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文化创意产业案例分析2010年3月20日，在单位听清华大学李季教授讲文化创意产业。
李教授着重从实际案例出发，分析了文化创意产业对当代中国经济社会发展的重大意义、以及发展文化创意产业的路径等问题。
一、何谓文化创意产业根据英国创意产业工作小组在1998年和2001年两次发布的《英国文化创意产业路径文件》，“那些源自个人的创造性、技能及智慧，通过对知识产权的开发和运用可创造潜在财富和就业机会的活动”统属创意产业。
包括出版、音乐、表演艺术、电影、电视和广播、软件、互动休闲游戏软件、广告、建筑、设计、艺术品和古董交易市场、手工艺品以及时装设计在内的多种行业。
创意产业并不是一个新创的产业，而是在传统产业中注入了知识产权、技术创新、文化理念的元素，以创意为卖点的产业。
二、文化创意产业特征1、满足文化消费需求2、知识密集型3、高附加值4、生产和消费一体化三、城市发展文化创意产业的重大意义1、文化创意产业处于价值链的高端，是可持续发展的新兴产业。
发展文化创意产业，对于产业结构调整、完善现代产业体系、促进发展方式转变具有重要的意义。
2、发展文化创意产业，使文化建设与经济建设紧密相连，在实现经济效益的同时，推动城市文化产业发展，进而赋予城市深厚的文化气息的高雅的文化气质。
3、文化创意产业在吸纳就业上有着很大的优势，在英国，创意产业是吸纳就业人口最多的第一大产业。
文化产业对园区的要求四、创意产业园的规划要求1、原生态创作环境，人与自然和谐相处。
2、提供自然丰富、自然的创作空间。
3、创业园区的道路和路网以步行道和林荫道为主，在道路两侧设置大量的绿化和景观，来提高园区的整体环境。
4、区别城市园区，本着以人为本，原生原创的原则，把园区规划成为一个有别于都市办公模式且有强烈归属感的人文魅力之城。
5、规划用地内建筑设计结合环境，精心打造高品质的园区。
五、动漫产业园案例分析（一）南昌国际动漫产业园情况介绍南昌国际动漫产业园由泰豪集团联合国内著名的高科技企业同方股份有限公司共同投资建设，项目选址在南昌县小蓝经济开发区，总规划面积达2900亩，总投资12亿元，建成后可形成30亿元的动漫产业规模。
㊀Ｇｕｉｈａｉａ㊀Ａｕｇ.２０２１ꎬ４１(８):１２１９－１２２５ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍＤＯＩ:１０.１１９３１/ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１９１２０２０武丽霞ꎬ韩丽ꎬ赵宜婷ꎬ等.生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位[Ｊ].广西植物ꎬ２０２１ꎬ４１(８):１２１９－１２２５.ＷＵＬＸꎬＨＡＮＬꎬＺＨＡＯＹＴꎬｅｔａｌ.ＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒｐｒｏｔｅｉｎＰＩＮ１ｉｎｃｒｏｐｒｏｏｔａｎｄｅｍｂｒｙｏ[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ２０２１ꎬ４１(８):１２１９－１２２５.生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位武丽霞１ꎬ２ꎬ３ꎬ韩㊀丽１ꎬ２ꎬ３ꎬ赵宜婷１ꎬ２ꎬ３ꎬ周㊀璇１ꎬ２ꎬ３ꎬ杜云龙１ꎬ２ꎬ３∗(１.云南农业大学植物保护学院ꎬ昆明６５０２０１ꎻ２.云南生物资源保护与利用国家重点实验室ꎬ云南农业大学昆明６５０２０１ꎻ３.云南农业大学农业生物多样性与病害控制教育部重点实验室ꎬ昆明６５０２０１)摘㊀要:生长素输出载体在植物发育中起非常重要的作用ꎮ然而ꎬ生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在农作物水稻㊁小麦㊁玉米和大豆的根和胚中的亚细胞定位尚不清楚ꎮ该研究首先分析了ＯｓＰＩＮ１ｂ和它的同源物的氨基酸序列特征ꎬ发现小麦(ＴａＰＩＮ１)㊁玉米(ＺｍＰＩＮ１ｂ)和大豆(ＧｍＰＩＮ１ｂ)中的ＰＩＮ１序列与水稻的ＯｓＰＩＮ１ｂ序列分别具有６１.５％㊁６２.５％㊁６１.９％的相似性ꎮ然后根据水稻 日本晴 ( Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ )的ＯｓＰＩＮ１ｂ的氨基酸序列ꎬ人工合成ＯｓＰＩＮ１ｂ多肽并注射健康的新西兰白兔获得了抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体ꎬ在通过免疫印迹方法检测抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体的有效性后ꎬ发现可以利用该抗体有效检测到水稻叶片及根中ＯｓＰＩＮ１ｂ的表达ꎮ为检测ＯｓＰＩＮ１及其同源物在不同作物胚根和胚中子叶细胞的定位ꎬ利用制备的抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体并通过免疫组化实验ꎬ发现水稻的ＯｓＰＩＮ１ｂ㊁小麦的ＴａＰＩＮ１和玉米的ＺｍＰＩＮ１ｂ非极性定位在早期的胚根和胚中子叶表皮细胞的细胞质膜上ꎬ大豆中的ＧｍＰＩＮ１ｂ非极性定位在胚根表皮细胞的质膜上ꎬ而在胚的子叶细胞中是胞质定位ꎮ为进一步检测水稻中ＯｓＰＩＮ１ｂ的亚细胞定位ꎬ对水稻根分生区表皮细胞用蛋白质转运抑制剂ＢＦＡ(ＢｒｅｆｅｌｄｉｎＡ)及抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体处理后ꎬ进行免疫组化实验ꎬ结果发现水稻中的ＯｓＰＩＮ１ｂ可以通过胞吞转运途径从水稻根表皮细胞膜进入细胞质中ꎮ该研究利用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体有效检测了ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物在水稻㊁小麦㊁玉米和大豆的胚根表皮细胞及胚中子叶表皮细胞的亚细胞定位ꎬ这将有助于进一步揭示生长素输出载体ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物通过调控生长素极性运输而参与作物发育的作用机制ꎮ关键词:生长素输出载体ꎬＰＩＮ１ꎬ水稻ꎬ小麦ꎬ玉米ꎬ大豆中图分类号:Ｑ９４３㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀文章编号:１０００￣３１４２(２０２１)０８￣１２１９￣０７ＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒｐｒｏｔｅｉｎＰＩＮ１ｉｎｃｒｏｐｒｏｏｔａｎｄｅｍｂｒｙｏＷＵＬｉｘｉａ１ꎬ２ꎬ３ꎬＨＡＮＬｉ１ꎬ２ꎬ３ꎬＺＨＡＯＹｉｔｉｎｇ１ꎬ２ꎬ３ꎬＺＨＯＵＸｕａｎ１ꎬ２ꎬ３ꎬＤＵＹｕｎｌｏｎｇ１ꎬ２ꎬ３∗收稿日期:２０２０－０２－０５基金项目:国家自然科学基金(３１４６０４５３ꎬ３１６６０５０１ꎬ３１８６００６４)ꎻ云南省教育厅重大科研专项计划(ＺＤ２０１５００５)ꎻ教育部留学回国人员科研启动基金([２０１３]１７９２)ꎻ云南省应用基础研究计划的重点项目(２０１７ＦＡ０１８)[ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ(３１４６０４５３ꎬ３１６６０５０１ꎬ３１８６００６４)ꎻＭａｊｏｒＳｐｅｃｉａｌＰｒｏｇｒａｍｆｏｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＲｅｓｅａｒｃｈꎬＥｄｕｃａｔｉｏｎＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ(ＺＤ２０１５００５)ꎻＰｒｏｊｅｃｔｏｆＳＲＦｆｏｒＲＯＣＳꎬＳＥＭ([２０１３]１７９２)ꎻＫｅｙＰｒｏｊｅｃｔｏｆＡｐｐｌｉｅｄＢａｓｉｃＲｅｓｅａｒｃｈＰｌａｎｏｆＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ(２０１７ＦＡ０１８)]ꎮ作者简介:武丽霞(１９９４－)ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为水稻根系发育ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)２４１６２０６２４８＠ｑｑ.ｃｏｍꎮ∗通信作者:杜云龙ꎬ博士ꎬ教授ꎬ博士研究生导师ꎬ研究方向为激素与根系发育ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｙｕｎｌｏｎｇｄｕ＠ａｌｉｙｕｎ.ｃｏｍꎮ(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２０１ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＣｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＢｉｏ￣ＲｅｓｏｕｒｃｅｓꎬＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２０１ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＡｇｒｏ￣ＢｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄＰｅｓｔＭａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＣｈｉｎａꎬＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２０１ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒｐｌａｙｓａｎｅｘｔｒｅｍｅｌｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｐｌａｎｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ.ＨｏｗｅｖｅｒꎬｔｈｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒＰＩＮ１ｉｎｔｈｅｒｏｏｔｓａｎｄｅｍｂｒｙｏｓｏｆｃｒｏｐｓｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔꎬｍａｉｚｅａｎｄｓｏｙｂｅａｎｒｅｍａｉｎｓｕｎｃｌｅａｒ.ＩｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙꎬｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂａｎｄｉｔｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄꎬａｎｄｉｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅＰＩＮ１ｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆｗｈｅａｔ(ＴａＰＩＮ１)ꎬｍａｉｚｅ(ＺｍＰＩＮ１ｂ)ａｎｄｓｏｙｂｅａｎ(ＧｍＰＩＮ１ｂ)ｓｈａｒｅｄ６１.５％ꎬ６２.５％ａｎｄ６１.９％ｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓｗｉｔｈｒｉｃｅＯｓＰＩＮ１ｂꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.ＮｅｘｔꎬａｎａｒｔｉｆｉｃｉａｌＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｗａｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｂａｓｅｄｏｎｔｈｅＯｓＰＩＮ１ｂａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｒｉｃｅ Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ ａｎｄｉｎｊｅｃｔｅｄｉｔｉｎｔｏｈｅａｌｔｈｙＮｅｗＺｅａｌａｎｄｗｈｉｔｅｒａｂｂｉｔｓｔｏｏｂｔａｉｎａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ.ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓｏｆｔｈｅｐｒｅｐａｒｅｄｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔＯｓＰＩＮ１ｂｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｅｂｌｏｔｍｅｔｈｏｄꎬａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂｗａｓｆｏｕｎｄｔｏｂｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎｒｉｃｅｌｅａｖｅｓａｎｄｒｏｏｔｓ.ＦｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅꎬｔｈｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂａｎｄｉｔｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｉｎｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｓａｎｄｃｏｔｙｌｅｄｏｎｃｅｌｌｓｏｆｅｍｂｒｙｏｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｒｏｐｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｓｓａｙ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｒｉｃｅＯｓＰＩＮ１ｂꎬｗｈｅａｔＴａＰＩＮ１ａｎｄｍａｉｚｅＺｍＰＩＮ１ｂａｐｏｌａｒｌｙｌｏｃａｌｉｚｅｄｏｎｔｈｅｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｏｆｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｓａｎｄｃｏｔｙｌｅｄｏｎｏｆｅｍｂｒｙｏｉｎｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔａｎｄｍａｉｚｅｇｒｏｗｎｉｎｅａｒｌｙｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓｔａｇｅｓꎬａｎｄｓｏｙｂｅａｎＧｍＰＩＮ１ｂａｐｏｌａｒｌｙｌｏｃａｌｉｚｅｄｏｎｔｈｅｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｏｆｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓꎬｂｕｔｗａｓｃｙｔｏｓｏｌｉｃｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃｏｔｙｌｅｄｏｎｃｅｌｌｓｏｆｅｍｂｒｙｏ.ＴｏｆｕｒｔｈｅｒｄｅｔｅｃｔｔｈｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂꎬｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｏｆｒｉｃｅｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｍｅｒｉｓｔｅｍｒｅｇｉｏｎｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓＢＦＡ(ＢｒｅｆｅｌｄｉｎＡ)ａｎｄａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｎｄｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｓｓａｙ.ＩｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＯｓＰＩＮ１ｂｌｏｃａｌｉｚｅｄｏｎｃｙｔｏｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｏｆｒｉｃｅｒｏｏｔｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｃｏｕｌｄｅｎｔｅｒｉｎｔｏｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍｖｉａｅｎｄｏｃｙｔｉｃｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇｍａｎｎｅｒ.ＩｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙꎬｔｈｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂａｎｄｉｔｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｉｎｔｈｅｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｒｏｏｔｓａｎｄｃｏｔｙｌｅｄｏｎｓｏｆｅｍｂｒｙｏｓｏｆｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔꎬｍａｉｚｅａｎｄｓｏｙｂｅａｎｗｅｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙꎬａｎｄｉｔｗｉｌｌｆａｃｉｌｉｔａｔｅｕｓｔｏｒｅｖｅａｌｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒＯｓＰＩＮ１ｂａｎｄｉｔｓｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｐｏｌａｒａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｔｏｉｎｖｏｌｖｅｉｎｃｒｏｐｓｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒꎬＰＩＮ１ꎬｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔꎬｍａｉｚｅꎬｓｏｙｂｅａｎ㊀㊀生长素输出载体蛋白在调节植物生长素极性运输中起重要作用ꎮ生长素极性运输参与胚胎形态发生(Ｂｌｉｌｏｕｅｔａｌ.ꎬ２００５)和侧生器官的形成(Ｃａｓｉｍｉｒｏｅｔａｌ.ꎬ２００１)ꎮ拟南芥基因组中的ＰＩＮ基因家族编码ＰＩＮ１－８的８种生长素输出载体蛋白(Ｆｒｉｍｌｅｔａｌ.ꎬ２００３ꎻＢｅｎｊａｍｉｎｓ＆Ｓｃｈｅｒｅｓꎬ２００８)ꎮＰＩＮ蛋白可以通过内吞作用转运到细胞质中ꎬ并形成循环小泡返回质膜(Ｇｅｌｄｎｅｒｅｔａｌ.ꎬ２００１)ꎮＡｔｐｉｎ１突变体植株表现出针状花序并且花和维管组织发育表现明显缺陷(Ｇäｌｗｅｉｌｅｒｅｔａｌ.ꎬ１９９８)ꎮＡｔＰＩＮ１的极性定位还影响胚胎的发育(Ｆｒｉｍｌｅｔａｌ.ꎬ２００３)ꎮＡｔＰＩＮ１分布于维管组织(Ｇäｌｗｅｉｌｅｒｅｔａｌ.ꎬ１９９８)㊁木质部薄壁组织(Ｇäｌｗｅｉｌｅｒｅｔａｌ.ꎬ１９９８ꎻＰａｌｍｅ＆Ｇäｌｗｅｉｌｅｒꎬ１９９９)㊁根表皮和皮层细胞(Ｂｌｉｌｏｕｅｔａｌ.ꎬ２００５)㊁分生组织表皮和原基表皮(Ｇｕｅｎｏｔｅｔａｌ.ꎬ２０１２)的细胞质中ꎮ但是ꎬ目前人们对单子叶植物和双子叶植物之间ＰＩＮ１蛋白的亚细胞定位差异仍不清楚ꎮＡｔＰＩＮ１的同源基因可以存在于水稻(Ｘｕｅｔａｌ.ꎬ２００５ꎻＬｉｅｔａｌ.ꎬ２０１９)㊁小麦(Ｓｉｎｇｈｅｔａｌ.ꎬ２０１８)㊁玉米(Ｇａｌｌａｖｏｔｔｉｅｔａｌ.ꎬ２００８)和大豆(Ｗａｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０１５)的基因组中ꎮ在水稻的维管组织和根原基中可以检测到ＯｓＰＩＮ１的表达(Ｘｕｅｔａｌ.ꎬ２００５)ꎬＯｓＰＩＮ１以生长素依赖性的方式参与水稻根㊁茎㊁花序和分蘖的发育(Ｘｕｅｔａｌ.ꎬ２００５ꎻＬｉｅｔａｌ.ꎬ２０１９)ꎮＺｍＰＩＮ１ａ主要定位在玉米幼苗的上叶原基(Ｇａｌｌａｖｏｔｔｉｅｔａｌ.ꎬ２００８)㊁根中的中柱鞘细胞和内皮层细胞(Ｃａｒｒａｒｏｅｔａｌ.ꎬ２００６)㊁胚芽鞘(Ｋａｍａｄａｅｔａｌ.ꎬ２０１８)和叶片(Ｍｏｏｎｅｔａｌ.ꎬ２０１３)的表层细胞ꎮ此外ꎬＺｍＰＩＮ１ａ在根冠细胞中显示为胞质定位０２２１广㊀西㊀植㊀物４１卷(Ｆｏｒｅｓｔａｎｅｔａｌ.ꎬ２０１２)ꎬ在花序初生原基细胞中显示为非极性定位(Ｓｋｉｒｐａｎｅｔａｌ.ꎬ２００９)ꎮ但是ꎬ目前尚不清楚ＰＩＮ１在不同作物的根和胚中的亚细胞定位ꎬ包括水稻㊁小麦㊁玉米和大豆ꎮ在这项研究中ꎬ我们基于水稻 日本晴 ( Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ )的ＯｓＰＩＮ１ｂ氨基酸序列ꎬ制备了抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体ꎬ利用该抗体开展的免疫组化实验发现水稻的ＯｓＰＩＮ１ｂ及小麦和玉米中的同源蛋白可以非极性定位在根和胚中子叶表皮细胞的细胞质膜上ꎬ而大豆的ＧｍＰＩＮ１ｂ可以非极性地定位在根中表皮细胞的质膜上ꎬ但是ꎬ在胚的子叶表皮细胞中是细胞质定位ꎮ此外ꎬ水稻根表皮细胞质膜上的ＯｓＰＩＮ１ｂ可以通过内吞运输途径进入到细胞质中ꎮ这些ＰＩＮ１定位结果将有助于我们研究生长素极性运输在水稻㊁小麦㊁玉米和大豆作物发育中的作用ꎮ１㊀材料与方法１.１植物材料植物材料为水稻品种 Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ 和 丽江新团黑谷 ( ＬＴＨ )(Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａｓｕｂｓｐ.ｊａｐｏｎｉｃａ)㊁小麦(Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ Ｃｈｕａｎｍａｉ１０７ )㊁玉米(Ｚｅａｍａｙｓ Ｂ７３ )和大豆(Ｇｌｙｃｉｎｅｍａｘ Ｗｉｌｌｉａｍｓ )ꎬ各作物种子置于２８ħ条件下水培萌发ꎬ使用生长了７ｄ的胚根分生区细胞和１ｄ的子叶胚来检测ＯｓＰＩＮ１ｂ及同源物的亚细胞定位ꎮ１.２抗体的制备和检测根据水稻 Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ 的生长素输出载体ＯｓＰＩＮ１ｂ(Ｏｓ０２ｇ０７４３４００)的氨基酸序列人工合成多肽ＱＳＳＲＮＰＴＰＲＧＳＳＦＮＣꎬ并将其注入新西兰兔体内ꎮ通过ＥＬＩＳＡ方法检测到纯化的抗兔ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体ꎬ其浓度为０.５１ｍｇ ｍＬ￣１(１ʒ２００００)(杭州华安生物技术有限公司)ꎮ１.３免疫杂交和免疫组化检测为检测ＯｓＰＩＮ１ｂ的表达ꎬ提取了水稻叶片和根的总蛋白ꎬ并用一抗[抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体(１ʒ２００)]和二抗[山羊抗兔的ＩｇＧ￣ＨＲＰ(１ʒ５０００)]进行了免疫杂交ꎮ为了检测蛋白亚细胞定位ꎬ使用或不使用５０ｍｍｏｌ Ｌ￣１ＢｒｅｆｅｌｄｉｎＡ(ＢＦＡ)(ｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｒｏｂｅｓ)对不同农作物的根和胚处理９０ｍｉｎꎬ然后使用改良的免疫组织化学分析方法进行检测(Ｐａｃｉｏｒｅｋｅｔａｌ.ꎬ２００６)ꎮ具体如下:首先ꎬ将样品在２５ħ室温条件下用４％戊二醛溶液固定１ｈꎻ然后ꎬ３７ħ条件下用２％崩溃酶处理１ｈꎻ最后ꎬ用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体(１ʒ２００)和二抗[驴抗兔的ＩｇＧ(Ｈ＋Ｌ)￣Ａｌｅｘａｆｌｕｏｒ４８８抗体(１ʒ５００)](ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ)进行免疫组化检测ꎮ使用ＬｅｉｃａＳＰ５激光共聚焦显微镜(ＬｅｉｃａＭｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ)观察ＯｓＰＩＮ１ｂ的定位ꎮ１.４生物信息学分析从ＮＣＢＩ(ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ/)获得ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源蛋白的氨基酸序列ꎬ通过在线网站(ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｕｎｉｐｒｏｔ.ｏｒｇ/)分析ＯｓＰＩＮ１ｂ的跨膜结构域ꎬ使用软件ＶｅｃｔｏｒＮＴＩＳｕｉｔｅ６进行氨基酸序列比对ꎬ所有图片均使用Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ软件处理ꎮ２㊀结果与分析２.１不同作物的ＰＩＮ１序列相似性分析为了检测不同作物中生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１的亚细胞定位ꎬ首先ꎬ我们对拟南芥(ＡｔＰＩＮ１)㊁水稻(ＯｓＰＩＮ１ｂ)㊁小麦(ＴａＰＩＮ１)㊁玉米(ＺｍＰＩＮ１ｂ)和大豆(ＧｍＰＩＮ１ｂ)中ＰＩＮ１的氨基酸序列进行比对分析(图１)ꎮ结果表明:ＡｔＰＩＮ１㊁ＴａＰＩＮ１㊁ＺｍＰＩＮ１ｂ㊁ＧｍＰＩＮ１ｂ的序列与ＯｓＰＩＮ１ｂ分别具有５８.６％㊁６１.５％㊁６２.５％㊁６１.９％的相似性ꎬ在ＯｓＰＩＮ１ｂ的氨基酸序列中存在１０个跨膜区ꎮ２.２水稻中ＯｓＰＩＮ１ｂ的检测ＰＩＮ１序列在水稻㊁小麦㊁玉米和大豆之间显示出高度相似性(图１)ꎮ我们选择ＯｓＰＩＮ１ｂ中的序列ＱＳＳＲＮＰＴＰＲＧＳＳＦＮＣꎬ通过人工合成多肽免疫兔子制备了抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体ꎮ为检测抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体的有效性ꎬ我们提取了水稻叶片和根的总蛋白ꎬ并使用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体进行免疫杂交检测ꎮ结果表明ꎬ用ＯｓＰＩＮ１ｂ抗体可以检测到目标蛋白ＯｓＰＩＮ１ｂ(图２)ꎮ２.３ＰＩＮ１在不同农作物中的亚细胞定位通过免疫组织化学分析进一步检测了水稻㊁小麦㊁玉米和大豆根中ＰＩＮ１的亚细胞定位ꎬ发现１２２１８期武丽霞等:生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位水稻ꎬ小麦ꎬ玉米ꎬ大豆和拟南芥之间的ＰＩＮ１氨基酸序列比对ꎬ红框中的氨基酸序列为水稻ＯｓＰＩＮ１ｂ的跨膜结构域ꎮＰＩＮ１ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅｓａｒｅａｌｉｇｎｅｄａｍｏｎｇｒｉｃｅꎬｗｈｅａｔꎬｍａｉｚｅꎬｓｏｙｂｅａｎａｎｄＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓꎬａｎｄｒｅｄｂｏｘｅｓｓｈｏｗｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅｄｏｍａｉｎｓｏｆｒｉｃｅＯｓＰＩＮ１ｂａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｃｅｓ.图１㊀ＰＩＮ１的氨基酸序列比对Ｆｉｇ.１㊀ＰＩＮ１ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｌｉｇｎｍｅｎｔＰＩＮ１虽然可定位于根表皮细胞的细胞质膜上ꎬ但没有明显的极性分布(图３:Ａ－Ｄ)ꎮ在检测ＰＩＮ１在胚细胞中的定位时ꎬ发现ＰＩＮ１虽然可分布在水稻(图３:Ｅ)㊁小麦(图３:Ｆ)和玉米(图３:Ｇ)胚中子叶表皮细胞的细胞质膜上ꎬ但没有明显的极性分布ꎮ大豆中的ＧｍＰＩＮ１ｂ非极性分布在根表皮细２２２１广㊀西㊀植㊀物４１卷提取水稻 日本晴 叶片(Ａ)和根(Ｂ)中的总蛋白ꎬ用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体进行免疫杂交ꎮ箭头指示目标蛋白ＯｓＰＩＮ１ｂ的条带ꎮＴｏｔａｌｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆｒｉｃｅｌｅａｖｅｓ(Ａ)ａｎｄｒｏｏｔｓ(Ｂ)ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｒｉｃｅ Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ ａｎｄｂｌｏｔｔｅｄｗｉｔｈａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ.ＡｒｒｏｗｐｏｉｎｔｓｔｏｔｈｅｔａｒｇｅｔｐｒｏｔｅｉｎＯｓＰＩＮ１ｂ.图２㊀蛋白免疫杂交检测水稻叶片和根中的ＯｓＰＩＮ１ｂＦｉｇ.２㊀ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂｉｎｒｉｃｅｌｅａｖｅｓａｎｄｒｏｏｔｓｂｙｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｍｅｔｈｏｄ胞的细胞质膜上ꎬ而在胚的子叶表皮细胞中则分布于细胞质中(图３:Ｈ)ꎮ２.４水稻中ＯｓＰＩＮ１ｂ的胞吞检测由于ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白定位于细胞质膜上(图３:ＡꎬＥ)ꎬ因此ꎬ我们进一步检测了ＯｓＰＩＮ１ｂ是否可以通过胞吞的方式从细胞质膜转运入细胞质ꎮ用蛋白转运抑制剂ＢＦＡ处理水稻 Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ 和 ＬＴＨ 的根尖ꎬ用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体开展免疫组织化学实验ꎬ结果发现在细胞质中可以检测到ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白的聚集(图４)ꎮ这表明ＯｓＰＩＮ１ｂ可以通过胞吞途径从细胞质膜转移到细胞质中ꎮ３㊀讨论与结论生长素输出载体蛋白ＰＩＮ家族在植物发育中起着至关重要的作用ꎮ在这项研究中ꎬ我们利用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体有效检测了水稻㊁小麦㊁玉米和大豆的胚根分生区表皮细胞及胚中子叶表皮细胞的ＯｓＰＩＮ１及其同源物的亚细胞定位ꎬ结果发现ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物分布在水稻㊁小麦㊁玉米和大豆的根和胚中子叶表皮细胞的细胞质膜及细胞质中ꎮ不同作物中的相同细胞定位表明ＰＩＮ１在不同植物发育中ꎬ其调节生长素分布功能是保守的ꎮ此外ꎬ我们也注意到与拟南芥ＡｔＰＩＮ１的极性定位相比(Ｆｒｉｍｌｅｔａｌ.ꎬ２００３)ꎬ在不同农作物的根表皮细胞中ꎬＯｓＰＩＮ１及其同源物的定位是非极性的ꎮＯｓＰＩＮ１ｂ的氨基酸序列与ＡｔＰＩＮ１具有５８.６％的相似性ꎬ因此ꎬ不同作物和拟南芥ＡｔＰＩＮ１蛋白的亚细胞定位模式存在的差异可能与不同植物中ＰＩＮ１蛋白结构差异有关ꎮ玉米中的ＺｍＰＩＮ１ａ在不同玉米组织中的定位存在极性定位(Ｃａｒｒａｒｏｅｔａｌ.ꎬ２００６ꎻＧａｌｌａｖｏｔｔｉｅｔａｌ.ꎬ２００８ꎻＭｏｏｎｅｔａｌ.ꎬ２０１３ꎻＫａｍａｄａｅｔａｌ.ꎬ２０１８)㊁非极性定位(Ｓｋｉｒｐａｎｅｔａｌ.ꎬ２００９)和胞质定位(Ｆｏｒｅｓｔａｎｅｔａｌ.ꎬ２０１２)ꎬ一些研究也发现ＡｔＰＩＮ１的极性分布与胚发育中的生长素动态相关(Ｆｒｉｍｌｅｔａｌ.ꎬ２００３)ꎮ在本研究中ꎬ用于ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物细胞定位观察的胚根及子叶胚都处于植物发育的早期阶段ꎬ这表明不同作物中ＰＩＮ１的定位还与作物组织发育阶段有关ꎮ此外ꎬ利用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体可以检测到ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白ꎮ进一步分析结果发现ＯｓＰＩＮ１ｂ与ＯｓＰＩＮ１ａ氨基酸序列相似性为６２.４％ꎬＯｓＰＩＮ１ａ㊁ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白分子量分别为６４.７㊁５９.３ｋＤꎬ且ＯｓＰＩＮ１ａ氨基酸序列中含有用于制备抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体的序列ＱＳＳＲＮＰＴＰＲＧＳＳＦＮＣꎮ因此ꎬ不能完全排除所检测到的蛋白条带中含有ＯｓＰＩＮ１ａꎬ而这也可能部分解释了我们在根表皮细胞中所观察到的ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物的非极性定位ꎮＰＩＮ蛋白由于胞吞作用而产生的细胞定位的改变可影响生长素的极性运输ꎬ从而进一步调控器官形成(Ｋｌｅｉｎｅ￣Ｖｅｈｎｅｔａｌ.ꎬ２００８)ꎮ本研究结果发现ＯｓＰＩＮ１ｂ可以通过胞吞途径进入到细胞质中ꎮ这显示由于细胞的胞吞作用ꎬＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物的细胞质膜及细胞质定位可能会发生变化ꎬ并参与调控植物内生长素的分布ꎮＰＩＮ蛋白的细胞定位可受到其他物质如水杨酸的调控(Ｄｕｅｔａｌ.ꎬ２０１３)ꎮ但是ꎬ我们观察到ＯｓＰＩＮ１ｂ的定位可由自身胞吞作用而改变ꎬ因此ꎬ不同作物中ＰＩＮ１蛋３２２１８期武丽霞等:生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位水稻 日本晴 (ＡꎬＥ)ꎬ小麦(ＢꎬＦ)ꎬ玉米(ＣꎬＧ)和大豆(ＤꎬＨ)的根(Ａ－Ｄ)和胚(Ｅ－Ｈ)用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体开展免疫组化实验ꎮ标尺＝１０μｍꎮＲｏｏｔｓ(Ａ－Ｄ)ａｎｄｅｍｂｒｙｏｓ(Ｅ－Ｈ)ｏｆｒｉｃｅ Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ (ＡꎬＥ)ꎬｗｈｅａｔ(ＢꎬＦ)ꎬｍａｉｚｅ(ＣꎬＧ)ａｎｄｓｏｙｂｅａｎ(ＤꎬＨ)ｗｅｒｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｓｓａｙｗｉｔｈａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ.Ｂａｒｓ＝１０μｍ.图３㊀ＰＩＮ１在根和胚的子叶表皮细胞中的亚细胞定位Ｆｉｇ.３㊀ＳｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＰＩＮ１ｉｎｒｏｏｔａｎｄｅｍｂｒｙｏｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓ用２５μｍｏｌ Ｌ￣１ＢＦＡ处理水稻品种 丽江新团黑谷 (Ａ)和 日本晴 (Ｂ)的根尖９０ｍｉｎꎬ然后用抗兔的ＯｓＰＩＮ１ｂ多克隆抗体通过免疫组化检测ＯｓＰＩＮ１ｂ的胞吞ꎮ箭头指示根表皮细胞胞质中ＯｓＰＩＮ１ｂ蛋白聚集体ꎮ标尺＝１０μｍꎮＲｏｏｔｓｏｆｒｉｃｅｌｉｎｅｓ ＬＴＨ (Ａ)ａｎｄ Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ (Ｂ)ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ２５μｍｏｌ Ｌ￣１ＢＦＡｆｏｒ９０ｍｉｎꎬａｎｄｂｌｏｔｔｅｄｗｉｔｈａｎｔｉ￣ｒａｂｂｉｔＯｓＰＩＮ１ｂｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｓｓａｙ.ＡｒｒｏｗｐｏｉｎｔｓｔｏｔｈｅＯｓＰＩＮ１ｂｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｃｙｔｏｐｌａｓｍａｏｆｒｏｏｔｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓ.Ｂａｒｓ＝１０μｍ.图４㊀水稻根表皮细胞中ＯｓＰＩＮ１ｂ的胞吞检测Ｆｉｇ.４㊀ＥｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＯｓＰＩＮ１ｂｉｎｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍａｏｆｒｉｃｅｒｏｏｔｅｐｉｄｅｒｍａｌｃｅｌｌｓ４２２１广㊀西㊀植㊀物４１卷白的亚细胞定位是一个动态的过程ꎮ不同作物中ＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物可非极性定位于细胞质膜及细胞质中ꎬ这是一个动态的分布过程ꎬ并与植物所处的发育阶段密切相关ꎮＯｓＰＩＮ１ｂ及其同源物的亚细胞定位将有助于揭示生长素输出载体通过影响生长素极性分布而参与调控农作物中根和胚发育的分子机制ꎮ登录号㊀文章中相关蛋白在ＮＣＢＩ数据库中的登录号分别为ＡｔＰＩＮ１(ＮＰ＿１７７５００.１)㊁ＯｓＰＩＮ１ｂ(ＸＰ＿０１５６１６０１４.１)㊁ＴａＰＩＮ１(ＡＡＳ１９８５８.１)㊁ＺｍＰＩＮ１ｂ(ＡＢＨ０９２４３.１)㊁ＧｍＰＩＮ１ｂ(ＮＰ＿００１２３７５４６.２)ꎮ参考文献:ＢＥＮＪＡＭＩＮＳＲꎬＳＣＨＥＲＥＳＢꎬ２００８.Ａｕｘｉｎ:ｔｈｅｌｏｏｐｉｎｇｓｔａｒｉｎｐｌａｎｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ[Ｊ].ＡｎｎＲｅｖＰｌａｎｔＢｉｏｌꎬ５９(１):４４３－４６５.ＢＬＩＬＯＵＩꎬＸＵＪꎬＷＩＬＤＷＡＴＥＲＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２００５.ＴｈｅＰＩＮａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｆａｃｉｌｉｔａｔｏｒｎｅｔｗｏｒｋｃｏｎｔｒｏｌｓｇｒｏｗｔｈａｎｄｐａｔｔｅｒｎｉｎｇｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｒｏｏｔｓ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅꎬ４３３(７０２１):３９－４４.ＣＡＲＲＡＲＯＮꎬＦＯＲＥＳＴＡＮＣꎬＣＡＮＯＶＡＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２００６.ＺｍＰＩＮ１ａａｎｄＺｍＰＩＮ１ｂｅｎｃｏｄｅｔｗｏｎｏｖｅｌｐｕｔａｔｉｖｅｃａｎｄｉｄａｔｅｓｆｏｒｐｏｌａｒａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄｐｌａｎｔａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍａｉｚｅ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌꎬ１４２(１):２５４－２６４.ＣＡＳＩＭＩＲＯＩꎬＭＡＲＣＨＡＮＴＡꎬＢＨＡＬＥＲＡＯＲＰꎬｅｔａｌ.ꎬ２００１.ＡｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｐｒｏｍｏｔｅｓＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｌａｔｅｒａｌｒｏｏｔｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ[Ｊ].ＴｈｅＰｌａｎｔＣｅｌｌꎬ１３(４):８４３－８５２.ＤＵＹＬꎬＴＥＪＯＳＲꎬＢＥＣＫＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１３.Ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓｗｉｔｈｃｌａｔｈｒｉｎ￣ｍｅｄｉａｔｅｄｅｎｄｏｃｙｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ[Ｊ].ＰＮＡＳꎬ１１０(１９):７９４６－７９５１.ＦＯＲＥＳＴＡＮＣꎬＦＡＲＩＮＡＴＩＳꎬＶＡＲＯＴＴＯＳꎬ２０１２.ＴｈｅｍａｉｚｅＰＩＮｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｏｆａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ[Ｊ].ＦｒｏｎｔＰｌａｎｔＳｃｉꎬ３(１６):１６.ＦＲＩＭＬＪꎬＶＩＥＴＥＮＡꎬＳＡＵＥＲＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２００３.Ｅｆｆｌｕｘ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｕｘｉｎｇｒａｄｉｅｎｔｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅａｐｉｃａｌ￣ｂａｓａｌａｘｉｓｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅ(Ｌｏｎｄｏｎ)ꎬ４２６(６９６３):１４７－１５３.ＧＡＬＬＡＶＯＴＴＩＡꎬＹＡＮＧＹꎬＳＣＨＭＩＤＴＲＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２００８.Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄｍａｉｚｅｂｒａｎｃｈｉｎｇ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌꎬ１４７(４):１９１３－１９２３.ＧÄＬＷＥＩＬＥＲＬꎬＧＵＡＮＣꎬＭＵＬＬＥＲＡꎬｅｔａｌ.ꎬ１９９８.ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｏｌａｒａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｂｙＡｔＰＩＮ１ｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｖａｓｃｕｌａｒｔｉｓｓｕｅ[Ｊ].Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ２８２(５３９７):２２２６－２２３０.ＧＥＬＤＮＥＲＮꎬＦＲＩＭＬＪꎬＳＴＩＥＲＨＯＦＹＤꎬｅｔａｌ.ꎬ２００１.ＡｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｂｌｏｃｋＰＩＮ１ｃｙｃｌｉｎｇａｎｄｖｅｓｉｃｌｅｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅꎬ４１３(６８５４):４２５－４２８.ＧＵＥＮＯＴＢꎬＢＡＹＥＲＥꎬＫＩＥＲＺＫＯＷＳＫＩＤꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２.ＰＩＮ１￣ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｅａｆｉｎｉｔｉａｔｉｏｎｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌꎬ１５９(４):１５０１－１５１０.ＫＡＭＡＤＡＭꎬＭＩＹＡＭＯＴＯＫꎬＯＫＡＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１８.ＰｒｏｃｅｄｕｒｅｓｆｏｒｃｈｅｍｉｃａｌｆｉｘａｔｉｏｎｉｎｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｅｓｏｆＰＩＮｐｒｏｔｅｉｎｓｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｐｏｌａｒａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔ:ｒｅｌｅｖａｎｃｅｔｏｓｐａｃｅｆｌｉｇｈｔｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ[Ｊ].ＬｉｆｅＳｃｉＳｐａｃｅＲｅｓ(Ａｍｓｔ)ꎬ１８:４２－５１.ＫＬＥＩＮＥ￣ＶＥＨＮＪꎬＤＨＯＮＵＫＳＨＥＰꎬＳＡＵＥＲＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２００８.ＡＲＦＧＥＦ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｔｒａｎｓｃｙｔｏｓｉｓａｎｄｐｏｌａｒｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆＰＩＮａｕｘｉｎｃａｒｒｉｅｒｓｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ[Ｊ].ＣｕｒｒＢｉｏｌꎬ１８(７):５２６－５３１.ＬＩＹꎬＺＨＵＪＳꎬＷＵＬＬꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅｏｆＰＩＮ１ｐａｒａｌｏｇｏｕｓｇｅｎｅｓｉｎｒｉｃｅ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌꎬ６０(１２):２７２０－２７３２.ＭＯＯＮＪꎬＣＡＮＤＥＬＡＨꎬＨＡＫＥＳꎬ２０１３.Ｔｈｅｌｉｇｕｌｅｌｅｓｓｎａｒｒｏｗｍｕｔａｔｉｏｎａｆｆｅｃｔｓｐｒｏｘｉｍａｌ￣ｄｉｓｔａｌｓｉｇｎａｌｉｎｇａｎｄｌｅａｆｇｒｏｗｔｈ[Ｊ].Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬ１４０(２):４０５－４１２.ＰＡＣＩＯＲＥＫＴꎬＳＡＵＥＲＭꎬＢＡＬＬＡＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２００６.Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｔｅｃｈｎｉｑｕｅｆｏｒｐｒｏｔｅｉｎｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｓｅｃｔｉｏｎｓｏｆｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｓ[Ｊ].ＮａｔｕｒｅＰｒｏｔｏｃｏｌｓꎬ１(１):１０４－１０７.ＰＡＬＭＥＫꎬＧÄＬＷＥＩＬＥＲＬꎬ１９９９.ＰＩＮ￣ｐｏｉｎｔｉｎｇｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｂａｓｉｓｏｆａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔ[Ｊ].ＣｕｒｒＯｐｉｎＰｌａｎｔＢｉｏｌꎬ２(５):３７５－３８１.ＳＫＩＲＰＡＮＡꎬＣＵＬＬＥＲＡＨꎬＧＡＬＬＡＶＯＴＴＩＡꎬｅｔａｌ.ꎬ２００９.ＢＡＲＲＥＮＩＮＦＬＯＲＥＳＣＥＮＣＥ２ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈＺｍＰＩＮ１ａｓｕｇｇｅｓｔｓａｒｏｌｅｉｎａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｄｕｒｉｎｇｍａｉｚｅｉｎｆｌｏｒｅｓｃｅｎｃｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌꎬ５０(３):６５２－６５７.ＳＩＮＧＨＫꎬＳＩＮＧＨＪꎬＪＩＮＤＡＬＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１８.ＳｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆａｎａｕｘｉｎｅｆｆｌｕｘｃａｒｒｉｅｒＰＩＮ１ａｎｄｉｔｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｃｏｍｍｏｎｗｈｅａｔ[Ｊ].ＦｕｎｃｔＩｎｔｅｇｒＧｅｎｏｍｉｃꎬ１９(１):２９－４１.ＷＡＮＧＹＱꎬＣＨＡＩＣＬꎬＶＡＬＬＩＹＯＤＡＮＢꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１５.Ｇｅｎｏｍｅ￣ｗｉｄｅａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇｏｆｔｈｅＰＩＮａｕｘｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｉｎｓｏｙｂｅａｎ(Ｇｌｙｃｉｎｅｍａｘ) [Ｊ].ＢＭＣＧｅｎｏｍｉｃｓꎬ１６(１):９５１－９６３.ＸＵＭꎬＺＨＵＬꎬＳＨＯＵＨＸꎬｅｔａｌ.ꎬ２００５.ＡＰＩＮ１ｆａｍｉｌｙｇｅｎｅꎬＯｓＰＩＮ１ꎬｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎａｕｘｉｎ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｒｏｏｔｅｍｅｒｇｅｎｃｅａｎｄｔｉｌｌｅｒｉｎｇｉｎｒｉｃｅ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌꎬ４６(１０):１６７４－１６８１.(责任编辑㊀周翠鸣)５２２１８期武丽霞等:生长素输出载体蛋白ＰＩＮ１在作物根和胚中的亚细胞定位。
云南省人民政府关于2013年度科学技术奖励的决定文章属性•【制定机关】云南省人民政府•【公布日期】2014.04.01•【字号】云政发[2014]13号•【施行日期】2014.04.01•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】机关工作正文云南省人民政府关于2013年度科学技术奖励的决定(云政发〔2014〕13号)各州、市人民政府，省直各委、办、厅、局：为深入贯彻落实党的十八大和十八届二中、三中全会以及全国科技创新大会和省委九届七次全会精神，深入推进科技体制改革，大力实施创新驱动发展战略，不断提升自主创新能力，充分发挥科技支撑引领作用，省人民政府决定对2013年度在我省科学技术进步、经济社会发展中作出突出贡献的科学技术人员和组织给予奖励。
授予李德铢研究员云南省科学技术奖杰出贡献奖；授予“基因组多样性与亚洲人群的演化”成果云南省自然科学奖特等奖；授予“生物系统的噪声和时间延迟效应研究”等5项成果云南省自然科学奖一等奖；授予“WRKY基因调控植物抗逆境性状建成的分子机制研究”等9项成果云南省自然科学奖二等奖；授予“托卡马克等离子体中逃逸电子行为的实验研究”等9项成果云南省自然科学奖三等奖。
授予“高效低成本钢铁耐磨材料制备技术及应用”成果云南省技术发明奖一等奖；授予“锌湿法加压冶金新技术研发及产业化”等3项成果云南省技术发明奖二等奖；授予“高效、卫生、优质普洱茶加工工艺”等6项成果云南省技术发明奖三等奖。
授予“光损伤性皮肤病防治体系的创建及应用”成果云南省科技进步奖特等奖；授予“优质超级稻新品种‘楚粳28号’的选育及应用”等6项成果云南省科技进步奖一等奖；授予“典型农区农业面源污染防控关键技术研究与示范”等25项成果云南省科技进步奖二等奖；授予“羊肚菌仿生栽培关键技术研究及产业化示范”等114项成果云南省科技进步奖三等奖。
希望获奖者再接再厉，勇攀高峰，不断取得新成果，创造新业绩。
全省广大科技工作者要向全体获奖者学习，继续发扬求真务实、勇于创新的科学精神，紧紧围绕建设绿色经济强省、民族文化强省和我国面向西南开放重要桥头堡的目标，按照“翻两番、增三倍、促跨越、奔小康”的要求，以科教兴滇为己任，以改革创新为动力，以提高自主创新能力为核心，加快实现创新驱动发展，努力开创科学发展、和谐发展、跨越发展新局面，为加快创新型云南建设、实现我省与全国同步全面建成小康社会作出新的更大贡献。
![云南省人民政府关于表彰标准化贡献单位和技术标准创新项目的决定-云政发[2009]142号](https://img.taocdn.com/s1/m/ad689706c4da50e2524de518964bcf84b9d52d06.png)
云南省人民政府关于表彰标准化贡献单位和技术标准创新项目的决定正文：---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 云南省人民政府关于表彰标准化贡献单位和技术标准创新项目的决定(云政发[2009]142号)各州、市人民政府，省直各委、办、厅、局，有关企业：在省委、省政府的正确领导下，全省各地、各有关部门、行业组织，深入贯彻落实科学发展观，开拓创新，狠抓落实，积极推进标准化工作，为全省经济社会发展、社会和谐稳定作出了积极贡献。
为表彰先进，树立典型，鼓舞斗志，加快我省标准化创新研究，进一步提高标准化对我省经济社会发展的技术支撑和基础保障作用，省人民政府决定，授予省农业厅等10个单位“云南省标准化贡献奖”，授予《地理标志产品普洱茶》等10项技术标准项目“云南省技术标准创新奖”，并给予表彰奖励。
希望获奖单位珍惜荣誉、再接再厉，为推动我省实施标准化战略，加快经济社会又好又快发展作出更大的贡献。
附件：“云南省标准化贡献奖”和“云南省技术标准创新奖”获奖名单云南省人民政府二00九年八月十六日附件：“云南省标准化贡献奖”和“云南省技术标准创新奖”获奖名单一、“云南省标准化贡献奖”获奖单位1．省农业厅2．红河州人民政府3．普洱市人民政府4．昆明经济技术开发区管理委员会5．会泽县人民政府6．洱源县人民政府7．红塔烟草(集团)有限责任公司8．云南锡业集团(控股)有限责任公司9．云天化集团有限责任公司10．云南驰宏锌锗股份有限公司二、“云南省技术标准创新奖’获奖技术标准项目1．GB/T22111-2008《地理标志产品普洱茶》国家标准(标准主要起草单位：云南省茶叶产业办公室) 2．GB/T22580-2008《特殊环境条件高原电气设备技术要求低压成套开关设备和控制设备》国家标准(标准起草单位：昆明电器科学研究所)3．GB/T18990-2008《促黄体生成素检测试纸(胶体金免疫层析法)》国家标准(标准起草单位：昆明云大生物技术有限公司)4．NY/T1491-2007《花卉植物病毒检测规程》行业标准(标准起草单位：农业部花卉产品质量监督检验测试中心·昆明)5．Y5/203-209《贵金属及其合金丝、线、棒材》行业标准(标准起草单位：贵研铂业股份有限公司) 6．DB53/T112-2004《烟草漂浮育苗基质》地方标准(标准主要起草单位：云南省烟草专卖局)7．DB53/68-2008《珠宝玉石、贵金属饰品标签标实》地方标准(标准起草单位：云南省珠宝玉石饰品质量监督检验所)8．DB53/062-2006《主要造林树种苗木》地方标准(标准主要起草单位：云南省林木种苗工作总站) 9．Q/YBY30-2009《云南白药牙膏》企业标准 (标准起草单位：云南白药集团股份有限公司)10．Q/YYX01-2004《玻璃钢沼气池》企业标准(标准主要起草单位：云南悦欣建材有限公司)——结束——。
云南师范大学计划财务处云南师范大学计划财务处篇一：云南师范大学科研经费管理暂行办法云南师范大学科研经费管理暂行办法（讨论稿）第一章总则第一条为贯彻落实《国家长期科学和技术发展规划纲要（201X-2020年）》和《国家中长期教育改革和发展规划纲要（201X-2020年）》，建立健全并符合科研活动规律的高校内部科研经费管理和运行体制，提升科研经费管理服务水平，进一步规范和加强我校各类科研项目资助经费的管理，保证经费使用的合理性，提高经费使用效益，保证科研项目的顺利完成，根据教育部、财政部《教育部、财政部关于进一步加强高校科研经费管理的若干意见》（教财〔201X〕7号）、科技部《关于严肃财经纪律规范国家科技计划课题经费使用和加强监管的通知》（国科发财字〔201X〕462号）、财政部、科技部《关于调整国家科技计划和公益性行业科研专项经费管理办法若干规定的通知》（财教〔201X〕434号）等文件精神及国家有关财务制度和学校财务有关规定的要求，参照有关主管部门制定的项目管理办法，结合我校实际，特制定本暂行办法。
第二条根据科研经费来源不同，科研项目经费分为纵向科研项目经费和横向科研项目经费两大类。
（一）纵向科研项目经费：是指经费来源性质属于中央或地方财政的资金，包括政府部门直接下达给学校的各类科研项目经费和学校作为合作（协作）单位承担上述来源项目并由项目主持单位转拨到我校的科研经费及学校自立的科研项目经费。
（二）横向科研项目经费：是指经费来源性质属于社会资金，包括各类企事业单位（地方政府、机关、社团、部队、其他学校、企业等）和个人委托的项目经费；境外（含港、澳、台）基金和非基金类资助的科研项目经费；国际政府组织、非政府组织（NGO）、国内外民间基金资助的科研项目经费；学校科技服务地方所承担的各类项目（包括技术合同项目）经费等。
第三条科研经费实行学校统一管理下的项目负责人责任制，在管理中明确责任主体，建立分级管理体制。
云南省人民政府关于表彰全省就业创业工作先进集体和先进个人的决定文章属性•【制定机关】云南省人民政府•【公布日期】2012.12.28•【字号】云政发[2012]170号•【施行日期】2012.12.28•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】机关工作正文云南省人民政府关于表彰全省就业创业工作先进集体和先进个人的决定(云政发〔2012〕170号)各州、市人民政府，省直各委、办、厅、局：就业是民生之本。
省委、省政府始终高度重视就业工作，把促进就业作为保障和改善民生的头等大事，摆在经济社会发展的优先位置，研究制定了一系列政策措施，千方百计扩大就业、鼓励创业。
全省各地、各部门和社会各界，精心组织，积极参与，落实更加积极的就业政策，保持了就业局势的稳定，为推动经济较快发展和社会和谐稳定作出了积极贡献。
在这一过程中，涌现出一批在落实政策、提供服务、推动工作上表现突出的先进集体和先进个人，积极吸纳就业、稳定就业岗位、构建和谐劳动关系的就业先进企业，自立自强、自主就业、创新创业的优秀创业者，高校毕业生就业见习基地和大学生创业园先进典型。
为激励先进，充分调动各方面参与就业创业工作的积极性，推动就业创业工作再上一个新台阶，省人民政府决定，授予昆明市劳动就业服务局等40个单位“全省就业先进工作单位”称号，授予王芳等40人“全省就业先进工作者”称号，授予昆明家乐福超市有限公司等40户企业“全省就业先进企业”称号，授予段昆等40人“全省就业创业优秀个人”称号，授予沈机集团昆明机床股份有限公司等10个单位“全省优秀高校毕业生就业见习基地”称号，授予昆明市大学生创业园等10个创业园区“全省大学生创业示范园”称号。
希望受表彰的先进集体和先进个人珍惜荣誉，再接再厉，再创佳绩。
各地、各部门要深入贯彻落实就业优先战略和更加积极的就业政策，努力实现更高质量的就业，为促进云南科学发展、和谐发展、跨越发展作出更大的贡献。
