人试剂盒说明书,人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA检测试剂盒

2022年修订第一版（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!）产品货号：E-EL-H0149c产品规格：96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

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Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中IL-1β浓度。

抗pcna抗体弱阳性抗pcna抗体也叫做增殖细胞核抗原，这种检查的方法是比较多的，pcna属于一种蛋白质，它是在细胞核内进行合成的，并且存在于细胞核里面，是DNA的辅助的一种蛋白，近些年来对于pcna的研究是比较热的，主要是因为在肿瘤方面，毕竟现在肿瘤患者越来越多，对于这种研究有助于患者早期发现。

★特点PCNA是一种分子量为36KD的蛋白质，在细胞核内合成，并存在于细胞核内，为DNA聚合酶δ的辅助蛋白。

在细胞核内存在可溶性与不溶性两种PCNA，可溶性PCNA在细胞周期各期中均有表达，其量在DNA合成过程中不发生明显变化，易被去污剂提取、甲醇破坏；不溶性PCNA较稳定，不易被去污剂洗脱、甲醇破坏，这种PCNA在G0～G1期细胞中无明显表达，G1晚期，其表达大幅度增加，S期达到高峰，G2～M期明显下降，其量的变化与DNA合成一致，检测其在细胞中的表达，可作为评价细胞增殖状态的一个指标[1,2,4]。

★肿瘤中PCNA的研究肿瘤细胞具有旺盛的增殖活性，而PCNA可作为评价细胞增殖状态的指标。

因此，国内外在许多肿瘤中进行了PCNA的研究，涉及PCNA与肿瘤发生发展[5,6]、分级[1,7～10]、分期[1,10]、放疗敏感性[11,12]、预后[1,7,8,10,13～20]、复发和转移[1,21]、死亡原因[20]、肿瘤标志物[18,22]等各个方面的相关性，得出了许多结论，但在某些方面因作者和所研究肿瘤的不同，还存在一些争议，即使尚没有争议的结论，也是从一种或几种肿瘤中得出的，这些结论是否适用于所有肿瘤，仍有待进一步研究。

肺癌中PCNA的研究PCNA在肺癌中的研究也较多，许多作者致力于这方面的探讨，期望找到有意义、有价值的结果，但到现在为止，PCNA在肺癌中研究所得出的一些结果也同样存在争论。

常用抗体的应用范围及选用在临床活检工作中，对于各种肿瘤的正确判断，历来是外科病理学的核心问题。

因它关系到患者的治疗和预后的问题。

在免疫组化技术没开展以前，主要靠HE，特殊染色和组织化学来进行鉴别和诊断各种肿瘤，这些在当时虽然解决了不少的问题，但是对于较为复杂，较为多型性的肿瘤，就不能对其起源及所含的成分作出正确的判断。

随着免疫组化工作的开展，给许多以往有待于解释原因的病理诊断上带来了福音。

许多以往无法解释原因的病例，经现今免疫组化染色技术的处理后，能够对其起源，相关的抗原或抗体成份给予显示出来，为肿瘤的诊断提断了形态学的依据。

虽然如此，对于一些较为复杂的抗原，就要根据具体情况作具体分析。

在生物界里面某些细胞仅具有一个抗原的决定簇，这是极少见的，而常见的是具有数百个乃至数千个的抗原决定簇。

数量之多但又不是千篇一律，并非都在细胞的表面表达出来，加上细胞的排列有高有矮，有长有短，切片时有的被切到细胞膜，有的被拦腰斩断，因此在一张切片上看到的同一种抗原的表达也不一致，有的在细胞核，有的在细胞膜，也有的在细胞浆，这种现象是由于切片的原因所致。

但是，抗原的表达，在原来的表达上就有核、浆、膜之分。

有的抗原可在一个部位表达，有的抗原则可在两个部位表达，例如PCNA，它可以在细胞核表达，也可在细胞浆表达。

有的抗原，可表现为双向表达，如上皮(样)肿瘤间皮肿瘤和滑膜内瘤等，用角蛋白标记时，可有阳性表达，用波形蛋白标记时，也可有阳性表达。

对于上述的许多现象，在观察检测时，就要特别地小心，不断地积累经验，以便于更好地鉴别各种抗原的所在部位。

某些抗原不是在任何时候能表达出来的它们需要一定的时间和条件。

有人根据肿瘤细胞增生的能力将其分为三个阶段：1.进入细胞周期的增殖细胞，这包括G1、G2及M期的细胞。

2.暂时未进入细胞周期，但在某特定的时期和条件下，使其开始增殖的细胞(GO期)。

3.静止的永不再进入增殖周期的细胞，这些细胞己分化成熟，根据新陈代谢的规律，它们逐渐地进行消之阶段。

抗pcna抗体弱阳性
文章导读
抗pcna抗体也叫做增殖细胞核抗原，这种检查的方法是比较多的，pcna属于一种蛋白质，它是在细胞核内进行合成的，并且存在于细胞核里面，是DNA的辅助的一种蛋白，近些年来对于pcna的研究是比较热的，主要是因为在肿瘤方面，毕竟现在肿瘤患者越来越多，对于这种研究有助于患者早期发现。

特点 PCNA是一种分子量为36KD的蛋白质，在细胞核内合成，并存在于细胞核内，为DNA聚合酶δ的辅助蛋白。

在细胞核内存在可溶性与不溶性两种PCNA，可溶性PCNA在细胞周期各期中均有表达，其量在DNA合成过程中不发生明显变化，易被去污剂提取、甲醇破坏；
不溶性PCNA较稳定，不易被去污剂洗脱、甲醇破坏，这种PCNA在G0～G1期细胞中无明显表达，G1晚期，其表达大幅度增加，S期达到高峰，G2～M期明显下降，其量的变化与DNA合成一致，检测其在细胞中的表达，可作为评价细胞增殖状态的一个指标124。

肿瘤中PCNA的研究肿瘤细胞具有旺盛的增殖活性，而PCNA可作为评价细胞增殖状态的指标。

因此，国内外在许多肿瘤中进行了PCNA的研究，涉及PCNA与肿瘤发生发展56、分级17～10、分期110、放疗敏感性1112、预后1781013～20、复发和转移121、死亡原因20、肿瘤标志物1822等各个方面的相关性，得出了许多结论，但在某些方面因作者和所研究肿瘤的不同，还存在一些争议，即使尚没有争议的结论，也是从一种或几种肿瘤中得出的，这些结论是否适用于所有肿瘤，仍有待进一步研究。

肺癌中PCNA的研究
PCNA在肺癌中的研究也较多，许多作者致力于这方面的探讨，期望找到有意义、有价值的结果，但到现在为止，PCNA在肺癌中研究所得出的一些结果也同样存在争论。

产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒（Human VEGF ELISA KIT）产品货号：H6139S, H6139M, H6139L产品规格：24T, 48T, 96T产品内容：注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。

储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。

开封后，保存温度详见说明书。

产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。

人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白，基因定位于第6号染色体长臂，由8个外显子和7个内含子交替构成，约14 kb。

由于mRNA剪接方式不同，产生了单链分别含121，145，165，183，189和206个氨基酸的不同变异体。

VEGF 121分子量约为34-46 kDa，是可溶性分泌型蛋白质，以游离状态存在，不能与肝素结合；VEGF 165分子量为45 kDa，30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质，其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。

VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。

VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。

骨骼肌，心肌，肝细胞，成骨细胞，中性粒细胞，巨噬细胞，角质形成细胞，血小板，褐色脂肪组织，CD34+细胞，星形细胞，神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。

血清和血浆样本均可检测到VEGF，由于血小板可释放VEGF，因此血清中VEGF含量较高。

VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。

人P16ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人P16的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人P16水平。

用纯化的人P16抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入P16，再与HRP标记的P16抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的P16呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人P16浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

人外周血循环肿瘤细胞检测试剂盒使用说明书人外周血循环肿瘤细胞检测试剂盒使用说明书（免疫磁捕获、免疫细胞化学鉴定）简介：本试剂盒利用免疫磁球捕获肿瘤病人全血中极少量的循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，CTC），并通过免疫细胞化学鉴定所捕获的细胞，从而实现对CTC的灵敏检测。

其中免疫磁球表面修饰有抗上皮细胞粘附分子（EpCAM）抗体。

免疫细胞化学鉴定是通过异硫氰酸荧光素标记的细胞角蛋白抗体（FITC-anti-CK19）、Alexa Fluor594标记的抗白细胞共同抗原抗体（AF594-anti-CD45）和DAPI对细胞进行免疫荧光染色，DAPI染色阳性，CK19表达阳性，CD45表达阴性（DAPI+/CK19+/CD45-）的细胞被鉴定为CTC。

本试剂盒对目标细胞的捕获效率高达90%，简便快速、特异性强、特别牢靠，可以在3小时内完成对全血中CTC的检测。

试剂盒所含试剂：（10人份/盒）试剂标号组分用途状态规格配制试剂A牛血清白蛋白封闭固体粉末试剂B免疫磁球磁捕获悬液200μL即用型试剂C4%多聚甲醛固定细胞液体5mL即用型试剂D1%Triton X-100通透细胞液体5mL即用型试剂E DAPI细胞染色液体50μL即用型试剂F FITC-anti-CK19细胞染色液体20μL即用型试剂G AF594-anti-CD45细胞染色液体50μL即用型试剂H1×PBS洗涤液体25mL即用型*保存条件：4-8℃用户自备试剂和材料：1.试剂L：通透封闭液于0.05g试剂A中加入0.5mL试剂D溶解待用，或根据此用量比配置所需用量的通透封闭液，标为“试剂L”。

2.试剂M：染色液于0.01g试剂A中加入190μL试剂H溶解后，向其中加5μL的试剂E，2μL 的试剂F，5μL试剂G，或根据此用量比配置所需用量的染色液，标为“试剂M”，4℃避光保存待用。

4.磁力架（推举Dynal公司123-20D）5.移液器（吉尔森）、涡旋仪、超声波清洗器、进口耗材（离心管、枪头等）、恒温水浴摇床、荧光倒置显微镜等。

抗核抗体谱17项表解读抗核抗体谱17项表是一种针对人体内核酸和蛋白质的抗体检测方法，用于诊断自身免疫性疾病。

本文将为您详细解读这个测试项目的每一项指标，帮助您更好地了解自身免疫系统的情况。

1. ANA（抗核抗体）ANA是抗核抗体的缩写，它是一种针对细胞核内的蛋白质和核酸的抗体。

ANA的检测结果通常分为阴性和阳性两种，阳性结果通常会被进一步分为低、中、高三档。

ANA阳性的结果并不一定代表存在自身免疫疾病，但它可以作为自身免疫疾病的初筛指标。

2. ds-DNA（双链DNA抗体）ds-DNA抗体是针对双链DNA的抗体，它通常会在系统性红斑狼疮等自身免疫疾病中产生。

ds-DNA抗体的检测结果通常分为阴性和阳性两种，阳性结果通常会被进一步分为低、中、高三档。

3. SS-A/Ro（Sjogren综合征A/Ro抗体）SS-A/Ro抗体是针对Sjogren综合征A/Ro蛋白质的抗体，它通常会在Sjogren综合征等自身免疫疾病中产生。

SS-A/Ro抗体的检测结果通常分为阴性和阳性两种，阳性结果通常会被进一步分为低、中、高三档。

4. SS-B/La（Sjogren综合征B/La抗体）SS-B/La抗体是针对Sjogren综合征B/La蛋白质的抗体，它通常会在Sjogren综合征等自身免疫疾病中产生。

SS-B/La抗体的检测结果通常分为阴性和阳性两种，阳性结果通常会被进一步分为低、中、高三档。

5. Sm（Smith抗体）Sm抗体是针对Smith抗原的抗体，它通常会在系统性红斑狼疮等自身免疫疾病中产生。

Sm抗体的检测结果通常分为阴性和阳性两种，阳性结果通常会被进一步分为低、中、高三档。

6. RNP（核糖蛋白复合体抗体）RNP抗体是针对核糖蛋白复合体的抗体，它通常会在混合性结缔组织病等自身免疫疾病中产生。

RNP抗体的检测结果通常分为阴性和阳性两种，阳性结果通常会被进一步分为低、中、高三档。

7. Sm/RNP（Smith/RNP抗体）Sm/RNP抗体是针对Smith抗原和核糖蛋白复合体的抗体，它通常会在混合性结缔组织病等自身免疫疾病中产生。

生存素、血管内皮生长因子C、增殖细胞核抗原在胆管癌中的表达及其与侵袭、转移的关系边伟;刘三光;张桂东;石云明【摘要】目的通过检测生存素、血管内皮生长因子C(VEGF-C)和增殖细胞核抗原(PCNA)在胆管癌中的表述水平,探讨其在胆管癌侵袭和转移中的作用机制.方法采用免疫组化过氧化物酶标记链霉卵白素法(SP)对42倒胆管癌组织及20例正常组织中生存索、VEGF-C和PCNA进行检测.采用RT-PCR方法检测42例术中新鲜的胆管癌、17例同个体癌旁胆管黏膜和20例正常胆管组织中生存素、VEGF-C和PCNA的mRNA表达.结果生存素、VEGF-C和PCNA在胆管癌组织中表达的阳性率明显高于正常组织.胆管癌组织、癌旁组织、正常胆管组织中生存素mRNA相对表达量分别为0.624±0.080、0.569±0.044 vs 0.568±0.032(P<0.05);VEGF-C mRNA相对表达量分别为0.693±0.108,0.627±0.066 vs0.611±0.058(P<0.01);PCNA mRNA相对表达量分别为0.630±0.077、0.569±0.041 vs 0.561±0.033(P<0.01);胆管癌组织、癌旁组织、正常胆管组织中生存素mRNA,VEGF-C mRNA和PCNA mRNA相对表达量在3组之间呈下降趋势(P<0.05).结论生存素、VEGF-C、PCNA蛋白和mRNA在胆管癌组织中呈高表达,这些基因和蛋白表迭的改变可能与胆管癌的发生及侵袭、转移等生物学行为密切相关.%Objective To investigate the expression of survivin, vascular endothelial growth factor C(VEGF-C),proliferating cell nuclearantigen(PCNA) in cholangioncarcinoma and its relationship with the invasion and metastasis of cholangioncarcinoma. Methods Immunohistochemical technique SP was used to examine the expression of survivin,VEGF-C,PCNA in 42 cases of cholangioncarcinoma mucosa and 20cases of normal tissues. The mRNA of survivin,VEGF-C, PCNA in 42 cases cholangioncarcinoma mucosa, 17 cases paired adjacent mucosa to carcinoma and 20 cases of normal tissues were studied with RT-PCR. Results The positive expressions of survivin, VEGF-C, PCNA were all higher in cholangioncarcinoma mucosa than those of normal bile duct mucosa. The expression of survivin mRNA in cholangioncarcinoma mucosa,adjacent mucosa to carcinoma and normal bile duct mucosa was respectively 0. 624±0. 080,0. 569 ± 0. 044 vs 0. 568 ± 0. 032 ( P ＜ 0.05 ); the expression of VEGF-C mRNA in cholangioncarcinoma mucosa,adjacent mucosa to carcinoma and normal bile duct mucosa respectively was 0. 693 ± 0. 108,0. 627 ± 0. 066 vs 0. 611±t0.058 (P ＜ 0.01); the expression of PCNA mRNA in cholangioncarcinoma mucosa, adjacent mucosa to carcinoma and normal bile duct mucosa was respectively 0. 630±0. 077,0. 569±0. 041 vs 0. 561 ±0. 033( P ＜0.01);the expression of survivin mRNA, VEGF-C mRNA, PCNA mRNA was higher in cholangioncarcinoma than that of others( P ＜ 0.05 ). Conclusion The expression of survivin, VEGF-C, PCNA protein and their mRNA in cholangioncarcinoma mucosa might have a close relationship with occurrence, invasion and metastasis of cholangioncarcinoma.【期刊名称】《临床荟萃》【年(卷),期】2011(026)009【总页数】6页(P755-759,封3)【关键词】胆管肿瘤;血管内皮生长因子C;生存素;增殖细胞核抗原;免疫组织化学;聚合酶链反应【作者】边伟;刘三光;张桂东;石云明【作者单位】河北医科大学第二医院肝胆外科,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院肝胆外科,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院肝胆外科,河北,石家庄,050000;河北医科大学第二医院肝胆外科,河北,石家庄,050000【正文语种】中文【中图分类】R735.8胆管癌是发病率相对较低的恶性肿瘤,但随着近年来影像学和其他临床检测方法的发展,胆管癌的发病率逐渐升高。

人肿瘤特异性抗原（TSA）分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：含量。

试验原理：TSA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知TSA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将TSA和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中TSA的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制自备材料1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3．不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

避免用手接触，有毒。

实验完成后应立即读取OD值。

8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法1、血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

抗核抗体谱检测试剂盒（磁微粒化学发光法)适用范围：分别用于体外定量测定人血清中抗SSA抗体IgG，抗核糖体P蛋白IgG抗体，抗SSB抗体IgG，抗nRNP/Sm免疫球蛋白G抗体（IgG），抗Sm抗体IgG，抗着丝点抗体IgG，抗Scl-70抗体免疫球蛋白G(IgG)，抗Jo-1抗体IgG，抗双链DNA IgG抗体，抗组蛋白抗体（IgG），抗核小体IgG抗体，抗线粒体2型（M2）抗体IgG，抗PM-Scl 抗体免疫球蛋白G（IgG），抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体IgG的含量。

1. 产品规格及其划分说明2. 性能指标2.1外观试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；磁分离试剂摇匀后为均匀悬浊液，无明显凝集；液体组分应澄清，无沉淀或絮状物；包装标签应清晰，易识别。

2.2准确度：各个项目的回收率均应在85%~115%范围内。

2.3线性2.4空白限2.5重复性各个项目变异系数(CV)应不大于10.0%。

2.6质控品赋值有效性各个项目的质控品测定值，每次测定结果均应在质控品测定值允许范围内。

（抗双链DNA 抗体项目的质控品测定值允许范围为300±30IU/ml、600±60IU/ml，其它项目的质控品测定值允许范围为都是30±9RU/ml、100±20RU/ml）。

2.7批间差各个项目批间变异系数(CV)应不大于15.0%。

2.8稳定性产品在2℃~8℃条件下保存有效期12个月，取失效期产品进行检测，检测结果应满足2.2~2.6项要求。

2.9校准品溯源性根据GB/T21415-2008及有关规定,抗核抗体谱检测试剂盒各个项目校准品溯源到相应的企业工作校准品。

1性能指标
1.1外观
试剂盒各组份应齐全、完整，标签清晰，易识别；液体无渗漏。

1.2准确度
对准确度参考品进行检测，双链DNA（dsDNA）IgG抗体的相对偏差应在±20%范围内。

1.3最低检测限
对检测限参考品进行检测，dsDNA IgG抗体的检测限应不高于10 IU/mL；其它定性指标对应的各指标的L1应为阳性、L2应为阳性或阴性、L3应为阴性。

1.4线性
dsDNA IgG抗体在10~ 600 IU/mL范围内，其线性相关系数（r）r2应不小于0.950。

1.5阴性参考品符合率
对10份阴性参考品进行检测，对应指标的阴性参考品符合率应为100%。

1.6阳性参考品符合率
对12份阳性参考品进行检测，对应指标的阳性参考品符合率应为100%。

1.7重复性
对重复性参考品检测10次，同一指标的变异系数（CV）应不大于15%。

1.8批间差
用三个批号试剂盒检测同一份重复性参考品，批间差应不大于20%。

1.9dsDNA 校准品均匀性
1.9.1瓶内均匀性
校准品的瓶内均匀性（变异系数，CV）应不大于15%。

1.9.2瓶间均匀性
校准品的瓶间均匀性（变异系数，CV）应不大于15%。

仅供科研使用，不得用于临床检验。

人促红细胞生成素（EPO ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称：人促红细胞生成素（EPO ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）英文名称：Human Erythropoietin（EPO ）ELISA KIT【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度。

【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。

在预包被抗人促红细胞生成素（EPO ）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人促红细胞生成素（EPO ）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗人促红细胞生成素（EPO ）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。

加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度正相关。

拟合校准品曲线，可以计算出样本中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度。

【主要组成成分】主要成分校准品检测范围：47-3000pg/ml。

校准品已经通过测试，结果表明HBs抗原阴性，HIV1、HIV2和HCV抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。

需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。

2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************碧云天网站微信公众号网址：Human Angiogenin ELISA Kit产品编号产品名称包装PA023 Human Angiogenin ELISA Kit 96次产品简介：碧云天的Human Angiogenin ELISA Kit (Human Angiogenin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人血管生成素酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Angiogenin的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。

多次重复检测结果表明，最小检出量为4.75pg/ml，与EGF、GM-CSF、MIP-1α、MIP-1β、TGF-α、TGF-β1，小鼠 EGF、GM-CSF、MIP-1α等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。

人血管生成素(Angiogenin, ANG)是一种分子量为14kDa的单链非糖基化蛋白，属于核糖核酸酶中RISBASE家族。

该家族成员不仅具有核糖核酸酶活性，还具有一些特殊的生物学功能。

ANG氨基酸长度为123，包括3个链内二硫键。

人ANG与小鼠ANG具有75%的氨基酸同源性，且具有一定的种间交叉反应。

能够表达ANG的细胞主要有血管内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞、结肠柱状上皮细胞、淋巴细胞和部分肿瘤细胞。

ANG主要参与血管的形成过程。

基底膜的降解是血管新生过程中内皮细胞发生迁移的先决条件。

ANG首先与肌动蛋白结合，随后肌动蛋白-ANG复合物发生裂解，激活组织血纤维蛋白溶酶原。

这一过程产生的血纤维蛋白溶酶会降解基底膜中的层粘连蛋白和纤连蛋白。

小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E08498m检测范围：1.56 U/ml - 100 U/ml最低检测限：0.39 U/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠PCNA，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中PCNA 含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

概述增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）又称Cyclin或DNA聚合酶δ辅助蛋白，是一个36KD的核内蛋白多肽。

1978年Myachi等首次发现系统性红斑狼疮患者血清中的自身抗体（抗核抗体）与细胞核增殖状态有密切关系。

PCNA在细胞增殖周期中的作用在于：与DNA聚合酶δ结合，从而引导完成DNA的复制。

当PCNA缺乏时,在DNA 的后随链的模板上只有短的DNA片段合成；当PCNA与DNA聚合酶δ结合时，前导链被合成被合成，从而使得DNA双链能够协调的合成出来。

因而DNA聚合酶δ和PCNA可能负责合成前导链。

当PCNA的反义寡脱核苷酸作用于细胞时，DNA的合成和细胞的有丝分裂完全被抑制。

从而进一步证实了PCNA在细胞DNA合成和细胞周期进展方面的重要作用。

PCNA的表达在细胞增殖周期中的不同阶段是不同的。

在静止期和G1早期，PCNA几乎不表达；G1晚期PCNA的表达开始增加；在S期达到高峰，随后在G2期和M期降低。

PCNA的发现和其单克隆抗体的建立为研究正常和异常细胞在体内的增殖变化提供了新的研究手段。

上海笃玛生物科技有限公司本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）骨钙素（BGP/OCN ）ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被骨钙素（BGP/OCN ）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的骨钙素（BGP/OCN ）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成上海笃玛生物科技有限公司名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、0.5、1、2、4、8ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

P16与增殖细胞核抗原蛋白在脑胶质瘤中的表达及意义发表时间：2016-06-08T10:22:52.477Z 来源：《健康世界》2016年第4期作者：罗文伟[导读] P16、PCNA蛋白的表达异常可用以判断人脑胶质瘤的生物学行为。

湖南省湘潭市中心医院病理科湖南湘潭 411100摘要：目的探讨P16及增值细胞核抗原（PCNA）在人脑胶质瘤中的表达。

方法用免疫组织化学方法检测114例不同级别中的P16和PCNA蛋白的表达，并与肿瘤不同级别的关系。

结果 P16蛋白表达缺失在Ⅲ级（65.5％）、Ⅳ级（91.3％）脑胶质瘤中显著高于Ⅰ~Ⅱ级的表达缺失（33.3％）（P＜0.01）；PCNA蛋白表达在Ⅲ级（56.3％）、Ⅳ级（84.8％）脑胶质瘤中的表达强度显著高于Ⅰ~Ⅱ级（16.7％）的表达强度（P＜0.01）。

结论 P16、PCNA蛋白的表达异常可用以判断人脑胶质瘤的生物学行为。

关键词：脑胶质瘤；基因，P16基因，增值细胞核抗原P16基因又称多瘤抑制基因，定位于染色体9p21，全长8.5kb，3个外显子（exon）被2个内含子（intron）分隔组成，其3个外显子共同编码分子量为16kDa的核苷酸蛋白（CDK4的抑制蛋白），即P16蛋白。

P16既是细胞周期有效调控者，有时抑制肿瘤细胞生长的关键因子。

增殖细胞核抗原（PCNA）是细胞DNA合成期必不可少的一种因子，能反映细胞增殖活动。

本实验应用免疫组织化学方法，对我院114例脑胶质瘤标本检测P16及PCNA表达情况，以探讨其与肿瘤发生和发展的关系。

1.材料与方法1.1 标本材料为我院2010年1月－2014年1月病理检查存档后的114例脑胶质瘤标本。

按Kernohan[5]分级标准：Ⅰ~Ⅱ级36例，Ⅲ级32例，Ⅳ级46例。

1.2 方法全部标本均经4％中性甲醛固定，石蜡包埋，切片3um厚，脱蜡至水，微波修复抗原，3％双氧水灭活内源性过氧化物酶，正常血清封闭，一抗采用P16单抗，PCNA单克隆抗体，均购自福建迈新公司，采用SP二步法，操作按说明书进行，用PBS代替一抗作阴性对照。