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绿萝组培快繁技术研究绿萝（学名：Epipremnum aureum）是一种常见的观赏植物，因其叶片翠绿，形态优美，且易于栽培而备受喜爱。
随着人们对绿化环境和美化家居的需求不断增加，绿萝的市场需求也逐渐扩大。
传统的绿萝繁殖方式存在种苗数量不足、繁殖速度慢等问题。
如何利用组织培养技术实现快速繁殖绿萝，成为当前研究的热点之一。
组织培养技术是一种通过离体培养植物组织、细胞和器官实现植物快速繁殖的生物技术手段。
这种技术不仅可以大大缩短绿萝繁殖周期，提高繁殖效率，还可以保持种苗良好的遗传性状和病虫害的洁净性，从而生产出质量更加稳定的绿萝苗。
对绿萝组培快繁技术进行深入研究，不仅有助于满足市场对绿萝数量的需求，还可以促进绿化产业的快速发展。
一、绿萝生物学特性及繁殖方式绿萝属于天南星科绿萝属，是一种多年生蔓性草本植物。
其茎细长，有气根，叶子厚而肉质，呈心脏形，叶色翠绿，具有观赏价值。
一般来说，绿萝的繁殖方式主要有扦插、分株和叶片扦插等几种方法。
1. 扦插：通常采用嫩枝或成熟枝条作为扦插材料，插入泥炭腐殖土或珍珠岩中生根，生根后即可成活。
这种繁殖方式简单易行，但生根时间较长，繁殖速度比较慢。
2. 分株：绿萝在生长过程中会产生侧芽，可以通过分株的方式繁殖。
将侧芽切割下来，直接插入生长基质中即可生根成苗。
这种方法虽然能够保持良好的遗传性状，但繁殖速度仍然较慢。
3. 叶片扦插：将绿萝叶片切割成小段，插入适当的基质中，经过一段时间后便能生根成苗。
这种方式繁殖速度较慢，且成活率不高，不太适合大规模生产。
二、组培快繁技术原理组织培养技术是通过植物的离体培养实现植物繁殖的一种高效、快速的方法。
具体来说，绿萝组培快繁技术主要包括以下步骤：1. 选材切割：选择健康的绿萝茎、叶等植物材料，进行无菌处理后，通过无菌操作技术将其切割成小段，以便于后续培养操作。
2. 培养基配制：根据绿萝生长的需要，配置适合其生长的培养基，包括植物生长激素、无机盐等营养物质。
蝴蝶兰的组培快繁技术作者：李小东郑林刘爱凤来源：《农业与技术》2016年第14期摘要：本文详述了蝴蝶兰组培快繁过程，包括取材、消毒、诱导、增殖、壮苗、生根培养等过程的方法、最佳培养基和培养条件。
探讨了蝴蝶兰组培中经常遇到的褐化、培养基改良方法等问题。
关键词：蝴蝶兰；组织培养；快繁；移栽；褐化中图分类号：S682.31 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160733011以丛生芽的方式增殖快繁，可以有效地保持母本的优良性状，变异率最低。
笔者经过近几年的研究实践，总结了蝴蝶兰组织培养整个过程的技术，并用于花卉公司规模化生产。
1 材料与方法1.1 预处理选择生长健壮、无病虫害、无病毒斑、不变异、无严重机械损伤、无严重脱水的蝴蝶兰母本单独隔离培养，栽培环境要经常杀菌。
选取花型均一、花色符合本品种特性、花朵排序整齐的花梗，使用消毒过的剪刀从花梗底端剪下。
将取回的花梗用75%的酒精棉花擦干净表面的灰尘、残留的农药、肥料、菌类等。
将花梗每节剪成一段，腋芽上端留2cm左右，下端留3cm 左右。
如果要存放1d以上，需先将花梗两端用石蜡封住，防止花梗失水，放入冰箱8℃冷藏。
1.2 外植体消毒根据花梗成熟老化程度进行分组，在超净工作台上用0.1%升汞溶液消毒15～20min，然后用无菌水清洗5～6次。
一般老化花梗消毒20min左右，绿色嫩花梗消毒15min左右[1]。
将花梗顶端小芽和带潜伏芽的花梗，用镊子仔细剥去包叶，尽量不产生伤痕，用于初代培养。
2 结果与分析2.1 初代诱导培养将上述准备好的花梗作为外植体，接种于诱导培养基，芽体向上，花梗倾斜45°。
经筛选最佳培养基为改良MS+5 mg/L6-BA+NAA0.5mg/L+蛋白胨1g/L+酸水解酪蛋白0.2g/L+椰汁10%+蔗糖20g/L+葡萄糖10g/L+琼脂5g/L，PH5.8～6.1，培养条件，温度为28℃，先暗培养1周能显著降低褐化率，然后每日光照12h，光照强度1200～2000Lx。
潍坊市职业学院项目课程实验设计项目名称：植物的组培快繁实训地点：学院组培中心实验设计者：王珏（0903199）09级园林工程系生物技术及应用专业设计时间：2010年12月26日—2011年7月9日指导教师：丁雪珍一实验名称：长寿花的组培快繁二实验目的：1、通过对长寿花进行组培快繁从而进一步了解植物组培快繁的原理；2、熟悉并掌握植物组配快繁的工艺流程；3、更熟练的掌握组培快繁的多项技术；4、对植物的组织培养的方法及有关知识拥有更深的了解；三实验原理植物的组织培养是指在无菌条件下，将植物的离体器官、组织、细胞以及原生质体，应用人工培养基，创造适宜的培养条件，使其长成完整小植株的过程。
植物的组织培养也就是根据植物细胞的全能性（每个具有完整细胞核的细胞都具有该植物的全部遗传信息和产生完整植物体的能力）利用外植体（从植物体上切取下的根、茎、叶、花、果实、种子、器官以及各种组织和细胞）进行了转接、继代培养以及驯化的过程，虽然此过程投资少、成本低而且历时短但是植物组织培养拥有很多优点。
如：1、研究材料单一，无性系遗传信息相同；进而保证了遗传性状的一致性，避免了误差，实验材料的纯度高，可以减少实验的重复而不影响实验的精度。
2、经济方便，效率高；进行实验时投资少、成本低但是利润高从而节约了人力和物力。
3、培养条件了可控，可周年实验或生产；避免了由于节气带来的影响。
4、生长快，周期短，重复性强；5、管理方便，利于自动化控制；通过仪器来提供试管苗的培养环境，大大节省了人力、物力及土地，也有利于工厂化生产。
本次实训以植物花月为对象用其幼叶作外植体进行组织培养（无菌短枝型），来领悟植物组织培养的原理。
四实验仪器及其他用具1、玻璃器具玻璃棒；烧杯；量筒；三角瓶；试剂瓶；胶头滴管；果酱瓶；酒精灯；漏斗；2、所需的实验仪器酒精灯；电子天平；磁力搅拌器；冰箱；超净工作台；接种器具消毒器；立式高压蒸汽灭菌锅；电炉；培养架；空调；3、实验药剂蒸馏水；葡萄糖；琼脂粉；MS母液（大量元素、微量元素、铁盐、维生素）；6-BA；2,4-D；IBA；IAAF；活性炭；95%酒精；氯化汞溶液；洗洁精；高锰酸钾；4、其他用具纱布；喷壶；搁置架；打火机；弯刀剪；麻线；牛皮纸；封口膜；剪刀；试管刷；洗耳球；引流器；PH试纸；周转箱；胶皮手套；秒表；废空箱子；马铃薯；刀；案板；铁架台；铝锅；麦麸；穴盘等五设计方案1、实验研究对象植物长寿花拉丁名：winter pot kalanchoe科属：景天科，蔷薇属别名：寿星花原产地：东非马达加斯加岛长寿花（Kalanchoe blossfeldiana cv tom Thumb）别名寿星花、假川莲、圣诞伽1.1植物简介长寿花是一种多肉植物，由肥大、光亮的叶片形成的低矮株丛终年翠绿。
植物组织培养在实际当中的应用摘要：植物细胞要表现出全能性，须经过脱分化、再分化等一系列过程。
在实际应用中可用胚状体作为特定的优良基因型个体的无性繁殖手段，同时在研究胚胎发育中也有很重要的理论意义。
随着科学技术的不断进步，植物组织培养这门崭新的技术将日益普及和深入，成为现代农业生产中重要的技术手段关键字：脱分化,愈伤组织,原生质体,脱毒苗,培养基形成芽的培养基条件常有不同，可以同时在组织培养中形成，一般说，培养物中形成的芽如胡萝卜悬浮培养，油菜愈伤组织等。
在组织培养中通过根、芽诱导再生植株方式有三种：一种在芽产生之后，于芽形成的基部长根而形成小植株，一种是在根上生长出芽来，另一种即在愈伤组织的不同部位分别形成芽和根，然后两者结合起来形成一株植物。
除营养芽之外，在组织培养中有时也有花芽的形成，如烟草、花生等。
也有变态器官的形成，如百合鳞片切块分化出的芽，形成小鳞茎，唐菖蒲茎端可诱导形成小球茎，马铃薯的茎切段可以形成块茎。
在很多禾谷类作物的组织培养中发现，用较高浓度的生长素（2，4-D）诱导形成的愈伤组织，当培养在除去生长素，或适当浓度的活性较低的生长素中时，就可以诱导芽的形成。
Nitsch等用Linsmaier(LM)培养基附加10-5摩尔2，4-D 培养水稻愈伤组织可以生根，一旦转入无生长素的培养基时就能产生芽。
Rangan 将小米愈伤组织从含生长素的培养基转移到无生长素的培养基，一个星期内就形成了芽。
但在另一些例子中激素比例控制器官分化的问题则出现完全相反的情况。
苜蓿在有2，4-D和细胞分裂素的培养基中，可以形成愈伤组织，转入不加以上两种激素的培养基中能分化，但分化的情况与原来的激素比例有关。
如果愈伤组织是在高细胞分裂素/生长素比例的培养基中形成的，易于生根，而在高生长素/细胞分裂素比例的培养基中形成的，易于生根，而在高生长素/细胞分裂素比例的培养基中形成的愈伤组织，则易生芽。
由此看来，分化与激素的关系同植物的遗传性有着密切的关系，用五个品种的烟草做实验，用相同的生长素/细胞分裂素比例，结果有的品种形成很多芽，有的形成很少芽，有的完全不生芽。
长寿花为景天科伽蓝菜属中一种草本植物，又名圣诞伽蓝菜等，是一种常见草本花卉，可露地栽植及盆栽，观赏价值非常好。
长寿花观赏效果、开花时节及观赏期极具特点，是园林绿化、室内美化应用中非常好的花材。
长寿花常用繁殖方法为扦插繁殖和组培繁殖。
扦插繁殖应用较早，技术比较成熟，组培繁殖技术应用较晚，还有开发空间，结合花卉生产实践介绍组织培养快繁技术。
1长寿花组培外植体的处理长寿花的茎顶、叶、茎、花芽和花均可以作为外植体，在作者实践中，以茎段做为外植体的效果最好。
采集长寿花茎段，带回组培实验室，清水洗净截小段，装进广口瓶，无菌纱布封瓶口，流水冲洗15分钟，沥干水分将截成小段嫩枝再进一步截成2~3厘米长短段，在0.1%升汞（HgCl 2）溶液中浸泡3分钟，再用无菌水冲洗4~5次，沥干水分，带入接种室中，放入已经消过毒的超净工作台上。
在接种前，外植体还需在75%的酒精溶液中浸泡30分钟，用无菌水冲4~5次后，再用无菌的药棉拭干水分，放在培养皿（垫上无菌滤纸）中。
茎段用酒精灯灼烧过的手术刀切割成0.5厘米的小段后再接种，首次接种每瓶只接1块原材料，这样可以降低它的污染率。
接种时使茎段保持横卧状态会有较好的效果，保持横卧时，茎段侧面两个切口都能够生成愈伤组织，最后会连到一起，保证产生较大面积的愈伤组织块，为形成大量不定芽做好基础。
2长寿花组培培养基配方选取长寿花整个室内组培过程分为初代培养、增殖培养和生根培养三个阶段。
前两个阶段基本培养基选取MS ，生根培养阶段基本培养基选取1/2MS ，然后往基本培养基中添加不同种类和浓度的激素。
各配方的培养基均采用固体培养基，添加琼脂量为6g/L ，蔗糖量为30g/L ，各配方pH 值均调整为5.8。
所有培养基都要用高压灭菌锅高压灭菌，条件为121℃、131kPa 、30分钟。
初代培养主要以诱导为目的，可选用MS+6-BA1.0毫克/升+NAA0.1毫克/升配方，在实践中发现该配方除了污染之外，每个组培瓶中均能够100%的形成愈伤组织，而且愈伤组织能够较好地诱导出不定芽。
植物组织培养有什么应用一、农业上的应用1. 快速繁殖种苗(rapid propagation)用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用，包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。
快繁技术不受季节等条件的限制，生长周期短，而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。
快速繁殖可用下列手段进行：⑴通过茎尖、茎段、鳞茎盘等产生大量腋芽；⑵通过根、叶等器官直接诱导产生不定芽；⑶通过愈伤组织培养诱导产生不定芽。
试管快速繁殖应用在下列生产或研究中：(1)繁殖杂交育种中得到的少量杂交种，以及保存自交系、不育系等。
(2)繁殖脱毒培养得到的少量无病毒苗。
(3)繁殖生产上急需的或种源较少的种苗。
由于组织培养周期短，增殖率高及能全年生产等特点，加上培养材料和试管苗的小型化，这就可使有限的空间培养出大量的植物，在短期内培养出大量的幼苗。
2.无病毒苗(virus free)的培养植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒病不同程度的危害，有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害，尤其是很多园艺植物靠无性方法来增殖，若蒙受病毒病，代代相传，越染越重，甚至会造成极严重的后果。
自从Morel l952年发现采用微茎尖培养方法可得到无病毒苗后，微茎尖培养就成为解决病毒病危害的重要途径之一。
若再与热处理相结合，则可提高脱毒培养的效果。
对于木本植物，茎尖培养得到的植株难以发根生长，则可采用茎尖微体嫁接的方法来培育无病毒苗。
组织培养无病毒苗的方法已在很多作物的常规生产上得到应用。
如马铃薯，甘薯，草莓，苹果，香石竹，菊花等。
而且已有不少地区建立了无病毒苗的生产中心，这对于无病毒苗的培养、鉴定、繁殖、保存、利用和研究，形成了一个规范的系统程序，从而达到了保持园艺植物的优良种性和经济性状的目的。
3. 在育种上的应用(breeding)植物组培技术为育种提供了许多手段和方法，使育种工作在新的条件下更有效的进行。
⑴倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显。
菊花组培快繁技术在实际生产中的应用
陈喜林陈晓彬陈琦磊
（广东省汕头市海滨华侨公园管理处 汕头 515041）
摘要：为了去除病害复壮菊花，采用侧芽和花序轴两种外植体，分别在MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+3%蔗糖培养基上经过一段时间的培养均可诱导产生不定芽，不定芽继续培养长大切成茎段微插于MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+3%蔗糖培养基，再经过30 天左右培养增殖4.6倍。
1/2MS+2%蔗糖培养14 天后100%生根。
移栽基质采用泥炭与椰糖各半的混合基质，28 天后成活率98%以上。
上盆后长势旺盛，翠绿健壮。
花朵直径略大，且花色更加洁白，观赏价值更高。
关键词：菊花侧芽培养花序轴培养组培快繁
中图分类号：Q943.1;S682.1+1 文献标识码：A 文章编号：1006—2327—（2009）04—0029—02
菊花Dendranthema morifolium是菊科菊属的多年生宿根草本植物，原产于中国。
菊花栽培历史悠久，现栽培的为高度杂交种，已成为世界广泛栽培的名花之一。
生产上主要采用扦插方法繁殖，一般名贵品种扦插不仅成活率低，满足不了生产上的需要，而且栽培过程中病害（如黑斑病、褐斑病、炭疽病等）有逐年加重趋势，长势渐弱。
为复壮几年前开展了针对菊花十几个品种的组织培养工作，现以“汉白吐玉”品种为例，探讨组培快繁及规模化育苗方法，以解决生产上实际问题。
1材料与方法
1.1外植体及处理
10月下旬从汕头市海滨路尾华侨公园苗圃内选择“汉白吐玉”优良单株（几天前喷杀菌剂），轻取带1～2片叶的侧芽和绿豆大小的花蕾，带回实验室，先用洗洁精饱和溶液浸泡4－5min后，流水冲洗20min后置于洁净工作台上，用1%硝酸银消毒10min，然后用无菌水漂洗并不断搅动5～6次，每次3min ，滤纸吸干水分后，用手术刀切取长0.3～0.5cm侧芽（A）。
剥离花蕾得到直径0.2～0.3cm花序轴（B）。
这样就获得A、B两种外植体。
1.2培养基
a.MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+3%蔗糖；
b.MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+3%蔗糖；
c.1/2MS+2%蔗糖。
以上培养基是经过预备性试验，逐步添加逐步排除的方法并参考前人的研究成果筛选出来的，均以MS为基本培养基，加入0.7%琼脂，pH值5.8；121℃条件下蒸汽高压灭菌20min，培养过程中温度保持在25℃±1℃，光照12 h·d-1，光照度3000 lx。
2结果与分析
2.1诱导产生不定芽
将A、B分别接种于培养基a，5 天后观察外植体明显长大，9天后在外植体周围产生黄白色致密的愈伤组织，转瓶一次（相同培养基）到18天后，A的愈伤组织开始分化出绿色芽点，B的愈伤组织20天转瓶一次（相同培养基），到第55天才开始分化出浅绿色不定芽。
不定芽再经过15天左右培养长成高1～2cm，粗0.1～0.2cm 的芽苗。
2.2 继代增殖培养
将分化出芽苗茎段切成1cm左右且带有2～3片叶作为插穗转接培养基b，4天后见0.1cm左右腋芽产生，21天后腋芽长至0.5～1.0cm，28 天后腋芽长至1.0～1.5 cm，35天后长至1.5～2.5cm，这样每30 天左右转瓶一次，其增殖达4.6倍，即可获得大量苗。
2.3生根培养
将经过大量繁殖的芽苗切成1～1.5cm茎段转瓶接培养基c，经15 天左右培养，生根率达100%，根长0.5～
3.0cm，白色不定根3～7条，到28天时平均根数8.5条，
平均根长5.0cm。
2.4试管苗的移栽和基质的选择
经14天生根培养，根长至1.0～2.0cm，叶片舒展，叶色浓绿时即出室炼苗，洗苗移栽。
采用四种移栽基质做对比试验，结果表明泥炭与椰糠各半混合基质优于纯泥炭土、珍珠岩与河沙各半混合基质，更优于纯河沙基质[1]。
在泥炭与椰糠各半混合基质经28天精心养护移栽成活率在98%以上，萌出新叶生出新根，就可以上盆,按菊花生产要求进行正常的田间管理了。
2.5试管苗与同期扦插苗比较
通过田间观测比对株高、茎粗、叶片数、叶片完整度，试管苗均明显好于扦插苗，且叶片翠绿，不易感染病害，花朵直径略大，花色更加洁白。
观赏期相应更长，达到了预期目的。
（下转第28页）
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播种后施入沼液500 kg/666.7m2左右。
2.2追肥
根据玉米的需肥规律，分两期追肥。
2.2.1苗期施肥
在玉米拨节前7～8叶时，条施沼液1000～1500 kg/666.7m2。
2.2.2穗期施肥
在玉米抽穗前10天左右，再施沼液500～1000 kg/666.7m2。
2.3施肥注意事项
2.3.1沼肥出池后的处理
沼肥还原性强，出池后要先在贮粪池中存放5－7天后再施用。
如果立即施用，会与玉米争夺土壤中的氧气，影响种子发芽和根系发育，导致叶片发黄、枯萎。
2.3.2沼肥施用方法
玉米栽培进行沼肥追施时，忌表土撒施，应采用穴施或沟施。
2.3.3控制沼肥的施用量
施用沼肥的量不要太大，一般要比施用普通猪粪肥少；如果盲目大量施用，会导致作物徒长，行间荫蔽，造成减产[3]。
2.3.4施用沼肥应注意事项
不得与草木灰、石灰等碱性肥料混合施用，否则会造成氮肥的损失，降低沼肥的肥效。
3叶面喷施
3.1沼液喷施促生长
分别于玉米苗期、大喇叭口期和吐丝期各喷施一次50%的沼液。
有试验表明，沼液喷施能够促进玉米生长发育，玉米茎杆粗壮，叶色浓绿，叶片变厚，光合作用好，有机养分积累多，能提高玉米产量[4]。
3.2沼液喷施防治玉米螟幼虫
沼液中含有多种生物活性物质，某些抗菌素对作物的病虫害有着直接作用。
沼液无污染、无残毒、无抗药性，是一种“生物农药”。
有试验表明，在螟虫孵化盛期，用沼液50kg+2.5％敢杀死乳油l0ml，配成药液进行叶面喷施[5]，可以强化防治效果。
3.3叶面喷施注意事项
3.3.1沼液的选取
选取沼液时，应从正常产气一个月以上的沼气池水压间中层取用，沼液要澄清或用纱面过滤好，以免堵塞喷雾器。
3.3.2沼液的浓度
沼液喷施前要先兑水，一般兑水量为沼液的一半。
如果不先兑水直接施用在叶面上，尤其用于幼苗期，会使作物出现灼伤现象。
3.3.3沼液的使用方法
喷施时，重点应以叶片背面为主，以利吸收，因为叶片正面的角质层厚，不易于吸收利用，而叶片背面布满微气孔，易于吸收利用。
参考文献
[1]毛跃进,江伟,等.鲜食玉米应用沼液效果初探[J].上海农业科技,2009,1:60
[2]赵利晖,毛伟.沼液浸种对玉米种子发芽的影响[J].贵州农业科学,2006,34(增刊): 84-85
[3]熊玲.沼肥在玉米生产上的应用[J].现代农业科技,2007,(16):142、144
[4]韩小平.玉米喷施不同浓度沼液效果试验报告[J].中国沼气,2009,27(3):50-51
[5]胡方才,沈继华,张一锦.沼液对玉米防虫及增产效果试验[J].中国沼气1993,11(2):42-44
（上接第29页）
3小结与讨论
不同品种的菊花诱导不定芽对6-BA、NAA浓度要求有所不同，一般6-BA浓度在1.0～3.0mg·L-1，NAA浓度在0.02～0.2mg·L-1。
采用花序轴和侧芽两种外植体，侧芽诱导不定芽比较容易，而花序轴需要较长时间培养才可以，中间每隔20天要进行一次转瓶，否则时间一长，材料就会发生褐变，影响分化。
花序轴因外面有一层薄膜包裹着，所以花蕾表面便于消毒处理，合适大小更便于剥离。
因此从具有该品种
典型特征的植株上选取饱满、大小合适的花蕾十分必要。
利用组培只能去除病害，要得到完全无病毒植株，就必须要进行脱毒处理，而且一定要用茎尖作为外植体进行培养才行[2]。
参考文献
[1]李放娟,陈喜林,陈琦磊,等.龙翅悬垂秋海棠组培苗的出瓶及栽
培管理技术[J].广东园林,2005增刊:28-29
[2]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版
社,1991.171-181
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