手术及化疗对乳癌患者外周血淋巴细胞端粒酶活性的影响

趔涪润鸯华大学预士研究生学位论文Ｎａｔｉｖｅ．ＰＡＧＥＥＬＩＳＡ董【ｂ谨ｂ－ＴＳＤＮｐＨＲｐｔ鹾Ｂ△Ａ主要缩略英文索弓ｌＮａｔｉｖｅ－ｐｏｌｙａｅｒｙｌｍ—ｎｉｄｅｇｅｌｃｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｃｓｉｓ非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳Ｅｎｚｙｍｅ－Ｉｋｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｃｎｔａｓｓａｙ酶联免疫吸附试验Ｔｅｌｏｍｅｒｉｃｒｅｐｅａｔａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｌｏｃｏｌ端粒蓬复净剽扩壤ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｓｕｂｓｔｒａｔｅ生物素标记的端粒酶作用底物ｄｉｎｉｌｍｐｈｅｎｙｌ二硝基酚ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ辣根过氧纯物酶ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｉｄｉｎｅ鞠甲联苯胺ｔｈｅｎｅｔｉｎｃｒｅａｓｅｏｆａｂｓｏｒｂａｎｃｅｆｏｒｔｈｅｓａｍｐｌｅ样品在４５０ｎｍ和６９０ｈｍ的吸光度之差对其热失活样品在同样波长吸光度的净增值刘洁澜南肇大学硕士研究生学馥论文手术和化疗对乳瘸患者外周血淋巴细胞端粒酶活性的影响硕士研究生：刘洁润导师；李汉贤教授中文摘要目的研究乳瘸根治术和术后辅助化疗对乳腺瘸患者外周血淋融细胞端粒酶活性表达的影响。

方法利用端粒重复序列扩增技术结合ａ＃变性聚丙烯醮黢凝胶电泳（Ｎａｔｉｖｅ～ＰＡＧＥ）定性和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）定爨两种方法检测乳腺癌患磐努躅敷游邑缨稳端粒醚活往。

凌３６铡端粒酶瓣蛙霉ｋ艨痉患者审，每一位患者均于术前、术盾８一１０天（即化疗前）及化疗第１、２周期四个不Ｉ硼对相备取血标本一次，用ＥＬＩＳＡ检铡簿一个徉麓的暖巍发（ＡＡ），将同一簿稻稀鹣的蔽毙度（鑫Ａ）分为～组，用方差分析法进行４组样鼎ＡＡ均数间的比较。

结果ＥＬＩＳＡ定量检测结果：样品的吸光度（ＡＡ），术前为０。

３５０－－＋０．０２６，丽术后８一ｌＯ天（即化疗翦＞为０．２５１±０。

０２３，两者相比，差异有显馨性（ｐ＜Ｏ．００１）；化疗第１周期后样品的吸光度（ＡＡ）为０．１９７士Ｏ．０１６，与术后８－１０天的△Ａ相比，毒绫诗学意义（ｐ＜Ｏ。

００１）；纯疗第２揭蘩嚣襻菇豹ＡＡ必０．１７４－＋０．０１３，与化疗第ｌ周期后的Ａｈ相比，差异有显藩性（ｐ＜０．００１）。

手术前后样品的吸光度（矗Ａ）降低禳发为０。

１００＿＋０。

００７，纯疗蓠后ＡＡ降低耩度先０．０５２－＋０。

００５，两者相比肖统计学意义（ｐ＜０．００１）。

Ｎａｔｉｖｅ—ＰＡＧＥ定性稔测结果：术前备样品凝胶电泳染色后有明显间隔６ｂｐ条豢；术爝位疗懿各样品农电泳图主静条带较拳前减弱；他疗后各样瑟在嗽泳圈上条带基本消失。

结论ｌ、乳癌根治手术是降低乳瘸患者外周血淋殴细胞端粒酶活憔的主要因素。

２、术后辅劲纯疗毹一定狡魔降低莪癌患者外周矗淋巴缩施端粒酶活性，餐支《洁澜南肇大学礤士辫究生学靛论文较手术浚疗静终建弱。

３、外周血端粒酶活性可能作为乳腺癌判断疗效、预后、转移、复发和随访的指标。

［关键词］乳腺癌乳癌根治术术艏辅助化疗外周血淋巴细胞端粒酶涟牲剃浩澜南牮大学礤圭研究生学德论文ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｔｅｌｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｐａｔｉｅｎｔｓｂｙｒａｄｉｃａｌｍａｓｔｅｃｔｏｍｙａｎｄｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅａｄｊｕｖａｎｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒａｄｉｃａｌｍａｓｔｅｃｔｏｍｙａｎｄｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅａｄｊｕｖａｎｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｏｎｔｅｌｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｅｌｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｔｈｒｏｕｇｈｔｅｌｏｍｅｒｉｃｒｅｐｅａｔａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌ（ＴＲＡＰ）ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｎ—ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＮａｔｉｖｅ—ＰＡＧＥｓｉｌｖｅｒｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄｔｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＥＬＩＳＡ。

３６ｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｐｏｓｉｔｉｖｅ－ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄ．Ｂｌｏｏｄｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍａｌｌｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ—ｐｏｓｉｔｉｖｅｐａｔｉｅｎｔｓｉｎｆｏｕｒｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅｔｉｍｅｓ：ｐｒｅｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅ８ｔｈｔｏｌＯｔｈｄａｙａｆｔｅｒｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｆｉｒｓｔｃｉｒｃｌｅａｎｄｔｈｅｓｅｃｏｎｄｃｉｒｃｌｅｏｆｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｔｌｙ，４ｇｒｏｕｐｓｆｏｒｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｆｏｒｍｅｄ，ｎａｍｅｌｙｐｒｅｏｐｅｒａｔｉｖｅｇｒｏｕｐ，ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｇｒｏｕｐａｎｄｔｗｏｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅａｄｊｕｖａｎｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅｎｅｔｉｎｃｒｅａｓｅｏｆａｂｓｏｒｂａｎｃｅｆｏｒｔｈｅｓａｍｐｌｅ（ＡＡ）ｗｅｒｅａｓｓｓａｙｅｄｂｙＥＬＩＳＡ．Ｔｈｅｍｕｌｔｉｐｌｅｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｍｅａｎｓｗｅｒｅｃｏｍｐｌｅｔｅｄｂｙａｎａｌｙｓｉｓｏｆｖａｒｉａｎｃｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ１．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＥＬＩＳＡ：△Ａｏｆ４ｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅ０．３５０＿＋０．０２６．０．２５１±Ｏ。

０２３，０．１９７＿＋０。

０１６ａｎｄ０。

１７４＿＋＿０．０１３ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ。

Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｐｒｅｏｐｅｒａｔｉｖｅｇｒｏｕｐａｎｄｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｇｒｏｕｐ（ｐ＜Ｏ．００１），ｏｒｂｅｔｗｅｅｎｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅａｄｊｕｖａｎｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｇｒｏｕｐａｎｄｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｇｒｏｕｐ（ｐ＜Ｏ．００１），ｏｒｂｅｔｗｅｅｎｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｇｒｏｕｐｓ（Ｄ＜Ｏ。

００１）ｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄ．ＴｈｅｄｅｃｒｅａｓｅｏｆＡＡｆｏｒｐｒｅｏｐｅｒａｔｉｖｅａｎｄｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ刘洁湖南肇大学碗尘耩究生学健谂文ｗａｓ０．１００±０．００７，ｂｕｔｔｈｅｄｅｃｒｅａｓｅｏｆＡＡｂｅｔｗｅｅｎｐｒｅｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙａｎｄｐｏｓｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｗａｓ０．０５２－－＋０．００５，ｔｈｅｒｅｗａｓａｌｓｏｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｍ（ｐ＜０．００１）．２．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＮａｔｉｖｅ—ＰＡＧＥ：Ｉｎｓａｍｐｌｅｓｏｆｐｒｅｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ｌａｄｄｅｒｓｏｆｐｒｏｄｕｃｔｓｗｉｔｈ６ｂｐｉｎｃｒｅａｓｅｍｅｎｔｓｃｏｕｌｄｂｅｖｉｓｕａｌｉｚｅｄｉｎＰＡＧＥｓｉｌｖｅｒｓｔａｉｎｉｎｇ；ｂｕｔｂｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｉｎｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｏｆｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｏｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｏｆｐｒｅｏｐｅｒａｔｉｏｎ：Ｉｎｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｏｆｐ０８ｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，ｌａｄｄｅｒｓｏｆｐｒｏｄｕｃｔｓｗｅｒｅｄｉｓａｐｐｅａｒｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｌ。

Ｔｈｅｒａｄｉｃａｌｍａｓｔｅｃｔｏｍｙｉｓａｍａｊｏｒｆａｃｔｏｒｉｎｒｅｄｕｃｉｎｇｔｈｅｔｅｌｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ．２．Ｔｈｅｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅａｄｊｕｖａｎｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｃａｎｒｅｄｕｃｅｔｈｅｔｅｌｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｔｏｓｏｍｅｅｘｔｅｎｔｓ，ｂｕｔｉｓｆａｒｗｅａｋｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅｒａｄｉｃａｌｍａｓｔｅｃｔｏｍｙｉｎｉｎｔｅｎｓｉｔｙ．３。

Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｅｔｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｏｆｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｉｎｂｒｅａｓｔｔｕｍｏｒｐａｔｉｅｎｔｓｍｉｇｈｔｂｅａｖａｌｕａｂｌｅｐａｒａｍｅｔｅｒｆｏｒａｓｓｅｓｓｉｎｇｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ，ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐａｎｄｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅｏｆｃａｎｃｅｒ。

［ＫｅｙＷｏｒｄｓ】ＰｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅａｄｊｕｖａｎｔＴｅｌｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙＪｉｅｒｕｎＬｉｕ（ｍａｊｏｒｉｎｏｎｃｏｔｏｇｙ）ＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙｐｒｏｆｅｓｓｏｒＨａｎｘｉａｎＬｉＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮａｎＨｕａｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙＨｅｎｇＹａｎｇ，ＨｕＮａｎｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ４２１００１ＢｒｅａｓｔＣａｎｃｅｒ；Ｒａｄｉｃａｌｍａｓｔｅｃｔｏｍｙｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ；Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｏｆｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄ莉洁濑南牮大学硕士研究生学位论文前言端牧酶是ＲＮＡ依赖的一神特殊的ＤＮＡ多聚簿，它与细胞的增生、分化和癌变有着极为密切的关系，其机制涉及衰老和细胞永生化“１。

在缺乏端粒酶活性的婕况下，正鬻体继藏端粒在复制孛逐激缀短，京这秘援德性熬“蠢丝分裂镀”魏作用下，细胞开始走向衰老，但有一些缀织细胞由于癌熬因、抑瘸基因ｐ５３和Ｒｂ貔突交，端粒酶被激活嚣澎成永生铑缀熬。

瓣瘸菠是壶遮攘多数绥藤夷爨、繁锈而形成的癌细胞群落。

可见端粒酶的激灞是肿瘸形成的强大驱动力。

端粒酶对胂瘤的诊断有极洚重要的意义，瞬前资料显示，通过高灵敏度的ＰＣＲ—ＴＲＡＰ方法梭测，端糠酶几乎在各种人类恶性肿瘤中均有不融程度的发达，总的表达率在８５％左右，它可能怒目前最为广谱的肿瘤分予标记物，端粒酶有可能成为某魑瑟性瓣瘸诊断、然选懿掭恚物。

乳腺癌是人类常见的恶性肿瘤，端敉酶检测技术的不断提高对乳癌的早期诊叛极必蘩要，鹫肉终学者磷究发凌，无论楚在巍稼耱块缀织还是箕乡｝羯斑洛巴绥胞中，端粒酶均有高表达（８５铲９０％）。

随藩生物技术的逐猛发展，警今肿瘤临床的牮期诊断、鉴别诊断、疗效观察及预后般测越来越受益于分子标志物的发现及其梭测方法学的完善。

鉴予手术切除肿瘤标本的分子生物学检测存在一定的局限俄（如标本来源的限制、无法连续妊测及髓访追综等），故瓣癌愚蠢撩蹋巍矮强瓣瘸标恚物（热藜、蛋囊、ＤＮＡ等）敷相关抗原的分子生物学检测现芷以其日益明显的优点逐渐被人们所重视。

最近汪谈莰爨舞溺魏锤舔耱瘩标志耱及稳美抗舔等懿分子稔溅有哥辘是本｛鼗纪瓣瘦分子诊断研究的热点之一。