苏教版第三章细胞质和细胞器
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生物一轮复习导学提纲(6)必修一:细胞质和细胞器班级______ 学号_____ 姓名____________1.如图甲与图乙是真核细胞内两种重要的细胞器模式图,回答有关问题:(1)观察两种细胞器时需染色的是______(填字母),所用染色剂是___________;不需染色的是_______(填字母),选菠菜作为实验材料撕________________(哪一部位)的细胞。
(2)①②的主要成分是____________,其结构特性是____________。
(3)③是该细胞器中某一结构的放大图示,其名称为______________,在光照下发生反应的产物是________________。
若在其他条件适宜,植物缺少Mg时,将直接影响___________的合成进而影响光反应。
(4)在④中除含有大量催化反应的酶等物质外,还含有____,与该细胞器的复制有关;在图甲中如果用放射性同位素对O2进行示踪,最先出现放射性同位素的产物是__________。
2.下图是一个细胞的亚显微结构图,请仔细观察后回答下列问题(在横线上写出细胞或结构的名称,括号内写标号):⑪该图是____________细胞的模式图。
⑫与烟草叶细胞相比,它所特有的结构是[]__________。
⑬与核糖体形成有直接关系的结构是[]__________。
⑭将丙酮酸彻底氧化分解的场所是[]__________。
⑮细胞内蛋白质等物质的运输通道是[]__________。
⑯细胞内具有双层膜结构的有____________________(填标号)。
3.下图是动植物细胞亚显微结构模式图。
请据图分析:(1)比较该图A、B两部分,高等动物细胞内不含有的细胞器有________(填标号)。
(2)A细胞中,产生CO2的场所为________。
若B细胞线粒体中产生的一个CO2扩散进入一个相邻细胞进行光合作用,则该CO2分子穿过的磷脂分子共________层。
第三章细胞的结构和功能第3课时细胞的类型和结构(3)考纲要求考点梳理1 在电子显微镜下观察,细胞核主要由、、组成。
核膜是层膜,上有小孔,称为,是蛋白质、RNA等大分子物质进出细胞核的通道。
核仁与的形成有关。
染色质是指细胞核中被染料染成深色的物质,主要由和组成。
染色质和是细胞中同一种物质在不同时期的两种表现形态。
细胞核是储存和复制的主要场所,也是细胞和活动的控制中心。
2 与真核细胞相比较,原核细胞最大的区别是。
除此之外,原核细胞只有而无其他复杂的细胞器,原核细胞细胞壁的成分是肽聚糖,而真核细胞细胞壁的主要成分是。
3 细胞只有保持性,才能正常完成各项生命活动。
基础过关1 (2011江苏学业水平测试,3)“超级细菌”是一种绝大多数抗生素不再敏感的细菌,它的产生与人们滥用抗生素有关,“超级细菌”具有的结构特点是( )A 没有DNAB 没有细胞质C 没有核糖体D 没有成形的细胞核2 (2011江苏学业水平测试,4)、细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心,这是因为细胞核( )A 体积大B 具有核膜C 位于细胞中心D 储存着大量的遗传信息3 (2011南京模拟,5)大肠杆菌、酵母菌和蓝藻共同具有的结构是( )A 线粒体B 核糖体C 染色体D 细胞核4 (2011扬州模拟一,2)组成染色体和染色质的主要物质是( )A 蛋白质和DNAB DN A和RNAC 蛋白质和RNAD DNA和脂质5 (2011扬州模拟一,3)下列生物中不属于真核生物的是( )①噬菌体②颤藻③酵母菌④水绵A ①②B ①③C ②③D ③④6 (2011徐州模拟,1)乳酸菌与小麦细胞的主要区别在于乳酸菌不具有( )A 细胞壁B 细胞膜C 核膜D 核糖体7 (2011扬州中学模拟,9)把变形虫的核从其体内取出,观察无核变形虫中的一系列变化的特点,下列最有可能出现的现象是( )A 失去核的变形虫,暂时运动,但在几天后核就再生,能正常活动B 失去核的变形虫,细胞质功能逐渐衰退,几天内将死亡C 失去核的变形虫,可以进行无丝分裂D 除去核以后,细胞质活动暂时提高,因此细胞分裂变得更加旺盛8 (2011宜兴一中模拟二,3)下列有关大肠杆菌组成物质和结构的说法中,错误的是( )A 含量最多的物质是水B 含有DNA、RNAC 无核膜包被的细胞核D 含有核糖体、线粒体等细胞器9 在真核细胞中,细胞核的主要功能是( )A 分解有机物,释放能量B 遗传和代谢活动的控制中心C 合成有机物,储存能量D 维持渗透压,保持细胞形态10 细胞核中与核糖体形成有关的结构是( )A 核膜B 染色质C 核仁D 核孔11 关于细胞器的界定,目前有两种意见,其中之一认为:细胞器是细胞内膜与细胞质基质隔离的相对独立的结构。
生物中考苏教版知识点总结一、细胞的结构和功能1. 细胞的基本结构细胞是生物体的基本单位,主要由细胞膜、细胞质、细胞器和细胞核组成。
细胞膜是细胞的外包膜,具有选择性通透性;细胞质是细胞内液态基质,包括细胞器和细胞原质;细胞器主要包括内质网、高尔基体、线粒体、叶绿体、溶酶体等;细胞核是细胞的控制中心,内含染色质和核仁。
2. 细胞的功能细胞具有营养、氧气和水的吸收与排泄、生长与繁殖、分泌与排泄、运动和感应等功能。
3. 细胞的分裂细胞的分裂包括有丝分裂和减数分裂两种类型。
有丝分裂包括前期、中期、后期和间期,其过程包括染色体的复制、染色体的缠绕与解缠、纺锤体的形成与消失等。
减数分裂包括减数分裂一、减数分裂二和间期。
二、生物的遗传与变异1. 遗传物质DNA是决定遗传特征的分子,具有双螺旋结构,由磷酸、糖和碱基组成。
四种碱基包括腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鸟嘌呤。
2. 遗传物质的复制DNA的复制是通过半保留复制的方式进行的,包括解旋、复制和连接三个过程。
3. 遗传的规律性孟德尔遗传规律主要包括基因的组合、分离和再组合三项规律。
基因的表现型由显性和隐性基因决定。
4. 变异变异是生物在繁殖过程中产生的新性状。
变异的表现可以是有利、有害或中性。
三、生物的调节与协调1. 神经系统神经系统包括中枢神经系统和外周神经系统。
中枢神经系统由脑和脊髓组成,负责接受和处理信息;外周神经系统由脑神经和脑神经节组成,负责传递信息。
2. 激素系统激素系统由内分泌腺和激素组成,通过血液循环对机体的代谢、生长和繁殖等进行调节。
3. 调节与协调功能生物体内部的稳态是通过神经和激素系统的调节协调实现的。
四、生物体的营养与代谢1. 细胞的呼吸细胞的呼吸包括有氧呼吸和无氧呼吸两种类型。
有氧呼吸包括糖异化和细胞色素系统两个阶段,产生大量ATP;无氧呼吸只有一个阶段,产生少量ATP。
2. 植物的光合作用光合作用是植物通过叶绿体中的叶绿体素将二氧化碳和水转化为葡萄糖和氧气的反应,包括光反应和暗反应两个阶段。
细胞质细胞内的胞浆和细胞器细胞质是细胞内的一种特殊结构,由胞浆和细胞器组成。
它在维持细胞功能和生命活动中起着重要的作用。
本文将从细胞质的组成和功能两个方面介绍细胞质的相关知识。
一、细胞质的组成细胞质由胞浆和细胞器两部分组成。
1. 胞浆:胞浆是细胞质的基础物质,它是由细胞器在其中悬浮的胶状物质。
胞浆主要由水、有机物、离子、蛋白质等组成。
它的主要功能是提供细胞内各种化学反应所需的环境,并提供细胞器运动的场所。
2. 细胞器:细胞器是细胞质中具有特定结构和功能的小器官。
常见的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体、溶酶体等。
(1)核糖体:核糖体是细胞中参与蛋白质合成的重要细胞器。
它由RNA和蛋白质组成,分布在胞质中或附着在内质网上。
核糖体主要的功能是根据DNA中的信息合成蛋白质。
(2)内质网:内质网是一种复杂的膜系统,存在于细胞质中。
它分为粗面内质网和滑面内质网。
粗面内质网上覆盖着许多核糖体,参与合成蛋白质。
而滑面内质网则主要参与脂类的代谢和合成。
(3)高尔基体:高尔基体是由扁平而弯曲的膜片叠加而成。
它主要参与蛋白质的修饰、分拣和运输。
高尔基体还与溶酶体和内质网之间有着重要的联系。
(4)线粒体:线粒体是细胞内的“动力站”,主要参与细胞呼吸过程中的能量转换,并产生三磷酸腺苷(ATP)。
(5)溶酶体:溶酶体是一种包裹着消化酶的小膜囊,主要参与细胞对外界物质的摄取、消化和分解。
二、细胞质的功能细胞质作为细胞的重要组成部分,具有以下功能:1. 细胞代谢:胞浆中有丰富的溶胶和胶体,是细胞内许多生物化学反应的场所。
胞浆中发生的一系列化学反应,如蛋白质合成、糖原合成、脂肪代谢等,都依赖于细胞质的环境。
2. 细胞运动:细胞质中的胞浆可以提供细胞器的运动场所。
细胞器在胞浆中的运动对于细胞的形态维持、物质运输、信号传导等起着重要的作用。
3. 物质传递:细胞质中的细胞器通过胞浆与细胞膜相连,形成细胞内物质传递的通路。
细胞器之间通过胞浆中的胶束作为“公路”,使细胞内物质传递更加便捷。
2012-2013学年度第一学期高一生物备课组3.2.2 细胞质和细胞器学案编号:08 编制:程素云审核:徐德杰【学习目标】1.准确说出各种细胞器的名称2.举例说出主要细胞器的结构和功能【自学质疑】一、细胞质的组成1、组成:2、细胞质基质(1)存在状态:(2)成分:(3)功能:二、细胞器说出下列各种细胞器的分布、结构和功能,并画出各细胞器的模式图(1)线粒体(2)叶绿体(3)内质网:(4)高尔基体(5)核糖体(6)液泡:(7)中心体:三、各种细胞器的归纳比较分布动植物细胞共有的细胞器动物和低等植物细胞特有的细胞器高等植物细胞特有的细胞器结构不具膜结构的细胞器具单层膜结构的细胞器具双层膜结构的细胞器功能与能量转换有关的细胞器增大细胞内膜面积的细胞器与细胞有丝分裂有关的细胞器与分泌蛋白的合成分泌有关的细胞器【矫正反馈】1.植物细胞壁的形成与高尔基体有关,这说明了高尔基体 ( )A.具有合成蛋白质的能力 B.具有合成脂肪的能力C.具有合成多糖的能力 D.具有合成核酸的能力2.线粒体、叶绿体和内质网都具有( )A.基粒B.基质C.膜结构D.少量DNA3.真核细胞内有双层膜结构的一组细胞器是( )A.叶绿体和核糖体B.线粒体和高尔基体C.叶绿体和线粒体D.核糖体和高尔基体4.下列不含有脂质的结构是 ( )A.叶绿体 B细胞膜 C.线粒体 D.中心体5.活细胞中,与酶的合成和分泌直接有关的是 ( )A.核糖体与高尔基体 B.中心体与高尔基体C.内质网与核糖体 D.高尔基体与液泡【迁移应用】1.下图是植物细胞亚显微结构的模式图,请根据图来回答:(示例:[8]细胞核)⑴.植物细胞内有,而动物细胞内没有的结构是:[ ] 、[ ] 、和[ ] 。
⑵.[1]高尔基体在植物细胞中的主要功能是______________________________。
⑶.细胞进行有氧呼吸的主要场所是。
_______________。
⑷.植物细胞与动物细胞所共有的细胞器除[6]、[10]核糖体外,还有[ ]___________________、[ ]___________________和[ ]___________________。
高一生物第三章八大细胞器的比较细胞器是细胞中通过生物膜与细胞中其他局部分隔开来的、功能上独立的亚细胞构造,与细胞质基质统称为“细胞质〞。
以下是为大家精选的高一生物第三章八大细胞器的比较,希望对你有帮助!八大细胞器的比较:1、线粒体:(呈粒状、棒状,具有双层膜,普遍存在于动、植物细胞中,内有少量DNA和RNA内膜突起形成嵴,内膜、基质和基粒中有许多种与有氧呼吸有关的酶),线粒体是细胞进展有氧呼吸的主要场所,生命活动所需要的能量,大约95%来自线粒体,是细胞的“动力车间〞2、叶绿体:(呈扁平的椭球形或球形,具有双层膜,主要存在绿色植物叶肉细胞里),叶绿体是植物进展光合作用的细胞器,是植物细胞的“养料制造车间〞和“能量转换站〞,(含有叶绿素和类胡萝卜素,还有少量DNA和RNA,叶绿素分布在基粒片层的膜上。
在片层构造的膜上和叶绿体内的基质中,含有光合作用需要的酶)。
3、核糖体:椭球形粒状小体,有些附着在内质网上,有些游离在细胞质基质中。
是细胞内将氨基酸合成蛋白质的场所。
4、内质网:由膜构造连接而成的网状物。
是细胞内蛋白质合成和加工,以及脂质合成的“车间〞5、高尔基体:在植物细胞中与细胞壁的形成有关,在动物细胞中与蛋白质(分泌蛋白)的加工、分类运输有关。
6、中心体:每个中心体含两个中心粒,呈垂直排列,存在于动物细胞和低等植物细胞,与细胞的有丝分裂有关。
7、液泡:主要存在于成熟植物细胞中,液泡内有细胞液。
化学成分:有机酸、生物碱、糖类、蛋白质、无机盐、色素等。
有维持细胞形态、储存养料、调节细胞浸透吸水的作用。
8、溶酶体:有“消化车间〞之称,内含多种水解酶,能分解衰老、损伤的细胞器,吞噬并杀死侵入细胞的病毒或病菌。
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第三章细胞和细胞器及间质的分离细胞内各种结构的比重、大小不同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,所以常用不同介质、不同转速、不同时间,通过分级离心,将细胞内各种结构组分(细胞核、核仁、线立体、高尔基复合体、溶酶体、染色体等)分离出来。
主要方法是:组织匀浆的制备、离心分级分离各组分、分析鉴定三个步骤。
一、细胞的分离根据细胞的大小、密度常可分离不同具有不同生物学特征的各种细胞亚群。
其原理是处于悬液中的细胞沉降率与细胞的直径成比例,也与细胞密度和分离介质密度之间差异成比例,假设细胞为球形,则其在溶液中在引力场内的沉降速度以下列公式表示V= 2g(ρc–ρs)r²9η遵循Stokes定律,其中:ρc和ρs分别是细胞和溶液的密度,η为溶液粘度,r为细胞半径,g为重力加速度。
根据细胞直径(大小)的分离方法:主要是速度下降。
细胞在单位引力下,通过低密度介质,或在低离心力作用下,通过密度梯度沉降。
由于细胞大小不同,沉降速度不同,细胞越大沉降越快。
根据细胞密度分离是等密度分离,就是细胞在连续密度梯度分离介质中,在强离心作用下,细胞最后到达与其自身密度相同的分离介质层面,并能保持平衡,在非连续密度梯度中,分离的细胞主要集中于介乎其自身密度两种密度介质的交界面上,从而达到分离。
操作方法:(一)单位重力沉降法:分离介质主要是牛血清白蛋白,其分离的细胞活性高、费用也昂贵。
现已用蔗糖替代,仍能取得较好的分离效果。
1.在固定沉降池上方加入30ml PBS/BSA,含有细胞1×108于池底。
2.从池周边加入50ml PBS覆盖于样品上,不要使整个界面破坏。
3.下口接1%蔗糖梯度液,稍松下口,缓慢放入50ml 1%蔗糖梯度液,约10ml/min。
4.接通梯度混合仪,从下口加入1200ml 1~2%蔗糖梯度液,速度为50ml/min。
5.最后加入500ml 2.5%蔗糖梯度液。
6.整个沉降系统,于4℃,静置4h,这时细胞按大小先后沉降,未成熟的红细胞在先,成熟的网织红细胞在最后。
第三章细胞的基本结构植物细胞亚显微结构模式图1细胞膜 2细胞壁(植物特有)3细胞质基质 4叶绿体(植物特有)5高尔基体 6核仁 7染色质 8核外膜9核内膜 10核孔 11线粒体 12内质网13核糖体14中央大液泡(植物特有)15液泡膜(植物特有)1.细胞壁主要成分是纤维素和果胶,有支持和保护功能。
2.细胞膜(1)组成:主要为磷脂双分子层(基本骨架)和蛋白质,另有糖蛋白。
(2)结构特点:具有一定的流动性(原因:磷脂和蛋白质的运动);功能特点:具有选择透过性。
(3)功能:保护,控制物质进出,信息交流3.细胞质:细胞质基质 + 细胞器(1)细胞质基质:为代谢提供场所和物质和一定的环境条件,影响细胞的形状、分裂、运动及细胞器的转运等。
(2)细胞器:线粒体;叶绿体;内质网;高尔基体;核糖体;溶酶体;液泡;中心体。
线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所。
又称”动力车间”。
细胞生命活动所需的能量,大约95%来自线粒体。
(双层)含少量的DNA。
叶绿体是绿色植物能进行光合作用的细胞含有的细胞器,是植物细胞的“养料制造车间”和“能量转换站”。
(双层)含少量的DNA。
内质网是由膜连接而成的网状结构,是细胞内蛋白质的合成和加工,以及脂质和糖类合成的“车间”。
(单层)高尔基体对来自内质网的蛋白质加工,分类和包装的“车间”及“发送站”。
动物细胞中与分泌物的形成有关,植物中与有丝分裂细胞壁的形成有关。
(单层)核糖体是合成蛋白质的场所,有的依附在内质网上称为附着核糖体,有的游离分布在细胞质中称为游离核糖体。
(无膜)由RNA和蛋白质构成溶酶体分解衰老,损伤的细胞器,吞噬并杀死入侵的病毒或细菌。
(“消化车间”)(单层)液泡是贮藏(营养、色素等)、保持细胞形态,调节渗透吸水,是植物细胞保持坚挺的细胞器。
含有色素(花青素)(单层)中心体与低等植物细胞、动物细胞有丝分裂有关。
由两个相互垂直的中心粒构成.(无膜)4.细胞核(1)组成:核膜、核仁、染色质(2)核膜:双层膜,有核孔(细胞核与细胞质之间的物质交换通道,RNA、蛋白质等大分子进出必须通过核孔。
文档收集于互联网,已重新整理排版.word版本可编辑,有帮助欢迎下载支持. 1文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑. 第一篇 组成人体的细胞 第三章 亚细胞结构的分离与鉴定 细胞由各种亚细胞结构组成。其重要的研究手段之一是分离纯化亚细胞组分,观察它们的结构或进行生化分析。离心技术是实现这一目标的基本手段。一般认为,转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机;转速超过25Kr/min,离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/min,离心力超过500Kg。 第一节 亚细胞结构分离的技术 分离亚细胞组分的第一步是制备组织匀浆或细胞匀浆。匀浆(Homogenization)是在低温条件下,将组织或细胞放在匀浆器中加入等渗匀浆介质(即0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液)研磨,使细胞被机械地研碎成为各种亚细胞组分和包含物的混合物。 分离亚细胞组分的第一步是分级分离。它通过由低速到高速离心技术,使非均一混合体中的颗粒按其大小轻重分批沉降到离心管的不同部位,再分部收集,即可得到各种亚细胞组分。由于样品中各种大小和密度不同的颗粒在离心开始时是均匀分布于整个离心管中,故每级分离得到的第一次沉淀必然不是纯的最重的颗粒,须经反复悬浮和离心加以纯化。分离亚细胞组分主要离心技术是差速离心和密度梯度离心。 差速离心(differential centrifugation)是在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。 在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:细胞核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高尔基体、最后为核糖体。由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠,一般重复2~3次效果会好一些。通过差速离心可将细胞器初步分离,但常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。 密度梯度离心(density gradient centrifugation) 是用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降两种。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。分离活细胞的介文档收集于互联网,已重新整理排版.word版本可编辑,有帮助欢迎下载支持. 1文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑. 质要求:能产生密度梯度,且密度高时,粘度不高; pH中性或易调为中性;浓度大时渗透压不大;对细胞无毒。①速度沉降(velocity sedimentation)主要用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。这种方法所采用的介质密度较低,介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。生物颗粒(细胞或细器)在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离;②等密度沉降(isopycnic sedimentation)适用于分离密度不等的颗粒。细胞或细胞器在连续梯度的介质中经足够大离心力和足够长时间则沉降或漂浮到与自身密度相等的介质处,并停留在那里达到平衡,从而将不同密度的细胞或细胞器分离。 等密度沉降通常在较高密度的介质中进行。介质的最高密度应大于被分离组分的最大密度。再者,这种方法所需要的力场通常比速度沉降法大10~100倍,故往往需要高速或超速离心,离心时间也较长。大的离心力、长的离心时间都对细胞不利。因此,这种方法适于分离细胞器,而不太适于分离和纯化细胞。 分离亚细胞组分的第三步是对分级分离得到的组分进行分析,以确认。常要的分析方法包括形态和功能鉴定。 第二节 细胞核与线粒体的分级分离 一、所需试剂及设备 小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺兰染液、0.02%詹纳斯绿B染液、0.9%NaCl溶液。 附:溶液的配制: 1/300詹纳斯绿染液: 取詹纳斯绿1克,加Riger氏液300ml。现用现配。 1/3000中性红染液: 称取中性红 (Neutral red)O.1g,加蒸馏水300ml。室温保存. Ringer Solution: NaCl 0.9g 文档收集于互联网,已重新整理排版.word版本可编辑,有帮助欢迎下载支持. 1文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑. KCl 0.042g CaCl2 0.025g 蒸馏水 100m1 0.25mol/L蔗糖一0.003mom/L氯化钙溶液: 蔗糖 85.5g CaCl2 0.33g 蒸馏水 1000ml 二、操作步骤 (一)制备肝细胞匀浆 将小白鼠用颈椎脱位法处死,迅速开腹取肝,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中,反复洗涤,除去血污,用滤纸吸去表面的液体。 称取1g肝组织(湿重)放在小平皿中,用量筒量取8ml预冷的0.25moL/L蔗糖—0.003mol/L CaCl2溶液,先加少量该溶液于平皿中,尽量剪碎肝组织后,再全加入。剪碎的肝组织倒入匀浆管中,使匀浆器下端浸入盛有冰块的器皿中,左手持之,右手将匀浆捣杆垂直插入管中,上下转动研磨3一5次,用8层纱布 (先用蔗糖液湿润)过滤匀浆于离心管中,然后制备涂片①,做好标记,自然干燥。 (二)分级分离与观察 1. 细胞核的分离提取与观察 将装有滤液的离心管配平后,放入普通离心机,以2500rpm,离心15min;缓缓取上清液,移入高速离心管中,放在冰块中,待分离线粒体用;同时涂一张上清液片②,做好标记,自然干燥;余下的沉淀物进行下一步骤。 用6m1蔗糖一氯化钙溶液悬浮沉淀物,以250Orpm离心15min弃上清,将残留液体用吸管吹打成悬液,滴一滴于干净的载片上,即涂片③,自然干燥。 将涂片①②③用1%甲苯胺兰染色后盖片即可观察。 2. 线粒体的分离提取与观察 将上述装有上清液的高速离心管,从装有冰块的烧杯中取出,配平后,以17000rpm离心20min,弃上清,留取沉淀物。加入0.25moL/L蔗糖—0.003mol/L氯化钙溶液1m1,用吸管吹打成悬液,以17000rpm离心20min,将上清吸入另一试文档收集于互联网,已重新整理排版.word版本可编辑,有帮助欢迎下载支持. 1文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑. 管中,留取沉淀物,加入蔗糖一氯化钙溶液0.1ml混匀成悬液(可用牙签)。取上清液和沉淀悬液,分别滴一滴于干净载玻片上(分别标记④⑤涂片),各滴一滴0.02%詹纳斯绿B染液盖上盖片染色20min。 油镜下观察,颗粒状的线粒体被詹纳斯绿B染成蓝绿色。 第三节 微粒体的分离 细胞通过匀浆破碎时,细胞质膜碎成片段,这些膜片段的末端融合形成的直径小于100nm的小泡。来自不同细胞器(细胞核、线粒体、质膜、内质网等)的小泡有不同的特性,所以可以将这些小泡相互分离。由内膜系统衍生而来的小膜泡形成相似大小的膜泡异质性集合体,称微粒体(microsome)。分离微粒体的方法是利用分级离心方法,去掉细胞核、线粒体后,经超速离心法而制备。具体步骤如下。 1. 将体重约为300g饥俄20h后的大鼠断头,取出肝脏,洗涤,剪碎,加2倍体积的介质溶液(含0.15mol/L蔗糖,0.025mol/L KCl,0.1mol/L Tris-HCl pH7.4, 0.005mol/L MgCl2),在玻璃匀浆器中匀浆; 2. 15000g×10min离心,弃沉淀,取上清; 3. 100000g×60min离心,弃上清,取沉淀,沉淀即为微粒体; 4. 将微粒体保存在介质溶液中。 第四节 溶酶体的分离 溶酶体是由一层单位膜包围,内含多种酸性水解酶的泡状结构。溶酶体含有40多种水解酶,其中包括蛋白酶、核酸降解酶和糖苷酶等。其主要功能是对细胞内物质的消化作用。此外溶酶体与器官形成、激素分泌的调节以及某些疾病的发生密切相关。可采用如下方法分离获得。 1.制备蔗糖梯度溶液:取带有两个小杯的梯度混合器,两个小杯分别装入117ml 2.1mol/L蔗糖和13ml 1.1mol/L的蔗糖; 2.将大鼠处死取出肾脏,以1:8(重量/体积)比例加入0.3mol/L蔗糖,然后在玻璃匀浆器中匀浆肾脏组织; 3.以150g ×10min离心,弃沉淀,取上清液,9000g×3min离心,弃上清液,取沉淀; 4.沉淀从上至下依次为白色、黄褐色、暗褐色三种不同颜色层,上层为膜成文档收集于互联网,已重新整理排版.word版本可编辑,有帮助欢迎下载支持. 1文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑. 分的混合物,中层为线粒体部分,最底层则为半纯化的溶酶体。先用吸管小心吸掉上层,然后沿管壁加入几毫升0.3mol/L蔗糖,慢慢摇管使界面层悬浮起来弃之。用0.3mol/L蔗糖洗涤1次,底层溶酶体部分悬浮在2.5ml 0.3mol/L蔗糖中;5.将2ml悬浮的半纯化的溶酶体铺在蔗糖梯度上面,用玻璃棒搅动最上层的梯度,使梯度和溶酶体之间的界面破坏,然后100000g×150min离心,离心结果可见:梯度溶液分3条明显的带和较少的沉淀。最下层的暗黄色到褐色的带即为纯化的溶酶体。以上所有操作需在0~4℃下进行。 第五节 细胞总蛋白质的分离提取 细胞器是一种动态的结构,如内质网、细胞核和高尔基体等,其蛋白质组成
细胞质和细胞器功能细胞是生物学中的最基本单位,存在于所有生物体中,包括植物、动物和微生物等。
其基本特征是由细胞质、细胞膜、细胞核、细胞器等组成的完整结构。
细胞质是细胞内所有非细胞核部分的总称。
细胞器则是细胞质内的一些特殊结构,在细胞代谢、分化和形态维持等方面担负着重要的角色。
细胞质中含有诸多物质,包括水、溶液、离子、分子等。
其中最占比例的是水分子,可占细胞质总质量的70%以上。
水分子除了为细胞提供溶剂作用外,还能通过渗透和运动将其他物质移动到不同位置。
细胞质中还含有多种小分子,如葡萄糖、蛋白质、脂质、核酸等,这些物质是构成生命体的基础。
细胞器分为多种,常见的有内质网、高尔基体、线粒体、溶酶体、核糖体等。
内质网是一系列相互连接的内膜系统,通常分为粗面内质网和平滑内质网两种类型。
其中粗面内质网表面附着大量核糖体,负责蛋白质的合成和后续的翻译修饰;平滑内质网则负责多种代谢活动,如脂类合成和解毒等。
高尔基体则是一种配有不同功能酶的组织化学复合体,主要负责多种物质的转运、分泌和加工。
线粒体是细胞的能量中心,主要负责三磷酸腺苷(ATP)的合成。
其内部含有许多与ATP合成相关的蛋白质和酶,这些蛋白质和酶能将葡萄糖、脂肪和氨基酸等能源物质转换为ATP,从而为细胞提供必要的能量。
溶酶体则是一种负责物质降解的细胞器,其内部含有多种水解酶,可对多种蛋白质和其它物质进行降解和分解。
由于其水解酶具有低pH值,所以是一种强酸性细胞器,能有效地分解细胞垃圾和有毒物质,并为细胞提供必要的原料。
核糖体是细胞内的一种与蛋白质合成相关的碳水化合物复合物,负责将mRNA 与氨基酸通过特定的配对方式结合,形成多肽链和最终的蛋白质。
其中核糖体由大、小两个亚基组成,分别具有不同的功能,如mRNA的结合、氨基酸的结合等。
核糖体的其它重要功能包括:调节细胞凋亡、抗生素的靶标、病毒的限制因子等。
在细胞内,细胞质和细胞器的功能相互协调,共同完成包括代谢、分化和形态维持等重要生命过程。