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2019年生物选修三《现代生物科技专题》全册综合测试题第Ⅰ卷一、单选题(共15小题,每小题3.0分,共45分)1.如果用两种不同方法分别切断同一碱基序列的脱氧核苷酸链，得到的两组片段是()则比较两组片段的碱基序列，推断原脱氧核苷酸的全部碱基序列应该是()A．③②①④ B．①④③② C．②①④③ D．④②③①2.下列有关基因工程技术的正确叙述是()A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA聚合酶和载体B．选用细菌作为受体细胞是因为其繁殖快、遗传物质相对较少C．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达D．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列3.生态恢复工程的第一步是()A．恢复这一地区的生物群落 B．恢复植被C．形成合理、高效的食物链 D．保持一定的动物数量4.如图流程为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子，及生产治疗烫伤、割伤的药物紫草素，应分别选用的编号是()A．④② B．③② C．③④ D．④③5.美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞，获得高水平的表达。
长成的植物通体光亮，堪称自然界的奇迹。
这一研究成果表明()①萤火虫与烟草植物的DNA结构基本相同②萤火虫与烟草植物共用一套密码子③烟草植物体内合成了荧光素④萤火虫和烟草植物合成蛋白质的原理基本相同A．①和③ B．②和③ C．①和④ D．①②③④6.某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法将a转到马铃薯植株中，经检测，在成熟茎细胞的间隙中发现了Amy。
这一过程涉及()A．目的基因来自细菌，可以不需要载体，由细菌侵染受体细胞而导入。
高中生物选修三《现代生物科技专题》全册综合测试题全册综合测试题1第Ⅰ卷一、单选题(共15小题,每小题3.0分,共45分)1.如果用两种不同方法分别切断同一碱基序列的脱氧核苷酸链，得到的两组片段是( )则比较两组片段的碱基序列，推断原脱氧核苷酸的全部碱基序列应该是( )A．③②①④ B．①④③② C．②①④③ D．④②③①2.下列有关基因工程技术的正确叙述是( )A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA聚合酶和载体B．选用细菌作为受体细胞是因为其繁殖快、遗传物质相对较少C．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达D．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列3.生态恢复工程的第一步是( )A．恢复这一地区的生物群落 B．恢复植被C．形成合理、高效的食物链 D．保持一定的动物数量4.如图流程为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子，及生产治疗烫伤、割伤的药物紫草素，应分别选用的编号是( )A．④② B．③② C．③④ D．④③5.美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞，获得高水平的表达。
长成的植物通体光亮，堪称自然界的奇迹。
这一研究成果表明( )①萤火虫与烟草植物的DNA结构基本相同②萤火虫与烟草植物共用一套密码子③烟草植物体内合成了荧光素④萤火虫和烟草植物合成蛋白质的原理基本相同A．①和③ B．②和③ C．①和④ D．①②③④6.某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法将a转到马铃薯植株中，经检测，在成熟茎细胞的间隙中发现了Amy。
这一过程涉及( )A．目的基因来自细菌，可以不需要载体，由细菌侵染受体细胞而导入B．基因a导入成功后，将抑制细胞原有代谢，开辟新的代谢途径C． RNA以自身为模板自我复制D． DNA以其一条链为模板合成mRNA7.下列关于从配子形成到早期胚胎发育过程的叙述中，正确的是( )A．排卵就是排出成熟卵细胞的过程B．受精作用完成的标志是透明带内出现三个极体C．动物胚胎发育的早期有一段时间是在透明带内进行的D．囊胚期的内细胞团将来发育成胎盘和胎膜8.下列生物技术的应用实例中，运用的原理与其他各项不同的是( )A．利用人参细胞发酵罐悬浮培养人参细胞，提取人参皂苷B．利用花药离体培养获得植物单倍体植株C．将转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育成植株D．通过植物组织培养获得人工种子并发育成植株9.以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。
1．（18分）【生物一现代生物科技专题】试管动物技术正广泛应用于畜牧业生产。
请根据试管牛的生产流程图回答相关问题：(1)①②过程分别表示、。
(2)对供体母牛的要求是。
通常母牛每次只排出一枚卵母细胞，可用激素对其进行超数排卵处理。
(3)从母牛体内获得的卵母细胞需要培养营养、温度和蝉以及气体环境。
(4)生产上常用期的胚胎进行②进程，应用试管动物的优势在于。
答案、（8分）(1)体外受精胚胎移植(2)遗传性能和生产性能优秀促性腺(3)减数第二次分裂中期(4)无菌无毒的环境(5)桑椹胚(或囊胚) 充分发挥雌性优良个体的繁殖能力2．（8分）【生物—现代生物科技专题】普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。
科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种，操作流程如图。
请回答：（1）在番茄新品种培育过程中，将目的基因导入受体细胞采用最多的方法是___________，筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上的________的表达。
（2）为促使图中②、③过程的顺利完成，需要在_____________________条件下进行。
要快速系列转基因抗软化番茄植株，目前常用的科技方法是____________________。
为获得这种番茄的脱毒苗，应用其___________进行培养。
（3）除了图示培育方法外，还可通过蛋白质工程技术，对____________________的结构进行特定的改变，从而获得抗软化的番茄品种，关键的操作是对__________________进行定向改造。
（4）为防止转基因番茄通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其它植物而造成基因污染，可将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄植物细胞的__________（结构）中。
答案（每空1分，共8分）（1）农杆菌转化法标记基因（2）无菌和人工控制植物组织培养（微型繁殖）茎尖（3）多聚半乳糖醛酸酶独家半乳糖醛酸酶基因（4）线粒体或叶绿体3．(8分)中科院动物研究所研究小组已培育出中国首例转基因猕猴。
第38题生物-选修3：现代生物科技专题高考考点命题分析三年高考探源考查频率基因工程微生物的培养与应用、酶的研究和应用属于高频考点。
今后高考的命题趋势：1.考查从实验的角度剖析微生物培养和利用及传统发酵技术的应用的每项技术，把握原理、材料、操作流程、注意事项等；2.多从实验细节入手进行考查，题目的综合性和难度适中；3.物质的提取、分离常以新科学技术为命题背景考查考生对生物技术基础知识的掌握及解决问题的能力。
2021年全国乙卷第38题2019年全国1卷第38题2020年全国3卷第38题★★★DNA的提取和分离及PCR技术2021年全国甲卷第38题2019年全国1卷第38题★★植物细胞工程2019年全国2卷第38题2019年全国3卷第38题★★动物细胞工程2020年全国1卷第38题★胚胎工程2020年全国3卷第38题★生态工程2020年全国2卷第38题★生物技术的安全性和伦理问题无例题（2021年全国乙卷）用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。
在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。
回答下列问题：（1）常用的DNA连接酶有E. coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。
上图中________________酶切割后的DNA 片段可以用E. coli DNA连接酶连接。
上图中______________________________________酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。
（2）DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是______________________________。
（3）DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能__________________________；质粒DNA分子上有______________________________________，便于外源DNA插入；质粒DNA分子上有标记基因（如某种抗生素抗性基因），利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是______________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________。
高中生物选修3《现代生物科技专题》知识梳理本文将对高中生物选修3《现代生物科技专题》进行知识梳理，主要涉及基因工程、细胞工程、胚胎工程和蛋白质工程等内容。
一、基因工程基因工程是一种对DNA进行操作的技术，其基本原理是利用限制性内切酶将外源基因切成片段，再通过连接酶将其与载体DNA结合，进而将目的基因导入受体细胞中。
基因工程的应用非常广泛，涉及到医药、农业、工业等领域。
例如，利用基因工程生产药物、改良作物、制造化学品等。
二、细胞工程细胞工程是一种通过对细胞进行操作的技术，包括培养、融合、转化等。
其中，培养细胞是细胞工程的基础，通过培养细胞可以获得大量的细胞样本。
此外，细胞融合也是细胞工程的重要技术，通过该技术可以获得异源细胞。
细胞工程在医药、农业、工业等领域也有广泛应用，例如，利用细胞工程生产疫苗、改良作物、制造细胞培养物等。
三、胚胎工程胚胎工程是一种对早期胚胎进行操作的技术，包括超数排卵、胚胎移植、胚胎克隆等。
其中，超数排卵是胚胎工程的基础，通过该技术可以获得大量的早期胚胎。
此外，胚胎移植也是胚胎工程的重要技术，通过该技术可以将早期胚胎移植到代孕母亲体内。
胚胎工程在农业、畜牧业等领域也有广泛应用，例如，利用胚胎工程生产优良品种家畜、克隆珍稀动物等。
四、蛋白质工程蛋白质工程是一种通过对蛋白质进行操作的技术，包括蛋白质合成、蛋白质修饰等。
其中，蛋白质合成是蛋白质工程的基础，通过该技术可以合成各种蛋白质。
此外，蛋白质修饰也是蛋白质工程的重要技术，通过该技术可以改变蛋白质的化学性质、生物学性质等。
蛋白质工程在医药、农业、工业等领域也有广泛应用，例如，利用蛋白质工程生产药物、改良作物、制造酶等。
综上所述，高中生物选修3《现代生物科技专题》主要涉及基因工程、细胞工程、胚胎工程和蛋白质工程等内容。
这些技术不仅在学术研究领域具有重要意义，而且在各个领域得到了广泛的应用。
随着科学技术的发展，这些技术将会不断改进和完善，为人类带来更多的福祉。
选修三专题1．【生物——选修三：现代生物科技专题】科研人员利用基因工程技术进行某项研究，流程如图所示。
请回答下列问题:（1）重组质粒1和2的形成过程中都用到的工具酶是____________。
（2）通常采用PCR技术扩增毒蛋白基因，前提是要有一段已知毒蛋白基因的核苷酸序列，原因是_________，在操作步骤中需要加热至90～95 ℃的目的是使_____________。
如果科研人员知道毒蛋白基因的序列，可通过___方法合成该基因。
（3）基因工程中最关键的步骤是_____________。
（4）基因工程中常用的载体有质粒、________、________等。
基因表达载体除了具有目的基因外，还必须有启动子、终止子以及________等。
【答案】（1）限制性核酸内切酶和DNA连接酶（2）根据这一序列合成引物目的基因受热变性解旋为单链化学（3）构建重组DNA分子（4）λ噬菌体动、植物病毒标记基因（1分）【解析】（1）构建重组质粒时使用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
（2）通常采用PCR技术扩增毒蛋白基因，前提是要有一段已知毒蛋白基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，在操作步骤中需要加热至90~95 ℃的目的是使目的基因受热变性解旋为单链。
当目的基因序列已知时，可以采用化学方法合成该基因。
（3）基因工程中最关键的步骤是构建重组DNA分子。
（4）基因工程中常用的载体有质粒、λ噬菌体、动植物病毒等。
基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。
2．【生物——选修三：现代生物科技专题】生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面。
请分析并回答下列问题：（1）目前临床用的胰岛素生产效率较慢，科学家将胰岛素 B 链的第28 和29 个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。
生产速效胰岛素，需要对_________（胰岛素/胰岛素mRNA/胰岛素基因/胰岛）进行定向改造。
（2）科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早早孕试纸。
2012年高考生物试题分类解析：选修三—《现代生物科技专题》1.（2012浙江）6.天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。
现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（）A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞【答案】A【命题透析】通过特定的实例考查基因工程的相关概念及操作要领。
【思路点拨】控制蓝色色素合成的基因B即为我们所需要的目的基因，可通过逆转录法获得基因B，再进行扩增以增加其数量；基因文库中保存的是各基因片段，提取时无须使用限制性核酸内切酶；为使目的基因在受体细胞中稳定存在且能向下一代遗传，应先在体外使用DNA连接酶构建基因表达载体，然后再导入大肠杆菌。
2.（2012福建）32.[生物一现代生物科技专题]必答题（10分）肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。
研究人员利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。
该基因工程技术基本流程如图1。
请回答：（1）进行过程①时，需用 ________ 酶切开载体以插入let-7基因。
载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为____________。
（2）进行过程e委时，需用____________酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
（3）研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。
据图分析，可从细胞中提取____________进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。
肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中____________ （RASmRNA／RAS蛋白质）含最减少引起的。
三年高考题专题讲解之选修3：现代生物科技专题（10题）2017，全国Ⅰ卷第38题38．[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。
已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。
回答下列问题：（1）某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是_____________________。
（2）若用家蚕作为表达基因A的受体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用____________________作为载体，其原因是_____________________。
（3）若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体。
因为与家蚕相比，大肠杆菌具有_________________（答出两点即可）等优点。
（4）若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是___________________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”）。
（5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是_________________________。
【答案】（1）基因A有内含子，在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出蛋白A（2）噬菌体噬菌体的宿主是细菌，而不是家蚕（3）繁殖快、容易培养（4）蛋白A的抗体（5）DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体2017，全国Ⅱ卷第38题38．[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。
通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。
回答下列问题：（1）在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是__________________________。
选修3: 现代生物科技专题导言生物科技是指利用生物学原理和方法来解决生物学问题、创造新生物技术或应用现有技术的科学领域。
随着科学技术的发展，现代生物科技在医药、农业、环境保护等领域发挥着重要作用。
本文将介绍几个现代生物科技的应用领域及其潜在的影响。
1. 基因编辑技术基因编辑技术是目前生物科技领域的热门话题之一。
通过编辑生物体基因组的DNA序列，可以实现增删改基因的功能。
其中最著名的技术是CRISPR-Cas9系统，它利用特殊的RNA引导蛋白质来精确切割DNA，从而具有高度精准的基因编辑能力。
基因编辑技术在医学研究中有广泛的应用，可以用于治疗遗传性疾病、癌症等。
此外，基因编辑技术还可用于改良农作物，提高其产量和抗病能力。
2. 基因组学研究基因组学是研究整个基因组的结构、功能以及相互关系的科学领域。
随着高通量测序技术的发展，我们可以在较短的时间内获得大量的基因组数据。
这些数据被广泛应用于研究不同物种的基因组特征、基因功能和遗传变异等。
基因组学研究对于揭示生物多样性、探索进化过程等具有重要意义。
此外，它还为人类疾病的研究提供了基础数据，促进了个性化医学的发展。
3. 生物制药生物制药是利用生物技术生产药物的过程。
相比传统的化学合成方法，生物制药具有更高的效率和精确度。
通过利用转基因微生物或动植物细胞表达外源蛋白质，可以大规模生产受体蛋白、抗体等药物。
生物制药已经成功地用于生产多种重要药物，如胰岛素、生长激素、抗癌药物等。
生物制药的发展有望改善药物的质量和疗效，并为新型药物的研发提供技术支持。
4. 基因检测与个性化医学基因检测是通过分析个体基因组中特定基因的变异情况，来预测个体患病风险、制定个体化治疗方案的方法。
随着测序技术的不断进步，基因检测已经广泛应用于疾病的早期预警、遗传性疾病的筛查、药物反应性的预测等方面。
个性化医学则是基于个体基因组信息，根据其遗传特点和生活环境制定个体化的治疗方案。
个性化医学的目标是提高疾病治疗效果和降低治疗风险。
高考生物试题分类解析：选修三—《现代生物科技专题》6.1基因工程1．（2012浙江）6．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。
现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞【答案】A【命题透析】通过特定的实例考查基因工程的相关概念及操作要领。
【思路点拨】控制蓝色色素合成的基因B即为我们所需要的目的基因，可通过逆转录法获得基因B，再进行扩增以增加其数量；基因文库中保存的是各基因片段，提取时无须使用限制性核酸内切酶；为使目的基因在受体细胞中稳定存在且能向下一代遗传，应先在体外使用DNA连接酶构建基因表达载体，然后再导入大肠杆菌。
2．（2012福建）32.[生物一现代生物科技专题]必答题(10分)肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。
研究人员利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。
该基因工程技术基本流程如图1。
请回答：(1)进行过程①时，需用酶切开载体以插入let-7基因。
载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为。
(2)进行过程e委时，需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。
据图分析，可从细胞中提取.进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。
肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中(RASmRNA／RAS蛋白质)含最减少引起的。
答案：⑴限制（限制性核酸内切）启动子⑵胰蛋白酶⑶RNA RAS蛋白质解析：本题主要考查基因工程的相关知识。
切开载体以插入目的基因需要用限制酶，限制酶能在特定的系列中的特定位点上将DNA切断；启动子是位于目的基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位。
在动物细胞培养的过程中，要用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶将组织细胞分散开，有利于细胞直接从培养中吸取营养物质并派出代谢废物，同时解除接触抑制有利于细胞增殖。
如果let-7基因进行转录，细胞中就会出现miRNA，用基因探针检测细胞中是否出现miRNA来判断let-7基因是否进行转录，那么应该提取细胞所有的RNA与相应的基因探针进行分子杂交。
由图可知癌细胞受到抑制的机理是let-7基因转录形成miRNA与癌基因RAS转录形成的RASRNA进行配对，从而阻止RASRNA的翻译，从而减少RAS蛋白质的含量。
3.（2012安徽）31．（24分）甲型血友病是由X染色体上的隐性基因导致的遗传病（H对h为显性）。
图1中两个家系都有血友病发病史。
Ⅲ2和Ⅲ3婚后生下一个性染色体组成是XXY的非血友病儿子（Ⅳ2），家系中的其他成员性染色体组成均正常。
（1）根据图1，＿＿＿＿＿（填“能”或“不能”）确定Ⅳ2两条X染色体的来源；Ⅲ4与正常女子结婚，推断其女儿患血友病的概率是＿＿＿＿＿。
（2）两个家系的甲型血友病均由凝血因子Ⅷ（简称F8，即抗血友病球蛋白）基因碱基对缺失所致。
为探明Ⅳ2的病因，对家系的第Ⅲ、Ⅳ代成员F8基因的特异片段进行了PCR扩增，其产物电泳结果如图2所示，结合图1，推断Ⅲ3的基因型是＿＿＿＿＿。
请用图解和必要的文字说明Ⅳ2非血友病XXY的形成原因。
（3）现Ⅲ3再次怀孕，产前诊断显示胎儿（Ⅳ3）细胞的染色体为46，XY；F8基因的PCR 检测结果如图2所示。
由此建议Ⅲ3＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）补给F8可治疗甲型血友病。
采用凝胶色谱法从血液中分离纯化F8时，在凝胶装填色谱柱后，需要用缓冲液处理较长时间，其目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿；若F8比某些杂蛋白先收集到，说明F8的相对分子质量较这些杂蛋白＿＿＿＿＿。
（5）利用转基因猪乳腺生物反应器可生产F8。
要使乳腺细胞合成F8，构成表达载体时，必须将F8基因cDNA与猪乳腺蛋白基因的＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等调控组件重组在一起。
F8基因cDNA可通过克隆筛选获得，该cDNA比染色体上的F8基因短，原因是该cDNA 没有＿＿＿＿＿＿＿＿。
（6）为获得更多的转基因母猪，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因母猪的体细胞核注入＿＿＿＿＿，构建重组胚胎进行繁殖。
【命题透析】【思路点拨】（1）由图1不难得出，Ⅲ2和Ⅲ3的基因型分别为X h Y和X H X＿，故无法推知Ⅳ2两条X染色体的来源；Ⅲ4基因型为X H Y，其女儿基因型为X H X＿，不患病。
（2）由电泳结果Ⅲ3有两个条带，其基因型为X H X h。
（3）Ⅲ3基因型为X H X h，其儿子Ⅳ3从电泳图中可知基因型为X h Y，患有血友病，应终止妊娠。
（4）凝胶色谱法在装填凝胶色谱柱后需用缓冲液冲洗，使其装填均匀。
该法利用的原理是大分子蛋白质运动路径短，速度快，而小分子蛋白质运动路径长，速度慢的特点。
故先收集到的应是大分子蛋白质。
（5）基因表达载体的构建，需将提取到的目的基因与含有启动子、终止子、标记基因的运载体进行体外重组，便于目的基因的表达及后续操作。
cDNA通过逆转录形成，故其不包含基因的启动子和内含子。
（6）去核的卵母细胞可以为移植的转基因母猪的体细胞核提供适宜的条件。
【参考答案】（1）不能0（2）X H X h见图解（3）终止妊娠（4）洗涤并平衡凝胶，使凝胶装填紧密大（5）启动子、终止子、标记基因启动子和内含子（6）去核卵母细胞5.（2012全国新课程）40．（15分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有和。
（２）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。
（３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即DNA连接酶和DNA连接酶。
（４）反转录作用的模板是，产物是。
若要在体外获得大量反转录产物，常采用技术。
（５）基因工程中除质粒外，和也可作为运载体。
（６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是。
【解析】本题着重考查基因工程方面的知识。
限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端，平末端和黏性末端。
两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同。
ＥcoliDNA连接酶可以连接黏性末端，Ｔ４DNA连接酶可以连接两种末端，反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA，利用ＰＣＲ技术进行大量扩增。
基因工程中可以选用质粒，噬菌体、动植物病毒做载体。
当受体细胞是细菌时，为了增大导入的成功率，常用Ca+处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。
【答案】（１）平末端和粘性末端（２）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同（３）Ｔ４Ｅcoli （４）mRNA 单链ＤＮＡＰＣＲ（聚合酶链式反应）（５）动植物病毒λ噬菌体的衍生物（６）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱5.（2012四川）2．将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。
下列叙述正确的是A．发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物B．大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传C．大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等D．生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶解析：因人生长激素不是大肠杆菌生长和繁殖所必需的物质，所以不是大肠杆菌的初级代谢产物，故A错；将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，属于基因工程中的人工基因重组，属于可遗传的变异，故B正确；大肠杆菌质粒是小型环状DNA分子，不含尿嘧啶，故C错；生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA 聚合酶，而不需要DNA连接酶，故D错。
答案：B。
6.（2012天津）8.（20分）黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。
某些微生物能表达AFB1解毒酶．将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。
( 1 ) AFB1属于类致癌因子。
( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上．使该位点受损伤变为G ' ，在DNA复制中，G '会与A配对。
现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为。
( 3 ）下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图据图回答问题：①在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株．经测定．甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶．过程l 应选择菌液的细胞提取总RNA ，理由是②过程Ⅱ中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是③检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用方法。
( 4 ）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。
实验设计及测定结果间下表：据表回答问题：①本实验的两个自变量，分别为。
②本实验中．反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是。
③经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ，则每千克饲料应添加克AFB1解毒酶．解毒效果最好．同时节的了成本。
（5）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计语气的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的。
【答案】( 1 )化学( 2 )（3）①甲因为甲菌液细胞含解毒酶，意味着完成了基因的表达，所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA②cDNA. ③抗原-抗体杂交(4）①AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量。
②B组③ 5(5）脱氧核苷酸序列。
【解析】黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。
某些微生物能表达AFB1解毒酶．将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。
( 1 ) 黄曲霉毒素B1（AFB1）是化学物质，AFB1属于化学类致癌因子。
( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上．使该位点受损伤变为G ' ，在DNA复制中，G '会与A配对。
现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为（3）①在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株．经测定．甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶．过程l 应选择甲菌液的细胞提取总RNA ，理由是因为甲菌液细胞含解毒酶，意味着完成了基因的表达，所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA②过程Ⅱ中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是cDNA.③检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用抗原-抗体杂交方法。
