钻石玫瑰组培快繁技术研究

花卉组织培养技术录入时间:2009-5-13 16:39:54 来源：青岛海博生物1、应用价值花卉组织培养，就是分离花卉植物体的一部分，如茎类、茎段、叶、花、幼胚等，在无菌试管，并配合一定的营养、激素、温度、光照等条件，使其产生完整植株。

由于其条件可以严格控制，生长迅速，1-2个月即为一个周期，因此在花卉植物的生产上有重要应用价值。

快速大量繁殖方面：对一些难繁殖的名贵品种花卉及一些短期内大量急需生产的花卉，应用很广。

兰花、菊花、唐菖蒲等花卉利用腋芽增生，短期得到大量植株。

非洲紫罗兰可通过叶片，水仙可通地鳞片，诱导产生不定芽，来达到大量繁殖的目的。

花卉育种方面：百合、鸢尾等许多花卉可以进行远缘杂交，由于生理代谢等方面的原因，常使杂种胚早期败育，因而得不到杂种植物。

而在试管中进行胚培养，可使其顺利生长，得到远缘杂种。

此外还可采用愈伤组织诱变、花粉培养等多种方法，来进行花卉育种。

培育无病毒苗方面：菊花、唐菖蒲、水仙、郁金香、大丽花等一大批花卉靠无性繁殖法繁殖，病毒逐代传递积累，危害日趋严重。

而分离花卉植物0.1-0.5毫米大小的生长点，培养得到的基本上是无病毒苗。

2、花卉组织培养对实验室及设备的要求花卉组织培养是在人工控制的条件下培养花卉。

实验室方面①化学实验室：主要承担配制培养基的任务。

要求具有各种化学药品试剂、各种玻璃器皿、称量天平等。

②洗涤室：主要进行玻璃器皿的洗涤，要求有自来水装置，同时有烘箱，以便洗后烘干。

③灭菌室：主要进行培养基和用具的消毒。

要有高压灭菌锅，具有水源和电源。

④接种室：是花卉材料分离、消毒接种和转移的场所。

要求密闭、清洁、整齐、装有紫外灯，能随时灭菌。

有的也可用接种箱或超净工作台代替。

⑤培养室：是花卉材料培养生长的地方。

要求清洁，保温好，室温均匀一致，并有绝热、防火性能。

设备方面①天平：供配制培养基时称量药品和激素用。

大量元素用普通天平；微量元素和激素用分析天平。

②酸度计：测定培养基的pH用。

玫瑰属蔷薇科蔷薇属植物，不但具有一定的园林观赏价值，而且有较高的经济价值和药用价值。

玫瑰常规以分株、压条、扦插等方法繁殖，繁殖率较低。

现甘肃省庆阳县有一玫瑰生产基地开展研究建立玫瑰的快速繁殖体系，并为玫瑰的工厂化生产和规模化种植提供科学依据。

一、材料与研究方法1.材料：以甘肃省陇东学院校园内栽培的玫瑰为材料。

2.研究方法：以MS或1/2MS为基本培养基，附加不同浓度的6-BA、IAA、IBA、NAA 等，蔗糖3％(为了降低成本，蔗糖均用市售白砂糖代替)，琼脂0.35％，pH5.8，培养温度为25℃，光照时间每天12小时，光照强度约1500 lx。

将启动培养基上腋芽长出的无根苗剪成单芽茎段，转入不定芽诱导培养基上，诱导不定芽产生；不定芽继代周期为5周，增殖培养时将不定芽块切割成小芽块转至增殖培养基中，每100毫升培养瓶中接种3个芽块；生根前将较弱的无效苗转入壮苗培养基中促使苗健壮；生根培养时将高约3厘米左右的芽剪下插入生根培养基，生根苗移栽采用“二步法”。

二、结果与分析1.无性系的建立。

2005年6月从该院校园栽培的植株上取生长健壮的半木质化枝条，依常规方法灭菌处理后，剪成茎尖和带腋芽茎段，接种于无性系建立培养基上。

20天后统计实验结果显示，就无性系建立而言，基本培养基MS比1/2MS效果好，在基本培养基中附加每升0.5毫克的6－BA和每升0.05毫克NAA，有利于愈伤组织的诱导和芽的萌生，愈伤组织诱导率可达76.5％，萌芽率为52.9％，且芽生长健壮。

2.不定芽的诱导。

将无性系幼茎切成单芽茎段，分别接种在不定芽诱导培养基上，结果表明，以MS为基本培养基，附加每升1～3毫克的6－BA和每升0.1～0.5毫克的NAA，均可高频诱导产生不定芽，当6－BA以较高浓度(每升2～3毫克)与NAA配合使用时，芽诱导率均为100％，产生的不定芽数量多，但茎不伸长，均为叶片，长势弱；较低浓度6－BA(每升1毫克)与每升0.1毫克NAA配合使用，虽然不定芽诱导率下降，但芽长势良好。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202110023555.8(22)申请日 2021.01.08(71)申请人 南京农业大学地址 210095 江苏省南京市玄武区卫岗一号(72)发明人 向增旭　张子璇　赵家靖　王将　贾悦　廖月月　(74)专利代理机构 北京高沃律师事务所 11569代理人 张梦泽(51)Int.Cl.A01H 4/00(2006.01)A01G 24/28(2018.01)A01G 24/15(2018.01)A01G 24/25(2018.01)(54)发明名称一种玫瑰红景天组培快繁的诱导增殖培养基及组培快繁的方法(57)摘要本发明提供了一种玫瑰红景天组培快繁的诱导增殖培养基及组培快繁的方法，属于植物组培苗培育技术领域。

本发明提供的玫瑰红景天组培快繁的诱导增殖培养基，以MS培养基为基础培养基，在MS培养基的基础上还包括如下质量体积浓度的组分：1.0～2.0mg/L 6‑BA、0.1～0.2mg/L NAA、30～35g/L蔗糖和6～7g/L琼脂，所述诱导增殖培养基的pH值为5.8～6.0。

本发明提供的诱导增殖培养基可以同时实现不定芽的诱导和增殖，简化了组织培养的步骤，缩短了试管苗成苗周期，节约了成本，同时也避免了频繁转接对组培苗造成的污染，提高了组培苗成活率。

权利要求书1页 说明书7页 附图3页CN 112616674 A 2021.04.09C N 112616674A1.一种玫瑰红景天组培快繁的诱导增殖培养基，其特征在于，所述诱导增殖培养基以MS培养基为基础培养基，在MS培养基的基础上还包括如下质量体积浓度的组分：1.0～2.0mg/L 6‑BA、0.1～0.2mg/L NAA、30～35g/L蔗糖和6～7g/L琼脂，所述诱导增殖培养基的pH值为5.8～6.0。

2.一种玫瑰红景天组培快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将种子置于权利要求1所述的诱导增殖培养基中进行诱导增殖培养，获得玫瑰红景天丛生芽；2)将玫瑰红景天丛生芽接种到生根培养基中进行生根培养，获得玫瑰红景天试管苗；所述生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，在1/2MS培养基的基础上还包括如下质量体积浓度的组分：0.4～0.6mg/L NAA、0.5～1.0g/L活性炭、30～35g/L蔗糖和6～7g/L琼脂，所述生根培养基的pH值为5.8～6.0；3)将获得的玫瑰红景天试管苗进行炼苗、移栽。

花卉组培快繁技术及产业化运用摘要：本文介绍了组培快繁技术的基本程序和发展概况，并结合本中心多年从事花卉种苗工厂化生产情况，概述本项技术的运用现状、关键技术环节，提出在花卉产业化生产中，质量和效率是企业生存和发展的基础和前提，过硬的技术和严格的管理则是提高质量和效率的关键，并就存在问题进行了分析和讨论。

关键词：组培快繁技术，花卉种苗，产业化生产1.组培快繁技术组织培养的依据是植物细胞的全能性，即指具有完整细胞核的植物细胞，都具有形成完整植株所必须的全部遗传信息，从而具备发展成完整植株的能力，在适宜的培养条件下任何一个细胞都可以发育成一个新的个体。

组织培养是在无菌条件下利用人工培养基培养植物的细胞、组织、器官等外植体，使其形成完整小植株的繁殖方法，根、茎、叶、花器官，甚至细胞及原生质体等均可作为组培的材料。

1.1花卉组培概况组培技术自20世纪60年代开始运用于生产以来，已经在农作物的脱毒、快繁、育种等各个方面取得了令人瞩目的成绩，我国20世纪70年嗲以后才开始快繁技术的研究，20世纪80年代以后开始运用。

兰花是最早运用也是最成功花卉，通过原球茎的增殖，一个茎尖外植体一年可以繁殖种苗几十万株，形成了当时的“兰花工业”。

之后此技术开始运用于月季、香石竹、菊花、唐菖蒲、非洲菊等许多花卉作物的种苗生产，此外在脱毒培养、种质保存、新品种培育等方面也开展了较多的工作。

利用组培快繁技术能短时、高效的提供性状一致的优质种源这一特性，在加速选育种过程中获得的性状优良的品种、品系及生产过程中出现的芽变、名、优、新品种及有利用价值的野生花卉的迅速推广及运用上起到了积极的推动作用，各科研院校和企业着力于花卉的组培技术研究及生产开发，形成了一批集科研和开发于一体的大型花卉种苗企业，就云南来讲，有年产200万株以上组培室8-10家。

对培养基、环境因子的影响进行了深入研究，探讨了玻璃化、畸形、黄化、变异的形成机理和防治措施，种苗快繁是组织培养技术在生产中运用最为广泛的一项技术，近几年在花卉种苗工厂化生产中广泛运用，对推动花卉产业的发展起到了积极的促进作用。

大马士革玫瑰组培与快繁技术研究龚维红（苏州农业职业技术学院，江苏苏州215008）摘要：以大马士革玫瑰当年生茎段为材料，开展大马士革玫瑰组培快繁技术的研究。

结果表明：取材时间以5月为佳，取材部位以茎尖下5～8节芽为好，继代培养以MS+ZT0.1mg/L+6-BA0.8mg/L+IBA0.1mg/L为佳，其增殖系数可达3.7；生根培养基以MS+NAA0.2mg/L为好，其生根率为71.6%。

关键词：大马士革玫瑰；组培；快繁中图分类号S685.120.4+3文献标识码A文章编号1007-7731（2022）01-0019-03Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of Rosa DamascenaGONG Weihong（Suzhou Polytechnic Institute of Agriculture,Suzhou215008,China）Abstract:The passage studied on the techniques of fast multiplication of shoot tips for Rosa damascene.The result show:The best time for getting stems is May,the best parts for getting materials are5～8knots under shoot tips.The best medium for germination and propagation is MS+ZT0.1mg/L+6-BA0.8mg/L+IBA0.1mg/L,proliferation rate reached3.7.The best medium for rooting was MS+NAA0.2mg/L,rooting rate was71.6%.Key words:Damascus Rose;Tissue culture;Rapid propagation大马士革玫瑰，蔷薇科，蔷薇属，是提取玫瑰精油和玫瑰香水的主要原料，尤其用其玫瑰花提取的玫瑰精油经济价值极高，素有“液体黄金”之称，在医疗保健、高档香水、美容用品、食品添加剂、烟草等行业中广泛应用。

花卉组织培养种苗快繁技术的论文花卉组织培养种苗快繁技术的论文摘要：花卉产业化生产过程中，生产效率和产品质量是关系企业生存发展的重要基础，本研究就花卉组织培养种苗快繁技术的发展现状及组织培养的步骤展开论述，旨在提高花卉的生产效率和质量。

关键词：花卉; 组织培养; 快繁技术1 花卉组织快繁培养技术植物细胞的全能性是花卉种苗培养的重要依据，具有完整细胞核的动植物细胞都具有完成细胞培养所需的遗传信息，经过组织培养，在适宜的生长环境下任何一个细胞都能被培养成一个新的个体。

所谓的组织培养技术就是在无菌环境下，通过人工培养基培养植物的细胞、组织及器官等使植物细胞形成完整的植株，其中根、茎、叶等植物器官及细胞原生物质都可以作为组织培养的材料[1]。

2 花卉组织培养简介自20世纪60年代以来，组培技术开始用于生产，现在已经在农作物快繁、育种和脱毒等方面得到广泛应用，我国的组培技术是从20世纪80年代得到运用并快速发展的，最早在兰花培育方面取得了显著的成果。

利用组培技术将原球茎进行增殖后，仅一个茎尖外植体1 a内就可以繁殖出数十万的种苗，在当时甚至形成了兰花工业。

之后组培技术不仅在月季、香石竹、菊花、非洲菊等作物中进行种苗生产，还在脱毒培养、种质保存及培养新品种等方面展开了技术研究。

种苗快繁技术是组织培养技术中应用最广泛的技术，其最鲜明的特点就是能够在短时间内优质高效地提供植物种源，因此能对品性优良的植物花卉、新品种和芽变等植物进行品种推广和培育。

各个科研院校和企业都在着手于花卉组织技术研究生产等，推动了该项技术在花卉种苗产业化生产中的应用，在一定程度上对花卉产业的`科学发展起到了极大的促进作用。

3 组织培养的技术步骤3.1 选择材料并消毒开展组织培养技术时要先进行市场调研，在引种、试种及市场调查结果等方面进行考虑，选择品性优良的植物品种，从这些品种中根据花色、健康问题以及病虫害问题进行二次选择，采用优良健康的单株作为组培取材母株，再根据该植物的组织培养特性，选择合适的部位作为外植体[2]。

玫瑰组织培养及再生方法研究玫瑰（rose）是蔷薇科、蔷薇属直立灌木，是世界上重要的观赏花卉之一，亦是提制香精用于各类高级食品、化妆品的重要原料。

常见的有紫玫瑰、红玫瑰、白玫瑰和杂交玫瑰等品种；果实呈球形、卵形或长圆形，红色，萼片宿存。

花期5～9月，果期9～10月[9]。

玫瑰色、香俱佳，形似皎洁美玉，且浓香诱人，素有花中皇后之称。

自古以来玫瑰花就经常作点缀园林，或腌酱、泡露、窨茶、酿酒、入药等加工应用；更有以玫瑰花作妇女装饰、美容和香化用品[6]。

玫瑰有效成分的提取起源于古代，最初是为了获得草药医治各种疾病，原始的做法是用水浸渍鲜花，以提取其中的有用成分。

中国是栽培与应用玫瑰花最早的国家之一。

玫瑰的繁殖方式很多，常以扦插或嫁接繁殖，但是繁殖率低且病毒感染严重，产量和品质的提高受到很大限制，难以满足规模化生产的需要，但是，研究者们利用组织培养技术为玫瑰的繁殖和新品种的选育提供了新的途径，可以满足规模化生产的需要[4]。

主要体现在：[1]首先，帮助玫瑰快速繁殖。

玫瑰有性生殖能力差，大多观赏价值高的品种不形成种子，种子繁殖不现实。

而玫瑰实生苗观赏价值较差，因此生产上必须通过野蔷薇扦插再嫁接进行繁殖。

这样耗时、耗人力、耗财力，成本高，大规模生产困难。

利用组织培养技术可以实现玫瑰优良品种的快速繁殖，并且能保持原有的优良性状不变。

其次，能够获得无病毒植株。

玫瑰在生长过程中，可能会感染上数种病毒或类病毒。

长期营养繁殖，如扦插、嫁接、分株，不仅不能脱毒，反而使病毒积累，严重影响玫瑰的品质，导致玫瑰观赏价值下降，比如花径变小、色泽变淡、产花减少、斑点较多、花形不规则、易感染病虫等。

通过组织培养技术，利用玫瑰茎尖脱毒后，使玫瑰的优良品质得到恢复，花径增大，色泽鲜艳，抗病能力提高，产花数量上升。

再次，可以培育新品种。

在组织培养过程中往往会发生芽变，芽变的结果导致花色变异、花的大小变异、花期变异、叶色变异、染色体数量变异等。

组培法快速繁殖优质草花创建园林化城市是现代城市园林建设发展的方向，而科学技术的研究、应用在城市园林绿化可持续发展中无疑具有先导作用。

植物组织培养技术是将植物体的某一部分器官、组织、细胞等在离体条件下通过人工无菌培养的方式来进行快速繁殖。

这项技术目前在很多园林植物上得到了应用，据有关资料统计，植物组织培养技术已渗入到花卉园艺植物的80个科、450多种植物。

其应用范围之广，主要是它具有其它繁殖技术无法比拟的优点，如保存脱毒种苗，维持杂交F1代优良性状，生长周期短，全年试验、生产，不受气候影响等。

因此世界各国花卉产业都将组培作为一种大规模工厂化生产的手段来应用。

近两年，西安市园林研究所承担了市中心钟、鼓楼广场等城市主要街景的节日布置工作，草花需量大增。

草花在园林景观中是很重要的绿化材料，它具有品种繁多，色彩丰富，花期错落及可调控、见效快的特点。

盆栽草花可以用来装饰会场、厅堂、节日摆放等；露地栽培的草花主要用来布置花坛、花境、花带等；它能与乔、灌木、草坪配合构成园林绿化复层结构，丰富园林景观。

但经过两年的观察，我们发现不少品种草花退化严重，达不到应有的美化观赏效果。

虽然从国外引进少量优质品种，但价格昂贵，出苗率低，而且多为杂交一代种子，即使收获到种子也极易变异。

在这种情况下，运用植物组织培养技术对优良品种进行快速繁殖，既可保持优良品质不变，又可在短期内获得大量种苗的优势也就体现了出来。

通过课题主持人及参加人员的共同努力，有了阶段性突破。

从实验研究顺利过渡到生产阶段，现已有8000成品苗开花，点缀在城市主要街景、小区等处，可为西安市提供2-3万盆组培繁殖的各种草花。

我们于1998年9月选定以大花万寿菊、矮牵牛、百日草三种花为组培快速繁殖的对象。

万寿菊原产于南美墨西哥等地，为一年生草本植物，喜温暖环境，不耐寒，喜温热，杂交一代大花万寿菊具有花大、色艳、花期长、摆放效果十分壮观，对环境的适应性较强。

矮牵牛原产南美州，性喜温暖，不耐霜冻，又不耐30℃以上的高温，株体高度一致，差异微小，摆放效果好，花色鲜艳、优美整齐，但种子出苗率很低，价格昂贵。