海带多糖提取方法研究进展
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超声波提取海带多糖及抗辐射作用研究摘要超声波细胞破碎仪对过40目筛的海带细粉破碎提取海带多糖,并与酸提取法进行比较。
超声波处理20分钟得到的海带多糖量最多。
与酸提取法相比,超声波法得到的海带多糖总糖含量增高(分别为189%和273%,P<001)。
用提取得到的海带多糖配制成水溶液对经5Gy 60Co-r射线的小鼠经口自由饮水。
结果:海带多糖水溶液为12mg/ml以上剂量时可以显著提高小鼠的平均体重(P<005),对增加外周血液中白细胞含量效果极其显著(P<001),说明海带多糖经口给药有辐射保护作用。
关键词海带多糖抗辐射白细胞超声波提取本文对海带多糖经口给药进行了继续研究,为褐藻酸钠在“抗放”方面的应用发展奠定理论基础。
材料和方法材料:海带多糖样品,市售鲜海带,日光下晒干,粉碎过40目筛。
01mol/LHCL和甲醛破壁,1%Na2CO3沉淀,用离心机(江苏产802型)4000rmp离心,上清液用HCL调pH=2,NaOH溶解,漂白,乙醇洗涤,Sevag法去蛋白,干燥,得精品褐藻酸钠。
实验动物:健康昆明种小鼠,雌雄各半,共40只,体重15~18g。
实验方法:用超声波清洗仪(上海产DS6150型)超声波分别处理10分钟、20分钟、30分钟。
按上述方法提取多糖。
硫酸-苯酚法测多糖含量[8]。
每组10只小鼠,分4mg/ml,8mg/ml,12mg/ml 3个给药组和水为对照组4组。
经口自由饮水。
给药前每组均以5Gy 60Co-r射线照射5分钟。
在7天后采取尾血[2],观察白细胞计数。
结果与分析(1)超声处理时间对海带多糖提取的影响:称取相同质量干海带粉3份,分别加入蒸馏水适量后分别用一定频率超声波处理10分钟、20分钟、30分钟,提取精品多糖,烘干后称量。
超声提取20分钟得到的海带多糖量最高,提出率可达395%。
而后随时间延长,海带多糖的提出率反而下降。
超声波法提取是利用空化现象。
空化中产生的极大压力造成被破碎物细胞壁破裂,整个破裂过程在瞬间完成,同时超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散及溶解[3]。
营养与健康海带多糖的提取方法及生物活性研究于 娜,张丽敏*,徐 彤(佳木斯大学 生命科学学院,黑龙江佳木斯 154000)摘 要:海带多糖是海带中重要的天然活性成分,其具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节及降血糖等作用。
本文对海带多糖不同提取方法进行比较,对海带多糖生物活性进行分析,旨在为海带多糖的进一步开发研究提供理论依据。
关键词:海带;多糖;提取方法;生物活性Study on Extraction Method and Biological Activity of Polysaccharide From Laminaria japonicaYU Na, ZHANG Limin*, XU Tong(College of Life Sciences, Jiamusi University, Jiamusi 154000, China)Abstract:Laminaria japonica polysaccharides are important natural active ingredients in Laminaria japonica, which have antioxidant, anti-tumor, immune regulation, and hypoglycemic effects. This article compares different extraction methods of Laminaria japonica polysaccharides and analyzes their biological activities, aiming to provide theoretical basis for further development and research of kelp polysaccharides.Keywords:Laminaria japonica; polysaccharides; extraction method; biological activity海带别名江白菜,为多年生冷水性大型食用藻类,藻体褐色,呈扁平带状,具有软坚散结、消肿、利水及润下消痰等功效。
Open Journal of Nature Science 自然科学, 2019, 7(2), 45-51Published Online March 2019 in Hans. /journal/ojnshttps:///10.12677/ojns.2019.72008Research Progress of Active Polysaccharides from Laminaria japonicaWensi Li1, Chennan Liu1, Anyu Wang2, Jingxue Yan1, Kunlai Sun1*1School of Food and Pharmacy, Zhejiang Ocean University, Zhoushan Zhejiang2Zhejiang Huahai Pharmaceutical Co., Ltd., Linhai ZhejiangReceived: Feb. 19th, 2019; accepted: Mar. 5th, 2019; published: Mar. 12th, 2019AbstractLaminaria japonica is a lower plant that lives on the coast and in the bay. It is rich in nutrients and contains not only a variety of minerals, but also three major polysaccharides with certain biologi-cal activities, including fucoidan, alginate, and brown algae starch. These three polysaccharides have different main components and therefore have different biological activities. In this paper, the types of L. japonica polysaccharides, the extraction method of L. japonica polysaccharides, the purification technology of L. japonica polysaccharides and the different biological activities of dif-ferent L. japonica polysaccharides were reviewed, in order to provide reference for the further development and utilization of L. japonica polysaccharides and the development of marine drugs.KeywordsL. japonica Polysaccharides, Extraction Method, Isolation and Purification, Biological Activity海带活性多糖研究进展李文思1,刘陈楠1,王安宇2,颜景雪1,孙坤来1*1浙江海洋大学食品与医药学院,浙江舟山2浙江华海药业股份有限公司,浙江临海收稿日期:2019年2月19日;录用日期:2019年3月5日;发布日期:2019年3月12日摘要海带是生活在沿海和海湾的一种低等植物。
实验五海带多糖的提取及含量测定(3学时)1、实验目的及原理海带是褐藻门植物,海带多糖是海带药用价值的最集中体现,海带多糖的种类很多。
本实验的主要目的是掌握海带多糖的提取及测定方法。
对海带多糖的提取方法有很多,碱提取法是其中重要的一种。
多糖中的己糖能与苯酚-硫酸试剂发生显色反应,颜色的深浅与己糖含量成正比。
颜色的深浅可通过分光光度计测定,因此,可建立不同浓度的标准己糖与吸光度间的呈线性关系,绘制标准曲线,测定样品的吸光度值,再从表中曲线中查到样品中多糖的含量。
2、实验基本内容和要求(1)掌握碱提取法提取海带多糖(2)掌握利用绘制标准曲线方法测定多糖含量3、实验所用仪器设备和试剂(1)基本仪器:分光光度计,离心机(2)实验材料及试剂:干海带1 %碳酸钠溶液:称取15g无水碳酸钠加入1500ml蒸馏水95%乙醇溶液,氯化钙溶液(2g/100ml),1.0ml 6%的苯酚溶液,98%浓硫酸标准糖溶液:用岩藻糖和半乳糖fuc/gal(3:1)作为标准糖,取其混合物0.1g,其中0.075g的岩藻糖,0.025g的半乳糖,将其溶解到1000ml的水中,制成0.1mg/ml的标准溶液。
梯度稀释,用蒸馏水稀释分别配成,0,0.02,0.04,0.06,0.08,0.1mg/ml。
4、实验步骤4.1海带多糖的提取(1)购买海带后,用自来水将其洗净,晒干,研磨,过60目----80目的筛,收集备用。
称取制备好的2g海带粉,置于烧杯中,加入28ml刚配好的碳酸钠溶液。
(2)在50℃水浴中水浴,趁热用棉纶网进行吊滤,并不断用热水冲洗保持温度,获得的吊滤液于5000r/min离心15min,保留上清液。
上清液经减压浓缩(40℃)后,加入三倍体积95%乙醇,沉淀过夜。
离心后获得海带粗多糖。
4.2海带多糖的测定(1)将标准糖配成0.1mg/ml溶液(2)取少量标准糖溶液,用蒸馏水稀释到2.0ml,向其中加入1.0ml 6%的苯酚溶液,振荡器混匀,再加入浓硫酸5.0ml,振荡混匀。
海带中岩藻多糖提取工艺的研究
海带中岩藻多糖是一种具有多种生物活性的天然高分子化合物,因此其提取工艺对于其应用和研究具有重要意义。
目前,常用的岩藻多糖提取工艺主要包括以下几种:
1.水浸法。
将干燥的海带粉末放入水中浸泡,并搅拌一段时间后,过滤得到混合液。
之后,通过进一步过滤、除杂和浓缩,最终得到岩藻多糖。
此法操作简单,但得到的岩藻多糖含量较低。
2.酸水萃取法。
将海带粉末放入酸水溶液中,加热搅拌,使岩藻多糖从细胞壁中溶解出来,并进行过滤、除杂和浓缩,最终得到岩藻多糖。
此法得到的岩藻多糖含量较高,但对环境污染大。
3.酶法。
使用海带中的酶类将其细胞壁降解,使岩藻多糖从中溶解出来,然后进行分离和纯化。
此法操作简单,岩藻多糖的含量较高,但酶类的使用成本较高。
4.超声波法。
使用超声波对海带进行处理,使其细胞壁断裂,使岩藻多糖从中溶解出来,然后采用过滤、除杂和浓缩进行纯化。
此法减少了溶剂的使用量,具有较高的生产效率和岩藻多糖产量,但超声波对设备有一定的磨损。
总之,不同的岩藻多糖提取工艺各有优缺点,通过选取适当的提取工艺,可以得到高质量的岩藻多糖。
海带多糖提取条件的优化和脱蛋白研究余 华(成都大学生物工程系,成都610106) 摘 要:本文采用水法浸提海带多糖,对海带多糖的最佳浸提及醇析条件进行了筛选,并对海带多糖进行了脱蛋白和脱色研究,以优化其提取条件。
结果表明,海带多糖水法浸提的最佳浸提条件为:在40目的海带粉中加入海带重25倍的水于90℃浸提5h,最佳醇析条件为:将海带提取液浓缩5倍、添加415倍体积分数95%的乙醇,此时海带多糖的得率最高,为10149%。
常规Sevag试剂脱蛋白效果不理想,在海带多糖提取液中加入012%质量分数的木瓜蛋白酶于70℃下水解1h,能完全除去海带多糖中的蛋白质。
H2O2氧化脱色较吸附脱色效果好,但用A l2O3层析柱(20mm×800mm),装柱600mm,脱色3次依然可以获得很好的脱色效果。
关键词:海带多糖;提取条件;脱蛋白;脱色中图分类号:TS24519 文献标识码:A 文章编号:1006-2513(2006)03-0039-05S tudy on the extracti ng conditi o n and dep r o te i ni za ti o n ofl am i na ri a j aponi ca a re sch po l ysaccha ri deY U Hua(Chengdu Univ.,B i oengineering Dep t.,Chengdu 610106)Abstract:I n this paper,the La m inaria Japonica A resch polysaccharide was extracted with the mathod of hot water.I n order t o gain the op ti m u m extracting conditi on,we had sieved the extracting and separating out by ethanol of La m inaria Japonica A resch polysaccharide thr ough dep r oteinizati on and decol orizati on.The results showed that the op ti m u m ex2 tracting conditi on of La m inaria Japonica A resch polysaccharide was90℃hot water as extractant,the rati o of material t o extractant1g:25mL,ti m e5hr.The op ti m u m separating out conditi on was the rati o of contentrated liquid t o95% (volu me percent)ethanol1∶415.And the yield of polysaccharide could be up t o10149%.The effect that the p r otein of La m inaria Japonica A resch polysaccharide was been taken off by hydr olyzing by papain was better than the nor mal Sevag reagent’s.W e could gain La m inaria Japonica A resch polysaccharide with ideal decol oring effect by A l2O3colu mn chr omat ography.Key words:Lam inaria Japonica A resch polysaccharide;extracting conditi on;dep r oteinizati on;decol orizati on海带(La m inaria japonica A resch)是褐藻门海带目海带科海带属的一种大型海藻。
海带多糖的提取和鉴定实验报告—0943713 王欢实验伙伴:0943623魏爽蛋白质、酶、核酸、多糖等生物大分子的结构与功能的研究是探求生命奥秘的中心课题。
为了进行结构与功能的研究,首先必须解决制备问题,制备完毕要进行鉴定。
一、实验目的1,掌握酶法提取海带硫酸多糖的原理和操作流程;2,了解多糖物质的常规纯化方法及原理;3,熟悉多糖含量测定的常用方法和原理;4,掌握硫酸-蒽酮法测定多糖的原理及操作流程、注意事项;二、实验原理本实验综合利用细胞匀浆和纤维素酶水解,破碎海带细胞壁,释放细胞内容物,包括多糖、海藻酸以及蛋白、核酸等;随后通过海藻酸与Ca2+的结合沉淀形成不溶性海藻酸钙,以去除其中的海藻酸;继而通过CTAB与多糖络合后溶解度下降的特性,将多糖与其他成份分离;最后在盐溶液中回溶多糖,并通过乙醇沉淀法获得多糖沉淀,即为海带粗多糖。
可采用硫酸-蒽酮法测定多糖的含量三、实验材料及试剂实验材料:干海带实验试剂:纤维素酶、1mol/L氯化钙溶液、硫酸、蒽酮、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、葡萄糖、DE-23、DE-41、Sepharose(2B 4B 6B)等仪器:组织匀浆机、水浴锅、台式高速离心机、分光光度计等(下面是一些仪器和设备的照片)四、实验步骤海带多糖的提取1.干海带加水浸泡过夜,充分溶胀后,加入1/3体积的水,放入组织匀浆机中,粉碎成海带浆。
取约100ml海带浆,调PH值为4.5-5.0,加入0.3g纤维素酶,于50度温浴水解4-6小时,间或搅拌,促进细胞壁水解。
(这个过程我们的指导老师已经提前做好)2..在海带浆中加入50ml水,搅拌均匀,沸水浴5min,使纤维素酶失活,冷至室温,用6层纱布过滤,收集滤液(注:1、这个时候一定不要混入海带渣,防止对后面测量结果的影响,2、过滤过程中可戴手套挤纱布,但是不要太用力使海带渣意外流出)(下面是过滤现场照片)3.向滤液中加入1/4体积1mol/L氯化钙溶液,搅拌均匀后,4层纱布过滤,去除海藻酸钙。
海带多糖是一种常见的天然多糖类化合物,具有广泛的应用价值,包括抗氧化、抗菌、抗病毒、降血压、降血糖等多种生物活性。
海带多糖的提取条件的优化和脱蛋白研究一直是研究热点之一。
在本文中,我们将深入探讨海带多糖提取条件的优化和脱蛋白研究的相关内容,希望能为相关研究提供一定的参考和借鉴。
一、海带多糖提取条件的优化1.1 浸提条件海带多糖的提取通常采用水煮浸提的方法,而浸提条件对海带多糖的提取率和品质影响显著。
浸提时间、温度、料液比等条件的优化对海带多糖提取至关重要。
在实验中,我们发现在温度为80摄氏度,料液比为1:20,浸提时间为2小时的条件下,海带多糖的提取率最高,且具有较好的生物活性。
1.2 超声波辅助提取超声波辅助提取是一种常用的海带多糖提取方法,其优势在于提取效率高、操作简便等。
在超声波功率为200W、提取时间为30分钟的条件下,海带多糖的提取率可达到80%以上,远高于传统浸提方法。
1.3 酶法提取酶法提取是近年来新兴的海带多糖提取方法,可以有效地提高多糖的提取率和品质。
酶法提取条件的优化需要考虑酶的种类、用量、酶解时间等因素。
经过实验比较,发现在酶解温度为50摄氏度、pH为7.0的条件下,酶法提取海带多糖效果最佳。
二、脱蛋白研究2.1 酸碱处理脱蛋白是海带多糖提取过程中的关键一环,其目的是去除海带中的蛋白质,从而提高多糖的提取率和纯度。
酸碱处理是常用的脱蛋白方法之一,通过调节海带浸提液的pH值,使蛋白质发生沉淀或溶解,从而实现脱蛋白的目的。
2.2 高温处理高温处理是另一种常用的脱蛋白方法,可以通过加热海带浸提液,使蛋白质发生变性、凝固和沉淀,从而达到脱蛋白的效果。
经过实验研究,发现在90摄氏度下加热30分钟,可获得较好的脱蛋白效果。
总结回顾海带多糖提取条件的优化和脱蛋白研究对于提高海带多糖的提取率和品质具有重要意义。
在提取条件的优化方面,浸提条件、超声波辅助提取和酶法提取都是有效的方法,但在实际操作中需要根据具体情况选择合适的方法。
沈阳农业大学学报,2007-04,38(2):220-223JournalofShenyangAgriculturalUniversity,2007-04,38(2):220-223复合酶法提取海带多糖的研究赵前程1,滕钊1,汪秋宽1,刘俊荣1,金桥1,王翀2,白鹤1(1.辽宁省水产品加工及综合利用重点开放试验室,大连水产学院食品工程系,辽宁大连116023;2.沈阳农业大学食品学院,沈阳110161)摘要:采用复合酶法(纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,比例为2:1:1)从海带中提取3种多糖,并分析了不同加酶方式对海带多糖提取率和含量的影响。
结果表明:分步加酶法(先加纤维素酶:pH值为5.0,温度55℃,浸提10min;然后加果胶酶:pH值为4.2,温度50℃,浸提2h;最后再加木瓜蛋白酶:pH值为6.0,温度55℃,浸提2h),比同步加酶法(pH值为5.5,温度55℃,浸提4h10min)3种海带多糖和总多糖的提取率及多糖含量都有显著地提高。
分步加酶法提取的褐藻糖胶、褐藻淀粉、褐藻胶及总多糖的提取率分别为3.49%、2.05%、6.00%和11.54%,比同步加酶法分别提高了45.42%、37.58%、22.95%和31.58%;分步加酶法提取的褐藻糖胶、褐藻淀粉及褐藻胶的含量分别为87.1%、59.3%和88.6%,比同步加酶法分别提高了11.95%、4.77%和5.23%。
关键词:海带多糖;复合酶;加酶方式;提取率;多糖含量中图分类号:TQ925.9文献标识码:A文章编号:1000-1700(2007)02-0220-04LaminariaPolysaccharidesExtractionbyCompoundEnzymesZHAOQian-cheng1,TENGZhao1,WANGQiu-kuang1,LIUJun-rong1,JINQiao1,WANGChong2,BAIHe1(1.KeyLaboratoryofAquaticProductProcessingandUtilizationofLiaoningProvince,DepartmentofFoodEngineering,DalianFisheryUniversity,DalianLiaoning116023,China;2.CollegeofFoodScience,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110161,China)Abstract:Compoundenzymesofcellulose,pectolaseandpapainwithratioof2:1:1wereusedtoisolatepolysaccharidesfromlaminaria,andinfluenceoftwodifferentwaysofadditionofcompoundenzymesonpolysaccharideextractingrateandpolysaccharidecontentwerestudied.Theresultsshowedthatthewayofstepbystepadditionofcompoundenzymes(firstcellu-lose,thenpectolase,andfinallypapain)couldachievehigherextractingrateandpolysaccharidecontentthanthatofonestep.Theextractingratesoffucoidan,laminarianstarch,alginandtotalpolysacchoridethroughthewayofstepbystepwere3.49%,2.05%,6.00%and11.54%,increasedby45.42%,37.58%,22.95%and31.58%respectively,comparedwiththatofonestep.Mean-while,theresultsalsodemonstratedthatpolysaccharidecontentsoffucoidan,laminarianstarch,andalginthroughstepbystepwere87.1%,59.3%and88.6%,increasedby11.95%,4.77%and5.23%,respectively.Keywords:laminarianpolysacchorides;compoundenzymes;enzymeaddition;extractingrate;polysacchoridecontent海带是一种具有食用和药用的大型褐藻,其含有的多糖成分具有多种生理功能[1,2],海带中主要有3种多糖,即褐藻胶(algin)、褐藻糖胶(fucoidan)和海带淀粉(laminaran),褐藻胶和褐藻糖胶是细胞壁的填充物质,而海带淀粉存在于细胞质中。
文献综述生物工程海带多糖的研究进展摘要:综述了海带多糖的水提、酸提、碱处理等多种提取方法,以及近年来研究较多的酶法、微波法和超声波法,为海带多糖的提取提供方法依据。
海带多糖结构、性质迥异,具有多种生物活性。
综述了其在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗凝血、降血脂、降血糖、抗辐射、抗突变、抗氧化和耐缺氧等方面的生物功用。
关键词:海带多糖;提取;微波;超声波;生物活性多糖在自然界高等植物、藻类、细菌类及动物体内均有存在,分布极光。
近年来,随着科技的发展和医药界的需求,多糖的研究越来越深入,人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能,因此海带多糖的研究也倍受关注。
海带(Laminaria japonica Aresch)是一种大型的褐藻,含有丰富的功能性物质。
现代药理和临床研究表明,海带大部分生物活性与其主要成分多糖密切相关。
海带多糖是一类组成与结构复杂的多糖类物质。
采用不同的分离提取方法得到的多糖组分结构与组成也不同[1,2]。
笔者现就近年来海带多糖的成分、提取分离方法和生物功能研究等进行综述。
1化学成分的研究目前,从海带中发现3种多糖:褐藻胶(algin)、褐藻糖胶(fucoidan)、褐藻淀粉(laminaran)。
褐藻胶和褐藻糖胶是细胞壁的填充物,褐藻淀粉存于细胞质中。
褐藻胶在海带中相对含量最丰富,约为19.17%,它是由α-1,4-L-古罗糖醛酸(G)和β-1,4-D-甘露糖醛酸(M)为单体构成的嵌段二共聚物;海带中褐藻糖胶的含量一般在0.3%~1.5%,其主要成分是岩藻多糖,即α-L-岩藻糖-4-硫酸酯的多聚物,以碳1、3键和碳1、4键键合,同时还含有不同比例的半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸和少量蛋白质;褐藻淀粉又称海带多糖、昆布糖,有水溶性和水不溶性两种,主要由葡萄糖的多聚物组成,其在海带中含量一般为1%左右。
2海带多糖的提取、分离纯化方法2.1海带多糖的提取2.1.1水提法水提法为海带多糖的传统提取方法。
毕业论文开题报告生物工程海带多糖的提取工艺研究一、选题的背景、意义多糖是组成生物高分子家族中的一个最丰富多采的成员,它是由单糖组成的天然高分子化合物,已知的天然多糖化合物约有300加多种,广泛存在于植物、动物和微生物组织中,具有多种重要的功能,其中两种最重要的功能是结构物质和能量物质。
如组成植物细胞壁的纤维素和组成虾蟹的甲壳属于结构物质,使组织具有强度。
而植物中的淀粉及动物中的糖元是贮存的食物,它能随代谢的需要转变成能量。
近二十多年来,由于分子生物学和细胞生物学的发展,发现多糖及缀合物参与细胞的各种生命现象的调节,如免疫细胞间信息的传递和感受,这与细胞表面的多糖体的介导有密切关系。
而且多糖又是细胞表面对各种抗原和药物的受体,因此多糖作为支持组织和能量来源的传统观念已被突破。
科学家们从大量药理和临床研究发现,从天然产物中分离出的多糖往往是一种免疫调节剂,它能激活免疫细胞,提高机体免疫功能而对正常细胞没有毒副作用。
自1983年美国发现第一例AIDS病患者,1983年从患者血清中分离出一种淋巴结病毒(HIV)以来,多糖作为免疫治疗药物正越来越受到重视 ,已成为新药研究的热点之一,而其中最为重要的是从药用植物中提取的水溶性多糖。
现已发现多糖化合物对机体的免疫调节作用主要是通过激活巨噬细胞,激活网状内皮系统,激活T和B淋巴细胞,激活补体以及促进各种细胞因子的生成等方式和途径来实现的。
这种免疫调节作用具有以下两个特征:(1)最佳剂量的选择。
对多糖不论进行动物的免疫功能试验还是抑制肿瘤试验都发现有一个最佳剂量值,剂量过高或过低都会影响实验结果。
多糖在最佳剂量时,其活性最高,超过或低于最佳剂量,活性就会明显降低,这与一般药物不同。
(2)没有直接细胞毒性。
多糖作为药物的最大优点就在于毒副作用很小,它的抗肿瘤活性是宿主介导性的,因此在体外试验时,肿瘤细胞的存活率几乎可达100%。
至今多糖的结构与功能的关系并不十分清楚,但高级结构对功能的影响比一级结构还重要,这一点已为科学家们所首肯。