酶免基础
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抗原：是能在机体中引起特异性免疫应答并能与免疫应答的产物发生特异性结合的物质。
免疫原性：抗原刺激机体后，集体免疫系统能形成抗体或致敏T淋巴细胞特异性免疫反应。
反应原性：指产生的抗体或致敏T淋巴细胞能与抗原进行特异性结合的免疫反应。抗原的反应性决定于抗原决定簇。
半抗原：有些分子无免疫原性，一旦与某些载体结合就具有免疫原性的物质，如吗啡。
具有免疫原性和反应原性的抗原称为免疫原。
分子量与抗原的关系：1.相对分子量大，表面抗原决定簇就多，淋巴细胞需要一定数量的抗原决定簇才能激活2.大分子稳定，在水中呈胶体，不易被清除，体内存在时间长，持续刺激机体
抗原分类：外源性（细菌、病毒、花粉）和内源性（构象改变的自身成分）。
抗体：免疫系统受抗原刺激后，B细胞转化为浆细胞，由浆细胞产生与抗原发生特异性结合的球蛋白。
免疫球蛋白：具有抗体活性或化学结构与抗体类似的球蛋白。
抗体都属于免疫球蛋白，但免疫球蛋白不一定都是抗体。
Ig：分五类，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为IgG和IgM。
IgG多为单体，是唯一能通过胎盘的抗体，血清含量最高(75%～85%)，半衰期较长（16～24d），主要的抗感染抗体和再次免疫应答的主要抗体，2价的。
IgM是个体发育中最早产生的抗体，胚胎晚期已能合成，为五聚体，是分子量最大的Ig，称巨球蛋白。IgM是抗原刺激后出现最早的抗体，半衰期短，故检测IgM水平可用于传染病的早期诊断。五价的。
抗原抗体的实质：抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点结合
抗原抗体的三个性质：1.可逆性，抗原抗体间的结合力：疏水作用力>氢键>静电引力>范德华力，都不是共价键，结合不很牢固，所以是可逆反应；2.特异性，形如钥匙和锁孔，差别太大是无法结合的，但如果一部分相同，也可发生反应，如HCG、LH；3.比例性
HOOK效应：在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同，如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，这种现象被称为钩状效应（hook
effect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）时，应注意可测范围的最高值。
影响抗原抗体反应的因素：
1.电解质：抗原抗体结合后，必须有电解质参加反应，降低电势，使结合物析出，比如生理盐水等稀释液
2.Ph：一部分抗原是蛋白质，都有等电点，若ph在等电点附近，即使不予抗体反应，抗原也会自行析出，假阳性
3.温度：每一类抗原抗体反应都有自己的最适反应温度，高于或低于都会影响反应的进行，造成结果不准
4.震荡：增加抗原抗体结合的机会，使反应充分，减小钩状效应
5.杂质：无关蛋白或多糖会抑制抗原抗体反应甚至发生非特异性的反应
Elisa原理：
1.使抗原或抗体结合到固相表面，保持其免疫活性
2.使抗原或抗体与某种酶连接起来，保持其免疫活性和酶活性
3.把标本和酶标结合物按不同步骤与固相反应，再用洗涤的方法把与固相结合的抗原抗体复合物同其他物质分离，此时固相的酶量就与标本中的受检物质成一定比例，再加入底物后，在酶的催化下发生颜色反应，通过酶标仪根据颜色的深浅定性或半定量分析。
Elisa三个必要试剂：免疫吸附剂、酶结合物、底物。根据试剂、标本的情况可设计出不同类型的检测方法。
1.双抗体夹心测抗原：
2.双抗原夹心测抗体：
3.间接法测抗体：
4.竞争法：
5.捕获法：
夹心法优点：特异性强，测量相对准确
间接法优点：采用的二抗是针对Ig类抗体Fc段的二抗，故酶结合物可通用，减少成本
竞争法优点：适用于小分子与半抗原，小分子是空间结构上不允许，半抗原缺少足够的结合位点
夹心法优点：特异性强，测量相对准确
间接法优点：采用的二抗是针对Ig类抗体Fc段的二抗，故酶结合物可通用，减少成本
影响因素：1.抗原纯度，特别是能与一般人血清发生反应的杂质，否则假阳性；2.非特异性IgG占很大部分，且吸附性强，若包被不完全，可吸附固相，假阳性，用无关蛋白封闭；3.有时需要稀释，避免过高阴性本底
竞争法优点：适用于小分子与半抗原，小分子是空间结构上不允许，半抗原缺少足够的结合位点
测e抗体，将标本与抗原一同加入固相抗体中竞争，洗涤后再加酶标。
若用间接法因有大量的Ig竞争干扰，所以采用捕获法。近来因RF干扰，近来用中和Ig间接法
