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茶叶中茶多酚的提取与检测分析

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2014年第7期现代园艺

茶叶中茶多酚的提取与检测分析

田鄂

（恩施自治州产品质量监督检验所，湖北恩施445000）

摘要院茶叶中含有茶多酚，茶多酚是纯天然的，拥有很强的抗氧化作用，是目前人工不能合成的纯天然、多功能、

高效能的抗氧化剂和自由基净化剂。一般我们经过对粗茶的萃取、冷凝、浸提、回流和蒸发，然后可以通过分光光度法和

标准的曲线法来计算出粗茶中茶多酚的含量。关键词院浸提；蒸发；检测；茶多酚

在现代生活中，人们更加注重饮食安全和保健。在众多

饮品中，茶可谓是饮品中的极品。茶叶中含有多种的有效成

分，如咖啡因、茶多糖和茶多酚等等。而茶多酚是一种纯天然

的高效抗氧化剂。在食品，日用和保健方面都能找到它的身

影。本文试验室为了探讨茶多酚提取和分离的新方法。1所用材料和方法

1.1选取的材料

首先是选取茶叶的样品，我们选择了3个品种的茶叶，

共计10份来做试验。分别是绿茶4份，占40%，花茶3份，占

30%，乌龙茶3份，占30%。这些茶叶样品都是2009年3月

份～2012年3月份生产的。

选择试验仪器：上海尤尼柯生产的UV-2000紫外可见

分光光度计，上海至金仪器设备有限公司生产的恒温水浴设

备，美国奥豪斯电子的分析天平。分液漏斗，冷凝回流仪和旋

转蒸发仪。

试验试剂：无水乙醇，没食子酸乙酯（作为基准试剂），酒

石酸铁溶液110g，定容1000ml的酒石酸钾钠，510g的硫酸亚

铁，分析纯用乙酸乙酯，23187g的缓冲溶液，9108g的磷酸氢

二钠和磷酸二氢钾各定容1000ml，然后按85ml∶15ml混合，

使其pH值=7.5。

1.2提取用到的方法

首先是浸提，要选取710g的各种茶叶样品剪碎。然后放

进冷凝回流仪里面，然后倒进热水，浸提3次。过滤残渣，再

用含水的乙醇浸提1次，然后丢弃残渣。过滤的液体放进分

液漏斗里面去，然后用氨仿来浸提，最后我们要用到乙酸乙

酯来进行浸提3次就可以了。其次，就是旋转蒸发了：准备真

空的旋转蒸发器，把浸提过后的过滤液体倒进去。要进行旋

转蒸发，应该在40℃时的恒温水浴设备下，加入乙酸乙酯。最

后提取浓缩液来做一个样品分析。

1.3对样品进行检测

测定吸收曲线：我们知道，亚铁离子和多酚类会生成紫蓝

色的络合物。我们可以用分光光度法来测定它的含量。在

215ml缓冲液的背景下，准备25ml的容量瓶，放入5ml的酒

石酸铁后，再加入215mg的没食子酸标准溶液来进行显色。

然后在1cm的吸收池里面放入少量的显色液体和蒸馏水参

比，利用UV-2000紫外可见分光光度计来测定吸收曲线。测

定数据为（为方便简洁，用字母表示）Nnm分别为400、410、

420、430、440、450、460、470、480、490、500：而对应的A值分别

为：0.810、0.868、0.929、0.977、1.08、11.094、1.155、1.213、1.267、1.315、1.354：而Nnm值分别为：510、525、530、535、540、550、

560、570、580、590：而下面一组对应的A值为：1.389、1.412、

1.415、1.417、1.416、1.414、1.394、1.372、1.324、1.281、1.205。经

过测定，我们可以很直观地看出，没食子酸和酒石酸铁显色

液最大的吸收波长是530nm。

绘制标准曲线：干燥的没食子酸乙酯取250mg加进

100ml的水里作为母液。分别取0、2、4、6、8、10ml的母液放在

100ml的容量瓶里。然后取没食子酸乙酯1ml和酒石酸铁

5ml放到25ml的容量瓶里面。定容用pH=7.5的缓冲溶液。然

后放进1cm的吸收池和蒸馏水参比。以此来测定没食子酸乙

酯和酒石酸铁的工作标准曲线。得到如下数据：编号分别为：

1到6：而其对应的没食子酸（mg/ml）分别为：0.00、0.50、1.00、

1.50、2.00、2.50：而相对应的A值则分别为：0.048、0.283、

0.616、0.797、0.996、1.417。

测试样品：准备100ml的烧杯，取200mg的浓缩液放到

里面，再加上30ml的沸水，等冷却后倒进100ml的容量瓶里

面。然后再从里面取1ml的液体放到25ml的容量瓶里面。加

入酒石酸铁5ml，用pH=7.5的标准缓冲溶液稀释到刻度。和

空白试剂参比。从530nm处可以测定吸光度，计算公式为

X=E×100(1-G)。可以分别计算出吸光度，没食子酸乙酯含量和

茶叶中的茶多酚含量，见下表。

2结果和讨论

在中国，茶叶以及茶文化可谓是源远流长。在对茶多酚

的提取上，我们中国的技术可以做到提取纯度为99%的茶多

酚。并且在理论上证明了茶多酚拥有广泛的用途，在社会上

和经济上都有着重大效益。作为一种纯天然的抗氧化剂，茶

多酚已经在食品加工行业中得到了广泛的应用。根据我们国

家的食品添加剂使用标准，茶多酚可以用在熟食、饮料、糖果

等食品上。在用量上规定为0.14g/kg。要正确使用，要先将其

溶入乙醇，加上一定量的柠檬酸制成溶液，然后喷在或添加

在食品上。试验研究

吸光度A没食子酸乙酯当量E茶叶中茶多酚含量X铁观音(乌龙茶)0.0420.0760.163%龙井(绿茶)0.0130.0230.049%黄山毛峰(绿茶)0.1690.3040.651%花茶0.1340.2410.516%红茶0.1450.2610.559%

19--.com.cn. All Rights Reserved.2014年第7期现代园艺

参考文献

1罗婧，顾颖颖，刘易成，郭梁.不同茶叶中茶多酚和咖啡因成分的对比分析[J].贵州茶叶，2013（1）2浦周芳,韩丽琴，曹宏梅.茶叶中茶多酚提取及含量测定的研究[J].食品研究与开发，2013（17）3鹿洋，齐崴，苏荣欣，何志敏.茶叶中茶多酚的提取纯化及咖啡碱和茶多糖的联产制备[J].食品工业科技，2013（20）（责任编辑王蔓）植物组织培养即植物无菌培养技术，又称离体培养，是

根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官(如

根、茎、叶、茎尖、花、果实等）、组织（如形成层、表皮、皮层、髓

部细胞、胚乳等）或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及

原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，

诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株。1组织培养发展简史

1838～1839年，德国科学家Schleide和Schwann发表了

细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。

1902年，德国植物学家Haberlandt根据细胞学说，提出

单个细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。

1904年，Hanning最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。

1922年，Knudson采用胚培养法获得大量兰花幼苗。

1934年，White用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无

性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。

1958年，英国科学家Steward等用胡萝卜根的愈伤组织

细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植

株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技

术程序奠定了基础。

1962年，Murashinge和Skoog在烟草培养中筛选出至今

仍被广泛使用的MS培养基。

1964-1966年，印度科学家Guha和Maheswari在曼陀罗

花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。

1972年，Carlson通过两个种的烟草原生质体融合培养，

获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。

植物组织的培养过程并不复杂，但是外植体消毒灭菌不

彻底往往会影响试验和生产的结果，本实验以蓝刺头的腋芽

为外植体，研究流水冲洗外植体时间的长短在植物组织培养

中的应用效果。2准备工作

（1）试验材料：蓝刺头新发腋芽。（2）消毒试剂：75%酒精，

2%次氯酸钠溶液，吐温-80。（3）无菌器材：16瓶培养基，大量

无菌水，镊子，解剖刀，烧杯。

接种前，用75%酒精棉球擦拭超净工作台台面，将培养

基及接种用具放入超净工作台。房间用酒精喷雾降尘后打开

超净工作台紫外灯及房间的紫外灯，照射约30分钟；然后关

闭紫外灯，打开房间换气扇以及超净工作台的风机，通风20

分钟后，再进行无菌操作。3消毒步骤

3.1自来水冲洗

用已消毒的刀片切取新发的蓝刺头腋芽，先用毛刷粘洗

洁精轻轻刷洗表面，然后分别放入4个玻璃杯，玻璃杯口用

纱布封上，在自来水龙头下分别冲洗1小时、2小时、4小时、

8小时。

3.2酒精消毒

冲洗后进超净工作台，进入接种间，用酒精棉球仔细擦

拭双手至手腕部位。外植体用滤纸吸干水分，放入事先消好

毒的空瓶，用75%酒精浸泡30秒，倒出酒精用无菌水冲洗

3～4次。

3.3化学药剂灭菌

外植体用无菌水冲洗完后，第3步用2%次氯酸钠溶液

加少量吐温80消毒5～8分钟，消毒过程经常晃动瓶子，使

外植体表面与消毒液充分接触，以期达到最佳消毒效果。消

毒时间结束后在酒精灯火焰旁用无菌镊子将已完成表面灭

菌的外植体转移到烧杯中，用无菌水反复清洗7～8次，每次

不少于1分钟，清洗时不断摇动烧杯以确保完全去除消毒

剂。最后1次清洗后将外植体转移到无菌烧杯上，吸干水分

备用。4接种培养

接种时，每1次操作都要先将镊子等器械浸入75%酒精

中，再将器械取出后置于酒精灯火焰上充分灼烧，待冷却后

方可使用。将消毒后的外植体腋芽表层剥离，再接种到

MS+6-BA1.0mg/L+2，4-D0.4mg/L的培养基上。每瓶接入

2～3个腋芽。每瓶接种完毕后，将瓶口置火焰上转动烧烤，以

杀死瓶口上的细菌，再封好瓶口，贴上标签。将培养瓶放置在

温度为24～26℃，光照为1500～2000lx，光周期12h/天的环

境下培养。每周观察1次，将污染的外植体及时拿走洗掉。5结果分析

30天后观察不同流水时间对外植体长势的影响发现：冲

洗8小时的外植体接种后的污染率最低，但由于冲洗时间过

长，其发芽率明显低于其他；冲洗1、2小时的外植体污染率

高于冲洗4小时和8小时的；而冲洗4小时的外植体效果最

佳。实验表明，外植体流水冲洗时间也并非越长越好，冲洗4

小时左右为最佳时间。

（责任编辑荷初）流水冲洗对外植体消毒灭菌的影响

王伟张丽华管德泳刘捷李剑龙

（上饶市水稻良种场，江西上饶334100）试验研究

20--.com.cn. All Rights Reserved.

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绿茶中茶多酚含量测定

绿茶中茶多酚含量测定

河源职业技术学曉

食 品 检

验 分 析

报 告

小组成员：

指导老师：严汉彬

班级：12食品营养与检测2

河源职业技术学院

绿茶中茶多酚含量测定

、实验目的

1. 了解食品中茶多酚的提取方法

2. 掌握茶多酚的检验方法

3. 能熟练运用分光光度计测定食品中茶多酚的含量

、实验原理

茶叶中的多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物, 与茶多酚的含量成正比，因而可用分光光度计测定其含量。

三、实验步骤

1. 试液制备

准确称取磨碎绿茶样品1g于250MI,加入沸水80mL在沸水浴中浸提 30min后过滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏 水定容至刻度，摇匀，备用。

2. 吸光度测定

吸取样品溶液1mL于 25mL容量瓶中，依次加蒸馏水4mL酒石酸铁 溶液5mL摇匀，再加入pH=7.5的磷酸缓冲液稀释至刻度。以未加酒石酸 亚铁的试液代替样品溶液如上操作作空白对照。选择540nm波长和.5cm的 比色杯测定吸光度值。

4. 结果计算

P=A*7.826/1000*[V 』(V 2*m)]*100%

式中 P -------- 茶多酚含量，g/100mL；

A --------- 样品溶液吸光度；

V 1 -------------- 样品溶液总量，mL

V 2 ----- 吸取的试液量，mL 2014-3-1

其颜色的深浅 3

m -------- 样品质量，g.

河源职业技术学院

2014-3-1

四、测定结果

Pi=0.3530*7.826/1000*[100/(2*1)]*100%=13.81g/100mL

P2=0.3559*7.826/1000*[100/(2*1)]*100%=13.92g/100mL

平均值：13.865g/100mL

五、数据处理与结果分析

(1)绘制的标准曲线为:

(2)结果计算分析:4

河源职业技术学院

河源职业技术学院

食品分析检验报告

茶多酚的提取纯化及其抗氧化性能研究

茶多酚的提取纯化及其抗氧化性能研究

茶多酚的提取纯化及其抗氧化性能研究

茶叶是中国优秀的传统农产品，因其含有大量的茶多酚，在人们的生活中受到广泛的关注。茶多酚具有抗氧化、杀菌、抑菌等多种生物活性，对人体健康具有积极的作用。因此，提取茶多酚并进行纯化研究具有重要的意义。

一、茶多酚的提取

茶多酚可以从茶叶中提取获得。一种较常用的提取方法是利用溶剂法进行提取。首先，将茶叶样品晒干后研磨成粉末，然后将茶叶粉末放入瓶子中，并加入合适的溶剂。通过反复提取，可以使茶多酚充分溶解到溶液中。常用的溶剂有乙醇、丙酮等，数字上要求浓度不同。最终，通过蒸馏或冷冻干燥获得茶多酚。

另一种提取方法是超临界流体萃取法。超临界萃取通常利用超临界二氧化碳作为溶剂，其优点在于无毒性、无残留、操作简单等。超临界萃取法在提取茶多酚时不需要高温，更适合提取易挥发性的成分。

二、茶多酚的纯化

茶叶中的茶多酚含量较低，需要进行纯化提高其含量。Fetrow 和 Avila 等人就茶多酚的纯化进行了研究。首先，利用海绵吸附柱进行预处理，将杂质去除。然后进行阴离子交换色谱分离和高效液相色谱纯化。最终，通过Vacuum-drying的方法获得纯的茶多酚。该方法能够有效地去除杂质，获得高纯度的茶多酚。

三、茶多酚的抗氧化性能

茶多酚作为一种抗氧化剂，可以中和自由基，并减缓细胞的氧化损伤，起到延缓衰老、促进健康的作用。针对茶多酚的抗氧化性能，当今的研究主要集中在其体外和体内抗氧化性能的测定上。

体外抗氧化性能研究 目前，体外抗氧化性能评价主要采用自由基清除试验、铁离子螯合能力试验、脂质过氧化反应试验及还原能力测定试验等方法。针对这些方法，茶多酚的抗氧化性能也被广泛研究。Zhao 等人通过自由基清除试验评价绿茶中茶多酚的抗氧化性能，发现含量高的多酚对自由基有很好的清除作用。Jia 等人则借助铁离子还原势和铁离子离解势阐述了绿茶中茶多酚与铁对接反应的机理。

体内抗氧化性能研究

体内抗氧化性评价方法主要包括病理学观察法、生物化学分析法和红细胞型抗氧化性测定等。许多研究人员利用小鼠模型来评估茶多酚的抗氧化性能。Smasratana 等人通过小鼠模型评估了茶多酚在撞击性脑损伤的预防和治疗方面的功效。将茶多酚注射到小鼠体内之后发现其有较好的保护神经细胞功能，抗氧化反应也有增强。

茶多酚的提取实验报告

茶多酚的提取实验报告

茶多酚的提取实验报告

一、实验目的

本实验旨在通过提取茶叶中的茶多酚，掌握茶多酚的提取方法，了解茶多酚的性质和应用。

二、实验原理

茶多酚是茶叶中的一种重要成分，具有抗氧化、抗菌、抗病毒等多种生物活性。茶多酚的提取方法主要有水提法、有机溶剂提取法和超临界流体提取法等。本实验采用水提法提取茶多酚。

三、实验步骤

1.将10克干燥的绿茶叶粉末加入500毫升蒸馏水中，加热至沸腾，保持沸腾10分钟。

2.将煮沸后的茶叶汁过滤，收集滤液。

3.将滤液加入等量的乙醇中，搅拌均匀，过滤，收集滤液。

4.将滤液加入等量的正己烷中，搅拌均匀，过滤，收集滤液。

5.将滤液加入等量的氯仿中，搅拌均匀，过滤，收集滤液。

6.将收集的氯仿溶液挥发干燥，得到茶多酚。

四、实验结果

经过提取和干燥，得到了0.5克茶多酚。

五、实验分析

茶多酚是茶叶中的一种重要成分，具有多种生物活性。本实验采用水提法提取茶多酚，水是一种绿色、环保的提取溶剂，不会对环境造成污染。但是，水提法提取茶多酚的效率较低，需要多次提取和分离，操作较为繁琐。此外，茶多酚的提取量受到茶叶品种、加工工艺、提取条件等多种因素的影响。

六、实验结论

本实验通过水提法提取茶叶中的茶多酚，得到了0.5克茶多酚。茶多酚是一种重要的生物活性物质，具有多种保健功效。本实验掌握了茶多酚的提取方法，对茶多酚的性质和应用有了更深入的了解。

茶多酚的检测方法

茶多酚的检测方法

茶多酚的检测方法

茶多酚是指茶叶中的一类重要营养成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降低胆固醇等多种保健作用。茶多酚的检测方法可以分为传统方法和现代方法两种。

1. 传统方法：

传统方法主要是基于化学反应原理进行测定，如铁离子还原法、显色法、比色法和滴定法等。

铁离子还原法：茶多酚具有还原性，可以通过与铁离子反应生成蓝色络合物的程度来测定其含量。该方法操作简单，但结果受干扰较大，准确性较差。

显色法：茶多酚可以与某些试剂发生着色反应，形成显色产物，如费林试剂、氢氧化钠等。该方法操作简单，但灵敏度较低。

比色法：茶多酚可以通过与某种标准溶液进行比色来测定其含量。这种方法简单易行，但需要标准溶液的配制和标定。

滴定法：通过滴定法测定茶多酚的总酚含量，常用的滴定剂有高锰酸钾溶液、亚硫酸钠溶液和硫酸铁溶液等。这种方法操作简单，但耗时较长，准确性受到影响较大。

2. 现代方法： 现代方法主要是基于仪器分析的方法，如色谱法、质谱法、光谱法和电化学法等。

色谱法：茶多酚可以通过色谱柱进行分离，然后使用紫外光检测器进行测定。常用的色谱方法有高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。这些方法操作复杂，但精确度和灵敏度较高。

质谱法：茶多酚可以通过质谱仪进行分析鉴定，如气质联用质谱（GC-MS）和液质联用质谱（LC-MS）。质谱方法准确性高，但设备成本较高。

光谱法：茶多酚的检测可以通过紫外-可见光谱法（UV-Vis）进行，茶多酚在紫外光区域有特征吸收峰，可以通过测定吸光度来定量。该方法快速、简单，但对样品的要求较高。

电化学法：茶多酚可以通过电化学方法进行检测，如循环伏安法、方波伏安法和电化学阻抗法等。这些方法操作相对简单，较具灵敏度和准确性。

无论是传统方法还是现代方法，茶多酚的检测都需要一定的样品处理过程，如提取茶多酚、去除干扰物、浓缩和分离等。不同的检测方法在选择上需要考虑实验条件、设备要求、样品种类和检测精度等因素。目前，现代方法在茶多酚检测上具有准确性高、快速性好、灵敏度高的特点，逐渐取代了传统方法成为主流。但传统方法也仍有其适用性，特别是在教学实验和简单定性检测中。