高效毛细管电泳简介
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第 1 页 共 2 页 高效毛细管电泳色谱仪有机基质整体柱制备
高效毛细管电泳色谱仪有机基质整体毛细管柱是采用柱内直接键合的方法在毛细管中进行原位自由基聚合反应,形成连续床固定相,不用柱塞,简化了柱制备过程。通过改变单体可引入多种官能团,有更好的多孔性和渗透性,对流动相阻力小,溶质在固定相和流动相之间快速分配,有利于实现高速分离。
有机基质整体毛细管柱有以聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯和聚苯乙烯为基质的整体柱。典型的聚合液以含一个乙烯基的化合物为单体,以含两个乙烯基的化合物为交联剂,以含离子基团的化合物为产生电渗流的单体,为了形成多孔结构往往添加致孔剂。有机基质整体毛细管柱种类比较单一,机械强度较差,容易发生收缩和溶涨现象,使柱性能发生变化,影响柱寿命。
一、聚丙烯酰胺基质整体毛细管柱制备:
以聚丙烯酰胺为基质的整体柱从1995年首次出现以来得到了广泛应用。最初的整体柱一般以丙烯酰胺为单体,以亚甲基二丙烯酰胺为交联剂,以含离子基团的化合物为产生电渗流的单体,所得到的整体柱是亲水性较强的柱床。为了获得疏水性较强的柱床,可添加疏水性较强的单体,如十四烯、十六烯和十八烯等,利用反相机制进行分离。 第 2 页 共 2 页 二、聚甲基丙烯酸酯基质整体毛细管柱制备:
以聚甲基丙烯酸酯为基质的整体柱是硬质柱床,柱制备比较简单,毛细管壁可不经过预处理将聚合物混合液引入到柱中后,经水热处理可得到柱体与管壁结合很好的整体柱。
以2-(三甲基磺酸甲酯铵)乙基甲基丙烯酸酯(MEAMS)为单体,以乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,以正丙醇和1,4-丁二醇的混合液为致孔剂,可得到具有反相和离子交换混合模式的整体柱。MEAMS中的铵基既作为产生反向电渗流的基团,又作为强离子交换固定相。该整体柱对中性化合物表现出反相色谱机制,对带电荷的物质既有反相作用机制,又有离子交换作用机制。使用该整体柱分离碱性化合物时,还消除了一般电泳和电色谱中由于碱性化合物吸附所造成的峰拖尾现象。
2011-12-31 毛细管电泳技术及其在检测分析中的应用 分析化学
1 / 4 毛细管电泳技术及其在检测分析中的应用
摘要:毛细管电泳技术(CE)作为现今一种主要的分析技术,凭借其高效、灵敏、快速、设备简单、广泛适用性等特点,广泛应用于各个领域。本文简要概述了CE技术的原理及特点,并简述了它在环境分析、食品分析、药物分析、生物大分子分析等各个领域的应用。
关键词:毛细管电泳;分析;应用
1. 毛细管电泳技术简介
1.1 产生与发展
毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis,
CE)是一种在电泳技术的基础上发展的一种现代分离技术。电泳技术作为一种分离技术已有近百年历史,1937 年A.Tiselius首先提出:传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热。1967年,Hjerten最先提出了毛细管电泳的雏形,即在直径为3mm的毛细管中做自由溶液的区带电泳。但他并没有完全克服传统电泳的弊端。直至1981年Jorgenson和Lukacs提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 这时现代毛细管电泳技术真正产生。1984
年Terabe将胶束引入毛细管电泳,开创了毛细管电泳的重要分支:胶束电动毛细管色谱(MEKC)。1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行。同年,Cohen 发表了毛细管凝胶电泳的工作。近年来,将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中,又发展了电色谱,扩大了电泳的应用范围。
毛细管电泳技术兼有高压电泳及高效液相色谱等优点,其突出特点是:
(1)所需样品量少、仪器简单、操作简便。
(2)分析速度快,分离效率高,分辨率高,灵敏度高。
(3)操作模式多,开发分析方法容易。
(4)实验成本低,消耗少。
(5)应用范围极广。
自1988年出现了第一批毛细管电泳商品仪器,短短几年内, 由于CE符合了以生物工程为代表的生命科学各领域中对多肽、蛋白质(包括酶,抗体)、核苷酸乃至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求,
2008,42(6):29—3l/孟欢欢,等 中国兽药杂志
高效毛细管电泳法测定兽用注射用青霉素钾的含量
孟欢欢 r,何东旭 ,陈玎玎 ,祁克宗
(1.安徽农业大学动物科技学院,合肥230036;2.安徽农业大学生物技术中心,合肥230036) [收稿日期]2008-01—21[文献标识码]A[文章编号]1002—1280(2008)06—0029—03[中图分类号]¥859.796
[摘 要] 研究测定兽用注射用青霉素钾含量的高效毛细管电泳方法,优化了高效毛细管电泳
法检测青霉素的电泳条件,缓冲液为pH 7.8(6 mol/L HCL调节)的30 mmol/L硼砂溶液,在分离
电压为18 kv、温度为25 ̄C条件下青霉素峰形尖锐,浓度与峰面积在40—200 ̄g/mL范围内线性 良好,相关系数为0.9971,回收率范围为99.3%~101.5%,日内及日间变异系数均小于4%。
[关键词] 毛细管电泳;青霉素
Determination of Penicillin Potassium Salt Injection for Veterinaries by
High Performance Capillary Electr0ph0resis
MENG Huan—huan ,HE Dong—XU ,CHEN Ding—ding ,QI Ke—zong (1.College ofAnimal Science and Technology,AnhuiAgricultural Univers ,Hefei,230036; 2.Biotechnology Center,AnhuiAgricultural University,Hefei,230036;China)
Abstract:This paper has studied the method of determining the content of penicillin potassium salt injection for
第5期 韩海峰,等:聚合离子液体为添加剂的毛细管电泳法用于快速高效分离饮料中7种有机酸 ‘539・
在食品生产过程中,多种添加剂被加入食品中
以保证食品质量¨ 。食品添加剂可以分为染料剂、
防腐剂、抗氧化剂、甜度剂以及酸度调节剂等等。很
多种类的有机酸可以用作食品添加剂,例如:苯甲酸
和山梨酸可以作为防腐剂。然而,食品中的有机酸
对人体器官各个方面都有着严重的影响 。尽管
有机酸添加剂在食品运输过程中可以保证其质量,
但是过多的食品添加剂对人体有害。所以,在食品
以及饮料的生产、运输以及存储过程中,有机酸的检
测是一种很重要的例行分析 。
气相和液相色谱已经广泛应用于有机酸的检测
分析 ’ 。但是,易挥发和热稳定性差的有机酸不
能通过气相色谱进行分析。而由于液相色谱的有限
分离效率,只有几种有机酸能够得到同时分离。另
外,液相色谱法消耗了大量的有机溶剂,这也是其不
利的一面。所以,一种既能够克服气相色谱缺点,也
能克服液相色谱缺点的分析方法,必将成为一种快
速、高效、低廉的新的分析手段。
毛细管电泳(CE)正是一种快速、高效以及低消
耗的分离分析方法。CE已经用于分析食品中的添
加剂。。 。然而,阴离子在空管柱中的分离比较复
杂,且分离时间较长,柱效不高。这是由于常规毛细
管电泳的电渗流(EOF)方向指向阴极,阴离子的电
泳迁移方向指向阳极,而毛细管电泳中分析物的迁
移速率是其电泳迁移率和电渗流共同决定的。所以
对于一些电泳迁移率较大的阴离子化合物,其分离
时问会相对较长,有时甚至无法检测到。如果电渗
流方向能够反转,与阴离子的迁移方向一致,那么其
分离时间将大为缩减。
众所周知,离子液体由于其热稳定性、蒸汽压低
和不可燃性,已广泛应用于色谱中 。例如用作气
相色谱中的固定相 ;液相色谱中的添加剂 ’ 和 固定相… ;以及用于毛细管电泳中,以抑制固定相
和毛细管壁上硅羟基与化合物之间的静电作
用 。