正常。

此外还见于胰岛素依赖性糖尿病、多发性硬化、类风湿性关节炎、良性复发性血尿、IgA 肾病、Henoch－Schonlein紫癜、亚急性硬化性全脑炎、IgA 遗传性缺乏症、麻风病等多种疾病。

血清补体C4测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2原理样品中补体C4与试剂中相应的抗体在溶液中相结合，立即形成抗原-抗体复合物，并形成一定浊度。

该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。

通过与同样处理的校准液比较，计算未知样品中的补体C4浓度。

3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1试剂：本科使用浙江伊利康生物技术限公司的试剂盒. （浙食药监械（准）字2014第2400384号YZB/浙2314-40-2014）4.1.1试剂盒组成如下:R1三羟甲基氨基甲烷缓冲液100mmol/L，聚乙二醇40g/L R2抗体试剂：羊抗人补体C3抗体适量，叠氮钠0.95g/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含有稳定剂，可能存在一定的刺激作用和毒性，请勿直接接触皮肤及眼睛。

一旦接触，即用大量清水冲洗。

请勿吞服。

4.2 校准品：使用浙江伊利康生物技术限公司提供的C4校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

补体C4测定试剂盒（免疫比浊法）组成：适用范围：该产品用于体外定量测定人补体C4的含量。

1.1规格规格1：(试剂1：20mL；试剂2：4mL)；规格2：(试剂1：40mL；试剂2：8mL)；规格3：(试剂1：60mL；试剂2：12mL)；规格4：(试剂1：60mL×2；试剂2：12mL×2)；规格5：(试剂1：60mL×3；试剂2：12mL×3)；1.2组成试剂盒组成见表1表1 补体C4测定试剂盒组成2. 性能指标2.1外观试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰，试剂盒组分齐全，液体无漏液；试剂1、试剂2为透明液体，不得有沉淀和絮状物。

2.2装量每瓶不少于标示值。

2.3试剂空白吸光度用指定的空白样品测试试剂（盒），在光径1cm下，在340nm处测定试剂空白吸光度A≤0.50。

2.4分析灵敏度测定0.38g/L被测物，吸光度变化ΔA≥0.050。

2.5线性范围2.5.1在[0.05，1.28]g/L内,相关系数R≥0.990。

2.5.2在[0.05,0.4]g/L内，线性绝对偏差不超过0.04g/L；(0.4,1.28] g/L 内，线性相对偏差不超过±10%。

2.6 重复性重复测试（0.17±0.04）g/L和（0.30±0.1）g/L样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于10%。

2.7批间差测定（0.17±0.04）g/L和（0.30±0.1）g/L样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。

2.8准确度回收率在85- 115%之间。

2.9效期稳定性试剂有效期为12个月取到效期后一个月内进行检测，测定结果应符合2.3-2.6、2.8项要求。