不同真菌菌株对蛴螬的毒力测定
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第三章 生物制品的菌种与毒种页数:22
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菌种毒力试验方法页数:2
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第三章 生物制品的菌种与毒种汇编页数:22
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苏云金杆菌菌株的毒力比较及筛选页数:4
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白僵菌20亿克粉剂防治花生蛴螬田间药效试验
表Ｉ白僵菌加亿／克粉剂防治花生蛴螬结果
粉剂１．５ｋｇ区平均为０．２头／３ｍ２，虫口减退率９８．１１％，防效９８．３１％，而空白对照区蛴螬密度平均为１１．６７头／３ｍ２，虫口密度较播种前增加１１．８９％。
差异极显著。
２．２花生产量考查施用白僵菌２０亿／克粉剂ｌｋｇ区平均产量３１１．２７ｋｇ／６６７ｍ２，增产率１４．８９％，施用白僵菌２０亿克粉剂１．５ｋｇ区平均产量为３２１．５７ｋｇ／６６７ｍ２，增产率１８．６９％，空白对照区平均产量为２７０．９３ｋｇ／６６７ｍ２，差异极显著。
３结论与讨论
试验结果表明：白僵菌２０亿／克粉剂在花生播种时随种子施人穴中，能有效防治花生蛴螬，且对环境、产品无毒、无害，并且省工省时，操作简单，是典型的绿色农药。
白僵菌２０亿／克粉剂１～１．５ｋｇ／６６７ｍ２均能较好地控制蛴螬为害，并有很好的增产效果，可根据当地蛴螬密度情况，密度大时，适当增加用量选择应用。
白僵菌20亿/克粉剂防治花生蛴螬田间药效试验
作者：孙明海， 孔德生， 惠祥海， 赵艳丽， 刘兰兰
作者单位：山东省邹城市植保站,山东,邹城,273500
刊名：
农药科学与管理
英文刊名：PESTICIDE SCIENCE AND ADMINISTRATION
年，卷(期)：2009，30(12)
被引用次数：1次
本文链接：/Periodical_nykxygl200912015.aspx
授权使用：(my152********)，授权号：dc83f93f-3022-4f37-a739-9ecb00a493e9
下载时间：2011年4月20日。
不同杀虫剂对铜绿丽金龟的室内毒力测定及混配增效药剂筛选
不同杀虫剂对铜绿丽金龟的室内毒力测定及混配增效药剂筛选作者：何发林乔治华姚向峰于灏泳孙石昂李向东张吉旺姜兴印来源：《植物保护》2020年第04期摘要為了筛选出对蛴螬具有增效作用的复配药剂组合，室内采用浸虫法测定了多个复配剂对铜绿丽金龟2龄幼虫的联合毒力，并用共毒因子法与共毒系数法相结合评价了复配组合的联合作用。
结果表明，氯虫苯甲酰胺与硫双威、毒死蜱、噻虫胺、氟虫腈、联苯菊酯、吡虫啉、高效氯氟氰菊酯分别按9∶2、5∶1、3∶4、9∶25、18∶5、1∶3、18∶23复配时增效作用最显著，其共毒系数分别为169、248、335、144、195、185、184;高效氯氟氰菊酯与噻虫胺按15∶2复配时增效作用最明显，共毒系数为166;联苯菊酯与硫双威、吡虫啉分别按5∶2、5∶9复配时增效作用最显著，共毒系数分别为216、244。
关键词铜绿丽金龟; 复配; 共毒因子; 共毒系数中图分类号： S 433.5文献标识码： BDOI： 10.16688/j.zwbh.2019191Co-toxicity of different insecticides against Anomala corpulenta andscreening of synergistic agents mixed with different insecticidesHE Falin， QIAO Zhihua， YAO Xiangfeng， YU Haoyong，SUN Shi’ang，LI Xiangdong， ZHANG Jiwang， JIANG Xingyin*（College of Plant Protection， Key Laboratory of Pesticide Toxicology and Application Technique ofShandong Province， Shandong Agricultural University，Tai’an 271018， China）AbstractIn order to screen out the complex insecticides with synergistic effect on grubs， the combined toxicity of multiple compounding agents against the 2nd-instar of the Anomala corpulenta was determined by the method of immersing the insects. The combined effects of compound combinations were evaluated using co-toxicity factor method and co-toxicity coefficient method. The results revealed that the mixtures of chlorantraniliprole with thiodicarb， chlorpyrifos， clothianidin，fipronil， bifenthrin， imidacloprid and lambda-cyhalothrin at the ratio of 9∶2， 5∶1， 3∶4，9∶25， 18∶5， 1∶3 and 18∶23，respectively， showed significant synergistic effect， with the co-toxicity coefficients （CTCs） of 169， 248， 335， 144， 195， 185 and 184， respectively. The mixtures of lambda-cyhalothrin and clothianidin （15∶2） showed the highest synergism with the CTC of 166， and the CTC of the mixtures of bifenthrin with thiodicarb and imidacloprid at the ratios of 5∶2 and 5∶9 were 216 and 244， respectively.Key wordsAnomala corpulenta; combination of pesticides; co-toxicity factor; co-toxicity coefficient地下害虫是国内外公认的难以预测和防治的重大害虫，主要为害农作物幼苗、根系及块茎等[1]。
蛴螬高毒力苏云金芽孢杆菌研究
年 ， 一 个 苏 云 金 芽 孢 杆 菌 商 品 制 剂 问 世 ， 于 防 治 地 中 海 第 用
果 ， 植 株 矮 小 变 黄 ， 低 产 量 ， 响 品质 。 使 降 影
蛴 螬 是 花 生 产 区 的 主 要 害 虫 。２ ０ — ２ ０ ０ ３ ０ ４年 笔 者 在 河
． 粉 螟 。到 １ ５ ９ ３年 Ｈａ ｎ ｙ 一 次 发 现 苏 云 金 芽 孢 杆 菌 的 杀 ２ ２ 花 生 蛴 螬 的 危 害 ｎａ 第
虫一 起 证 实 了 伴 孢
暗 Ｈｏｏｒ ｈａ ａａ ｅ 危 ｉ ｌａ 晶体 是 一 种 蛋 白质 。 Ｄｕｍａ ｅ １７ ） 选 出 对 夜 蛾 科 毒 力 北 定 州 市 调 查 ， 黑 鳃 金 龟 （ ｌｔ ｃ ｉ ｐ ｒｌ ｌ） 害 严 ｌ ｇ （９０ 筛 较 高 的 菌 株 ＨＤ一 １并 以 此 建 立 了 标 准 品 的 生 物 测 定 程 序 ， ， 实现 了苏云 金 芽 孢杆 菌 制 剂 的标 准 化 。１６ ９ ２年 ， ａｊｃ Ｂ ｒ 等 ａ 首 先 根 据 生 理 生 化 反 应 和 鞭 毛抗 原 （ 血 清 反 应 的 不 同 ， Ｈ） 把 苏 云金 芽 孢 杆 菌 划 分 为 ６个 亚 群 。 １ ６ ９ ７年 、 ９ ８年 Ｈｅ １６ ｉ ｍ— ｐｌ 形态特征 、 化反应 、 型 和酯 酶型 结合 在一 起 ， 出 ｅ把 生 Ｈ 提 了产 伴 孢 晶 体 的 细 菌 分 类 表 。 １ ７ ９ ６年 Ｚ ｋ ａｙ ｎ最 先 提 ａ ｈ ｒｏ 出 ： 粒 可 能 对 伴 孢 晶 体 的 编 码 起 作 用 。 Ｄ ｂ ｂ ｖ 等 质 ｅａｉ ｏ 重 ， 成花 生 严 重 减 产 ， 重 地 块 花 生 产 量 不 足 ５ 造 严 ０公 斤 ／ 亩 ；０ ５ ２ ０ ２ ０ — ０ ８年 调 查 ， 绿 丽 金 龟 （ ｏ ｌ ｏ ｐ ｌｎａ 铜 Ａｎ ｍａａｃｒ ｕｅ ｔ）
东北地区土壤中高毒力虫生真菌菌株的筛选
黑龙江农业科学 ２ ０ １ ５ （ Ｉ ） ： ５ ０ －５ ６
Ｈ ｅ ｉ ｌ ｏ ｎ ｇ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ
鳓 缳曲 Ｐ
东 北 地 区土 壤 中高 毒 力 虫 生 真 菌 菌 株 的筛 选
王 爽， 李新 民 ， 刘 春来 ， 夏 吉星 ， 杨 帆， 王克 勤 ， 刘兴 龙 （ 黑龙 江省 农 业科 学院 植物 保 护研 究所 ， 黑龙 江 哈 尔滨 １ ５ ０ ０ ８ ６ ）
大蜡螟幼虫 ， 摇动瓶子 ， 使 土 样 完 全 覆 盖 住 大 蜡
药 的注 册产 品∞ ］ 。研 究 表 明 ， 虫 生 真 菌分 布 十分
广泛， 不 同生 境 条件 下 分 离 获 得 的 同 一 种类 的菌 株 间在 数量 和 致 病 性 等存 在着 显 著 差 异 。因此 ，
开 展虫 生真 菌种 类 资 源 及 分 布研 究 ， 对 发 现 新 资 源、 筛 选高效 、 广 谱生 防 菌株 和生 物制剂 的 开发具
界 已知虫 生 真 菌 约 １ Ｏ ０属 ， ８ ０ ０余 种 ＿ ４ ｊ ， 近 １ ｏ年
来， 登记 注册 的杀 虫真 菌生 防制 剂 已有 ６ Ｏ余 个产 品 。我 国 ２ ０世 纪 ７ Ｏ年 代 末 始 见一 些 专 题 研 究 ，
病 原 真菌 分离 纯化后 选 １ ～２株共 ４ １株进 行生 物
虫 生真 菌是 一 种 重 要 的 生物 防 治资 源 ， 在 农 林 害虫 生物 防 治 中发 挥 着 巨 大 的作 用 ， 受 到 国 内 外 生物 防治 界 的广泛 关注 。用 虫生 真菌 来 防治害 虫 不仅 持效 期长 、 无残留、 无公 害 、 不伤 害天 敌 、 害
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东 北 地 区土 壤 中高 毒 力 虫 生 真 菌 菌 株 的筛 选
王 爽， 李新 民 ， 刘 春来 ， 夏 吉星 ， 杨 帆， 王克 勤 ， 刘兴 龙 （ 黑龙 江省 农 业科 学院 植物 保 护研 究所 ， 黑龙 江 哈 尔滨 １ ５ ０ ０ ８ ６ ）
大蜡螟幼虫 ， 摇动瓶子 ， 使 土 样 完 全 覆 盖 住 大 蜡
药 的注 册产 品∞ ］ 。研 究 表 明 ， 虫 生 真 菌分 布 十分
广泛， 不 同生 境 条件 下 分 离 获 得 的 同 一 种类 的菌 株 间在 数量 和 致 病 性 等存 在着 显 著 差 异 。因此 ，
开 展虫 生真 菌种 类 资 源 及 分 布研 究 ， 对 发 现 新 资 源、 筛 选高效 、 广 谱生 防 菌株 和生 物制剂 的 开发具
界 已知虫 生 真 菌 约 １ Ｏ ０属 ， ８ ０ ０余 种 ＿ ４ ｊ ， 近 １ ｏ年
来， 登记 注册 的杀 虫真 菌生 防制 剂 已有 ６ Ｏ余 个产 品 。我 国 ２ ０世 纪 ７ Ｏ年 代 末 始 见一 些 专 题 研 究 ，
病 原 真菌 分离 纯化后 选 １ ～２株共 ４ １株进 行生 物
虫 生真 菌是 一 种 重 要 的 生物 防 治资 源 ， 在 农 林 害虫 生物 防 治 中发 挥 着 巨 大 的作 用 ， 受 到 国 内 外 生物 防治 界 的广泛 关注 。用 虫生 真菌 来 防治害 虫 不仅 持效 期长 、 无残留、 无公 害 、 不伤 害天 敌 、 害
常用农药对5种昆虫细胞系的毒力测定及分析
自 20 世纪 60 年代 Grace 建立了第一个能够稳 定传代的昆 虫 细 胞 系 以 来 （ Grace，1962 ） ，经 过 几 十 年 的 研 究 和 发 展 ，昆 虫 细 胞 培 养 已 在 细 胞 系 建 立 、培 养技术和方法、昆虫 细 胞 培 养 技 术 的 利 用 等 方 面 取 得 了 很 大 的 进 展 ，昆 虫 细 胞 被 广 泛 地 应 用 于 医 学 、农 学及生物学 的 各 个 领 域 （ 宋 德 伟 等，2004； 张 佑 红 等，2006； Maramorosch et al.，1992 ） 。 目 前，全 世 界 已有 500 多 株 昆 虫 细 胞 系 得 以 建 立 （ Lynn，2001 ） ， 100 多种昆 虫 细 胞 被 应 用 于 生 物 学 和 医 学 的 研 究 （ 程东美等，2002 ） ，利 用 昆 虫 细 胞 检 测 化 学 药 物 及 生物活性物质毒力的立体毒力测试体系也逐步发展 起来。从 20 世纪 60 年代开始就有学者进行了昆虫 细胞离体条件下 农 药 的 毒 力 检 测 （ Mitsuhashi et al.， 1970； 杨红等，1996 ） ，Waterhouse （ 1965 ） 首 次 研 究 了 DDT 对 天 蚕 蛾 传 代 细 胞 系 的 影 响； Yoshida （1979） 研究 了 有机合 成 的 杀 虫 剂 对 离 体 细 胞 正 常 呼吸代谢 及 生 物 大 分 子 合 成 的 影 响； Stipanovic 等
表 1 供试细胞系
Tab. 1 The insect cell lines for test
细胞系名称 Cell line name 黑腹果蝇 SL2 Drosophila melanogaster SL2 白纹伊蚊 C6 /36 Aedes albopictus C6 /36 麻蝇 NIH-SaPe-4 Sarcophaga peregrine NIH-SaPe-4
常见产毒真菌的鉴定 标准文本(食品安全国家标准)
食品安全国家标准食品微生物学检验常见产毒真菌的鉴定1 范围本标准规定了食品中常见的产毒真菌的鉴定方法。
本标准适用于曲霉属、青霉属、镰刀菌属及其它菌属中常见产毒菌种的鉴定。
2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：2.1 冰箱：0℃～4℃2.2 恒温培养箱：25℃～28℃。
2.3 显微镜：10倍～100倍。
2.4 目镜测微计。
2.5 物镜测微计。
2.6 无菌接种罩。
2.7 放大镜。
2.8接种勾针。
2.9分离针。
2.10载玻片。
2.11盖玻片：18mm×18mm。
2.12灭菌刀子。
3培养基和试剂3.1 乳酸-苯酚液：见附录A中A.1。
3.2 察氏培养基：见附录A中A.2。
3.3 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基：见附录A中A.3。
3.4 麦芽汁琼脂培养基：见附录A中A.4。
3.5 马铃薯-酵母膏-蔗糖培养基：见附录A中A.5。
3.6 麦芽汁-酵母膏培养基：见附录A中A.6。
3.7 麦芽汁-蛋白胨培养基：见附录A中A.7。
3.8 大米培养基：见附录A中A.8。
3.9 玉米培养基：见附录A中A.9。
3.10 麦麸培养基：见附录A中A.10。
4 检验程序4.1 菌落的观察：为了培养完整的巨大菌落以供观察记录，可将纯培养物点植于平板上。
方法是将平板倒转，向上接种一点或三点，每菌接种两个平板，倒置于25℃～28℃温箱中进行培养。
当刚长出小菌落时，取出一个平皿以无菌操作，用特制不锈钢长柄小刀（小刀3mm×mm，柄长19cm，木制把手7cm）将菌落连同培养基切下1cm×2cm的小块，置菌落一侧，继续培养，于5d～14d进行观察。
此法代替小培养法，可观察子实体着生状态。
4.2 斜面观察：将真菌纯培养物划线接种（曲霉、青霉）或点种（镰刀菌或其它菌）于斜面，培养5d～14d，观察菌落形态，同时还可以将菌种管置显微镜下用低倍镜直接观察孢子的形态和排列。
4.3 制片：取载玻片加乳酸-苯酚液一滴，接种针钩取一小块真菌培养物，置乳酸-苯酚液中，用两支分离针将培养物撕开成小块，切忌涂抹，以免破坏真菌结构。
九种无公害农药对铜绿金龟子和韭菜迟眼蕈蚊的毒力测定
但在 处理后 ７ 毒性显著增加 。 ２ｈ 关键 词 ： 杀虫剂 ； 铜绿金龟子 ； 韭菜迟眼蕈蚊 ； 毒力
中图分类号 ：４２ ３ ｓ８． 文献标识码 ： Ａ 文章 编号 ：０４ ５４２ ｏ ）５ ３ １ ４ １０ —１２ （０ ６０ —０２ —０
Ｄｅｅｍｉａ ｉｎ ｏ ｈ ｏ ｉｉ ｔ９ ｋｎ ｓｓ ｆｔ ｓ ｃｉｉｅ ｏ ｔ ｅｌｒ ａ ｔＡｎ ｍａａ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｔｅｔ ｘｃｔ ｏ ｉ ｄ ａ ｅｙ ｉ ｅ ｔ ｄ ｓｔ ａ ｖ ｅｏ ｏ ／ ｏ ｙ ｎ ｃ ｈ ｃ ｒ ｕｅ ｔ ｏｓ ｈ ｉｋ ｎ ａ ｙ ｉ ｄ ｒ ｈ ｇ ｎ ｔＺ ａ ｇ ｉ ｈ ａ ｏ ａｏ ｙ ｏｐ ｌｎａ Ｍ ｔｃ ｕｓ ｙ ａ ｄ Ｂｒｄ ｓ ｏ ｏ ｉ ａ ａ Ｙａ ｇｅ ｈ ｎ ｔ ｅｌｂ ｒ ｔｒ ａ ｐ ｎ
大小 。结果表 明 ， 蛴螬 的毒力顺序（ 对 药后 ２ ）４５ ４ ：．％高效氯氰菊酯 Ｅ ＞ ８ ｈ Ｃ ４ ％乐斯本 Ｅ ＞ ０ Ｃ ４％辛硫磷 Ｅ ＞ Ｃ ４％灭线磷 Ｅ ＞ ０ ０ Ｃ ９％敌百虫 晶体 ＞ ％锐劲特 Ｓ ＞ ．％菜喜 ｓ 。对韭蛆的毒力顺序（ ５ Ｃ ２５ ｃ 药后 ２ ）４５ ４ｈ ：．％高效 氯氰菊酯 Ｅ ＞ ０ Ｃ ４ ％灭线磷 Ｅ ４ ％辛硫磷 Ｅ ＞ ８ Ｃ＞ ０ Ｃ ４％乐斯本 Ｅ ＞ ．％菜喜 Ｓ ＞ ０ Ｃ ２５ Ｃ ２％天 除 ＞ ．％绿宇。其 ０５ 中对蛴螬 和韭蛆毒性最强 的高效氯氰菊酯 ， 其次是辛硫磷 和乐 斯本。菜喜等 生物农 药的速效 性差 ， 见效慢 ，
Ｃ Ｅ Ｊａ ． ｎ ＨＥ ｈ ｎ ．ｉ，Ｙ ｉｏｐｎ ＨＥ Ｇ Ｘｕ ｓｎ Ｈ Ｎ ｉｎ ｍｉｇ ，Ｃ Ｎ Ｚ ｏ ｇｑ Ｕ Ｘ ａ ．ｉｇ ，Ｚ Ｎ —ｏ ｇ ，Ｃ Ｅ ｉ—ｈ ｎ ＨＡ Ｇ Ｈ Ｎ Ｌｅｚｏ ｇ ，Ｚ Ｎ Ｊｅｆｎ ｕ． ｇ ｅ
中图分类号 ：４２ ３ ｓ８． 文献标识码 ： Ａ 文章 编号 ：０４ ５４２ ｏ ）５ ３ １ ４ １０ —１２ （０ ６０ —０２ —０
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出口食品中主要产毒真菌检验方法
出口食品中主要产毒真菌检验方法出口食品中主要产毒真菌检验方法，是对食品中潜在产毒真菌的检测和识别，是合格食品生产过程检测环节的重要内容。
一般可采用培养瓶试验、生物多态参数技术（Biolog）和PCR方法来确定可能产毒或具有毒力作用的真菌。
（一）、培养瓶试验培养瓶试验是常用的检出真菌的方法，其主要流程是离心悬液、萃取、分离、培养、鉴定等步骤。
离心悬液过程中，可通过调节溶剂的酸碱度，和选择不同抗酒精等不同的培养基，来限制已知或不可知会产毒真菌的生长，以提高检测效果。
然后，在培养瓶中培养、分离和鉴定，以确定试样中是否含有可能产毒的真菌，具体步骤如下：1. 获取培养基：从市场或生产厂家购买中毒食物中主要潜在产毒真菌的培养基，例如常用的培养基有肉汁拉希德（L-R），拉希德汤（LR），Czapek-Dox，以及胡罗木斯（Lec）等。
2. 在培养瓶中培养：将培养基灌入培养瓶，将食品样品加入瓶内，加热无菌房中瓶口，并登记培养基情况，使单菌株剥离和萌发，然后在适当温度和湿度下，培养24-48小时，使菌落萌发后活化，反映真菌情况。
3. 分离筛选：将菌落取下，用清洗液（0.1%乳酸钠乳或胡罗木斯，一般为80%酒精）擦拭瓶内，对每组分离的真菌进行挑选，将记录分离的真菌的菌种和数量。
4. 鉴定：使用生物多态参数技术（Biolog）、分子生物学技术（PCR）或其他鉴定技术，对分离的菌进行检测，记录筛选的菌株具有毒力或不具有毒力的污染物。
（二）、生物多态参数技术（Biolog）生物多态参数技术（Biolog）是利用多孔玻璃片进行检测和辨认真菌类属的一种新技术，它能够通过测定真菌菌株对不同抗原的反应，来评价真菌的毒性和强度。
1. 使用多孔玻璃片：取液体样品，将其倒入多孔玻璃片上，使其落在玻璃片上并完整地充满玻璃片上所有多孔者，形成一个真菌抗原库，然后在质谱仪（Mass spectrometer）上测定。
2. 鉴定：将培养基样品和抗原库混合，发现培养基存在可能产毒真菌，然后根据生物多态参数技术（Biolog）系统，结合多孔玻璃片上生长的抗原，记录在玻璃片上的生长特征，以识别可能存在的真菌类属和活性。
不同杀虫剂对蛴螬的毒力及控制效果研究
动植物研究《西藏科技》2020年3期（总第324期）不同杀虫剂对畸!®的毒力及控制效果研究，李杨1次仁央拉1雷雪萍1刘和春1王文峰加（1.西藏自治区农牧科学院农业研究所；2.西藏自治区农牧科学院，西藏拉萨850009）摘要:娇蜡是主要地下害虫之一，有效控制其为害，本研究在蟒蜡发生严重的地块，藏青13为试验材料，研究了5种杀虫剂对蟒蜡的防治效果。
综合实验结果，苏云金杆菌可有效地防治娇蜡，且持效期长。
关键词：杀虫剂«防治效果蟒!®是鞘翅目（Coleoptera）金龟甲科（Scar-abaeo诚ie）幼虫的总称，是地下害虫种类最多、分布最广，为害最严重的一个类群[1-2]o我国已记载的駢!I®种类约1800种，其中能对农业、林业和牧草造成危害的大约有110种⑶。
成虫金龟子啃食植株叶片⑷，幼虫脐蜡的危害主要是2,3龄幼虫喜欢啃食新鲜播种的种子、根、块茎以及幼苗,咬断根茎、根系，影响其对水分和养分的吸收,严重的造成植株死亡，且伤口易被病菌侵入,造成植物病害。
据有关部门统计数据,作物地下组织受损害中有80%以上是駢!»造成的，是国内外公认的难防治的土栖性害虫之一为控制其危害，本文选用了5种不同药剂，对娇蜡类地下害虫的防治进行探索,现将结果报道如下。
1材料与方法1.1供试药剂试验药剂5种,分别为1%苦皮藤素颗粒（新乡市东风化工有限责任公司）、绿僵菌可湿性粉剂（河南省鹤壁市百惠生物科技有限公司生产）、苦参碱（恒源伟业生物科技）、苏云金杆菌（湖北康欣农用药业有限公司）,48%毒死婢乳油（美国陶氏益农公司），对照为清水。
1.2供试地点试验在西藏自治区农牧科学院农业研究所网室进行。
1.3试验方法1.3.1室内药剂筛选。
参照张宗炳的方法，将青棵的嫩叶在供试药液中浸10s,取出静置,待叶片垂宜放置而无水下滴时，移入昆虫饲养盒，再向盒内接入供试的蟒赠10头。
每个处理3次重复。
粮食中三种主要真菌毒素常用定量检测技术概述
分 析 与 检 测ｌ
真菌 毒 素是 真 菌产 生 的次 生代 谢 肾、肝、肺 和神 经 系统 有一 定 的毒害 要 求不 一 ，疫 学方 法特 异性 高 ，对 样 产物 ， 是粮食产 品的主要污染源之～ ， 作 用 ，可 以使 神 经系 统亢奋 ，造 成很 品净化 程度 要求 相对较 低 ，一 般不 需 （ Ｔ Ｌ Ｃ）以及 高效液相 色谱法 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ） 对样 品净化 程度 要求较 高 ，所 得提 取
至关 重 要。黄 曲 霉毒素 Ｂ （ Ａ Ｆ Ｂ Ｉ）、 是污 染最 为普 遍 的三种 毒 素 ，在 国家
刺激 、 拒食 、 神经紊乱、 流 产和 死 胎 等 ， 玉米赤霉烯酮 （ Ｚ Ｅ Ｎ） 、 呕 吐毒 素 （ Ｄ Ｏ Ｎ） 欧盟分类标准为三级致癌物。
２ 三 种 真 菌 毒 素 的 定 量 检 测 液 分离 、 固相 萃取 和免 疫亲 合柱 等。 般 玉米赤霉烯 酮 （ Ｚ Ｅ Ｎ） 和 呕 吐 毒 素 标准 Ｇ Ｂ ２ ７ ６ １ — ２ ０ １ ７中对各类 粮食 中的 方法
样 品经提 取、 浓缩和 薄 层分离 后 ，在 涡旋 和 离心 （ 或 过滤 ）等 前处 理 后 ， 紫外光 （ 波长 ３ ６ ５ ｎ ｍ） 下 产生蓝 紫色 试 样上 清液 或标 准 品中 的真 菌 毒素 与
验 方法会越 来越 多 。 越来越简便 。
参考 文献
【 １ ］ 吕波 ， 孙 国君 ， 王兵兵 ， 等 ． 呕
检 出 限为 ３ ０ ０ ｇ ／ ｋ ｇ 。因 Ｔ Ｌ Ｃ法 优 点 范 围 内呈 反 比。酶 联免 疫法 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 是 适 合 于 没 有 经 过 专 门培 训Ｉ 的 人 员 操 具 有 灵敏、操 作 简便 、样 品前处 理 无 【 ２ ］ 林 怡 ， 黎 乐 群 ，彭 涛 ． 黄 曲
真菌 毒 素是 真 菌产 生 的次 生代 谢 肾、肝、肺 和神 经 系统 有一 定 的毒害 要 求不 一 ，疫 学方 法特 异性 高 ，对 样 产物 ， 是粮食产 品的主要污染源之～ ， 作 用 ，可 以使 神 经系 统亢奋 ，造 成很 品净化 程度 要求 相对较 低 ，一 般不 需 （ Ｔ Ｌ Ｃ）以及 高效液相 色谱法 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ） 对样 品净化 程度 要求较 高 ，所 得提 取
至关 重 要。黄 曲 霉毒素 Ｂ （ Ａ Ｆ Ｂ Ｉ）、 是污 染最 为普 遍 的三种 毒 素 ，在 国家
刺激 、 拒食 、 神经紊乱、 流 产和 死 胎 等 ， 玉米赤霉烯酮 （ Ｚ Ｅ Ｎ） 、 呕 吐毒 素 （ Ｄ Ｏ Ｎ） 欧盟分类标准为三级致癌物。
２ 三 种 真 菌 毒 素 的 定 量 检 测 液 分离 、 固相 萃取 和免 疫亲 合柱 等。 般 玉米赤霉烯 酮 （ Ｚ Ｅ Ｎ） 和 呕 吐 毒 素 标准 Ｇ Ｂ ２ ７ ６ １ — ２ ０ １ ７中对各类 粮食 中的 方法
样 品经提 取、 浓缩和 薄 层分离 后 ，在 涡旋 和 离心 （ 或 过滤 ）等 前处 理 后 ， 紫外光 （ 波长 ３ ６ ５ ｎ ｍ） 下 产生蓝 紫色 试 样上 清液 或标 准 品中 的真 菌 毒素 与
验 方法会越 来越 多 。 越来越简便 。
参考 文献
【 １ ］ 吕波 ， 孙 国君 ， 王兵兵 ， 等 ． 呕
检 出 限为 ３ ０ ０ ｇ ／ ｋ ｇ 。因 Ｔ Ｌ Ｃ法 优 点 范 围 内呈 反 比。酶 联免 疫法 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 是 适 合 于 没 有 经 过 专 门培 训Ｉ 的 人 员 操 具 有 灵敏、操 作 简便 、样 品前处 理 无 【 ２ ］ 林 怡 ， 黎 乐 群 ，彭 涛 ． 黄 曲
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不同真菌菌株对蛴螬的毒力测定
作者：章骏
来源：《安徽农学通报》2014年第13期
摘要：选择几种真菌的不同菌株及其混合物对蛴螬进行毒力测定。
结果表明，绿僵菌Ma1较其它菌株校正累积死亡率最高，致死速度最快，平均累计校正死亡率达62.50%，LT50为10.31d，在花生蛴螬的防治上具有较大的应用价值。
关键词：绿僵菌；蛴螬；防治；毒力测定
中图分类号S476.1文献标识码A文章编号1007-7731（2014）13-29-02
蛴螬（Anmala cuprea）是鞘翅目金龟甲幼虫的总称，是我国地下害虫分布最广、为害最重的一类害虫，主要为害花生、大豆、麦类、高粱、玉米、甘蔗、棉花等多种大田作物，以及一些中药材等，其中以为害花生较为严重，严重时造成作物颗粒无收［1］。
长期以来，主要依赖化学农药防治该害虫，易使其产生抗性，并且造成土壤中农药残留，导致作物产品农药含量超标，使花生有异味，影响到出口创汇及人体健康。
为此，笔者选用几种真菌的不同菌株及其混合物，分别对蛴螬进行毒力测定，以期筛选出对蛴螬具有高毒力的菌株。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试虫源蛴螬幼虫是5月上旬从安徽省庐江县采集的越冬幼虫，室内饲养数天，挑选大小均匀且健康的个体备用。
1.1.2 供试菌种菌种为安徽农业大学植保学院生防研究室储存菌种，编号分别为Ma1、Bbr84、Ma2、Ma3、Ma4。
1.2 试验方法
1.2.1 菌剂的制备培养采用萨氏葡萄糖酵母浸膏培养基（SDAY）、蛋白胨马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PPDA）和察氏琼脂培养基培养（Czapek），置于光照培养箱内26℃下恒温培养15d后，放入冰箱低温（4℃）保存备用。
用无菌的塑料药匙将真菌的分生孢子粉刮到一个干净的盛有10mL0.05%Tween-80润湿剂的三角瓶中，在涡旋振荡器上充分振荡（10min左右），然后按比例稀释，经血球计数板测定每mL孢子数，通过计算把各菌的孢子悬浮液浓度配成基本一致，即1.0×108孢子/mL，以测定致死中时（LT50），比较各菌种间的毒力［2］。
1.2.2 测定方法用毛笔将蛴螬3龄幼虫挑起，在盛有孢子悬浮液的培养皿中浸蘸一下（约3～5s），而后迅速取出，置于洁净滤纸上，任其爬行，片刻后，移入洁净的小指型管
（1cm×8cm）中单头饲养。
为了避免相互残杀，每管放一小块人工饲料。
养虫器皿事先在1%甲醛液中浸泡片刻，取出后凉干备用。
不同处理用不同毛笔，避免不同菌株之间相互干扰，影响试验结果。
以0.05%吐温水为对照，共设7个处理，重复3次，每处理试虫数30头。
试验每天定时观察一次直至化蛹，每次记下死虫数，并及时将虫尸移出。
虫尸在26℃保湿培养（相对湿度大于90%）观察是否有僵虫出现，统计僵虫率。
1.2.3 数据处理计算公式如下：每mL孢子总量=平均每小格孢子数×4×106×稀释倍数；累积死亡率（%）=（处理的总死虫数×100）/处理的总虫数；累积校正死亡率（%）=（处理组累积死亡率-对照组累积死亡率）/（1-对照组累积死亡率）；僵虫率（%）=僵虫数×100/总死亡虫数。
以LT50、校正死亡率及僵虫率作为分析毒力的指标，将观察时间分为间隔相等的时间区段，分别统计整理每个时间区段内的累积死亡率，并校正，以时间（d）的对数值为X，死亡率的机率值为Y，采用机率值分析法（Doberski，J.W.1981）算出毒力回归方程和致死中时（LT50）。
2 结果与分析
2.1 不同真菌菌株对蛴螬的致病效果由表1可知，几种真菌的不同菌株及其混合物对蛴螬均有不同程度的致病性，但致死率表现出明显差异。
Ma1、Bbr84、Bb84r+Ma4、Ma3、Ma2及Bbr84+Ma3校正累积死亡率分别为62.50%、50.00%、4
3.75%、43.75%、37.50%和2
4.98%，致死中时LT50分别为10.31d、1
5.06d、15.30d、15.65d、15.40d和27.56d。
其中绿僵菌Ma1校正累积死亡率最高，达到了62.50%，而其它处理都≤50.00%，差异极显著；同时绿僵菌Ma1致死中时LT50最小，为10.31d，而其它处理都＞15d，由此可见绿僵菌Ma1的致病力最强。
表1 不同真菌对蛴螬3龄幼虫的致病效果及僵虫率
[处理\&累积死亡率（%）\&校正累计
死亡率（%）\&差异显著性\&回归方程\&相关系数
r\& 致死中时
LT50（d）\&僵虫率
（%）\&0.05\&0.01\&Ma1\&66.67\&62.50\&a\&A\&Y=7.912 35-2.874 40x\&0.993
81\&10.31\&66.64\&Bbr84\&55.56\&50.00\&b\&B\&Y=8.167 74-2.689 32x\&0.985
38\&15.06\&56.23\&Bbr84+Ma4\&50.00\&43.75\&c\&BC\&Y=8.078 05-2.591 80x\&0.967
44\&15.30\&58.78\&Ma3\&50.00\&43.75\&c\&BC\&Y=7.737 21-2.291 35x\&0.988
16\&15.65\&46.64\&Ma2\&44.44\&37.50\&d\&C\&Y=8.323 49-2.798 60x\&0.927
23\&15.40\&52.12\&Bbr84+Ma3\&33.33\&24.98\&e\&D\&Y=7.538 93-1.762 76x\&0.984
51\&27.56\&49.87\&ck\&11.11\&\&\&\&\&\&\&\&]
2.2 不同真菌的僵虫率在浓度为1.0×108孢子/mL时，各处理死亡幼虫24h后均出现僵虫，Ma1、Bbr84、Bb84r+Ma4、Ma3、Ma2及Bbr84+Ma3僵虫率分别为66.64%、56.23%、58.78%、46.64%、52.12%和49.87%，其中Ma1僵虫率最高，达到66.64%，而其它处理的僵虫率均在60%以下（表1）。
说明各供试真菌菌株都能侵染致死蛴螬3龄幼虫，而Ma1表现出对蛴螬明显的高毒力。
3 小结与讨论
化学农药的长期施用造成大面积土壤和农作物污染，并对人畜产生危害，而生物防治以其独特的优越性，在世界范围得以迅速应用［3-4］。
为了探索蛴螬的无公害防治措施，开发利用昆虫病原真菌资源，本文选用几种真菌的不同菌株及其混合物对蛴螬进行毒力测定，筛选出对蛴螬高毒力绿僵菌Ma1菌株，其致死率和致死速度均明显高于其它处理，在花生蛴螬的防治上具有较大的应用价值。
本次筛选的菌株及其混合物的数量较少，建议扩大菌株筛选范围。
同时毒力测定是在室内人为控制的条件下进行的，而田间防效则受到温湿度等各种环境因子的影响，因此要运用于实际生产中，仍需要进一步研究。
参考文献
［1］魏鸿钧，张子良.中国地下害虫［M］.上海：上海科技出版社，1989.
［2］浦蛰龙，李增智.昆虫真菌学［M］.合肥：安徽科技出版社，1996.
［3］张克勤.我国杀虫真菌的研究现状与展望［J］.植物保护，1996，22（1）：43-46.
［4］谢明杰，宋玉媛，曹文伟，等.微生物杀虫剂应用的研究进展［J］.辽宁师范大学学报，1998，21（4）：226-229.（责编：张宏民）。